环孢素A对链脲菌素诱导的糖尿病大鼠心脏免疫球蛋白异常沉积的影响

目的 探讨糖尿病心脏病(DC)发病的免疫机制,观察免疫抑制剂环孢素A(CsA)对DC的防治作用.方法 以链脲菌素诱导糖尿病(DM)大鼠为模型,平均体重约250 g的SD雄性大鼠74只,随机分为:①正常对照组(CON):10只;②单纯糖尿病组(DM):8只;③胰岛素治疗组(INS):9只;④造模前低剂量组(BML):9只;⑤造模前中剂量组(BMM):8只;⑥造模前高剂量组(BMH):8只;⑦造模后低剂量组(AML):8只;⑧造模后中剂量组(AMM):7只;⑨造模后高剂量组(AMH):7只.分别于造模前或成模后予1、4、8 mg·kg~(-1)·d~(-1)皮下注射,设CON组、DM组和INS组为对照,以病理组织学和超微病理学观察心肌形态,以免疫组化和荧光检测免疫球蛋白沉积.采用单因素方差分析进行统计学分析.结果 8周DM大鼠心肌细胞间质见淋巴细胞浸润和较多胶原纤维,电镜示肌丝断裂、线粒体变性.免疫组化的累积光密度(IOD)分析示各组心肌免疫球蛋白沉积的差异有统计学意义(IgG:F=11.110,P<0.01;IgA:F=10.502,P<0.01).CON组有少量IgG和IgA沉积(IgG:1482±818;IgA:1053±647),DM组其沉积显著升高(IgG:51811±15 088,P<0.01;IgA:51 881±18 170,P<0.01).INS组IgG和IgA沉积无减少,而各CsA干预组沉积量均少于DM组.免疫荧光检测示各组免疫球蛋白沉积的差异具有统计学意义(IgG:χ~2=42.158,P<0.01;IgA:χ~2=36.122,P<0.01;IgM:χ~2=23.269,P<0.01).结论 免疫机制可能参与DC的发生,CsA能有效减少免疫球蛋白沉积,可能具有延缓DC的作用.

波动性高血糖与恒定性高血糖对脂肪细胞脂联素和抵抗素表达的影响

目的 比较波动性高血糖与恒定性高血糖对脂肪细胞脂联素和抵抗素表达的影响.方法 体外培养3T3-L1脂肪细胞,制作血糖波动和氧化应激模型.细胞分为2组,A组观测波动性高血糖、锰苯甲酸卟啉、噻吩甲酰三氟丙酮对脂联素和抵抗素mRNA、细胞上清含量、硝基酪氨酸和8-羟基脱氧鸟苷的影响,B组观察氧化应激波动对脂联素和抵抗素表达的影响.采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及ELISA法分别检测脂联素、抵抗素mRNA和蛋白表达水平.硝基酪氨酸和8-羟基脱氧鸟苷分别采用间接竞争ELISA法及双抗夹心ELISA法测定.采用t检验及方差分析进行统计学分析.结果 与恒定性高血糖组比较,波动性高糖组脂联素mRNA和细胞上清含量明显降低(t值分别为7.29、7.13,均P<0.01),抵抗素mRNA和细胞上清含量明显升高(t值分别为6.85、6.94,均P<0.01),硝基酪氨酸和8-羟基脱氧鸟苷含量显著增多(t值分别为4.74、6.93,均P<0.01);用锰苯甲酸卟啉或噻吩甲酰三氟丙酮处理后,脂联素细胞上清含量水平均显著升高(t=7.47,P<0.01),抵抗素细胞上清含量水平均显著降低(t=6.91,P<0.01),硝基酪氨酸和8-羟基脱氧鸟苷的含量显著降低(t值分别为4.87、6.90,均P<0.01).氧化应激作用波动组脂联素mRNA表达水平明显降低(t=7.21,P<0.01),抵抗素mRNA表达水平明显升高(t=6.79,P<0.01).结论 波动性高血糖明显引起脂肪细胞内脂联素和抵抗素表达异常,其机制町能与线粒体电子传递链上活性氧族生产过剩有关.

持续气道正压通气对合并阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征的2型糖尿病患者糖代谢及糖皮质激素的影响

目的 探讨持续气道正压通气(CPAP)对合并有阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)的2型糖尿病(T2DM)患者糖代谢及糖皮质激素的影响.方法 选取2008年7月至2009年12月于卫生部北京医院内分泌科确诊合并有OSAHS的T2DM患者36例.对无禁忌者应用至少30 d的CPAP治疗.在治疗前后检测受试患者血糖、胰岛素敏感性指标及糖皮质激素水平.采用配对t检验对受试者前后指标进行分析.结果 应用CPAP治疗后受试者空腹血糖[(6.5±1.1)mmol/L]及糖化血红蛋白水平(7.1%±1.0%)较治疗前[(10.0±3.0)mmol/L,(9.1±2.2)%]显著降低(t=6.517,P<0.001;t=7.239,P<0.001),治疗后胰岛素抵抗(IR)的稳态模式评估指数(HOMA-IR)显著降低(3.4±1.9和2.6±2.0;t=2.204,P<0.05),促肾上腺皮质激素(ACTH)及皮质醇(COR)水平没有显著变化(P>0.05).结论 CPAP可以全面改善合并有OSAHS的2型糖尿病患者的血糖控制及胰岛素抵抗,是除生活方式干预及药物治疗外的一种行之有效的治疗手段.

2型糖尿病患者脂联素及脂联素基因启动子区多态性与白蛋白尿的相关性

目的 研究2型糖尿病患者血浆脂联素水平及脂联素基因启动子区-11377位点单核苷酸多态性(SNP)与尿白蛋白排泄率(UAER)之间的关系.方法 按1999年世界卫生组织制定的糖尿病诊断标准,自2006年4月至2009年4月选取福建医科大学附属第二医院内分泌科2型糖尿病患者403例,根据24 h UAER分为正常组(UAER<30 mg/24 h,NAU组)201例、微量白蛋白尿组(30 mg/24 h≤UAER<300 mg/24 h,MiAU组)134例和大量白蛋白尿组(UAER≥300 mg/24 h,MaAU组)68例.采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,检测脂联素基因启动子区SNP-11377C→G多态性.同时检测血浆脂联素、血脂、血糖、空腹胰岛素、血肌酐和内生肌酐清除率.脂联素水平与临床指标的相关性采用简单相关分析和偏相关分析.结果 脂联素水平随UAER增高呈递增趋势[NAU、MiAU、MaAU组分别为6.33(0.10～24.32)mg/L,6.97(0.25～20.12)mg/L,9.38(1.88～26.99)mg/L],MaAU组显著高于NAU和MiAU组(P<0.01).脂联素水平与血浆肌酐呈正相关(r=0.212,P<0.01),与肌酐清除率呈负相关(r=-0.157,P<0.05),与稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)呈负相关(r=-0.215,P<0.01).脂联素基因启动子SNP-11377C→G的基因型(CC型、CG型和GG型)和等位基因频率分布在NAU组、AU组间的差异无统计学意义(P>0.05).未发现启动子区SNP-11377C→G与脂联素水平有关.结论 2型糖尿病患者血脂联素随糖尿病肾病进展白蛋白尿加重而增高.未发现福建地区2型糖尿病患者脂联素基因启动子区-11377C→G多态性与UAER明显相关.

胰腺星状细胞对高糖诱导的胰岛β细胞凋亡的影响

目的 观察胰腺星状细胞对高糖诱导的大鼠胰岛β细胞株Ins-1细胞活力及凋亡的影响,探索胰腺星状细胞在糖尿病胰岛功能衰竭进程中的作用.方法 构建Ins-1及胰腺星状细胞共培养系统,细胞分为Ins-1对照组、Ins-1高糖组(25 mmol/L葡萄糖)、Ins-1高渗组(25 mmol/L甘露醇)、共培养对照组、共培养高糖组(25 mmol/L葡萄糖)、共培养高渗组(25 mmol/L甘露醇).24 h后采用流式细胞法分析Ins-1细胞早期凋亡水平,48 h后分别采用嚷唑蓝(MTT)法和4,6-二氨基-2-苯基吲哚(DAPI)染色法检测细胞活力及凋亡细胞形态.使用单因素方差分析进行数据统计.结果 Ins-1高糖组与Ins-1对照组比较,Ins-1细胞凋亡率显著增加(分别为7.93%±0.41%、3.73%±0.35%,F=55.68,P<0.05);共培养高糖组与共培养对照组比较,Ins-1细胞凋亡率显著增加(分别为11.73%±1.20%、5.03%±0.41%,F=55.68,P<0.05).Ins-1高糖组与Ins-1对照组比较,细胞活力明显下降(分别为2.28±0.13、2.85±0.31,F=97.75,P<0.05);共培养高糖组与共培养对照组比较,细胞活力明显下降(分别为0.62±0.06、1.29±0.19,F=97.75,P<0.05).共培养对照组、共培养高糖组、共培养高渗组与Ins-1对照组、Ins-1高糖组、Ins-1高渗组比较,Ins-1细胞凋亡率显著增加(分别为5.03%±0.41%、3.73%±0.35%;11.73%±1.20%、7.93%±0.41%;7.60%±0.72%、5.60%±0.40%;F=55.68,P<0.05),细胞活力明显下降(分别为1.29±0.19、2.85±0.31;0.62±0.06、2.28±0.13;0.65±0.07、2.35±0.12;F=97.75,P<0.05),并可见凋亡细胞典型形态特征.结论 高糖、胰腺星状细胞可致大鼠胰岛β细胞Ins-1活力下降,凋亡增加;胰腺星状细胞可促进高糖诱导的胰岛β细胞凋亡.

用RNA干扰慢病毒研究Wnt/β-连环蛋白信号通路对小鼠胰岛β细胞增殖的影响

目的 构建β-连环蛋白特异的RNA干扰(RNA interference,RNAi)慢病毒表达载体,初步探讨Wnt/β-连环蛋白信号通路对小鼠胰岛β细胞增殖的影响.方法 利用体外同源重组技术构建短发夹RNA(shRNA)慢病毒表达载体,与辅助包装质粒一起在293 T淋巴细胞中包装并扩增病毒,逐孔稀释法测定病毒滴度;RNAi慢病毒感染小鼠胰岛β细胞,实时PCR以及Western blot法检测其对β-连环蛋白表达的抑制效应;利用构建的RNAi慢病毒抑制β-连环蛋白表达,四甲基偶氮唑盐法检测小鼠胰岛β细胞增殖活性.组间比较采用方差分析(ANOVA).结果 成功构建了β-连环蛋白特异的RNAi慢病毒表达载体,获得的慢病毒滴度在5.0×10~8TU/ml左右;RNAi慢病毒在3 d后就能有效感染小鼠胰岛β细胞,5 d后使细胞内β-连环蛋白基因mRNA和相应蛋白的表达受到明显抑制;慢病毒感染小鼠胰岛β细胞后,细胞增殖率明显减少.结论 构建的目的RNAi慢病毒表达载体能有效抑制β-连环蛋白基因的表达;Wnt/β-连环蛋白信号通路在小鼠胰岛β细胞增殖中有重要影响.

社区自然人群糖调节受损者5年转归及其影响因素

目的 探讨糖调节受损人群发生糖尿病的危险性及其影响因素.方法 2002年6月至8月,采用抽样分层横断面现场调查方法于上海市浦东新区社区中检出192例糖调节受损者.2007年同期进行随访,观察单纯糖耐量受损、单纯空腹血糖受损、糖耐量受损合并空腹血糖受损、糖尿病人群比例,变化.使用t检验、方差分析、卡方检验进行统计学分析.结果 5年中死亡5例,存活的187例中79例发生糖尿病,糖尿病年转化率为8.4%(79/187/5年).基线单纯糖耐量受损者糖尿病年转化率为8.2%(47/114/5年),基线单纯空腹血糖受损者精尿病年转化率为6.3%(12/38/5年),基线糖耐量受损合并空腹血糖受损者糖尿病年转化率为11.4%(20/35/5年).正常糖耐量年转化率为6.3%(59/187/5年).单纯糖耐量受损者和糖耐量受损合并空腹血糖受损者发生糖尿病的风险分别是单纯空腹血糖受损者的1.4倍(95%可信区间为0.753～2.508,P=0.29)和107倍(95%可信区间为1.021～2.80,P=0.028).转化为糖尿病者较未转化为精尿病者高血压、肥胖的比例增高,基线年龄、体重指数、腰围、腰臀比和2 h血精明显升高,随访结束时体重指数和收缩压较基线时增高.结论 上海市浦东新区糖耐量受损合并空腹血糖受损者糖尿病转化率高.多种代谢异常可促进糖调节受损人群向糖球病转化.

肾小球足细胞synaptopodin和WT-1表达水平与糖尿病肾病患者肾脏损害的关系

目的 观察synaptopodin和WT-1在糖尿病肾病患者肾脏组织内的表达水平,探讨其对糖尿病肾病进展的影响.方法 选取1998年1月至2005年9月经解放军二八一医院确诊的35例糖尿病肾病患者,收集肾脏组织标本,根据病理变化分为弥漫性系膜硬化组(n=20)和结节性硬化组(n=15),另以7例肾脏肿瘤患者瘤旁肾脏组织为对照.应用间接免疫荧光双标记和激光共聚焦显微镜技术检测肾脏组织内synaptopodin和WT-1表达水平.收集患者肾脏活检前24h尿蛋白定量、血肌酐、评估的肾小球滤过率等临床资料.采用单因素方差分析、q检验、t检验、直线相关分析进行数据统计.结果 结节性硬化组与弥漫性系膜硬化组比较,24 h尿蛋白定量和血肌酐升高[24 h尿蛋白定量分别为(3.7±0.9)、(5.6 ±1.6)g,/24 h,t=4.177,P<0.05;血肌酐分别为(92±20)、(135±45)vmol/L,t=10.455,P<0.05] ,评估的肾小球滤过率降低[分别为(65±19)、(53±24)ml/min,t=8.921,P<0.05] .与对照组相比,糖尿病肾病患者肾组织内足细胞数量(F=4.06,P<0.05)、synaptopodin(F=3.79,P<0.05)、WT-1表达显著减少(F=5.68,P<0.05),结节性硬化组较弥漫性系膜硬化组减少更为显著(q值分别为5.80、6.42、5.35,均P<0.05).糖尿病肾病患者synaptopodin 和WT-1表达与24 h尿蛋白定量呈负相关(相关系数分别为-0.64、-0.71,均P<0.05),与评估的肾小球滤过率呈正相关(相关系数分别为0.57、0.62,均P<0.05).结论 糖尿病肾病患者肾小球内synaptopodin和WT-1表达降低,并且与肾脏损害临床指标存在相关性,提示足细胞损伤可能为糖尿病肾病进展的原因之一.

Visfatin转基因对胰岛β细胞功能和活性的影响

目的 探讨Visfatin基因过表达对胰岛β细胞增殖、凋亡、细胞周期和胰岛素释放的影响.方法 将MIN6细胞分为对照组、绿色荧光蛋白转染组和Visfafin转染组,对照组以空质粒、绿色荧光蛋白转染组以荧光蛋白质粒、Visfatin转染组分别以2、5、10 mg/L Visfatin质粒转染细胞,40、60 h后收集细胞,采用实时聚合酶链反应和Western blot法检测Visfatin mRNA和蛋白表达,应用噻唑蓝法及流式细胞仪检测细胞增殖、凋亡和周期,运用酶联免疫法检测葡萄糖刺激的胰岛素释放.采用单因素方差分析进行统计学分析.结果 与对照组相比,2、5、10 ms/L Visfatin质粒转染40 h及5 mg/L Visfatin质粒转染60 h后细胞增殖率分别升高1.60、1.87、1.75、1.51倍(t值分别为4.98、13.52、11.02、6.14,均P<0.05).棕榈酸诱导的细胞凋亡率降低,与对照组和绿色荧光蛋白转染组相比,质粒转染组细胞凋亡率分别降低42%、48%(F值分别为4.58、6.12,均P<0.05).与对照组相比,Visfatin质粒转染40 h后G_0/G_1期细胞减少12.3%,S期细胞增加13.2%(F值分别为5.25、6.23,均P<0.05).与对照组相比,质粒转染组细胞基础胰岛素分泌无改变,葡萄糖刺激后胰岛素释放有所增加,差异无统计学意义(P>0.05).结论 Visfatin可促进胰岛β细胞增殖,抑制胰岛β细胞凋亡,对细胞周期有调节作用.

糖耐量损伤者瘦素受体基因Gln223Arg多态性研究

目的 探讨糖耐量受损者瘦素受体基因Gln223Arg多态性与血清瘦素水平及胰岛素抵抗的相关性.方法 从2007年1月至2009年8月在宁波市第二医院检验科进行糖耐量试验的门诊患者中筛选未接受任何抗糖尿病治疗且血常规及肝肾功能正常者.649名合格者据其糖耐量试验结果分为正常糖耐量组(n=298,男168名,女130名,平均年龄42岁)及糖耐量受损组(n=351,男188例,女163例,平均年龄46岁).检测甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、糖化血红蛋白、空腹血糖、胰岛素、瘦素、胰岛素抵抗及瘦素受体基因Gln223Arg多态性.采用t检验及χ~2检验分析瘦素受体基因Gln223Arg多态性与血清瘦素及胰岛素抵抗的相关性.结果 糖耐量受损组Gln223Gln基因型比例高于正常糖耐量组(χ~2=7.38,P<0.05),体重指数、甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆同醇、空腹血糖、糖化血红蛋白、胰岛素、胰岛素抵抗及瘦素水平显著高于正常糖耐量组(t值分别为13.168、10.816、6.704、16.459、26.553、9.521、17.108、28.122、5.829、6.602,均P<0.01).223Arg等位基因缺失的糖耐量受损患者总胆同醇、低密度脂蛋白胆固醇、胰岛素、胰岛素抵抗、瘦素高于携带该等位基因的糖耐量受损患者(t值分别为2.294、3.744、3.892、7.633、2.263、2.479,均P<0.05),但两者甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、糖化血红蛋白及空腹血糖水平无显著差异(t值分别为0.343、-0.494、-1.175、1.404,均P>0.05).223Arg等位基因缺失(Gln223Gln)与男性糖耐量受损相关[比值比(OR)=2.32,P<0.01] ,与女性糖耐量受损无显著相关(OR=1.45,P>0.05).结论 瘦素受体基因Gln223Arg多态性与血脂、血清瘦素水平及男性糖耐量受损的发生、发展密切相关.

2型糖尿病与阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征的关系及持续气道正压通气对糖代谢的影响

我国人群2型糖尿病患病率逐年增高,其多种代谢紊乱和并发症、伴发病是导致预后不良的主要原因.睡眠呼吸紊乱在2型糖尿病患者中非常常见,通常表现为阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS).2型糖尿病与OSAHS之间存在重要的临床、流行病学和公共卫生学联系,2型糖尿病与OSAHS之间的作用机制及临床治疗对策更成为目前的研究热点之一.

糖尿病胰岛纤维化分子机制研究进展

大量病理研究发现,在1型和2型糖尿病患者及各种动物模型中,均可观察到胰岛纤维化现象.胰岛纤维化过程进一步破坏了胰岛的正常组织结构并导致胰岛功能恶化、β细胞数量减少、胰岛素分泌量降低.

阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征的治疗及其与糖尿病的关系

阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(obstructive sleep apnea hypopnea syndrome,OSAHS)不但极易造成多系统损害,还是一种进行性疾病,尤其是肥胖和习惯性打鼾者,随着时间的推移可逐步发展为OSAHS患者,或由轻症发展为中重度患者,并出现各种合并症~([1]),甚至发生恶性生产、交通事故或睡眠猝死.只有科学规范地治疗OSAHS,才可能去除致病因素,使OSAHS造成的多系统损害(尤其是心脑血管疾病和糖尿病)得以控制.

阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征与胰岛素抵抗

阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(obstructive sleep apnea hypopnea syndrome,OSAHS)是具有潜在危害性的疾病,可引起一系列并发症,严重时甚至可导致死亡.其主要表现为睡眠时打鼾并伴有呼吸暂停和(或)低通气,夜间反复发生低氧和高碳酸血症以及睡眠结构紊乱,并进而导致白天嗜睡、记忆力下降,可出现自主神经功能紊乱乃至心脑血管并发症、多脏器损害等,严重影响患者的生活质量和寿命.进一步的研究结果揭示,OSAHS本身作为多种全身疾患的独立危险因素参与诸如糖尿病、代谢综合征、冠心病、卒中等的发生发展,而OSAHS所致的胰岛素抵抗在这些并发症的发生过程中起着至关重要的作用.

重视糖化血红蛋白在糖尿病管理中的重要作用

国际糖尿病联盟(IDF)公布的统计数据显示,2007年全球糖尿病患病率为6.0%,患者人数已达2.46亿,预计到2025年全球糖尿病患者将达到3.8亿~([1]).我国糖尿病的形势同样严峻,近20年来,随着我国经济迅速发展,生活水平提高引起膳食结构和生活方式改变,加上社会逐步进入老龄化等原因,我国糖尿病患病率显著升高.

高渗性非酮症糖尿病昏迷伴空泡蝶鞍尿崩症一例

患者女性,50岁,因"口干、多饮1年余,神志不清3 h"于2009年12月6日入院.既往糖尿病史1年,不规律口服二甲双胍,未监测血糖水平.入院前3 h无明显诱因被发现卧床不起,呼之不应,双上肢抽搐.入院体格检查示:血压121/74 nm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa),脉搏104次/min.

阻塞性睡眠呼吸暂停与糖尿病专家共识

一、前言阻塞性睡眠呼吸暂停(obstructive sleep apnea,OSA)在2型糖尿病患者中很常见~([1]),两者在临床、流行病学和发病机制方面具有相关性,且独立于肥胖之外.目前2型糖尿病对健康的危害已为人们所认识,而OSA对健康的危害及其带来的医疗负担还远没有被人们所认识.因此需要通过各学科的努力使人们认识到OSA与2型糖尿病之间的关系,并着手采取实际行动.

关于《三七总皂苷联合氨基胍治疗对糖尿病大鼠肾脏氧化损伤的影响》一文术语的更正

请多保留一份真

有这样一个故事:一天,上帝看到人们的生活水平很低,便想在世间找寻一个人,赐予他丰厚的财富,去接济那些穷人.终,上帝确定了两个能力比较强而且受人尊敬的年轻人布朗和罗丹,并决定对这两个人进行后的考验.