听皮层-内侧膝状体突触传递的长时程增强及其突触前机制的研究

目的研究大鼠听皮层(AC)-内侧膝状体(MGB)突触传递的长时程增强(long-term potentiation,LTP)及其突触前机制.方法刺激听辐射纤维,采用脑片膜片钳全细胞技术在MGB分离和记录兴奋性突触后电流(EPSCs);诱导LTP,并观察谷氨酸受体阻断剂对LTP的影响;采用配对脉冲实验对LTP的发生机制进行探讨.结果①AC-MGB突触的兴奋性传递主要由NMDA和AMAP/kainate受体介导,可在MGB成功诱导出LTP;②应用AP-5或KYN阻断突触后神经元的去极化后仍然可在MGB成功诱导出LTP;但用无Ca2+的ACSF替代正常ACSF后,在MGB难以诱导出LTP.③AC-MGB突触传递的LTP伴随着配对脉冲比率(paired-pulse ratio,PPR)的下降.结论AC-MGB突触传递存在LTP机制,其诱导过程不依赖于突触后NMDA受体,但依赖于细胞外Ca2+的浓度;LTP的发生与突触前兴奋性神经递质释放概率增加有关.

德氮吡格对人肝癌细胞株QGY-7701基因表达的影响

目的研究德氮吡格(TNBG)对人肝癌细胞株QGY-7701基因表达的影响,探讨其抗肿瘤作用的分子机制.方法采用基因芯片检测德氮吡格处理人肝癌细胞株QGY-7701前后mRNA的改变情况.结果基因芯片筛选出差异表达基因共1 200条,尤以脂代谢相关基因变化显著:脂肪合成有关的10条基因表达上调,脂肪分解有关的3条基因和脂肪转移有关的1条基因表达下调.结论德氮吡格的抗肿瘤效应可能是通过干扰细胞的脂代谢来实现的.

前列腺、膀胱及盆底肌伤害感受神经元在脊髓中的分布及其关系的研究

目的探讨前列腺、膀胱及盆底肌伤害感觉神经在脊髓中枢的分布及其关系.方法用甲醛分别刺激S-D大鼠前列腺、膀胱、盆底浅层肌,用原位杂交方法确定脊髓中痛敏物质SP的分布及表达情况.结果甲醛刺激前列腺、膀胱及盆底肌引起相似(L6-S1)的脊髓节段内P物质的表达显著增强.结论接受前列腺、膀胱及盆底的伤害刺激的脊髓伤害感觉神经元有显著的互相重叠.前列腺、膀胱、盆底的病变可引起相似的疼痛感觉.

肝细胞色素氧化酶Ⅰ在非酒精性脂肪肝大鼠形成中的作用

目的研究肝脏线粒体DNA细胞色素氧化酶Ⅰ(COXⅠ)在非酒精性脂肪肝大鼠的表达及其意义.方法Wistar大鼠40只,随机分为正常对照组和高脂饲料2、4、8、12周组(其中每组各8只);紫外分光光度法测定肝脏细胞色素氧化酶活性,Western blot方法研究高脂饲料诱导的大鼠脂肪肝形成中肝细胞COX Ⅰ蛋白的表达变化,逆转录聚合酶链反应测定肝细胞COX Ⅰ mRNA表达变化.结果脂肪肝2、4、8和12周细胞色素氧化速率分别为(0.88±0.32)、(0.76±0.37)、(0.48±0.26)、(0.39±0.21)/win,与正常对照组(0.98±0.37)/min较明显降低(P＜0.01),肝细胞COX Ⅰ基因及蛋白表达随着脂肪肝程度的加重亦明显增强.结论非酒精性脂肪肝大鼠肝细胞色素C氧化酶活性下降以及线粒体编码呼吸链相关的细胞色素C氧化酶COX Ⅰ基因和蛋白质降低,与脂肪肝引起的肝脏损害密切相关.

Bek腺病毒表达载体的构建及其在哺乳类动物细胞中的表达

目的构建Bek腺病毒表达载体并观察该载体在成纤维细胞中转基因表达FGFR2-Ⅲc的情况,为研究骨骼发育打下基础.方法利用AdEasy-1腺病毒载体系统构建Bek腺病毒表达载体;该载体感染成纤维细胞后,通过荧光定量PCR(FQ-PCR)检测Bek腺病毒表达载体转基因表达FGFR2-Ⅲc mRNA情况.结果Bek腺病毒表达载体感染成纤维细胞后,成纤维细胞有绿色荧光表达,荧光定量PCR检测表明Bek腺病毒表达载体转基因表达FGFR2-Ⅲc mRNA效果明显(P＜0.05).结论Bek腺病毒表达载体构建成功,能够转基因表达FGFR2-Ⅲc mRNA,为研究骨骼发育和成骨机制提供了基础.

藿香正气液对大鼠胃动素的影响

目的观察藿香正气液对大鼠胃动素的影响及其临床意义.方法80只Wistar大鼠随机分为藿香正气液组和对照组,在给大鼠分组灌服藿香正气液或生理盐水1、6 h后:①观察大鼠胃肠运动的变化;②运用放射免疫分析法测定血浆、胃窦和空肠组织匀浆中胃动素(MTL)的含量变化;③运用免疫组化法显示胃窦、空肠组织中MTL阳性产物的分布情况.结果①应用藿香正气液后1、6 h,大鼠胃肠运动显著增强,以用药后1 h更为明显.②藿香正气液明显增加血浆、胃窦及空肠组织匀浆中MTL的水平,及胃窦和空肠组织中MTL的阳性产物的含量.结论藿香正气液有促胃肠动力作用,该作用可能与其对胃动素的影响有关.

脂多糖结合蛋白多抗对大鼠肺泡巨噬细胞内毒素耐受性及Toll样受体4表达的影响

目的观察脂多糖结合蛋白(lipopolysaccharide binding protein,LBP)多抗对大鼠肺泡巨噬细胞(alveolar macrophage,φAM)内毒素(lipopolysaccharide,LPS)耐受性与Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)表达的影响,研究二者之间的联系.方法将从32只Wistar雄性大鼠分离所得φPAM,按随机数字法等分为正常对照组(A)、LPS单次刺激组(B)、LPS二次重复刺激组(C)和LPS二次重复刺激+LBP多抗组.运用ELISA和RT-PCR方法分别检测各组大鼠φAM分泌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及TLR4 mRNA表达的变化,Western blot检测TLR4蛋白表达的变化.结果大鼠φAMTNF-α分泌和TLR4 mRNA表达及TLR4的蛋白表达水平,A组分别为:(0.45±0.01),(0.77±0.06),(51.03±1.19)μg/L,B组分别为:(0.76±0.03),(1.55±0.25),(122.72±1.75)μg/L,B组与A组比较显著增加,P＜0.01;C组分别为:(0.49±0.05),(1.13±0.07),(85.35±0.68)μg/L,C组与B组比较,明显减少,P＜0.05.D组分别为:(0.28±0.07),(0.78±0.17),(61.06±1.36)μg/L,D组与C、B组比较,明显减少(P＜0.05,P＜0.01).结论LPS重复刺激可使大鼠φAM对LPS产生耐受性;LPS耐受性的产生与TLR4表达下降相关;LBP多抗通过降低TLR4表达,提高大鼠φAM对LPS耐受性,此乃LBP抗体可用于治疗LPS所致急性肺损伤的部分分子生物学理论基础.

盐酸尼卡地平对血管紧张素Ⅱ诱导成年大鼠心脏成纤维细胞增殖和PYK2表达的影响

目的研究盐酸尼卡地平对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的成年大鼠心脏成纤维细胞(cardiac fibroblasts,CFs)增殖和粘附斑激酶新成员PYK2合成的影响,探讨盐酸尼卡地平抑制心肌纤维化的机制.方法建立AngⅡ诱导成年大鼠纤维化模型,采用MTT法检测盐酸尼卡地平对CFs增殖的影响,免疫组化法检测CFs纤维连接蛋白量的变化,RT-PCR法和Western blot法分别检测PYK2 mRNA和蛋白的改变.结果盐酸尼卡地平呈浓度依赖性方式抑制AngⅡ诱导CFs的增殖和纤维连接蛋白的合成,并可降低PYK2 mRNA和蛋白的表达.结论盐酸尼卡地平的抗心肌纤维化作用的作用机制之一可能是通过抑制PYK2的表达实现的.

SGC7901-DC融合细胞疫苗表型变化特点的研究

目的利用细胞融合技术,获取SGC7901胃癌细胞-DC融合细胞疫苗,并对融合细胞表型变化进行检测,了解其变化特点,为基于树突状细胞的融合疫苗研究及应用提供实验依据.方法利用聚乙二醇(PEG)诱导SGC7901胃癌细胞、树突状细胞融合,利用HAT、HT筛选培养系统对融合细胞进行筛选培养,获取纯净融合疫苗;应用直标荧光单克隆抗体进行染色,流式细胞仪检测细胞表型变化特点.结果SGC7901胃癌细胞-DC融合后,融合细胞具备独特的形态学特点,其细胞表面分子表达较亲代DC显著升高.结论SGC7901胃癌细胞-DC融合细胞疫苗具备独特形态学特点,其细胞表面分子表达较亲代DC显著升高,成为其具备更强生物学效应的细胞学基础.

胃肠道起搏细胞ICCs在豚鼠泌尿道分布研究

目的研究胃肠道起搏细胞-Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICCs)在豚鼠泌尿道的分布情况.方法取8只豚鼠肾盂、输尿管、膀胱和尿道组织,经铺片处理后,行ICCs特异性标志物KIT免疫细胞化学染色.结果KIT染色阳性,形态与胃肠道起搏细胞ICCs相似的细胞(ICCs样细胞)存在于豚鼠全泌尿道的黏膜下层和肌层.结论在豚鼠全泌尿道存在有ICCs样细胞分布,豚鼠可作为研究人泌尿道ICCs样细胞功能的理想动物模型.

hTERT隐性表位肽-核酸病毒样颗粒疫苗抗胃癌免疫的初步研究

目的设计新型的人端粒酶逆转录酶(hTERT)肽-核酸病毒样颗粒疫苗,并研究其抗胃癌的作用.方法将阳离子隐性表位肽和DNA疫苗协同性结合于同一疫苗形成病毒样颗粒,通过DNA阻滞试验、DNA沉淀试验、免疫组化等试验优化该疫苗参数,并鉴定其免疫原性和观察其体内激发特异性CTL反应的有效性.结果确定制备疫苗的参数为浓度为150 mmoL/L NaCl,电荷比为4.证实该疫苗可激发特异性CTL反应,并对胃癌细胞具有特异性杀伤活性,Elispot实验显示能够有效诱导的IFN-γ分泌.结论成功构建了具有特异性CTL杀伤活性的hTERT隐性表位肽-核酸病毒样颗粒疫苗,为进一步探索其体内抗胃癌免疫作用奠定了基础.

系统性红斑狼疮并发肺动脉高压误诊1例

患者,女性,34岁,因间断双下肢及颜面水肿,伴腹胀,手指麻木,双腿无力,食欲下降,体质量下降约10 kg,在外院诊断为"慢性胃炎、肾炎",相应治疗效果不佳.后出现活动后气促,夜间平卧时呼吸困难、体重短期内明显增加.急诊入我院后查体:端坐位,表情痛苦,贫血貌,血压144/88 mmHg.

四胞胎1例

孕妇,31岁,2005年12月8日因"孕36+6周,孕2产1,下腹胀痛伴心慌3 d"入院.孕前月经周期规则,未使用促排卵药物.末次月经:2005年3月23日,预产期:2005年12月30日.

替硝唑糊剂局部治疗牙周炎的临床疗效

自2003年来,我科门诊采用替硝唑糊剂置入牙周袋内治疗牙周炎,并与传统法比较,疗效满意,现报告如下.

蜜蜂蜂毒刺疗致急性肝衰竭1例

1临床资料患者,张某,女,45岁.不嗜烟酒,无输血史,既往无传染病史和遗传病史,曾患关节疼痛6年,病因不明.2001年始听信偏方用活蜜蜂尾刺针刺关节周围皮肤治疗关节疼痛,持续共约4年时间.

食道结核1例

患者,男性,23岁,进食梗阻1周,同时伴盗汗、胸痛,自服消炎药后进食梗阻有所好转,停药后复发,再次服药后无效.平素体形消瘦,无肺结核及其他系统结核病史.外院胃镜及病理学活检提示见未分化癌细胞,后再次行胃镜检查,提示黏膜慢性炎伴中度非典型增生,黏膜下见小血管增生,大量细胞浸润,平滑肌细胞、泡沫状细胞及坏死物,其中1粒见成片小细胞,不能除外小细胞癌或间叶源性肿瘤,建议复诊.

经皮腔内血管内支架成形术治疗症状性大脑中动脉狭窄1例

脑动脉脉狭窄是脑卒中的一个重要原因,大约10%的缺血性卒中及8%的短暂性脑缺血发作(transient ischemia attack,TIA)是由此而引起的.在亚洲,约1/3急性缺血性卒中是由颅内大动脉闭塞性病变引起的.药物治疗难以解除大脑中动脉(middle cerebral artery,MCA)狭窄导致的TIA发作,而颅内动脉支架成形术提供了一种有希望的方法[1,2].

分根术治疗下颌第1磨牙严重病变25例的疗效

下颌第1磨牙俗称6龄齿,在口腔中萌出时间早,萌出时处于昆合牙列期,窝沟裂隙结构明显,是容易龋坏的牙齿,而且一般认为残根、龋坏至髓底穿通者或根分叉病损经反复治疗瘘道不愈合者均需拔除[1],本研究采用根管治疗后进行分根术,改变根分叉部位的隐蔽环境,便于彻底清除根分叉病变的炎症组织,利于病变愈合[2],将下颌第1磨牙恢复成2个前磨牙形态,减少残根的负载,为修复体的永久保留创造了条件,现将研究结果报告如下.

肋间神经冷冻术用于开胸患者术后镇痛临床效果观察

开胸术后剧痛导致众多并发症,严重影响患者康复.目前认为术后疼痛和机体对创伤的过度应激反应是影响患者康复的重要因素,因此术后镇痛作为一种调控手段显得十分重要[1].研究观察肋间神经冷冻术用于开胸患者术后镇痛的镇痛效果及并发症.

2 437例院前急救疾病谱流行病学一般性回顾分析

近年来,随着院前急救系统的建立和患者急救意识的提高,急救患者数量日渐增多,针对院前急救患者的流行病学分析,无疑具有重要的医疗和社会价值.本研究采用流行病学的一般回顾性分析方法对我院近年来院前急救患者疾病谱进行了初步分析,并探讨了其在院前急救系统中的意义.

脑血管造影和成形术后Angioseal血管缝合的临床应用

目的探讨脑血管造影和成形术后Angioseal缝合器止血的临床应用效果和安全性.方法18例脑血管造影和成形术后患者实施了Angioseal缝合止血器,并与同期实施的20例传统压迫止血的患者进行比较;观察治疗效果和不良反应.结果缝合法与压迫法止血时间及下肢制动时间的比较.缝合法(2.1±0.8)min,压迫法(27.1±6.4)min,两者差异非常显著(P＜0.01);下肢制动时间分别为:缝合法(4.2±O.6)h,压迫法(22.4±3.4)h,两者差异非常显著(P＜0.01);压迫法术后各类并发症如出血、血肿、迷走反射、皮肤溃烂等明显高于缝合法(P＜0.01).结论脑血管造影和成形术后Angioseal缝合止血器临床应用简便、实用、安全.

肝癌粘附转移中相关整合素的作用研究现状

整合素家族作为细胞粘附分子中的一类,是连接细胞与细胞外基质(extracellular matrix,ECM)相互作用重要的一种细胞表面糖蛋白受体.原发性肝癌是我国常见的恶性肿瘤之一,因较早即发生浸润和转移,发现时多属晚期,使得预后较差.肝癌侵袭与转移过程中,肝癌细胞首先必须粘附,才能实现侵袭与转移的关键步骤.而作为整合素家族中的整合素β1家族在肝癌粘附转移过程中起了关键的作用.

肿瘤化疗药物对护士的职业危害和化疗防护现状及对策

动物实验和体外试验结果已证实,很多化疗药物具有致畸、致突变作用[1,2].长期少量接触化疗药物对人体组织、细胞也会产生各种不良影响[3].工作人员通过皮肤、呼吸道、消化道被动吸收化疗药物,形成潜在的身体损害.这种职业性危害已得到国外很多肿瘤专家的重视,国际几家权威机构已制定了安全防护措施,并且有了很好的防护设备.

肿瘤分子病理和分子靶向治疗进展

临床肿瘤学的发展,直接得益于基础科学,特别是分子生物学和分子病理学的研究进步,正如第41届ASCO主席DHJohnson教授所指出的那样"提高肿瘤治疗水平,终依靠科学进步".现仅就肿瘤分子病理和分子靶向治疗方面,主要包括DNA损伤修复与肿瘤基因治疗,以及肝细胞癌研究的某些进展简要进行综述,其中有些研究结果对于今后的肿瘤治疗、预防可能具有一定的实际意义.

关于计量单位的使用

重组腺病毒介导的p53基因对肝癌细胞生长抑制作用的研究

目的探索p53基因在肝癌基因治疗方面的可行性.方法以人肝癌细胞系SMCC-7721为实验对象,将载有人野生型p53 cDNA的重组腺病毒(Ad-p53)感染SMCC-7721细胞及肿瘤组织,体外体内实验观察Ad-p53对SMCC-7721细胞生长的影响.结果Ad-p53对SMMC-7721细胞的抑制作用与感染浓度有关,MOI值越高,抑制作用越强.当Ad-p53在100 MOI效靶比时,SMCC-7721细胞基本达到完全抑制.感染2 d后P53蛋白表达达到高峰,SMCC-7721生长受到明显的抑制.瘤内注射Ad-p53后,荷瘤裸鼠的肿瘤体积明显减小.结论Ad-p53转导野生型p53基因可能是一种有效的肝癌基因治疗途径.

原发性肝癌不同病理组织类型中肝干细胞的起源分析

目的观察原发性肝癌不同病理组织类型中肝干细胞的活化、分布、来源和免疫表达特征.方法应用HE染色、免疫组化S-P方法观察94例肝细胞癌(HCC)和12例肝内胆管细胞癌(ICC)和10例混合型肝癌的肝干细胞情况,用5例肝硬化和4例正常肝组织为对照.结果在原发性肝癌不同病理组织类型中干细胞免疫标志均有不同程度的表达,均可观察到肝于细胞向肝癌细胞的转化,以混合型肝细胞癌中肝于细胞免疫表型表达率高(P＜0.05).结论不同病理组织类型的肝癌组织中均存在不同分化状态和不同来源的肝干细胞,可能由于肝干细胞(hepatic stem cell,HSC)分化不全或分化异常所致.

pSilence APE1对骨肉瘤诱导血管内皮细胞迁徙抑制作用的实验研究

目的观察APE1 siRNA表达载体pSilence APE1对骨肉瘤诱导血管内皮细胞迁徙的抑制作用及其与ES的协同作用.方法pSilence APE1转染骨肉瘤细胞9901和HOS;骨肉瘤和内皮细胞Transwell双室培养,计数迁移到内室膜背面的内皮细胞数,观察pSilence APE1及其联合ES对骨肉瘤细胞诱导内皮细胞迁徙的影响.结果ES低剂量组(350ng/ml)和高剂量组(700 ng/ml)与正常对照组有明显差异(P＜0.01).2μg pSilence APE1和3μg pSilence APE1较单独脂质体组有显著性差异(P＜0.01).2 μg pSilence APE1和ES低剂量(350 ng/m1)联合组抑制内皮细胞迁徙的作用显著高于单独对照组(P＜0.01).结论pSilence APE1可显著抑制骨肉瘤细胞诱导的血管内皮细胞迁徙,并且可能与ES具有协同抗血管生成的作用.

人骨肉瘤细胞HOS锎-252中子放射敏感性的研究

目的观察锎-252中子治疗骨肉瘤的效果.方法人骨肉瘤细胞HOS用铱-192γ射线和锎-252中子射线分别以不同的剂量照射,MTr法绘出细胞存活曲线,经典的克隆形成分析测算D0、Dq和SF2值,彗星分析法检测照射后细胞的DNA损伤情况.结果MTT法、克隆形成分析和彗星分析法3种方法的实验结果均表明HOS细胞对锎-252中子射线更为敏感.由克隆形成分析得到锎-252中子射线和铱-192γ射线照射HOS细胞的D0值分别是2.80和3.34,Dq值分别是2.66和3.07,SF2值分别是0.596和0.684.锎-252中子射线和铱-192γ射线以200、500、1 000 cGy 3个剂量照射HOS细胞后,碱性彗星尾力矩分别是(6.664±0.648)、(20.322±1.433)、(33.909±1.245)和(4.760±O.528)、(15.203±1.272)、(27.375±1.315)(P＜0.05).结论锎-252中子对HOS细胞的杀伤效果优于铱-192γ射线,说明锎-252中子放射治疗骨肉瘤可能是一种具有发展潜力的放射治疗方法.

非霍奇金淋巴瘤患者血清VEGF及Endostatin水平检测的临床相关研究

目的探讨非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin's lymphoma,NHL)患者血清VEGF及Endostatin(ES)水平变化与其临床特征、治疗、预后因素的关系.方法采用ELISA法检测162例NHL患者和50例正常健康人血清VEGF及ES水平.结果①162例NHL患者血清中VEGF、ES水平(198.97±17.92)pg/ml和(34.82±7.91)pg/ml,均分别显著高于正常健康人(31.58±6.68)pg/ml和(16.80±3.87)pg/ml(P＜0.01),V/E比值也非常显著高于正常人.②NHL患者血清中VEGF、ES水平以及V/E比值与其恶性程度、临床分期和骨髓侵犯(VEGF除外)等显著相关(P＜0.05),而与其年龄、性别、细胞类型之间无明显关系.③50例NHL完全缓解(CR)患者血清中VEGF、ES水平及V/E比值均非常显著低于122例NHL初治患者(IP)(P＜0.01);但血清中VEGF、ES水平仍非常显著高于正常健康人(P＜0.01),而两者V/E比值差异并不明显(P＞0.05).39例复发/难治NHL患者(RRP)血清中VEGF水平显著高于IP组(P＜0.05),但其ES水平差异并不明显(P＞0.05),其V/E比值非常显著高于IP组(P＜0.01).④NHL患者血清VEGF、ES水平以及V/E比值与其预后指标LDH、CRP、β2-MG均呈显著正相关;血清VEGF、ES两者之间亦呈显著正相关.结论NHL患者血清中VEGF、ES水平升高,与淋巴瘤的恶性程度及肿瘤负荷大小密切相关,其两者的比值(V/E)对NHL患者的治疗、预后判断有重要意义.

APE1 siRNA表达载体的构建及其对骨肉瘤细胞APE1表达的抑制作用

目的构建DNA损伤修复基因脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶APE1 siRNA表达载体pSilence APE1,观察其对骨肉瘤细胞HOS和9901APE1蛋白表达的抑制作用.方法设计合成APE1 siRNA cDNA序列与线性化pSilence 2.0-U6质粒连接后构建APE1 siRNA表达载体pSilence APE1,经酶切鉴定和测序确认.应用免疫组化检测骨肉瘤细胞APE1蛋白的表达,同时应用免疫印迹检测其对APE1基因的敲低作用的量效和时效关系.结果通过双酶切鉴定和测序分析,成功构建了APE1 siRNA表达载体.免疫组化和免疫印迹证实pSilence APE1对骨肉瘤细胞APE1基因具有特异性"敲低"作用,其抑制APE1基因表达效率为72%～95%,而且其抑制作用以3.0μg pSilence APE1转染第3天为显著.结论成功构建了APE1 siRNA表达载体pSilence APE1,并且该载体能有效地敲低骨肉瘤细胞APE1基因表达.

大鼠半胸照射致肺纤维化模型的病理学观察

目的观察辐射致鼠肺纤维化病变发生过程的病理特征及其规律.方法35只雄性SD大鼠分为实验组21只和对照组14只.实验组用8MV直线加速器给予大鼠右半胸20 Gy单次照射,对照组佯装照射.在照射后1、3、7、14、28、84、164 d共7个时相点,分批活杀大鼠(照射组3只,对照组2只),观察其全肺大体形态改变,取右肺中叶组织进行光镜及电镜病理组织形态观察.结果照射后1、3、7 d可见肺实质细胞的损伤,内皮细胞核损伤出现早;照射后14、28 d肺泡间隔渐加宽,并有胶原和成纤维细胞的增生;照射后84、164 d出现典型的肺纤维化病灶,肺实变区域有新生的血管内皮细胞和较多的肺泡Ⅱ型上皮细胞,肺泡腔内可见大量吞噬细胞.结论血管内皮细胞可能为辐射损伤敏感的肺实质细胞.

咖啡酸苯乙酯对大肠癌细胞β-catenin蛋白表达的影响

目的探讨咖啡酸苯乙酯(caffeic acid phenethyl ester,CAPE)对体外培养的人大肠癌HCT116和SW480细胞β-catenin蛋白表达的影响.方法以大肠癌细胞株HCT116和SW480为研究对象,应用间接免疫荧光、Western blotting检测2.5、5.0、10 mg/L CAPE处理24、48 h后细胞β-catenin表达变化.结果Western blotting检测结果显示2.5、5.0、10mg/L CAPE处理HCT116和SW480细胞24、48 h后β-catenin总蛋白表达降低,呈剂量和时间依赖性,间接免疫荧光检测结果显示细胞β-catenin蛋白胞核及胞浆表达下调,细胞连接处胞膜表达上调.结论CAPE能明显下调β-catenin蛋白表达并阻止其核转位,这可能是其抗癌作用的重要分子机制.

PD98059对肝癌HepG2细胞Tec信号转导作用的初步研究

目的探讨MEK1抑制剂PD98059对肝癌细胞株HepG2细胞中Tec(tyrosine kinase expressed in hepatocellular carcinoma)及ERK2作用.方法免疫细胞化学方法检测Tec、ERK2在HepG2细胞中的表达;用RT-PCR和Westernblot方法检测,不同浓度PD98059处理细胞后,HepG2细胞中的Tec、ERK2 mRNA及蛋白表达.结果Tec、ERK2在HepG2细胞中呈高表达,PD98059明显影响HepG2细胞Tec、ERK2 mRNA以及蛋白表达,呈剂量依赖性,40 μmol/LPD98059细胞抑制明显.结论Tec可能是肝癌细胞内Ras/Raf/ERK信号转导途径上游的信号蛋白,与Ras/Raf/ERK信号转导通路存在着某种信号联系.

大肠癌Ref-1/APE的表达特点及其意义

目的探讨大肠癌氧化还原因子-1(redox factor-1,Ref-1),又称脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶(apurinic/apyrimidinic endonuclease,APE),在大肠癌的表达特点及其与血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和血管密度的关系.方法应用免疫组化S-P法检测110例大肠癌和40例非癌区大肠组织中Ref-1/APE和VEGF的表达,采用血管内皮特异标记物CD31标记并计数肿瘤微血管密度(microvessel density,MVD),后分析Ref-1/APE与VEGF和MVD的关系.结果所有大肠癌和非癌区大肠组织都有Ref-1/APE表达,但是其在细胞内的定位有所不同.40例非癌区大肠组织细胞核都有Ref-1/APE表达,仅5例有胞质表达(5/40,12.5%);而110例大肠癌中有79例(79/110,71.81%)细胞质有Ref-1/APE表达,比例显著高于非癌区大肠组织(P＜0.01).而且细胞质Ref-1/APE阳性表达的大肠癌较无细胞质表达者VEGF阳性率显著增加(P＜0.05),MVD也显著增高(P＜0.05).结论大肠癌Ref-1/APE移位于细胞质的异常表达可能涉及大肠癌的发生,并且可能与VEGF表达和肿瘤血管生成有关.

EGFR抑制剂吉非替尼对肝癌细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)抑制剂吉非替尼对人肝癌细胞株SMMC-7721增殖和凋亡的影响,为原发性肝癌的分子靶向治疗提供实验依据.方法应用免疫组化法检测SMMC-7721细胞中EGFR的表达,不同浓度吉非替尼处理SMMC-7721细胞48 h后,MTT法检测细胞对该药物敏感性,流式细胞仪检测细胞凋亡变化.结果SMMC-7721细胞中EGFR呈强阳性表达,吉非替尼明显下调EGFR表达,抑制SMMC-7721细胞生长,呈剂量时间依赖性,8 mmol/L吉非替尼组细胞凋亡率为(58.58±2.95)%,显著高于对照组(0.11±0.04)%,(P＜0.01).结论吉非替尼能够通过诱导细胞凋亡抑制SMMC-7721细胞生长,因而有望为肝癌的分子靶向治疗提供新的有效途径.

Tec激酶区作用蛋白RAI16的筛选和结构功能分析

目的筛选与Tec激酶结构域相互作用的蛋白分子,并获得其蛋白质结构及功能信息.方法通过酵母双杂交技术筛选作用蛋白,利用相应的计算机软件及数据库,对筛库所得蛋白进行生物信息学分析.结果筛选得到1种Tec激酶区作用蛋白RAI16,其cDNA序列由2 863个核苷酸组成,编码759 aa蛋白质,具有多个功能基序,其中包括3个酪氨酸磷酸化位点.结论推测RAI16蛋白与细胞分化有关,很可能在肝癌细胞的诱导分化信号转导转录中与Tec协同发挥重要作用.

视黄酸依赖Fas/RARα融合基因诱导MCF-7细胞凋亡的分子机制研究

目的探讨视黄酸协同融合基因Fas/RARα诱导MCF-7细胞凋亡效应及其分子机制.方法以流式细胞仪、DNA梯形带检测MCF-7细胞凋亡效应,经RT-PCR和蛋白免疫印迹等方法观测视黄酸处理后caspase-8、bcl-2及bax基因表达变化.结果一定剂量视黄酸可诱导转染Fas/RARα融合基因的MCF-7细胞凋亡,caspase-8和bax基因表达上调,而bcl-2基因表达下降.结论视黄酸及其依赖的融合基因表达可联合诱导MCF-7细胞凋亡,caspases和bcl-2家族成员表达变化可能是其作用的主要分子机制.