天津医药杂志
Tianjin Medical Journal 천진의약
- 主管单位： 天津市卫生局
- 主办单位： 天津市医学科学技术信息研究所
- 影响因子： 1.10
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 0253-9896
- 国内刊号： 12-1116/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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miR-34a改变自噬通路AMPK/mTOR的活性在心肌细胞肥大中的作用
目的：研究miR-34a与自噬通路磷酸腺苷蛋白激酶（AMPK）/哺乳动物雷帕霉素靶点（mTOR）在血管紧张素（Ang）Ⅱ诱导的原代大鼠心肌细胞肥大中的作用。方法体外培养原代大鼠心肌细胞，分成3组：阴性对照慢病毒（NC）组、AngⅡ刺激+阴性对照慢病毒（AngⅡ+NC）组、AngⅡ刺激+miR-34a过表达慢病毒（AngⅡ+miR-34a）组。激光共聚焦检测心肌细胞肥大变化；利用荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测miR-34a、心房钠尿肽（ANP）和β-肌球蛋白重链（β-MHC）表达；利用蛋白印迹（Western blot）测定AMPK/mTOR信号通路的活性变化。结果与NC组比较，AngⅡ+NC组心肌细胞表面积明显增大（P＜0.05）；与AngⅡ+NC组比较，AngⅡ+miR-34a组心肌细胞表面积减少（P＜0.05）。与NC组比较，AngⅡ+NC组的miR-34a表达下调，ANP和β-MHC表达上调（均P＜0.05）；而与AngⅡ+NC组比较，AngⅡ+miR-34a组的miR-34a表达上调，ANP和β-MHC表达下调（均P＜0.05）。与NC组比较，AngⅡ+NC组p-AMPK/AMPK增加，p-mTOR/mTOR减少（均P＜0.05）；与AngⅡ+NC组比较，AngⅡ+miR-34a组p-AMPK/AMPK减少，p-mTOR/mTOR增加（均P＜0.05）。结论 miR-34a能抑制AngⅡ诱导的心肌细胞肥大，其作用部分是通过改变AMPK/mTOR的活性来实现的。
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原核移植技术对子代小鼠脑组织mRNA表达谱的影响
目的：探讨原核移植（PNT）技术对子代小鼠脑组织mRNA表达谱的影响。方法将SPF级ICR（CD-1）雌鼠超促排卵并与雄鼠交配受精后，收集雌鼠受精卵进行原核移植，获得重构胚胎，将其移植到假孕小鼠输卵管内获得原核移植子代小鼠（PNT组），未经原核移植操作的受精卵经过胚胎移植后获得子代小鼠（对照组）。提取2组小鼠脑组织RNA，逆转录为cDNA后荧光染料标记，利用Agilent小鼠mRNA芯片检测2组mRNA表达谱差异，筛选差异表达的mRNA并进行GO和信号通路分析。结果 PNT组与对照组表达差异倍数在2倍以上的mRNAs有392个，占所有mRNAs的1.7%，其中366个表达升高，26个表达降低；表达差异倍数在4倍以上的共11个。上述差异表达的mRNAs经GO分析结果显示靶基因富集于mRNA可变剪接、小GTP酶介导的信号转导、胰岛素受体信号通路调节等生物学过程以及水解酶活性、跨膜转运蛋白活性、焦磷酸酶活性等分子功能。信号通路富集分析结果显示靶基因集中在离子通道转运、脂肪酸代谢、丁酸甲酯代谢、三酰甘油和酮体代谢等信号通路。结论原核移植可能会对小鼠脑组织一些关键代谢过程产生影响。
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P2X7R拮抗剂对小鼠慢性胰腺炎的作用及机制研究
目的：探讨嘌呤能P2X7受体（P2X7R）拮抗剂——氧化三磷酸腺苷（OxATP）和亮蓝G（BBG）在抑制下游靶蛋白——核苷酸结合寡聚化结构域样受体3（NLRP3）炎性体活化和慢性胰腺炎（CP）胰腺纤维化进程中的作用及可能机制。方法40只C57BL/6小鼠随机均分为正常对照组、CP模型组、OxATP组和BBG组。除正常对照组腹腔注射与处理组等体积的生理盐水外，其余组均通过腹腔注射雨蛙素法制作CP小鼠模型（6周）。造模结束后，CP模型组、OxATP组和BBG组分别予以腹腔注射生理盐水、OxATP（20μL，300μmol/L）和BBG（20μL，10μmol/L）处理，连续注射2周。然后处死各组小鼠并取胰腺组织，行病理学检查，以HE染色对胰腺病理组织学（炎性细胞浸润、腺泡萎缩及纤维化程度）进行评分，天狼星红染色和α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）免疫组化染色分别对胰腺纤维化程度进行评估；免疫组化法检测胰腺P2X7R、NLRP3和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1（Caspase-1）中的累积光密度（IOD）值。结果与正常对照组比，CP模型组炎症损伤组织学评分增加，胰腺纤维化程度显著增加，P2X7R、NLRP3和Caspase-1免疫组化IOD值显著升高（P<0.05）；与CP模型组相比，OxATP和BBG组炎症损伤组织学评分降低，HE染色纤维化评分、天狼星红染色和α-SMA免疫组化染色均显著减轻（P<0.05），胰腺P2X7R、NLRP3和Caspase-1 IOD值均明显降低（P<0.05）。结论 P2X7R拮抗剂OxATP 和BBG能够显著减轻CP小鼠模型的慢性炎症和纤维化程度，阻断P2X7R-NLRP3炎性体信号通路，这有望成为治疗CP及其纤维化进程的一种潜在新策略。
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香叶醇对大鼠颈动脉球囊损伤后血管内膜增生的抑制作用
目的：研究香叶醇对球囊损伤大鼠颈动脉损伤后血管内膜新生的影响及可能的机制。方法20只雄性成年SD大鼠，随机均分为4组。（1）假手术组：不予以球囊损伤。（2）对照组：予以球囊损伤，不予以药物干预。（3）低浓度组：球囊损伤后每日口服香叶醇50 mg/kg。（4）高浓度组：球囊损伤后每日口服香叶醇200 mg/kg。制作球囊损伤模型，2周后留取球囊损伤段血管制作病理切片，苏木精-伊红（HE）染色法测量内膜与中膜（I/M）比值，免疫组化法检测增殖细胞核抗原（PCNA）的表达，用积分光密度（IOD）值表示，并测定组织中氧化应激标志物8-羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）和脂质氧化产物丙二醛（MDA）的水平。结果与假手术组比较，对照组I/M比值、IOD值、8-OHdG及MDA水平均升高；与对照组比较，低浓度组I/M比值、IOD值、8-OHdG均降低，但MDA水平与对照组差异无统计学意义。高浓度组与对照组比较I/M比值、IOD值、8-OHdG及MDA水平均降低，且较低浓度降低更明显（P
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浙贝母叶与浙贝母花醇提物的止咳、化痰及平喘活性研究
目的：考察浙贝母叶与浙贝母花醇提物的止咳、化痰及平喘活性。方法分别采用小鼠氨水引咳法和豚鼠枸橼酸引咳法研究浙贝母叶与浙贝母花醇提物的止咳活性；小鼠气管酚红排泌法研究化痰活性；豚鼠整体动物引喘法研究平喘活性。结果浙贝母叶醇提物可明显延长小鼠和豚鼠的咳嗽潜伏期并减少咳嗽次数，显著增加小鼠呼吸道黏膜酚红的排泌量，显著延长豚鼠哮喘潜伏期（均P＜0.05）；浙贝母花醇提物可明显延长小鼠和豚鼠的咳嗽潜伏期并减少咳嗽次数，显著增加小鼠呼吸道黏膜酚红的排泌量（均P＜0.05），但不能延长豚鼠哮喘潜伏期（P＞0.05）。结论浙贝母叶醇提物具有明显的止咳、化痰及平喘活性；浙贝母花醇提物具有明显的止咳、化痰活性，但现有剂量下，没有平喘活性。
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医用气源汲送装置复制呼吸衰竭犬模型的可行性研究
目的：探讨医用气源汲送装置复制呼吸衰竭犬模型的可行性及稳定性。方法以犬为研究对象，采用自行设计的气源汲送装置，通过调控吸入氧气（O2）、二氧化碳（CO2）和氮气（N2）的比例，降低吸入氧气浓度（FiO2）和（或）提高吸入CO2浓度（FiCO2），同时开放呼出气通路的方法，使犬动脉血氧分压[p（O2）]和动脉血二氧化碳分压[p（CO2）]达到并稳定在某一设定状态。分别在基础状态及造模后1 h和2 h时采集动脉血，检测相关血气指标。结果造模1 h后，实验动物p（O2）＜60 mmHg（1 mmHg=0.133 kPa）、p（CO2）＞50 mmHg，呼吸衰竭犬模型建立成功。造模1 h和2 h时酸碱度（pH）值、血氧含量、动脉血氧饱和度（SaO2）、碱剩余（BE）较基础状态降低，p（CO2）、二氧化碳总量（TCO2）、碳酸氢根（HCO3-）较基础状态升高（P<0.05）。造模2 h时p（O2）、血氧含量、SaO2较造模1 h降低（P<0.05），而pH值、p（CO2）、TCO2、HCO3-、BE较造模1 h差异无统计学意义（P>0.05）。结论在医用气源汲送装置调控下，成功建立了大型实验动物的呼吸衰竭模型。
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微创McKeown食管癌切除术行喉返神经旁淋巴结清扫的临床效果探讨
目的：探讨微创McKeown食管癌切除术行喉返神经旁淋巴结清扫的可行性、安全性。方法回顾性分析新疆医科大学附属肿瘤医院行微创McKeown食管癌切除术的食管鳞癌患者163例，依术式的不同分为常规组63例、右侧喉返神经旁淋巴结清扫组（右侧组）53例、双侧喉返神经旁淋巴结清扫组（双侧组）47例。比较各组患者术后病理情况、手术时间、术中出血量、术后住院时长、淋巴结清扫数及肺炎、吻合口瘘、喉返神经损伤等并发症情况。病理情况包括肿瘤部位、病理分化程度、T分期以及病理分期。术后并发症随访至术后6个月。结果常规组、右侧组、双侧组的肿瘤部位、病理分化程度、T分期以及病理分期差异均无统计学意义。常规组出血量大于右侧组和双侧组（P＜0.05），右侧组与双侧组出血量差异无统计学意义；常规组、右侧组及双侧组的总淋巴结清扫数及胸腔淋巴结清扫数依次升高，组间多重比较差异均有统计学意义（P＜0.05）；而其他组间手术情况及术后并发症差异均无统计学意义。结论微创McKeown食管癌切除术行双侧喉返神经旁淋巴结清扫具有较好的安全性及可行性。
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黄连成分与阿米卡星联合用药对多重耐药大肠埃希菌的体外活性研究
目的：研究硫酸阿米卡星与黄连中成分黄连提取物、盐酸小檗碱、盐酸巴马汀联合用药对多重耐药大肠埃希菌的体外抑制作用。方法选择2013—2014年间对头孢噻肟耐药的100株大肠埃希菌，筛选多重耐药大肠埃希菌，并采用纸片扩散确证法进行超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）检测。采用微量肉汤稀释法分别检测黄连提取物、盐酸小檗碱、盐酸巴马汀、硫酸阿米卡星对产ESBLs耐药大肠埃希菌的小抑菌浓度（MIC）值，再以ATCC 25922为质控菌株，以棋盘式微量稀释法检测黄连提取物、盐酸小檗碱、盐酸巴马汀与硫酸阿米卡星联合用药对耐药大肠埃希菌的抑菌效果，并计算联合用药的部分抑菌浓度（FIC）值。结果共筛选出10株产ESBLs耐药大肠埃希菌，黄连提取物、盐酸小檗碱与硫酸阿米卡星联合用药后对9株耐药菌均表现为协同或相加作用，而盐酸巴马汀与硫酸阿米卡星联合用药后对全部耐药菌均表现为协同或相加作用。结论盐酸巴马汀或盐酸小檗碱或黄连提取物与硫酸阿米卡星联合用于多重耐药大肠埃希菌感染，具有较好的应用价值，值得进一步研究。
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床边检测NT-proBNP及cTnI对心源性呼吸困难的临床诊断价值
目的：探讨床边联合检测氨基末端B型钠尿肽原（NT-proBNP）和心肌肌钙蛋白I（cTnI）水平对心源性呼吸困难的诊断价值。方法选取以呼吸困难为主诉入院的患者120例，入院时立即行床边NT-proBNP、cTnI检测， NT-proBNP＞300 ng/L或cTnI＞0.16μg/L定义为心源性呼吸困难。根据后诊断将呼吸困难患者分为心源组（n=68）和肺源组（n=52），同时选取30例健康体检人群作为对照组，对3组的NT-proBNP、cTnI水平进行分析。研究单独检测NT-proBNP、cTnI和NT-proBNP+cTnI联合检测诊断心源性呼吸困难的敏感度和特异度。结果肺源组及心源组的NT-proBNP及cTnI水平均高于对照组，且心源组高于肺源组（P＜0.01）。NT-proBNP、cTnI单独检测诊断心源性呼吸困难的敏感度分别为67.65%和52.94%；两者联合检测提高至94.12%；NT-proBNP、cTnI单独检测时的特异度分别为70.00%和53.33%，联合检测提高至86.67%。NT-proBNP+cTnI联合检测的敏感度高于NT-proBNP、cTnI单独检测（P＜0.05），检测特异度高于cTnI单独检测（P＜0.05），与NT-proBNP单独检测差异无统计学意义。两者联合对心源性呼吸困难诊断的阳性预测值为94.12%（64/68），阴性预测值为86.67%（26/30）。结论床边联合检测NT-proBNP、cTnI在心源性呼吸困难快速诊断中具有重要的价值，两者联合检测能够提高其诊断的敏感度。
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急性STEMI患者血同型半胱氨酸与Kv1.3通道、肌钙蛋白关系的研究
目的：探讨急性ST段抬高型心肌梗死（STEMI）患者血浆同型半胱氨酸（Hcy）水平与淋巴细胞电压门控性钾通道（Kv1.3通道）、Kv1.3通道与心肌肌钙蛋白I（cTnI）水平的相关性。方法80例STEMI患者根据血浆Hcy水平分为STEMI合并高同型半胱氨酸血症（Hhcy）组（STEMI+Hhcy组，Hcy>15μmol/L，n=41）和对照组（STEMI组， Hcy≤15μmol/L，n=39）。抽取血标本后全自动生化仪测定Hcy、cTnI及血脂等指标，密度梯度离心法提取淋巴细胞，实时荧光定量PCR检测Kv1.3 mRNA表达，Western blot检测Kv1.3蛋白表达。结果 STEMI+Hhcy组cTnI水平高于STEMI组（μg/L：22.997±5.880 vs.12.881±6.343；P＜0.01）。多元线性回归分析显示年龄、性别、高血压病、糖尿病、吸烟史、家族史、三酰甘油（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）对Hcy无明显影响（P＞0.05）。STEMI+Hhcy组Kv1.3通道mRNA和蛋白相对表达量（1.35±0.14和0.85±0.12）较STEMI组升高（1.00±0.07和0.64±0.05，P＜0.05）。Hcy水平与Kv1.3通道mRNA和蛋白表达水平呈正相关（r分别为0.299、0.542，P＜0.05）；Kv1.3通道蛋白表达水平与cTnI水平呈正相关（r=0.644，P＜0.05）。结论 Hcy可能对淋巴细胞Kv1.3通道表达起着一定的作用，导致血浆cTnI水平升高。
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叶酸代谢酶MTHFR、MTRR基因多态性与原因不明复发性流产的关系
目的：探讨叶酸代谢相关酶亚甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR）、甲硫氨酸合酶还原酶（MTRR）基因多态性与原因不明复发性流产（URSA）之间的关系。方法采用病例对照的研究方法，选取天津医科大学总医院和天津市妇女儿童保健中心2013年1月1日—2015年3月1日因URSA就诊的非妊娠妇女244例（URSA组）和健康非妊娠妇女116例（对照组）。获取口腔黏膜上皮细胞，使用荧光定量PCR检测MTHFR基因C677T、A1298C位点和MTRR基因A66G位点的单核苷酸多态性（SNP），同时测定MTHFR酶活性及红细胞叶酸、血浆叶酸、血浆同型半胱氨酸水平，分析叶酸代谢相关酶MTHFR、MTRR基因多态性与URSA之间的关系。结果 URSA组MTHFR C677T位点TT基因型频率高于对照组，CT基因型频率低于对照组（P＜0.05）。2组间MTHFR A1298C、MTRR A66G基因型频率差异无统计学意义。URSA组MTHFR酶活性、红细胞叶酸、血浆叶酸水平低于对照组，同型半胱氨酸水平高于对照组（P＜0.05）；URSA组中＜35岁、≥35岁患者血浆叶酸、红细胞叶酸、同型半胱氨酸水平差异无统计学意义。结论 MTHFR C677T基因多态性与URSA有一定关系。
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孕产妇不同分娩方式的选择及结局探讨
目的：调查初产妇及经产妇不同情况下分娩方式的选择，并对其分娩结局进行交叉比较。方法回顾性分析天津医科大学总医院妇产科2013年1月1日—2014年12月31日入院分娩产妇7509例的临床资料，其中初产妇6229例，经产妇1280例。统计初产妇和经产妇阴道分娩和剖宫产例数及经产妇中剖宫产者的剖宫产指征构成比，比较初产妇及瘢痕子宫孕产妇再次妊娠选择阴道分娩与剖宫产的比例及结局。结果经产妇剖宫产率高于初产妇（69.06%vs.57.54%，χ2=59.19，P＜0.05）。其中瘢痕子宫妇女再次妊娠631例，经阴道分娩39例（6.18%），再次剖宫产592例（93.82%）。经产妇选择剖宫产的手术指征以瘢痕子宫为主。初产妇及瘢痕子宫孕产妇选择阴道分娩结局与剖宫产相比新生儿体质量较轻，孕产妇住院时间较短，产后24 h出血量和产后发热例数均较少（均P＜0.05），在新儿评分方面差异无统计学意义。初产妇与瘢痕子宫孕产妇选择阴道分娩结局差异无统计学意义。瘢痕子宫经产妇再次剖宫产与初产妇首次剖宫产相比，会增加孕产妇产后24 h出血量和产后发热例数（P＜0.05）。结论经产妇再次分娩仍以剖宫产为主；瘢痕子宫经产妇再次妊娠经阴道分娩的结局明显优于首次和再次剖宫产者，经阴道分娩是孕产妇较为安全的分娩方式。
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血栓抽吸在急性STEMI患者PPCI术中的应用研究
目的：评估急性ST段抬高心肌梗死（STEMI）患者直接经皮冠状动脉介入治疗（PPCI）中应用血栓抽吸（TA）对术后TIMI血流、左室收缩功能和临床预后的影响。方法回顾天津市胸科医院心内科2013年1月—2015年3月连续收治的STEMI并行PPCI的患者664例，根据术中是否应用血栓抽吸，分为抽吸组和对照组。2组临床基线情况、冠状动脉造影（CAG）病变情况及PPCI相关指标差异均无统计学意义。术后随访12个月，评价1个月及12个月时血栓抽吸对术后TIMI血流、左室收缩功能及预后的影响。结果抽吸组术后TIMI血流、术后1周左室射血分数均高于对照组（P＜0.05）。随访1个月时2组各主要不良心脏事件（MACE）及总MACE发生率比较差异无统计学意义。12个月时2组心源性死亡、再发心肌梗死、新发或加重心力衰竭发生率比较差异无统计学意义，抽吸组再发心绞痛、总MACE发生率低于对照组。抽吸组无MACE生存情况优于对照组。结论 STEMI患者PPCI术中应用血栓抽吸可以进一步改善术后TIMI血流和左室收缩功能，减少术后12个月内再发心绞痛的发作，但对其他MACE无明显获益。
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急性脑卒中患者外周血单个核细胞来源的AChE相关的microRNAs的表达变化
目的：探讨急性脑卒中患者外周血单个核细胞内乙酰胆碱酯酶（AChE）相关的microRNAs的表达变化。方法利用microRNAs的预测软件并结合文献，筛选靶向AChE的microRNAs。收集发病24 h以内的急性脑卒中患者和与之相匹配的对照组人群，留取静脉血提取单个核细胞。利用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）技术检测microRNAs和AChE mRNA的表达，利用Western blot技术检测AChE蛋白的表达。结果预测的靶向AChE的microRNAs包括microRNA（miR）-24、-28、-124、-132、-182*、-194、-484。与对照组相比，脑卒中患者外周血单个核细胞内miR-24、-124、-132和-194表达升高（P＜0.05），miR-28、-182*及-484无明显变化，AChE mRNA和蛋白表达水平降低（P<0.05）。结论脑卒中时miRNAs可能通过靶向AChE增强胆碱能抗炎通路。
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严重急性呼吸综合征患者十年生存质量分析
目的：对严重急性呼吸综合征（SARS）患者10年后的生存质量进行分析。方法收集确诊为SARS的患者25例为SARS组，健康体检者25例为对照组，2组一般资料差异无统计学意义。采用健康调查简表（SF-36）从生理机能、生理职能、躯体疼痛、一般健康状况、精力、社会功能、情感职能以及精神健康等8个方面对被调查者的生存质量进行评价。比较2组肺功能指标，包括用力肺活量（FVC）、一秒用力呼气容积（FEV1）、一秒率（FEV1/FVC）、肺总量（TLC）、残气容积（RV）、校正后一口气弥散量（TLCOc SB）及校正后弥散率（TLCOc/VA）；并分析SARS组各肺功能指标与生存质量各维度评分的相关性。骨MRI扫描检查SARS组患者髋关节与股骨头坏死情况。结果 SARS组中有23例（92.0%）生存质量总评分差，2例（8.0%）生存质量总评分中等。SARS组较对照组各维度生存质量评分偏低（P＜0.01）。SARS组仅TLCOc SB低于对照组，生理机能评分与FEV1、FEV1/FVC呈正相关，躯体疼痛评分与FEV1/FVC呈正相关（P＜0.05），其他生存质量评分与肺功能指标间均无相关性。SARS组中股骨头非坏死者14例（56%）、坏死者11例（44%）。坏死组各维度生存质量仅生理机能得分低于非坏死组（P＜0.05）。结论 SARS患者的生存质量低下既有心理因素也有身体因素，SARS患者的肺通气功能和股骨头坏死影响了患者的生存质量，特别是生理机能。
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VEGF165在恒河猴骨髓间充质干细胞中的表达及鉴定
目的：探讨血管内皮生长因子（VEGF165）转染恒河猴间充质干细胞（MSCs）后的表达情况，以及转染后对MSCs功能的影响。方法通过Ficoll法分离并培养恒河猴骨髓MSCs，进行细胞表型鉴定。转染pcDNA-eGFP-VEGF165至MSCs，荧光显微镜观察增强型绿色荧光蛋白（eGFP）表达情况，同时流式细胞技术对转染成功的细胞进行细胞表型及eGFP表达鉴定，RT-PCR法检测转染后VEGF165表达情况。结果成功分离到纯度较高的MSCs，转染后的MSCs及子代细胞均有eGFP和VEGF165的表达，且保留了MSCs的特性。结论 VEGF165基因转染MSCs后可以稳定表达外源基因，且可以维持MSCs的特性。
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长链非编码RNA HOTAIR影响人舌鳞癌细胞Tb3.1增殖与凋亡的体内外研究
目的：研究长链非编码 RNA HOTAIR 对人舌鳞癌细胞系 Tb3.1增殖与凋亡的影响。方法使用HOTAIR siRNA（siHOTAIR）敲低HOTAIR的表达；实验分为siHOTAIR组、无义序列组和空白对照组。前2组分别用siHOTAIR和无义序列转染舌鳞癌细胞，空白对照组细胞不做任何处理。实时定量PCR检测HOTAIR的表达水平；四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测Tb3.1细胞增殖；Western blot检测B细胞淋巴瘤2（Bcl-2）、活化型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Cleaved Caspase-3）、BAX的表达；流式细胞仪检测细胞凋亡；平板克隆形成实验检测细胞增殖情况；并行细胞衰老检测。动物实验建立Tb3.1裸鼠皮下荷瘤模型，通过免疫组织化学染色及TUNEL法评价干扰HOTAIR后对Tb3.1细胞增殖、凋亡的作用。结果 siHOTAIR处理后HOTAIR的表达水平降低；Western blot结果示Cleaved Caspase-3和BAX表达水平升高，Bcl-2表达水平降低。MTT结果显示siHOTAIR组细胞增殖受到抑制；流式细胞示siHOTAIR组细胞凋亡升高；细胞衰老实验显示siHOTAIR组细胞衰老数目增加；免疫组化结果显示， siHOTAIR组较对照组Ki-67、Bcl-2表达减少，Caspase-3、BAX表达增加；TUNEL结果显示，siHOTAIR组较空白对照组肿瘤细胞凋亡水平升高。结论干扰HOTAIR可以促进舌鳞癌细胞的凋亡并抑制其增殖，HOTAIR可以作为舌鳞癌治疗的研究方向。
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针对人DNAH2蛋白的鼠源单克隆抗体的制备
目的：制备特异性的鼠源单克隆抗DNAH2（Homo sapiens dynein，axonemal，heavy chain 2）抗体。方法首先针对人DNAH2蛋白N端1~300 aa序列，构建可表达His标签的免疫原融合表达质粒，在大肠杆菌内以IPTG诱导His-免疫原的表达并纯化；然后免疫BALB/c小鼠，分离出脾淋巴细胞，并与骨髓瘤细胞融合，形成杂交瘤细胞；后以酶联免疫吸附测定（ELISA）、蛋白免疫印迹法（Western blot）筛选阳性杂交瘤细胞。结果利用IPTG有效诱导了大肠杆菌内DNAH2免疫原的表达；筛选的阳性杂交瘤细胞检测出DNAH2蛋白条带。结论成功制备针对人DNAH2蛋白的鼠源单克隆抗体。
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应用CRISPR/Cas9系统在G401细胞株中敲除p21基因
目的：运用CRISPR/Cas9基因编辑技术，在人恶性横纹肌样瘤细胞株G401中敲除p21基因。方法通过反转录定量PCR（RT-qPCR）及Western blot检测各瘤细胞株中p21的表达，针对p21基因作用的功能域，设计了靶向人p21基因第3个外显子的向导RNA（sgRNA），克隆入lentiCRISPR v2载体。将测序及酶切鉴定正确的重组质粒在293T工具细胞中制备慢病毒颗粒并感染G401细胞，使用嘌呤霉素进行阳性细胞筛选，显微镜下挑取单克隆细胞团并继续培养获得G401单克隆细胞株。提取单克隆细胞株RNA及蛋白，利用RT-qPCR及Western blot方法检测细胞株中p21的敲除效果。结果 p21在人横纹肌样瘤细胞中高表达。成功构建靶向p21基因的lentiCRISPR v2-sgRNA重组慢病毒质粒。与对照组相比，筛选得到的G401亚克隆细胞系中p21蛋白表达缺失。结论针对难转染的G401细胞，应用CRISPR/Cas9系统成功构建了p21基因敲除的稳定株，为后续深入研究p21在人恶性横纹肌样瘤中的作用机制奠定了基础。
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右旋-色氨酸对变异链球菌生物膜形成及离散的影响
目的：探讨右旋-色氨酸（D-Trp）对变异链球菌（S. mutans）生物膜形成及离散的影响，以及在D-Trp作用下S. mutans对氯己定（CHX）药物敏感性的变化。方法吸光度法检测5.0 mmol/L D-Trp对悬浮S. mutans生长的影响，非处理组不作D-Trp处理；结晶紫染色法检测1.0、2.5及5.0 mmol/L D-Trp处理组S. mutans生物膜形成的变化，非处理组不添加D-Trp；结晶紫染色法及激光扫描共聚焦显微镜（CLSM）观察1.0、2.5及5.0 mmol/L D-Trp处理组对24 h S. mutans生物膜的离散作用；刃天青钠盐指示法检测5.0 mmol/L D-Trp处理（实验组）和阴性对照组的小抑菌浓度（MIC）及小生物膜抑菌浓度（MBIC）。结果单菌种悬浮S. mutans在D-Trp处理组与非处理组的作用下，28 h内生长趋势一致，均从4 h开始进入对数期，22 h到达平台期。1.0、2.5及5.0 mmol/L D-Trp处理组与非处理组相比，S. mutans生物膜在0~72 h内生物膜生物量均随时间推移而增加；同一时间点，各处理组各时点生物膜生物量均低于非处理组（P＜0.05）。结晶紫染色法示1.0、2.5及5.0 mmol/L D-Trp处理组生物膜生物量（OD570）均低于非处理组（P＜0.01）。激光扫描共聚焦显微镜观察结果显示，1.0、2.5及5.0 mmol/L D-Trp处理组均有细菌黏附于介质表面，处理组生物膜生物量低于非处理组（P＜0.01）。实验组和阴性对照组对S. mutans的MIC均为0.073 mg/L，对S. mutans的MBIC分别为0.293 mg/L和2.344 mg/L，添加5.0 mmol/L D-Trp后，CHX对S. mutans的MBIC降至1/8。结论 D-Trp能够抑制生物膜形成，促进已形成生物膜离散，并提高S. mutans对CHX的敏感性。
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鲍氏志贺菌临床分离株的毒力基因检测及分子分型
目的：了解鲍氏志贺菌临床分离株毒力基因分布、耐药性、分子分型及菌株间流行病学相关性。方法从我院2015年6月—10月间门诊就诊腹泻病患者的粪便中分离收集9株鲍氏志贺菌。采用K-B纸片扩散法行抗生素药敏试验，聚合酶链反应技术检测毒力基因，脉冲场凝胶电泳技术及多位点序列分型确定分子分型，分析菌株间流行病学相关性。结果9株鲍氏志贺菌共分为3个血清亚型：Ⅰ型1株，Ⅱ型3株，Ⅳ型5株。9株菌均为多重耐药菌：对氨苄西林耐药率为9/9，对头孢他啶、链霉素、庆大霉素、复方新诺明、头孢噻肟、头孢曲松、四环素、诺氟沙星和左氧氟沙星的耐药率分别为1/9、4/9、4/9、4/9、5/9、5/9、6/9、6/9、6/9，未发现阿米卡星、头孢哌酮-舒巴坦和亚胺培南耐药株；ipaH的检出率为100%，sen、set1A、set1B、ial、virA、icsA、sigA的检出率均为0，pic、sepA、sat的检出率分别为4/9、5/9、7/9；9株鲍氏志贺菌通过脉冲场凝胶电泳共分为8种谱型，相似性在63.21%~100%。多位点序列分析结果显示6株为ST648，2株为ST131、1株为ST10。结论本院分离的9株鲍氏志贺菌共分3个血清亚型，多重耐药情况严重，菌株间亲缘关系相对较远，属非暴发病例。
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miRNAs与腹膜纤维化关系的研究进展
近年发现微小RNA（miRNAs）是转录后基因调控的关键因素，参与诸多疾病的发生、发展。腹膜透析是终末期肾脏疾病的主要替代治疗方法之一，腹膜纤维化是导致腹透患者退出腹透治疗的主要因素，制约了腹膜透析的应用和发展。miRNAs与腹膜纤维化发生密切相关。本文就miRNAs在腹膜纤维化发病机制及治疗中的作用进行综述。
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成人下颌骨髁突骨折手术治疗32例临床分析
目的：探讨包括囊内骨折在内的成人下颌骨髁突骨折的手术疗效。方法32例33侧髁突骨折中，囊内骨折6例，采用耳前入路和2枚18 mm的长螺钉固定；髁颈骨折6例7侧，采用颌后穿腮腺入路及1块小型板固定；髁颈下骨折20例，采用环下颌角入路和2块接骨板固定。结果术后平均随访13.5个月，随访期末平均大张口度37.5 mm。32例患者均获得良好的咬合关系和面部对称性。7例（21.9%）出现暂时性面神经瘫痪，术后3个月均完全恢复，1例出现涎漏，加压包扎后痊愈。无永久性面瘫、髁头吸收等严重并发症。结论对不同类型的髁突骨折采用适宜的手术入路和内固定方法是取得良好手术效果的关键。
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脂肪瘤性血管外皮细胞瘤一例
脂肪瘤性血管外皮细胞瘤（LHPC）是一种罕见的软组织肿瘤，生长缓慢，好发于深部软组织，其经典形态学特点是圆形至梭形的未分化细胞围绕薄壁分支状血管生长。本文通过回顾性分析1例LHPC的临床病理特征，以期加强对LHPC的认识。
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抗-S抗体导致疑难配血一例
抗-S抗体是MNS血型系统中少见的不规则抗体。笔者在工作中发现1例冠心病患者在行冠脉搭桥术前经不规则抗筛查呈阳性。经过检测确认患者血清中含有IgG型抗-S抗体，为本实验室首次发现。因此在输血前必须进行抗体筛查，并行不规则抗体鉴定，以避免输血不良反应的发生。
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肛管恶性黑色素瘤一例
肛管恶性黑色素瘤临床罕见、恶性程度高、预后差。本文回顾了1例肛管恶性黑色素瘤患者的诊疗经过并复习了该病诊断及治疗的相关文献资料。
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 02 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
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| 2000 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
