中国和巴西临床新生隐球菌格鲁比变种菌株的种群和基因型比较分析

目的 了解新生隐球菌格鲁比变种(Cryptococcus neoformans var.grubii)临床菌株在国内和巴西多位点微卫星位点定型(multilocus microsatellite typing MLMT)的种群分布特征,探讨并分析两国新生隐球菌格鲁比变种MLMT基因型差异.方法 对已鉴定的69株新生隐球菌格鲁比变种进行DNA提取,采用3个微卫星位点(CNG1、CNG2、CNG3)的正反序列引物对相应的微卫星位点基因片段进行扩增后测序;测序后计算出每一菌株位点基序重复数(CNG1对应TA重复,CNG2对应GA重复,CNG3对应CAT重复);结合不同基序重复数判定各菌株的基因型.应用SPSS 11.5统计软件进行统计学分析.结果 在33株被MLMT基因分型的国内新生隐球菌grubii变种菌株中有5种基因型被鉴定,其中29株为MLMT-17,占87.88%;而在36株巴西临床菌株中有10种基因型被鉴定,其中19株为MLMT-13,占52.78%.结论 两国间新生隐球菌格鲁比变种临床菌株的主要基因型分布存在显著差异.巴西临床菌株的基因型分布表现为多样性.

低位直肠癌应用经肛门拖出单吻合器技术保肛的临床研究

目的 探讨经肛门拖出单吻合器技术在低位直肠癌保肛手术中的效果及应用价值.方法 对2004年1月至2009年2月收治的低位直肠癌,75例行双吻合器保肛术(double stapling technique,DST),37例行经肛门拖出单吻合器保肛术(single stapling technique,SST).结果 两组所有患者保肛手术均获成功, 无手术死亡,术后病理切缘均未见癌细胞浸润.两组手术时间、术中出血量、平均住院时间均无差异(P＞0.05).DST组发生吻合口漏3例,SST组无吻合口漏发生.随访 4～65个月(平均15个月),DST组盆腔复发3例 4%,吻合口复发2例2.7%,肝脏转移 7例 9.3%;SST组盆腔复发1例 2.7%,无吻合口复发,肝脏转移 4例 10.8%;两组之间无统计学差异(P＞0.05).结论 经肛门拖出单吻合器保肛术(SST)治疗低位直肠癌保肛成功率高,复发率低,简化了手术操作,安全可行.

先天性心脏病肺动脉高压患儿血浆ET-1、CGRP、TXA_2及肺组织中其受体的变化

目的 探讨左向右分流型先天性心脏病合并肺动脉高压患儿血浆内皮素-1(ET-1)、降钙素基因相关肽(CGRP)及血栓素A_2(TXA_2)的变化及其受体在肺组织中的变化.方法 采集60例左向右分流型先天性心脏病患儿血浆,采用酶免、放射性免疫及ELISA等方法测定ET-1、CGRP和TXB_2含量,修补术中取患儿肺组织,采用RT-PCT的方法检测相应受体在肺组织中的表达变化.结果 与对照组相比,观察组(先天性心脏病组)患儿血浆ET-1及TXB2的水平明显增高(P<0.05),而血浆CGRP的含量水平则明显降低(P<0.01);与无肺动脉高压组患儿相比中、重度肺动脉高压患儿血浆ET-1和TXB_2的含量显著增高,而CGRP的含量则显著降低(P<0.05,P<0.01);经过PGE_1治疗14 d后,患儿血浆ET-1和TXB_2的含量显著降低(P<0.01),而CGRP的含量则无明显变化(P>0.05).与无肺动脉高压组患儿相比合并肺动脉高压患儿肺组织中ET-1和TXA_2受体的mRNA表达显著增高,而CGRP受体的mRNA表达量则显著降低(P<0.05,P<0.01).结论 ET-1、CGRP和TXA_2与左向右分流型先天性心脏病合并肺动脉高压的发生与发展有着密切的联系,且测定这些指标可以用来判断其预后.

USPIO和GoldMag磁共振成像信号特点的实验研究

目的 通过对不同浓度超小超顺磁性氧化铁(ultra-small superparamagnetic iron oxide,USPIO)和金磁微粒(GoldMag-Coreshell, GoldMag)行不同序列MR成像,对比分析其信号特点,探讨合适的MRI检查方法.方法 以磷酸盐缓冲液(PBS)为稀释剂将USPIO和GoldMag分别稀释为0.5～1 000 μg/ml的47个不同的浓度,以PBS液为对照,共获得48个浓度,行FSE T_1WI、FSE T_2WI和GRE T_2~*WI磁共振成像.观察不同浓度USPIO和GoldMag在3种序列中的信号强度变化规律,计算信号强度变化比率,绘制浓度-信号强度曲线图.结果 GoldMag与USPIO的MRI信号变化规律基本一致,随浓度增加,FSE T_1WI信号强度呈升高趋势,FSE T_2WI信号强度略有下降,GRE T_2~*WI信号强度明显降低.不同成像序列两种对比剂信号强度比较,在FSE T_1WI,浓度高于30 μg/ml时信号强度有显著性差异(P<0.05);在FSE T_2WI,浓度为40～90 μg/ml时信号强度有显著性差异 (P<0.05);在GRE T_2~*WI,两种对比剂信号强度无显著性差异 (P>0.05).结论 GoldMag与USPIO常规MRI信号特点变化趋势相似,GoldMag是较理想的MRI分子影像学研究纳米粒对比剂,GRE T_2~*WI为USPIO和GoldMag的佳成像序列.

伴有胃肠动力障碍的重症急性胰腺炎大鼠结肠肠肌间神经丛一氧化氮合成酶神经元的变化

目的 观察伴有胃肠动力障碍的重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)大鼠结肠肠神经系统(enteric nervous system,ENS)肌间神经丛一氧化氮合成酶(nitric oxide synthase,NOS)神经元的变化,以探讨SAP胃肠动力障碍的神经机制.方法 20只SD大鼠随机均分为假手术组和SAP组,逆行胰胆管穿刺逆行注射5%牛磺胆酸钠制作SAP模型.检测腹部X线、小肠推进比,胰腺病理评分.制作肌间神经丛全层标本,应用双重免疫荧光染色法观察NOS神经元的形态及占总神经元的百分比.结果 与假手术组相比,SAP组大鼠肠管明显扩张,SAP组小肠推进比显著降低(P<0.01),胰腺病理评分明显增高(P<0.01),NOS神经元胞体大而染色深,结间束NOS神经纤维粗大,NOS神经元比例为(40.74±5.15)%明显高于假手术组(P<0.01).结论 结肠肌间丛NOS神经元表达增多可能是大鼠SAP胃肠动力障碍神经机制之一.

鼻窦眼眶区良性占位性病变手术径路的选择

目的 探讨鼻窦眼眶区良性占位性病变手术径路的选择.方法 根据良性占位性病变侵犯的部位,将116例鼻窦眼眶区良性占位性病变患者分为额筛眶区、蝶筛眶区和颌筛眶区;其中额筛眶区16例,包括鼻内镜径路6例,联合径路(鼻内镜手术+鼻外开放式手术)8例,鼻外径路2例;蝶筛眶区40例,为鼻内镜径路;颌筛眶区60例,包括鼻内镜径路42例,联合径路12例,鼻外径路6例.结果 蝶筛眶区40例良性占位性病变均经鼻内镜径路切除病灶,且手术视野好,病变清除彻底,未见复发,所有患者术后无眶内及颅内并发症;鼻内镜径路对48例颌筛眶区脓囊肿、上颌窦内侧壁良性占位性病变及某些额筛眶区脓囊肿也能较容易的清除病灶,但对28例额筛眶区、颌筛眶区某些特殊的良性占位性病变却很难完成.结论 鼻内镜径路是治疗蝶筛眶区良性占位性病变、颌筛眶区脓囊肿、上颌窦内侧壁良性占位性病变及额筛眶区某些脓囊肿的理想选择.

基于"单碱基延伸和酶放大系统"的SNP漏声表面波生物传感器的实验研究

目的 探讨漏声表面波生物传感器检测单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism, SNP)的方法.方法 分别在漏声表面波生物传感器反应体系加入2条仅存在一个碱基不同(A/G)的靶序列,与固定的探针杂交.利用酶生物信号放大系统,结合单碱基延伸技术,观察其杂交信号的改变.结果 靶位点为完全匹配的A时,相位下降(6.47°±0.42°);而靶位点为错配的G时,相位下降仅为(0.77°±0.25°),两者差异有统计学意义(P＜0.01).结论 成功建立了漏声表面波生物传感器检测SNP的新方法.

不伴癫痫发作的幕上占位病变患者的皮层脑电图特征与术后癫痫的研究

目的 探讨不伴癫痫发作的幕上占位病变患者的皮层脑电图(electrocorticography,ECoG)特点及皮层横纤维热凝术对术后癫痫的作用.方法 选择76例术前无癫痫发作的幕上占位病变患者,术中行ECoG监护及病灶切除加周围痫灶皮层热凝(监护组).100例同期无癫痫发作幕上占位病变患者仅单纯病灶切除(对照组),术后随访24～48个月,平均33.6个月,比较两组术后癫痫发生率的差异.结果 ①监护组76例病灶切除前ECoG显示有痫性放电65例(85.52%).其中41例行皮层热凝,痫性放电减少或消失.②术后早期癫痫:监护组10例(13.16%),对照组28例(28.00%),两组结果差异显著(χ~2=5.78,P＜0.05).术后晚期癫痫发生率:监护组与对照组分别为11.84%和27.70%,差异显著(χ~2=6.34,P＜0.05).结论 术前无癫痫发作的幕上占位病变患者,ECoG显示痫性放电阳性率较高;病灶切除联合皮层热凝痫性放电较单纯病灶切除术后癫痫发生率低.

丙酮酸脱氢酶激酶-1在人结肠癌中的表达及意义

目的 检测丙酮酸脱氢酶激酶-I(pyruvate dehydrogenase kinase-I,PDK1)在人结肠癌组织和细胞中的表达.探讨抑制PDK1对结肠癌细胞活性的影响.方法 应用RT-PCR、荧光定量PCR和免疫荧光法、Western blot检测结肠癌组织、癌旁组织以及4种人结肠癌细胞PDK1基因的表达情况.在PDK1抑制剂(dichloroacetate ,DCA)的诱导下,通过MTT法观察结肠癌细胞活性.结果 PDK1基因在结肠癌组织中表达较癌旁组织中高;在4种人结肠癌细胞中明显表达.抑制PDK1能抑制结肠癌细胞增殖活性,抑制效应随药物浓度而递增,其中90 mmol/L DCA的活性细胞率分别为(23.90±2.79)%、(5.90±1.31)%、(32.82±4.50)%和(29.72±3.03)%.结论 PDK1基因在结肠癌组织和细胞中高表达,在癌旁组织中低表达,抑制PDK1明显抑制结肠癌细胞增殖活性,PDK1可望成为结肠癌有效治疗靶点.

肝内胆管上皮细胞上皮-间叶转化的实验研究

目的 观察人肝内胆管上皮细胞(human intrahepatic biliary epithelial cells,HIBEpiC)上皮-间叶转化(epithelial-mesenchymal transitions, EMT)现象,探讨EMT在胆管周围纤维化中的作用及其可能的分子机制.方法 HIBEpiC用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)处理48、72 h后,用PCR及Western blot技术检测E-cadherin、S100A4和α-SMA的表达,以及与EMT信号通路相关的TGF-β1的表达;同时用紫杉醇、siRNA smad2/3阻断TGF-β1的作用,探讨TGF-β1/smad2/3信号通路在HIBEpiC发生EMT时的可能作用.结果 HIBEpiC经LPS处理后,TGF-β1 mRNA表达于48 h达到高峰,72 h后开始下降,但维持较高水平(P<0.01,P<0.05);EMT标志物E-cadherin mRNA和蛋白表达随培养时间的延长逐渐降低(P<0.01),而S100A4、α-SMA mRNA及蛋白表达明显上调(P<0.01,P<0.05).紫杉醇可使HIBEpiC中LPS所诱导的TGF-β1、Smad2/Smad3 mRNA表达明显下降,特别是在48 h明显(P<0.01).用siRNA技术可使Smad2/3 mRNA及蛋白表达明显下调(P<0.01),同时可使与HIBEpiC共培养EMT标志物E-cadherin mRNA及蛋白质表达上调(P<0.01,P<0.05),S100A4和α-SMA表达明显下调(P<0.01).结论 LPS可诱导HIBEpiC中TGF-β1的表达,使胆管上皮细胞发生EMT,抑制TGF-β1或Smad2/3,可使EMT发生逆转,提示TGF-β1或Smad2/3可能成为预防胆道周围纤维化的一个潜在靶点.

nesprin-1基因在小鼠心脏发育过程中的表达

目的 检测小鼠心脏发育过程中nesprin-1基因mRNA和蛋白的表达及亚细胞定位.方法 取小鼠胚胎12.5 d(embryo 12.5day,E12.5)、E14.5、E16.5、E18.5以及新生鼠、成年小鼠心脏,应用RT-PCR、Western blot、免疫荧光技术检测胚胎各时间点、新生鼠、成年鼠心脏nesprin-1基因mRNA和蛋白表达及细胞定位.结果 在小鼠胚胎E12.5、E14.5、E16.5、E18.5以及新生鼠、成年小鼠心脏组织中,nesprin-1基因mRNA及蛋白均有表达,其表达量随着心脏的发育而逐渐增加,E16.5和E18.5表达高,成年鼠表达低.免疫荧光显示,nesprin-1的分布在各个时期均位于核被膜及核周间隙中.结论 nesprin-1在小鼠心脏发育过程中表达呈动态变化,在心脏传导系统和心肌细胞发育成熟时期呈高表达,因此推测nesprin-1可能在心脏传导系统和心肌细胞的发育中有重要作用.

小鼠CD25分子胞外段的原核表达载体的构建及表达鉴定

目的 构建小鼠CD25分子胞外段的原核表达载体,并在大肠杆菌中进行表达.方法 从BALB/c小鼠脾细胞中提取总RNA,利用RT-PCR方法获得CD25分子胞外段序列;将其亚克隆入原核表达载体PET-32a,构建好PET-32a-CD25胞外段,并进行酶切及测序鉴定;将PET-32a-CD25胞外段转染大肠杆菌BL21进行表达,并对表达产物进行纯化和鉴定.结果 RT-PCR扩增出708 bp的CD25胞外段的基因片段;pET32a-CD25胞外段/BL21经IPTG诱导后, SDS-PAGE显示有新生的蛋白表达条带, 相对分子质量约为47×10~3,重组蛋白用镍树脂纯化后经Western blot检测显示具有良好的免疫反应性,并且可以在体外有效刺激自体T细胞疫苗免疫小鼠脾细胞的增殖并高分泌IL-4.结论 CD25胞外段蛋白在原核细胞中成功表达, 纯化后的蛋白保持良好的免疫反应性.

牙周病相关危险因素分析

目的 调查和分析四川省牙周病流行趋势及其相关危险因素.方法 采用阶段分层等容量随机抽样,随机抽取四川省部分地区和人群,进行问卷调查和临床检查,分析影响牙周病的部分社会因素和生活方式,对400份调查资料的一般情况、健康行为、口腔情况、口腔保健、口腔治疗、全身健康史与牙龈指数、简化口腔卫生指数、牙龈探诊出血、牙周炎的关系进行Logistic多因素回归分析.结果 (1)400例调查者中, 牙周炎发病率达87.8 %,平均牙周袋探诊深度(periodontal probing,PD)值为(1.71±0.81) mm;平均附着丧失(clinic attachment loss,CAL)值为(2.44±1.73) mm;简化口腔卫生指数(simpified oral hygiene index,OHSI)为(2.53±1.17),大多数人的口腔卫生水平状况较差;牙龈指数(gingival index,GI)为(1.926±0.224); 80.28 %的患者至少有1个部位探诊出血,牙龈探诊出血(bleeding on probing,BOP) 阳性位点占全部检测位点的17.67 %.(2)Logistic多因素回归分析表明:经常进食高纤维食品、平均每天刷牙时间3 min左右、知道要定期洁牙是牙周炎的保护因素,而吸烟、年龄、城乡居住地点差异对牙周炎有高度影响(P<0.05) .结论 戒烟的宣教工作与加强口腔卫生教育及防病治病意识是牙周病的保护因素.

条件性恐惧消退早期大鼠边缘下区NR2B的动态变化

目的 探讨条件性恐惧消退早期(1周内),记忆保持成绩与内侧前额叶皮层边缘下区(infra-limbic cortex,IL)NMDA受体2B亚基(NR2B)免疫反应阳性物质的动态变化.方法 将70只成年雄性SD大鼠随机分成:正常对照组、恐惧消退组和恐惧对照组,其中恐惧对照组(条件恐惧建立后不进行消退训练),恐惧消退组(条件恐惧建立24 h后进行消退训练),采用以声音为提示的足底电击建立大鼠恐惧记忆,然后仅给予声音信号进行恐惧消退训练.在恐惧消退后第1、3、7天分别进行消退保持测试,并在各时间点取边缘下区标本进行NR2B的免疫组化实验.结果 在消退保持过程中:①恐惧对照组和恐惧消退组大鼠消退成绩整体呈上升趋势,但均低于正常对照组,恐惧消退组消退成绩好于恐惧对照组(P＜0.01);②恐惧对照组和恐惧消退组大鼠边缘下区NR2B免疫反应阳性物质逐渐增加,但均低于正常对照组,第1天无明显差异,第3、7天差异明显,恐惧消退组NR2B免疫反应阳性物质高于恐惧对照组(P＜0.05).结论 恐惧消退训练后3～7 d,边缘下区NR2B水平与消退记忆保持成绩一致.

MAPK信号通路对人胆管癌细胞Fas配体基因表达的调节及其机制的初步探讨

目的 观察MAPK/ERK kinase(MEK)抑制剂PD98059对人胆管癌细胞Fas配体(Fas ligand, FasL)表达的影响及其作用机制.方法 用RT-PCR和Western bolt检测PD98059处理组及未处理组人胆管癌细胞(QBC939)中c-Myc、p-c-Myc和FasL的表达;构建含FasL基因启动子的荧光素酶报告基因质粒,瞬时转染人胆管癌细胞,用PD98059处理后,检测荧光素酶相对活性,比较启动子活性的变化情况;染色质免疫共沉淀(ChIP)技术分析p-c-Myc和FasL基因启动子的结合情况.结果 PD98059处理组胆管癌细胞磷酸化c-Myc(p-c-Myc)和FasL的表达均明显降低,而c-Myc未见明显变化;人胆管癌活细胞中p-c-Myc与FasL基因启动子有结合;PD98059处理组胆管癌细胞荧光素酶活性与对照组相比下降约80%.结论 PD98059通过抑制MAPK/ERK kinase(MEK)的活性,降低c-Myc磷酸化水平,进而下调FasL基因启动子活性,从而抑制人胆管癌细胞FasL基因的表达.

分化早期胚胎大鼠神经干细胞电生理特征

目的 探索分化早期神经干细胞的电生理特征.方法 分离培养胚胎大鼠海马神经干细胞.应用膜片钳全细胞记录技术检测神经干细胞和分化早期(1～3 d)神经细胞的电压门控离子电流.结果 未分化的神经干细胞不表达内向钠离子电流,而诱导分化1 d的神经细胞即表达内向性钠离子电流,但不能诱导产生动作电位.神经干细胞和分化早期的神经细胞均表达两种类型的外向钾离子电流,并表达内向T-型钙电流.结论 钠离子电流的功能性表达是神经干细胞退出细胞周期开始分化的标志.分化早期是神经干细胞离子通道发育过程的重要阶段.

扩张型心肌病大鼠心肌ErbB4蛋白表达和细胞凋亡及neuregulin-1β的干预作用

目的 观察阿霉素所致心衰大鼠心肌ErbB4蛋白表达和细胞凋亡及NRG-1β的干预作用.方法 用60只SD雄性大鼠随机分为4组:阿霉素心肌病8周组(ADR1,n=10), 阿霉素2 mg/kg,尾静脉注射,每周1次,连续注射8周;阿霉素心肌病12周组(ADR2,n=20), 阿霉素2 mg/kg,尾静脉注射,每周1次,连续注射8周,之后普通喂养到12周;阿霉素心肌病+NRG-1治疗组(NRG, n=20),在注射ADR后8周后即开始给予neuregulin-1β 10 μg/(kg*d)尾静脉注射,连续5 d,之后喂养到12周;正常对照组(CON, n=10).免疫印迹法(Western blot)检测ErbB4受体蛋白的表达;HE染色病理观察评分;TUNEL法观察心肌细胞凋亡.结果 心肌细胞凋亡指数:与模型组相比,NRG治疗组凋亡指数显著降低(P<0.05);ErbB4蛋白表达:模型组第8周时表达明显高于正常组,模型组12周时表达较正常组明显减少;与模型组比较,NRG干预组ErbB4蛋白表达明显上调(P<0.05).结论 ErbB4蛋白表达在扩张型心肌病大鼠心肌中表达早期增强,随着病程延长明显下降; NRG-1β能够抑制扩张型心肌病大鼠心肌细胞凋亡并增加其受体ErbB4的表达.

mdr-1基因转染的骨髓细胞对大剂量MMF治疗的耐受性研究

目的 检测转染多药耐药基因-1(multidrug resistance gene-1,mdr-1)的骨髓细胞能否耐受大剂量霉酚酸脂(mycophenolate mofetil,MMF)的杀伤作用,为体内实验提供依据.方法 将重组腺病毒Ad-EGFP-mdr-1转染大鼠骨髓细胞.RT-PCR法和Western blot法检测mdr-1 mRNA及蛋白的表达水平;柔红霉素排出试验检测转染mdr-1基因后的骨髓细胞有无功能表达;MTT法检测不同浓度MMF处理后转染mdr-1基因骨髓细胞的存活情况.结果 骨髓细胞病毒转染率为30.14%,存活率为89.25%;转染后骨髓细胞mdr-1的mRNA及蛋白质水平都存在功能性表达;导入的mdr-1表达产物P-gp有药物外排泵功能;不同剂量的MMF处理后,转染mdr-1基因的骨髓细胞存活率没有明显差异(P>0.05).结论 转染mdr-1的大鼠骨髓细胞能有效耐受超大剂量MMF治疗.

吴茱萸碱刺激的负载脊髓匀浆蛋白DCs促进小鼠脊髓损伤的修复

目的 探讨吴茱萸碱(evodiamine,EVO)刺激的负载脊髓匀浆蛋白(homogenate protein of spinal cord,hp)树突状细胞(hpDCevo)对小鼠脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)的促修复作用及其机制.方法 SCI后24 h给予治疗,随机分6组:分别腹腔注射PBS、EVO、未成熟DC(DCs)、经EVO刺激的DCs(Dcevo)、负载hp的DC(hpDC)、hpDCevo.利用BMS功能评分及组织病理学方法,观察hpDCevo对小鼠脊髓损伤神经功能恢复和局部瘢痕等病理学改变的影响.ELISA法测定SCI损伤局部组织和T细胞培养上清中的脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)、神经营养因子-3(Neurotrophin-3,NT-3)、白介素-12(interleukin-12,IL-12)、粒-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony stimulating factor ,GM-CSF)的含量.结果 注射后第84天,hpDCevo组BMS评分明显高于hpDC组和其余各组(P＜0.05).组织病理学结果显示,hpDCevo组较其他组空洞和瘢痕缩小.损伤局部组织中的BDNF、NT-3、GM-CSF、IL-12含量为hpDCevo组高于hpDC组和其余各组(P<0.05);T细胞培养上清中的BDNF、GM-CSF为hpDCevo组高于hpDC组和其余各组(P<0.05).结论 hpDCevo对小鼠SCI修复有促进作用,其机制可能是通过上调损伤局部的BDNF、NT-3、GM-CSF、IL-12来实现的.

咖啡酸衍生物的合成及其脑靶向性的研究

目的 咖啡酸衍生物的合成及其脑靶向性评价.方法 以浓硫酸为催化剂,咖啡酸与甲醇和乙醇直接反应合成咖啡酸甲酯和乙酯,咖啡酸在磷酸催化下与醋酐酰化得3,4-二乙酰基咖啡酸;并测定了咖啡酸及其衍生物在正辛醇-磷酸盐缓冲溶液(pH 7.4)系统中的分配系数;采用原代脑微血管内皮细胞(brain microvascular endothelial cell, BMVEC)和星形胶质细胞(astrocytes, AC)共培养建立的体外血脑屏障模型来评价其脑靶向性.结果 得到3个咖啡酸衍生物的油水分配系数均较咖啡酸高,亲脂性增强;其中咖啡酸甲酯和3,4-二乙酰基咖啡酸透过体外血脑屏障的能力较咖啡酸强.结论 所合成的3个化合物经MS、~1HNMR、IR和UV证实其结构;咖啡酸甲酯和3,4-二乙酰基咖啡酸能突破血脑屏障具有脑靶向性特点.

人卵巢癌微血管内皮细胞的培养及体外管腔样结构形成的观察

目的 建立人卵巢癌微血管内皮细胞(ovarian carcinoma-derived microvascular endothelial cells,ODMECs)免疫磁珠分选体系并观察ODMECs体外二维管腔样结构(tubule-like structure,TLS)的形成.方法 利用结合有CD31抗体的MACS MicroBeads 免疫磁珠分选系统分离纯化ODMECs.通过形态学、生化和表型特征对所获得的ODMECs进行鉴定;并检测其摄取乙酰化低密度脂蛋白(acetylated-low-density lipoprotein,DIL-acLDL)和结合凝集素Ⅰ(UEA-Ⅰ)的能力,观察其在体外培养体系中二维管腔样结构的形成.结果 所获ODMECs流式分析细胞纯度可达99.6%,具有卵石征、接触抑制,表达CD31、CD105、FⅧ-Rag;具有结合UEA- Ⅰ和摄取DIL-acLDL的能力;培养过程中观测到ODMECs可形成二维管腔样结构.结论 成功建立了人ODMECs的免疫磁珠分离培养方法,并观察到ODMECs具有体外二维管腔样结构.

非酒精性脂肪肝患者血浆FGF21水平及与肥胖、胰岛素抵抗关系研究

目的 探讨非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)患者血浆成纤维细胞生长因子21(fibroblast growth factor 21,FGF21)水平及与肥胖、胰岛素抵抗等因素的相关性.方法 根据是否合并糖尿病将70例NAFLD患者分为单纯脂肪肝组36例和2型糖尿病合并脂肪肝组34例,正常对照组26例,采用酶联免疫分析法检测血浆FGF21水平,并测定空腹血糖(fasting plasma glucose, FPG)、空腹胰岛素(fasting insulin, FINS)、游离脂肪酸(free fatty acids, FFA)、血脂水平,以及体质量指数(body mass index, BMI)、腰臀比(waist-to-hipratio, WHR);采用稳态模型HOMA-IR和胰岛素敏感指数(insulin sensitivity index,ISI)评价胰岛素抵抗状态.结果 ①2组脂肪肝患者中,肥胖比例、BMI及WHR均显著高于正常对照组,甘油三酯(triglyceride,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、FFA显著增高(P<0.05,P<0.01),高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol, HDL-C)降低(P<0.05);糖尿病合并脂肪肝组HOMA-IR明显增高(P<0.01),ISI显著降低(P<0.05).②单纯脂肪肝和糖尿病合并脂肪肝患者血浆FGF21水平[(1.86±0.64)、(1.97±0.60)ng/ml]明显高于健康对照组[(1.26±0.43) ng/ml,P<0.05].③相关分析显示:血浆FGF21水平与BMI、WHR 、HOMA-IR、TG、FFA呈正相关(r=0.278、0.335、0.326、0.312、0.307,P<0.05,P<0.01),与HDL、ISI呈负相关(r=-0.255、-0.279,P<0.05).④多元逐步回归分析显示:WHR、HOMA-IR、TG是血浆FGF21的独立相关因素.结论 NAFLD 患者血浆FGF21水平升高,FGF21与肥胖、胰岛素抵抗、脂代谢紊乱有关,FGF21可能在脂肪肝的发生、发展中起了一定的作用.

建立禽流感H7和H9亚型荧光定量PCR检测方法

目的 建立高致病性禽流感H7和H9亚型荧光定量PCR方法.方法 根据禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)HA-H7基因和HA-H9基因分别设计特异AIV H7和H9亚型特异荧光定量PCR引物和探针,优化反应体系和反应条件,分析该试剂的敏感性、特异性、重复性等.结果 经优化反应体系和反应条件后,AIV H7试剂和AIV H9试剂的敏感性达到1×10~(4.67) EID_(50)和1×10~(3.80) EID_(50)水平,特异性与细胞培养敏感性类似;批内和批间精密度Ct值的CV值均远小于10%,可重复性良好.结论 本项目研制的AIV H7和H9亚型的敏感性、特异性、重复性均好,适合在禽流感H7和H9亚型疫情和人类疑似禽流感病例中检测使用.

左旋多巴诱导舞蹈样运动障碍3例

左旋多巴(L-dopa)是目前治疗帕金森病(parkinson disease,PD)有效的药物,但是长期服用L-dopa(5～12年)后会出现一些严重的并发症,主要有症状波动、运动障碍和精神障碍等,其中表现为舞蹈症样的运动障碍是L-dopa诱导的异动症(levodopa-induced dyskinesias,LID)的一种,临床上较少见,但该症的出现给PD患者带来极大的痛苦.目前由于LID的发病机制尚未明确,所以其治疗存在困难~([1]).本研究报告3例PD患者L-dopa不同治疗阶段出现的LID,并对其治疗方法及疗效进行分析.

双眼睑非霍奇金淋巴瘤1例

眼睑部位淋巴瘤约占眼部淋巴瘤的5%,以B细胞低恶度型为主,对放疗敏感,预后好~([1]).双眼睑同时发生淋巴瘤者罕见,现报告如下.

短期应用小剂量甲强龙治疗婴儿重症肺炎43例

婴儿重症肺炎是儿科的急症,及时、合理、准确的诊断与治疗,大多预后良好~([1]).我科2008年1月至2009年1月婴儿重症肺炎在常规治疗的同时短期应用小剂量的甲泼尼龙琥珀酸钠(商品名为甲强龙,以下简称甲强龙),疗效明显,现报告如下.

闭合穿针复位改良Ishiguro法治疗骨性锤状指

外伤致手指末节指骨基底背侧骨折锤状指畸形在手外科比较常见,临床表现为手指远指间关节屈曲,不能伸指的一种畸形,X线片见末节指骨基底背侧撕脱骨块向近背侧移位.锤状指骨折较早见于Smillie(1937)报道.Webbe~([1])在其报道的160例锤状指中骨性锤状指占44例.因其影响外观及功能,常需手术治疗.2004年5月至2009年5月我科采用闭合复位穿针改良Ishiguro法治疗骨性锤状指患者43例,取得了较好效果,现报告如下.

妊娠合并肝血管瘤破裂出血1例

妊娠合并肝脏的包块的病因众多,其中血管瘤是常见的肝脏良性肿瘤,精确发病率很难界定,很多人无症状或者将症状误以为是妊娠引起,妊娠增加肝血管瘤并发症的发生率,却限制了诊断和干预的方式,极易造成误诊或漏诊,出现不良结局~([1]).我科于2009年2月收治1例妊娠合并肝血管瘤破裂的患者,现报告如下.

125例大子宫肌瘤阴式手术临床分析

子宫切除术(transvaginal hysterectomy, TVH)是妇科常见的手术之一,但对于子宫大于12孕周的大子宫而言,采用传统术式操作难度大、术中出血多、手术时间长~([1]).本科研究设计出"两快一游离"大子宫肌瘤阴式手术新方法,对125例大子宫施阴式子宫切除术,疗效满意.现报告如下.

某部1992-2007年传染病的季节分布特征分析

传染病的防控一直是军队卫生防病工作的重点~([1]).分析传染病发病的流行趋势和季节变化规律,可为制定预防控制传染病的措施提供依据.为了解某部传染病发病季节分布,我们对1992-2007年该部的传染病资料进行了统计分析.

射频消融辅助治疗剖宫产切口部位早孕1例

1 临床资料孕妇,32岁,因停经49 d,B超发现切口部位妊娠于2007年9月3日入院.患者2年前行子宫下段剖宫产,此次早孕要求行人工流产术,术前常规检查,彩超结果显示:①宫内早孕,孕囊约34 mm×25 mm,囊内见胎芽及原始心管搏动.②孕囊着床于子宫切口疤痕部位,距膀胱层约5 mm.提示:宫内早孕,切口部位妊娠.

2例高强聚焦超声治疗儿童肝母细胞瘤麻醉处理

高强聚焦超声(high intensity focused ultrasound,HIFU)治疗是一种非侵入性局部高温治疗肿瘤的新技术~([1]),其麻醉方法有别于传统的外科手术麻醉.我科率先对2例肝母细胞瘤患儿进行HIFU治疗,采用静吸复合全醉及气管插管控制呼吸方法,并在治疗前行人工胸水协助暴露肿瘤病灶,达到安全有效治疗肿瘤的目的,现报告如下.

巨大毛发胃石症1例

胃石是患者进食植物纤维、某些矿物质或异物后,在胃内积聚并与胃黏液结成的固体硬块,形状多为圆形或椭圆形,大小不一~([1]).本科收治1例罕见的巨大毛发性胃石,现报告如下.

针刺加运动疗法治疗颞颌关节紊乱综合征的临床观察

颞颌关节紊乱综合征是一种常见病,主要症状有关节疼痛、酸胀、关节弹响、张口受限,进食、语言均受影响.部分患者反复发作,久治不愈.治疗常采用药物(消炎、止痛、活血)、理疗等方法,但见效慢,疼痛、关节紧张和粘连无法快速减轻.本研究治疗的65例颞颌关节紊乱综合征,大多数为多方法治疗无效或疗效不显著者,我们应用针刺加运动疗法~([1])治疗颞颌关节紊乱综合征,见效快,效果好,现报告如下.

冠心病患者血液中肺炎衣原体抗体、血管性假性血友病因子和纤维蛋白原的变化及其临床意义

目前已有研究表明病原体感染可引发体内慢性炎症反应,从而促进动脉粥样硬化(atherosis,AS)及冠心病(coronary heart disease,CHD)的发生、发展,但具体机制尚不明确~([1]).本实验应用微量免疫荧光法测定CHD患者血清肺炎衣原体(coronary heart disease,Cpn)特异性抗体,ELISA法测定血管性假性血友病因子(Von Willebrand factor,vWF),凝固法测定纤维蛋白原(fibrinogen,Fg),并与正常人相比,旨在探讨Cpn感染及vWF、Fg与CHD发生、发展的关系.

激光治疗白内障术后糖尿病视网膜病变疗效观察

目的 探讨激光治疗白内障术后糖尿病视网膜病变疗效.方法 将120例单眼白内障合并双眼糖尿病视网膜病变的患者分为治疗组、对照组,对术前及术后眼底情况进行观察.并于术前或术后早期行视网膜激光光凝治疗.结果 对照组68只眼,进展25只眼,稳定43只眼,治疗组52只眼,进展10只眼,稳定42只眼(χ~2=4.39,P<0.05).两组对侧眼共120只眼,进展30只眼,稳定90只眼(χ~2=5.01,P<0.05).结论 白内障手术可加速糖尿病视网膜病变进展.术前或术后尽早行全视网膜激光光凝术可有效阻止病变进展.

HBV对肝癌细胞中AKR1C1基因表达的影响

目的 研究HBV对肝癌细胞中AKR1C1基因表达的影响,并对其作用机制进行初步的探讨.方法 RT-PCR和Real-time PCR检测HepG2.2.15和HepG2细胞中AKR1C1基因的差异表达情况;构建AKR1C1基因启动子虫荧光素酶报告质粒,并分别与HBV、HBx、HBs、HBp、HBc的表达质粒共转染HepG2细胞,双荧光素酶检测系统检测虫荧光素酶活性.结果 AKR1C1基因在HepG2.2.15细胞中的表达高于HepG2细胞1.5倍;在HBV表达质粒与AKR1C1基因启动子虫荧光素酶报告质粒共转染的HepG2细胞中,虫荧光素酶的活性明显增强,为对照组3.37倍;相对HBs、HBp、HBc,HBx升高虫荧光素酶的活性的作用强.结论 HBV可以增强AKR1C1基因启动子的转录活性,促进AKR1C1在肝癌细胞中的表达,HBx在这一转录激活当中发挥重要作用.

斜"T"形钛板固定治疗桡骨远端骨折

目的 探讨斜"T"形钛板治疗桡骨远端骨折的适应证及临床疗效.方法 总结分析斜"T"形钛板治疗25例桡骨远端骨折临床效果.结果 优13例,良12例,可2例,优良率92%.结论 对于桡骨远端骨折手法复位未能达到要求的不稳定型骨折,采用斜"T"形钛板固定治疗,是一种有效的治疗方法.有利于手腕关节术后早期功能锻炼,临床效果好.

双膜滤过治疗降低肾移植患者群体反应性抗体水平的临床观察

目的 探讨分子筛治疗对移植肾失功患者群体反应性抗体(panel reactive antibody,PRA)含量及再次肾移植排异反应的影响.方法 选择2008年1-12月第三军医大学新桥医院肾内科就诊的初次肾移植后慢性移植肾功能不全合并PRA阳性的移植肾失功患者10例进行5次分子筛治疗,检测PRA、配型的变化,再次肾移植的排异反应.结果 与分子筛治疗前[(40.8±6.2)%]比较,PRA水平[(18.8±3.4)%]显著下降(P<0.05).PRA抗体阳性特异性位点和阳性频率均明显减少.Ⅰ、Ⅱ类抗原配型错配率也显著降低,10例患者接受肾移植均未发生超急性排异反应.结论 分子筛治疗可有效减少再次肾移植患者PRA水平和移植肾超急性排异反应.

我校2009年重要科技奖励成果简介(一)