第三军医大学学报杂志
Journal of third military medical university 제삼군의대학학보
- 主管单位： 第三军医大学
- 主办单位： 第三军医大学
- 影响因子： 1.01
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1000-5404
- 国内刊号： 50-1126/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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真核表达载体pEGFP-N2/AT2R的构建及其在原代血管平滑肌细胞的表达
目的 体外构建携带血管紧张素Ⅱ2型受体(ANG Ⅱ Type 2 Receptor,AT2R)基因的增强型绿色荧光蛋白真核表达载体,并观察其在大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)中的表达.方法 以pUHD-10.3/AT2R质粒为模板,PCR扩增AT2R基因的全长cDNA序列,再将其克隆人载体pEGFP-N2,构建其真核表达载体pEGFP-N2/AT2R.以基因转染技术,将AT2R导入原代VSMCs.倒置荧光显微镜观测转染后VSMCs生长变化及AT2R在其中的表达等情况.图像分析技术检测AT2R在VSMCs中的转染效率.Western blot检测转染AT2R基因的VSMCs表达其编码蛋白.RT-PCR法对AT2R基因修饰的VSMCs进行鉴定.结果 成功构建AT2R基因的真核表达载体pEGFP-N2/AT2R,该真核载体能携带AT2R基因转染并有效表达于VSMCs,其转染效率约40%,RT-PCR及Western blot均可检测到AT2RmRNA及蛋白在血管平滑肌细胞中高表达.结论 成功地将克隆到的AT2R基因克隆入pEGFP-N2载体中,并实现了AT2R基因在原代VSMCs的表达.
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法尼酯X受体上调载脂蛋白F在肝细胞中的表达
目的 研究法尼酯X受体(farnesoid X receptor,FXR)的激活在肝细胞中对载脂蛋白F(apolipoprotein F,ApoF)基因表达的影响.方法 应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法和Western blot检测不同浓度鹅脱氧胆酸(chenodeoxy cholic acid,CDCA,0、25、50、100 μmol/L)和人工合成FXR配体GW4064(0、0.02、0.2、2μmol/L)处理后HepG2和L02细胞中的小分子异二聚体伴侣(small heterodimer partner,SHP)及ApoF的mRNA和蛋白水平变化.结果 结果①经FXR天然配体CDCA处理24 h后,不同浓度处理组细胞SHP mRNA水平、ApoF mRNA和蛋白水平均显著高于未处理组(P<0.05).②经FXR人工合成配体GW4064处理24 h后,不同浓度处理组细胞SHP mRNA水平、ApoF mRNA 和蛋白水平均显著高于未处理组(P<0.05).结论 肝细胞株HepG2和L02经FXR配体CDCA或GW4064处理后,FXR 被激活,并上调ApoF的mRNA和蛋白水平.
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老年结核性胸膜炎的内科胸腔镜表型分析
目的 探讨老年结核性胸膜炎内科胸腔镜下表型的特征.方法 回顾性分析2006年10月至2010年1月,在本院结核科病房通过内科胸腔镜确诊的老年结核性胸膜炎24例(≥60岁)和非老年结核性胸膜炎52例(<60岁)的临床资料和胸腔镜下表现特征.结果 两组结核性胸膜炎患者均有胸膜粟粒或结节样改变,伴有或不伴有黏连.老年组胸膜呈弥漫粟粒样改变或多发白色结节改变(66.67%)显著低于非老年组(90.38%,P<0.05).两组发生胸膜黏连的概率无显著性差异(P>0.05).结论 老年结核性胸膜炎胸膜上粟粒或结节分布减少,闭式胸膜活检的意义有限,对于老年不明原因胸腔积液患者,建议尽早行胸腔镜检查.
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单核细胞趋化蛋白-1在恶性骨肿瘤中高表达
目的 探讨单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)在人转移性骨肿瘤、恶性原发性骨肿瘤、良性骨肿瘤组织中差异性表达及其意义.方法 2008年12月至2010年9月期间,收集转移性骨肿瘤15例、原发性恶性骨肿瘤15例、良性骨肿瘤15例,总共45例骨肿瘤标本.半定量RT-PCR检测各组MCP-1 mRNA的表达水平.应用免疫组织化学S-P法检测MCP-1蛋白的表达水平、Image-Pro Plus(IPP)分析标本中阳性细胞的累积光密度值和阳性表达面积.结果 转移性骨肿瘤组MCP-1 mRNA相对表达量(0.862±0.042)高于恶性原发组(0.612±0.051)和良性组(0.171±0.021)(P<0.05).转移性骨肿瘤组织中MCP-1免疫组化累积光密度(4 532.12±190.02)和阳性面积[(513.32±89.08)μm2]均高于原发性恶性骨肿瘤组[(2 592.11±120.21)、(308.34±79.33)μm2]和良性骨肿瘤组[(551.22±79.12)、(115.91±32.68)μm2],且其在原发恶性组中的表达水平也高于良性组(P<0.05).结论 MCP-1在恶性骨肿瘤中高表达,在转移性骨肿瘤表达更显著.
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水面舰艇军人自我意识、心理应激水平和作业疲劳的关系
目的 研究水面舰艇军人自我意识(自我接纳和自我概念)、心理应激水平和作业疲劳的关系.方法 采用自我接纳问卷(Self Acceptance Questionnaire,SAQ)、Wallance自我概念量表(Wallance Self Concept Scale,WSCS)、心理应激自评问卷(Psychological Stress Self-evaluation Test,PSET)、心理卫生自评量表(Symptom Checklist,SCL-90)和作业疲劳症状自评量表(Newly Developed Questionnaire for Work Related Fatigue Feelings,WRFFQ),对舰艇部队1 451名军人进行整群抽样调查.结果 ①军人自觉疲劳症状严重者占10.4%,干部、士官和士兵三者间无显著差异(P>0.05).作业疲劳低分组在自我接纳和自我概念得分均显著高于高分组,而PSET和SCL-90得分显著低于高分组(P<0.01);②作业疲劳总分与自我接纳、自我概念、PSET和SCL-90的相关系数r分别为-0.30、-0.23、0.58和0.74(P<0.01);③SCL-90总均分和PSET能较好地预测作业疲劳,解释率达60.3%.SCL-90 和 PSET直接正性影响作业疲劳,且SCL-90还可通过影响PSET 间接正性影响疲劳.自我意识通过影响SCL-90和PSET间接对疲劳产生负性影响.结论 水面舰艇军人作业疲劳与自我接纳、自我概念、心理健康水平和抗应激能力密切相关.
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奥卡西平口服混悬液对特发性癫痫患儿免疫功能的影响
目的 观察奥卡西平口服混悬液单药治疗对特发性癫痫患儿细胞免疫及体液免疫功能的影响.方法 采用定期门诊随访,用药前、用药后3个月、6个月分别采集25例特发性癫痫患儿(癫痫组)及21例健康体检儿童(正常对照组)空腹静脉血以全自动生化分析仪采用免疫比浊法检测血清免疫球蛋白IgG、IgA、IgM及流式细胞分析仪检测CD3、CD4、CD8及ICAM-I.结果 癫痫患儿用药前IgA [(0.75±0.42)g/L]、IgG[(7.74±2.65)g/L],ICAM-1(38.07±12.87)、CD8(19.61±5.52)含量升高,CD3(40.27±9.66)、CD4(20.63±8.97)下降,与正常对照组比较差异有显著性(P<0.05),而IgM[(1.10±0.50)g/L]与正常对照组比较差异无显著性(P>0.05);用药3个月后IgA[(0.29±0.18)g/L]、IgG[(6.66±1.84)g/L]、CD8(16.27±6.53)下降,CD3(50.55±13.35)升高,与用药前比较差异有显著性(P<0.05),与正常对照组比较差异无显著性(P>0.05);用药6个月后IgA [(0.25±0.13)g/L]、IgG[(6.07±1.46)g/L]、CD8(14.22±4.76)、ICAM-1(29.83±10.84)下降,CD4(26.58±9.76)升高,与用药前比较差异有显著性(P<0.05),与正常对照组比较差异无显著性(P>0.05);IgM与正常对照组及用药前比较差异均无显著性(P>0.05).用药3个月与6个月各指标比较差异无显著性(P>0.05).结论 特发性癫痫患儿用药前即存在细胞免疫及体液免疫功能的紊乱,奥卡西平口服混悬液在控制癫痫发作的同时,可改善癫痫患儿的免疫状态.
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结核患者抗原特异性CD8+记忆T细胞的检测分析
目的 研究活动期肺结核患者和潜伏感染者CD8+记忆T细胞的产生及分布特性.方法 24例活动性肺结核患者均为确诊的住院患者,22例潜伏感染者经ELISPOT检查确定.取外周血分离获取外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),以结核分枝杆菌抗原ESAT-6刺激,通过CD8、CD107a、CCR7、CD45RA抗体共染色,采用流式细胞术分析.结果 建立了基于CD107a为分子标识的结核抗原特异性CD8+T细胞检测方法.对24例活动性肺结核患者及22例潜伏感染者对比分析发现,与潜伏感染者相比,肺结核患者CD45RA阳性CD8+记忆T细胞TEMRA亚群比例显著增加[(59.94±3.87)% vs(46.65±2.88)%,P=0.02031,CD8+效应记忆T细胞TEN亚群分布频率显著降低[(38.14±3.87)% vs(52.34±2.95)%,P=0.0142].结论 肺结核患者与潜伏感染者抗原特异性CD8+ 记忆T淋巴细胞亚群的比例存在明显差异,可能与体内抗原刺激的程度及特异细胞免疫应答反应相关.
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甲状腺素对兔心房和肺静脉神经和组织重构的影响
目的 研究酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)和生长相关蛋白-43(growth associated protein-43,GAP-43)在心房和肺静脉中的表达,从而探讨甲状腺素对心房和肺静脉组织及神经重构的影响.方法 新西兰大白兔20只,采用完全随机分组法分为实验组和对照组,每组10只.实验组腹腔注射左旋甲状腺素[levothyroxine,L-Thy50 μg/(kg·d)x28 d]建立甲亢动物模型.分别于实验第0、7、14、21、28天测定兔心率、体质量、体温,耳缘静脉采血,用放免法测TT3、TT4.于实验第28天收集心房后壁和肺静脉组织,光镜下观察心房、肺静脉形态结构,测定心肌细胞直径,Van Gieson(VG)染色测定胶原容积分数(CVF),免疫组化半定量检测GAP-43在左、右心房及肺静脉中的表达,RT-PCR半定量检测TH、GAP-43 mRNA在左、右心房和肺静脉中的表达.结果 实验组与对照组相比,心房肌细胞直径增加[左心房(9.58±0.57)vs(4.79±0.31)mm;右心房(8.19±0.65)vs(4.67±0.29)mm,P<0.01]、心肌胶原容积分数升高[左心房(6.71±0.11)vs(0.36±0.06);肺静脉(4.29±0.12)vs(0.19±0.01);右心房(4.62±0.40)vs(0.30±0.12),P<0.01];实验组左、右心房及肺静脉GAP-43阳性表达较对照组明显增加(P<0.01);实验组左、右心房及肺静脉GAP43mRNA和TH mRNA表达较对照组增加(P<0.01).结论 L-Thy可诱导心肌细胞结构改变、心肌间质纤维化以及心房和肺静脉交感神经增生.
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重组工程菌pET32a-CR1-SCR15-18/BL21(DE3)高密度发酵工艺研究
目的 建立重组工程菌pET32a-CR1-SCR15-18/BL21(DE3)的高密度发酵工艺.方法 以摇瓶发酵结果为基础,扩大至发酵罐发酵,对影响工程菌生长及目的 蛋白表达的因素如发酵培养基、培养温度、pH值、活化时间、诱导时间及分批补加营养物质等条件进行优化.结果 采用改良M9-CA培养基、37℃活化4h后以0.2 mmol/L IPTG诱导表达4h,以甘油为碳源,在生长期和诱导期分别以40 ml/h和70 ml/h的速率连续流加补料,全程滴加氨水保持培养基pH值保持在7.5,调节转速控制溶解氧在40%左右.终菌体产量提高至40 g/L以上,CRl-SCR15-18蛋白表达率达28%以上.结论 高密度发酵工艺显著提高了工程菌的产量和CRl-SCR15-18蛋白的表达水平.
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2479例膝关节镜手术患者关节软骨损伤的流行病学分布特征
目的 调查分析膝关节软骨损伤的临床流行病学特征.方法 收集2005年10月至2009年12月本中心2 479例膝关节镜手术患者视频及病历资料,分析不同程度关节软骨损伤的病例构成比、性别比、平均年龄与分布、发生部位与数量及常见与高发疾病的分布.结果 关节软骨损伤者占55.1%,与无软骨损伤者比较,性别构成差异无统计学意义(P>0.05),年龄(41.31±15.88)岁,30～59岁为高发年龄段;右膝多于左膝(P<0.05),好发部位为股骨滑车、胫骨外侧平台、髌骨;其常见疾病为半月板损伤、交叉韧带损伤、原发性OA,高发疾病为关节结核、类风湿性关节炎、关节僵直和粘连、髌骨轨迹异常.关节软骨损伤病例中Ⅰ～Ⅳ级者分别占27.45%、29.94%、14.71%、27.89%,各级别损伤者的性别比、平均年龄与分布、损伤部位与数量均存在统计学差异(P<0.05).结论 膝关节软骨损伤十分常见,患者年龄分布范围大,中青年为主要人群,性别构成比相近.不同程度、不同疾病关节软骨损伤病例性别构成比不同,不同程度软骨损伤病例年龄分布特征不同.
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纤维粘连蛋白EDA片段调控结肠癌SW480细胞的增殖、凋亡
目的 研究纤维粘连蛋白EDA片段对结肠癌SW480细胞增殖、凋亡的影响.方法 慢病毒感染结肠癌SW480细胞干扰纤维粘连蛋白EDA片段表达,建立纤维粘连蛋白EDA片段低表达的SW480细胞.利用MTT检测于扰前后细胞增殖的变化,并采用流式细胞术检测干扰前后细胞凋亡的变化.同时使用Western blot分别检测干扰前后凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的表达变化.结果 慢病毒感染结肠癌SW480细胞后,纤维粘连蛋白EDA片段持续低表达.MTT法结果显示,干扰纤维粘连蛋白EDA片段24、48、72、96 h后细胞生长速度明显降低.转染组与未转染组及空载体组比较,差异均有统计学意义(P<0.05).流式细胞术显示未转染组、空载体组及转染组的细胞凋亡率分别为(3.09±1.13)%、(3.71±0.42)%、(47.76±1.51)%,差异有统计学意义(P<0.05).Western blot的结果显示干扰纤维粘连蛋白EDA片段后促凋亡因子Bax表达上调,同时,凋亡抑制因子Bcl-2表达降低.结论 纤维粘连蛋白EDA片段对结肠癌SW480细胞具有促增殖、抗凋亡作用.
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载脂蛋白E基因多态性与星形胶质细胞损伤后兴奋性氨基酸变化的关系
目的 探讨载脂蛋白E(apolipoprotein E,蛋白:ApoE,基因:APOE)基因多态性与星形胶质细胞损伤后兴奋性氨基酸(excitatory amino acids,EAAs)变化的关系.方法 提取APOE敲除鼠新生2d内乳鼠大脑皮层星形胶质细胞,并以GFAP-FITC免疫荧光法对所获细胞进行鉴定.脂质体介导重组体pEGFP-N1-APOEε2、pEGFP-N1-APOEε3、pEGFP-N1-APOEε4分别转染入星形胶质细胞中,RT-PCR鉴定该基因在转染后的细胞中的表达,荧光显微镜观察该基因的亚细胞定位及转染效率.制备3种基因型星形胶质细胞划伤模型,采用氨基酸分析仪分别测其中氨基酸的含量,流式细胞仪检测细胞凋亡.结果 星形胶质细胞划伤后谷氨酸(Glu)和天冬氨酸(Asp)的释放较早,在划伤后30 min即达到高峰,在伤后30、60 min APOEε4型显著高于APOEε2、APOEe3型(P<0.05).细胞早期凋亡率在24 h达到高峰,在伤后12、24 hAPOEε4型显著高于APOEε2、APOEε3型(P<0.05).结论 APOE以亚型特异性的方式影响星形胶质细胞创伤后EAAs的释放,APOEε4携带体可能通过EAAs毒性作用导致创伤性脑损伤急性期伤情加重及不良预后.
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妊娠期大鼠胎盘组织中Rho/ROCK蛋白动态变化特点
目的 研究Rho亚家族蛋白(RhoA、B、C)与Rho激酶即ROCK(ROCK Ⅰ、Ⅱ)在大鼠不同孕期胎盘中的表达水平及其动态变化特点.方法 正常受孕的20只雌性大鼠分为孕7、10、13、15、18 d组;各组孕鼠正常饲养,并分别于妊娠第7、10、13、15、18天剖宫取胎盘,测量胎盘湿重及胎盘直径,并记录胎盘个数;采用Western blot及免疫组化法测定胎盘组织中RhoA、B、C与ROCK Ⅰ、Ⅱ蛋白的表达水平.结果 随着孕龄增加,大鼠胎盘的质量和直径都在增加;Westernblot及免疫组化法检测结果显示,RhoA、RhoC的表达水平在孕13、15、18 d组显著高于孕7、10 d组(P<0.01),而RhoB表达水平无明显差异(P>0.05).ROCK Ⅰ、ROCK Ⅱ在孕18 d组表达显著高于孕7、10、13、15 d组(P<0.01).结论 RhoA、RhoC、ROCK Ⅰ、ROCK Ⅱ在大鼠胎盘组织中的表达呈上升趋势,而RhoB则无明显变化;Rho/ROCK信号通路在正常妊娠不同时期的大鼠胎盘组织中发挥重要作用.
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电磁辐射急性暴露对Th1/Th2细胞因子平衡的影响
目的 观察电磁辐射对Th1/Th2细胞因子平衡的影响.方法 以平均功率密度为90 mW/cm2 的微波辐照昆明小鼠(4～6周龄,体质量20～25 g,40只,均为雌性)20 min,采用RT-PCR、ELISA检测微波辐照后不同时相点干扰素(interferon-gamma,INF-γ)、白细胞介素4(interleukin4,IL-4)表达量的变化,分析微波辐照对Th1/Th2平衡的偏移.结果 90 mW/cm2 的微波急性辐照会导致INF-γ表达量的增高,辐照后第5天达到峰值,增幅为135.5%(P<0.01);90 mW/cm2 的微波急性辐照使IL-4的表达有降低的趋势,但与对照组相比没有显著差异(P>0.05).结论 平均功率密度为90 mW/cm2 的微波急性辐照会导致昆明种小鼠Th1/Th2平衡向Th1方向偏移.
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脉冲电场介导AT2R基因在血管局部表达及其对血管新生内膜的影响
目的 研究脉冲电场对血管紧张素2型受体(AT2R)基因在血管局部表达的作用,探讨AT2R基因在体转染对大鼠颈动脉球囊损伤后新生内膜增生的作用.方法 大鼠颈动脉球囊损伤后,用脉冲电穿孔法介导AT2R cDNA真核表达质粒或空质粒载体在动脉局部表达,于术后3、7 d和21 d用免疫组织化学、HE染色等方法,进行AT2R在颈动脉壁中表达的变化及定量组织形态学分析.结果 免疫组织化学染色结果显示:脉冲电场介导AT2R cDNA真核表达质粒表达后,3d时可见内膜、中膜、外膜大量AT2R的棕色阳性着色,7d时可见少量棕色阳性着色,21d棕色阳性着色几乎消失,未转染组及空质粒转染组未见AT2R的棕色阳性着色,表明脉冲电穿孔能有效导人AT2R基因,并在动脉壁获得稳定表达.在21 d时,AT2R cDNA真核表达质粒组的内膜面积与中膜面积比显著低于未转染组和空质粒载体组[分别为(0.76±0.08),(1.39±0.08),(1.32±0.10),P<0.01],空质粒转染组和未转染组间无统计学差异(P>0.01).结论 脉冲电穿孔可介导AT2R基因在血管局部有效表达,AT2R在体转染可抑制球囊损伤后大鼠颈动脉平滑肌细胞增殖和新生内膜增生.
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步兵摩托化进驻4300m高原半年内习服状况评价
目的 调查步兵摩托化进驻4 300 m高原1周至半年习服状况,分析影响习服的主要因素.方法 整群抽取从海拔1400 m驻地摩托化进驻4 300 m地区1周[109人,(19.71±1.46岁]、1个月[122人,(19.63±1.29)岁]和半年[127人,(20.45±1.60)岁]的步兵为研究对象,以平原士兵为对照[358人,(19.66±1.55)岁].测量脉搏(HR)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、大摄氧量(VO2max)、血红蛋白(Hb),进行急性高原病症状评分,依据国家军用标准GJB4301-2002进行高原习服状况评价.结果 从海拔1 400 m摩托化进驻4 300 m高原士兵1周初步习服者占84.40%;1个月基本习服者占90.16%;6个月达到完全习服者占88.98%.进驻高原1周和1个月未达到初步习服(15.6%)和基本习服(9.84%)的主要因素是HR和SBP高出标准规定的水平,进人高原半年后未达到完全习服标准(11.02%)的中主原因是Hb偏高,其中2人(1.57%)发生红细胞增多症(Hb≥210 g/L).HR:初步习服和基本初习服阶段均显著高于平原对照(P<0.05),完全习服阶段显著低于初步基习服和基本初习服阶段(P<0.05).SBP:初步习服阶段与基本习服阶段显著高于平原对照(P<0.05),完全习服阶段显著低于对照、初步习服阶段与基本习服阶段(P<0.05).DBP:各习服阶段均显著高于对照(P<0.05).Hb:各习服阶段均显著高于对照(P<0.05),完全习服阶段显著高于初步习服阶段和基本习服阶段(P<0.05).VO2max:基本习服组和完全习服组显著低于对照(P<0.05).结论 由1 400 m驻地摩托化进驻4 300 m 高海拔地区士兵大多能较好地习服高原环境,在初步习服阶段应重点采取改善心血管功能的措施以提高习服水平,进驻较长时间(半年)则应着重预防高原红细胞增多症,并采取综合措施提升高原官兵健康水平.
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胃癌及癌前病变患者幽门螺杆菌的sabA基因多态性的研究
目的 对癌症和癌前病变患者幽门螺杆菌进行sabA基因遗传信息多态性的研究.方法 采用特异引物聚合酶链反应(PCR)及测序和比较基因组方法分析42株国内癌症及癌前病变患者幽门螺杆菌的sabA基因CT双核苷酸重复序列调节区多态性.结果 sabA基因调节区的阳性检测率为85%,功能性sabA基因占所有测序菌株的55%.对随机挑选的18株检测阳性菌株进行测序分析,结果显示在碱基水平及氨基酸水平存在显著的遗传多态性.对sabA基因调节区的氨基酸序列聚类分析中发现,本研究菌株与国际已经完成测序的7株幽门螺杆菌可以明显的分为两个组,即中国组与西方组.结论 sabA基因CT双核苷酸重复序列调节区在中国菌株中普遍存在,且在翻译水平有很显著的多态性.聚类分析发现含有功能性sabA基因的幽门螺杆菌菌株多态性存在明显的地域性分布差异.
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D-环丝氨酸促进大鼠条件性恐惧消退记忆的长期保持
目的 研究D-环丝氨酸(D-serine,DCS)对条件性恐惧消退记忆的长时保持的影响.方法 成年雄性SD大鼠40只,采用完全随机方法分为空白对照组、消退对照组、消退训练组、消退训练前DCS干预组、消退训练后DCS干预组,每组8只.在消退训练后3d时进行僵立行为测试与旷场行为测试.结果 ①消退训练组的僵立时间百分比[(39.77±22.69)%]显著低于消退对照组[(61.46±11.10)%](P<0.05),但仍高于空白对照组[(2.82±1.27)%](P<0.01);旷场测试中消退训练组的中央路程百分比及直立次数[(2.82±2.89)%,(7±4)]显著高于消退对照组[(0.50±0.84)%,(3士4)],但低于空白对照组[(19.29±6.08)%,(20±6)](P<0.05);②消退训练后DCS干预组的僵立时间百分比与旷场行为测试成绩与其他组比较均有统计学差异(P<0.05).结论 消退训练后给予D-环丝氨酸能够促进条件化恐惧消退记忆的长时保持.
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新型异黄酮T1对辐射引起的造血损伤的防护作用
目的 探讨新型异黄酮化合物(T1)对雄性SD大鼠由辐射引起的造血系统损伤的防护作用.方法 将60只SD大鼠分为正常对照组、辐射组、T1预防组和T1治疗组,每组15只.4.5 Gy60 Coγ射线一次性全身照射大鼠(正常对照组除外),T1预防组和T1治疗组大鼠分别在照射前和照射后按剂量为10 mg/kg腹腔注射T1溶液,辐射组在受照后不给予任何处理.动态观察各组大鼠受照前后体质量和外周血WBC 4周内的变化,比较照后1周和4周各组骨髓的病理学变化,并利用比色法测量照后1周各组肝脏组织抗氧化酶的活性.结果 受照大鼠的体质量与正常对照组相比,体质量明显减轻(P<0.05);在照后第1、4、5天,T1预防组和T1治疗组的WBC明显高于辐射组(P<0.05),在T1预防组和T1治疗组间差异不明显,从第6天开始,WBC进人恢复期,除正常对照组外,各组WBC无明显差异(P>0.05);受照后1周,辐射组骨髓造血细胞明显减少伴脂肪组织显著增生,T1预防组和T1治疗组损伤相对较轻;在T1预防组,肝脏匀浆CAT、GSH-Px活力较辐射组明显升高,MDA水平明显降低(4.06±0.19vs5.61±0.46,P<0.05).结论 T1可以减缓照后WBC的下降速度,使WBC的回升时间提前,并对辐射造成的骨髓损伤具有一定的防护作用,其机制可能与消除体内过量有害自由基有关.
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模拟急进高原环境下小型猪创伤性脑出血模型的建立
目的 建立模拟急进高原环境下的实验用小型猪创伤性脑出血的动物模型.方法 按随机数字表法将29只小型猪分为高原注血组(n=11)、高原假手术组(n=4)、平原注血组(n=11)和平原假手术组(n=3).用动物低压氧舱模拟高原环境,采用二次法缓慢注射3 ml自体动脉血于右侧基底节区建立脑出血模型,立即行头颅CT扫描,分别于注血后各时相点(2、24、72、168 h)连续监测动脉血血气、动物行为学,168 h后行脑组织大体切片并计算血肿体积,行HE、Nissl 染色,了解模型建立的稳定性及可重复性.结果 CT扫描、脑组织大体切片均显示脑内血肿形成,168 h后血肿体积明显减小(P<0.01),但高、平原两组血肿体积差异无统计学意义(P>0.05).致伤后,在各时相点,高原注血组神经功能得分均大于平原注血组(P<0.01),且平、高原两注血组的主要血气参数值差异也均有统计学意义(P<0.01).高原组的神经元细胞核、尼氏体的损伤及缺血改变重于平原组.结论 本实验制备的高原创伤性脑出血模型能产生稳定的的血肿体积、明显的神经功能缺损,可操作性强、可重复性好.
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颈动脉内中膜厚度及尿微量白蛋白在多动脉粥样硬化患者心血管危险评估中的作用
目的 探讨颈动脉内中膜厚度(carotid intima-media thickness,CIMT)及尿微量白蛋白(microalbuminuria,MA)与动脉粥样硬化患者的病情程度及心血管事件发生率之间的关系.方法 选择发生在多个区域中,动脉狭窄≥50%,已施行血运重建操作的患者149例为试验组;同时选择40例动脉粥样硬化性狭窄<50%的患者作为对照,分别测定IMT和MA.结果 CIMT≥1.38 mm时,对≥3个区域动脉狭窄的敏感性和特异性分别为90.0%和82.6%.MA≥6.85 mg/dl时,对≥2个区域动脉狭窄的敏感性和特异性分别为54.9%和83.3%.试验组发生心血管事件104例.CIMT第1、2、3、4四分位数Kaplan-Meier两年无心血管事件存活率分别为93.9%、95.7%、73.9%和59.6%;MA第1、2、3、4四分位数Kaplan-Meier两年无心血管事件存活率分别为95.7%、89.6%、72.3%和66.0%.独立的心血管不良事件预测因子在多变量Cox比例风险模型中为:CIMT≥1.38 mm,RR=1.83;CI=1.049～3.196(P<0.001),MA≥6.85 mg/dl,RR=0.99;CI=0.576～1.703(P<0.001).把CIMT引入模型分层显著提高了心血管事件危险的预测(chi2=7.098,P<0.01),把MA引人模型分层对心血管事件危险预测影响不显著(chi2=0.002,P<0.01).结论 经过血运重建操作的患者,测量颈动脉内中膜厚度对未来心血管危险分层有重要且独立的贡献,CIMT≥1.38 mm与1.8倍有害心血管事件有关,而尿MA≥6.85 mg/dl与近1倍有害心血管事件有关.
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高血糖合并形觉剥夺性近视/弱视小鼠模型的建立
目的 探讨高血糖合并形觉剥夺性近视/弱视小鼠模型的制备方法.方法 选取1周龄的BALB/cJ小鼠30只,通过查随机数字表分为3组,每组10只:正常对照组、诱发高血糖组、诱发高血糖联合形觉剥夺性近视/弱视组.右眼睑缝和建立形觉剥夺性近视/弱视,腹腔多次小剂量注射链脲菌素(STZ)诱发高血糖.结果 成功建立形觉剥夺性近视/弱视与高血糖小鼠模型;与对照组相比,诱发高血糖小鼠的血糖[高血糖组(20.66±3.51)mmol/L,高血糖合并形觉剥夺性近视/弱视组(21.05±5.91)mmol/L]、体质量均显著改变[对照组(26.90±4.38)g,高血糖组(18.02±3.90)g,高血糖合并形觉剥夺性近视/弱视组(15.87±5.61)g;P<0.01].缝合眼睑小鼠右眼眼轴长度、屈光度[(3.348+0.018)mm,(9.05±1.42)D]与对照组[(3.310±0.041)mm,(11.80±2.24)D]相比,差异有统计学意义(P<0.01).结论 缝合眼睑联合STZ小剂量多次腹腔注射是一种可靠的制备高血糖合并形觉剥夺性近视/弱视小鼠模型的方法.
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非基因组活性对雌激素受体阳性乳腺癌细胞Herceptin敏感性的影响
目的 探讨雌激素(estrogen,E2)通过雌激素受体(estrogen receptor,ER)非基因组活性干扰ER阳性(ER+)乳腺癌细胞对人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2,HE R2)的人源化单克隆抗体赫赛汀(Herceptin)的敏感性及其机制.方法 采用Western blot和瞬时转染结合荧光素酶报告基因分析,确定BT-474乳腺癌细胞(ER+/HER2+)和SKBR-3 乳腺癌细胞(ER-/HER2+)作为对比研究对象;在E2存在与否的情况下,采用细胞增殖分析比较Heregulin(HRG)诱导的BT-474和SKBR-3细胞对Herceptin敏感性的改变;采用Western blot检测HER2途径下游关键分子MAPK的磷酸化水平.结果 在没有E2存在的情况下,Herceptin可有效抑制BT-474和SKBR-3细胞的增殖(P<0.01);在E2存在的情况下,Herceptin对BT-474细胞增殖的抑制效应消失(P<0.01),同时,Herceptin不能降低MAPK的磷酸化;这些现象在SKBR-3乳腺癌细胞中却不会出现.结论 E2可通过ER非基因组活性影响ER+ 的乳腺癌细胞Herceptin的治疗效果,并可能参与了Herceptin抵抗的发生.
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法尼醋X受体上调肝细胞中成纤维细胞生长因子21的表达
目的 研究法尼酯X受体(farnesoid X receptor,FXR)对成纤维细胞生长因子21(fibroblast growth factor,FGF21)表达的影响.方法 用FXR特异性激动剂终浓度为0、50、100 μmol/L的CDCA和0、1、5μmol/L的GW4064分别处理人肝癌细胞株HepG2和人胚胎肝细胞L02细胞后,用逆转录-聚合酶链法(RT-PCR)检测FXR特异性靶基因小异源二聚体配体(small heterodimer parterner,SHP)和FGF21 mRNA的表达变化,再用Western blot法检测FGF21蛋白表达水平的变化.结果 用FXR特异性激动剂CDCA和GW4064刺激后,分别比较HepG2和L02细胞SHP与(β-actin mRNART-PCR产物光密度比值,比值均明显增高(P<0.05),反应HepG2和L02细胞内SHP mRNA水平均明显升高,表明FXR在2种细胞中被激活;分别比较HepG2和L02细胞FGF21与β-actin RT-PCR产物光密度比值以及FGF21与β-actin蛋白光密度比值,比值均明显升高(P<0.05),表明FGF21 mRNA和蛋白水平均明显升高.结论 激活的FXR可以上调FGF21的表达.
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骨髓来源细胞参与肝脏损伤的修复
目的 探讨小鼠骨髓来源干细胞(bone marrow stem cells,BMSCs)在体内分化为肝细胞的可行性及BMSCs是否参与肝功能受损的修复.方法 30只雌性C57BL/6小鼠全身一次性接受10 Gy 60Co射线照射后,立即接受同品系雄性小鼠骨髓干细胞移植.移植后21 d后以CCl4 致骨髓嵌合小鼠肝功能受损,并于CCl4 致伤后第2、3、4、7、14、21、28天取骨髓嵌合小鼠肝脏,冰冻切片行Y染色体FISH和白蛋白(albumin,ALB)免疫荧光双标染色法,检测BMSC阳性细胞在受体小鼠肝内的分化情况,ELISA法检测肝脏基质细胞衍生因子-1(stromal cell-derived factorl,SDF-1)及其趋化因子受体(CXCR4)、肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)、干细胞因子(stem cell factor,SCF)的表达.结果 伤后2、3、4、7、14、21、28 d骨髓嵌合小鼠肝内皆可见FISH和ALB共表达的双阳性细胞,计数Y染色体FISH与ALB双阳性的细胞数量为3.763%～5.578%.ELISA法检测相关干细胞因子发现,在肝损伤后同一批次各时相点肝脏组织匀浆标本中SDF-1、CXCR-4、SCF、HGF 4种因子均呈现增高趋势,并在肝损伤第21天达到高峰表现,与其他时相点相比显著增加(P<0.05),同FISH与ALB荧光双标记共表达计数结果一致.结论 BMSCs 可通过直接分化为肝细胞及分泌相关细胞因子间接促进受体肝脏干细胞增殖参与受损肝脏的修复.
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真性球麻痹性吞咽困难1例
真性球麻痹性吞咽困难临床罕见,治愈更少见[1].我科收治1例真性球麻痹性吞咽困难患者,采用药物静滴、吞咽训练、球囊扩张、针刺等方法综合治疗,疗效较好,现报告如下.
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双子宫妊娠侧子宫脱垂伴宫颈感染嵌顿1例
妊娠晚期子宫脱垂临床少见,并发感染致宫颈嵌顿者更少见,现将新桥医院成功诊治的1例双子宫妊娠侧子宫脱垂伴宫颈感染嵌顿病例报告如下.
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以三叉神经痛为首发症状的POEMS综合征1例
POEMS综合征是临床上一种比较罕见的多系统损害的疾病,该综合征的主要特征有:多发性神经病变(polyneuropathy,P)、脏器肿大(organomegaly,O)、内分泌系统的病变(endocrinopathy, E)、 M-蛋白(M-protein, M)及皮肤改变(skin changes,S),取五大征的英文首字母,命名POEMS综合征[1].几乎所有POEMS患者病程中都有多发性周围神经损害,且多以周围神经病变为首发症状就诊,但一般情况下颅神经较少受累.而以颅神经损害为首发症状的病例更是罕见.我们现报告1例以三叉神经痛为首发症状的POEMS综合征患者.
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成人鼻腔鼻窦横纹肌肉瘤1例
鼻腔鼻窦横纹肌肉瘤(rhabdomyosarcoma, RMS)比较少见,而发生于成人者则更为罕见.RMS恶性程度高,预后差,正确的诊断和恰当的治疗对提高患者生成率十分关键.RMS不具有特异性症状和体征,临床上诊断比较困难[1].影像学检查,如CT和MRI,能准确显示病变的位置及其侵犯的范围,对于鼻腔鼻窦RMS的诊断具有较大价值.本院收治1例成人鼻腔鼻窦RMS,结合文献进行分析,报告如下.
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hsa-mir-520真核表达载体的构建及对E-钙粘蛋白表达的影响
目的 构建hsa-mir-520真核表达载体,并转染大肠癌细胞SW-480细胞,检测细胞中E-钙粘蛋白表达情况.方法 依据miRBase数据库中hsa-mir-520序列,设计并合成寡核苷酸片段,构建hsa-mir-520表达载体和对照载体.采用脂质体转染方法分别将mir-520表达载体、及对照质粒转染大肠癌细胞SW-480细胞株.采用酶切、测序检测载体构建;Western blot检测E-钙粘蛋白的表达.结果 酶切和测序表明hsa-mir-520真核表达载体构建成功.Western blot结果显示与转染对照质粒和未转染的细胞相比,转染了hsa-mir-520重组质粒的细胞中E-cadherin蛋白的表达明显增加(P<0.01),密度扫描半定量分析显示E-cadherin蛋白的表达增加了大约40%.结论 成功构建了hsa-mir-520和对照的真核表达载体,hsa-mir-520质粒转染大肠癌细胞SW-480后可增加E-钙粘蛋白的表达.
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富血小板血浆复合材料对种植体周骨缺损修复的影响
目的 研究实验性种植体周骨缺损的修复效果.方法 健康新西兰大白兔24只,采用自身对照方法,在每只兔胫骨上1/3距膝关节2 cm处各植人1枚种植体,并在种植体一侧建立骨缺损区,左侧为实验组,填充PRP与nano-HA 复合物;右侧为对照组,填充nano-HA.分别于术后2、4、6周处死8只动物,通过X线片测量种植体周骨密度灰度值;组织学染色观察兔胫骨种植体周骨缺损愈合情况,并进行计算机图像分析,对新生骨面积进行测量.结果 术后2、4、6周时,骨密度分析显示实验组灰度值显著高于对照组(P<0.05);术后2、4、6周时,实验组新生骨面积显著高于对照组(P<0.05).结论 富血小板血浆复合纳米羟基磷灰石对实验性种植体周骨缺损的生长有促进作用.
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心复康口服液对压力超负荷大鼠心肌ND4表达的影响
目的 探讨心复康口服液对压力超负荷心衰大鼠心肌线粒体ND4 mRNA和蛋白表达的影响.方法 240只雄性SD大鼠采用随机数字表法分为3组:假手术组、腹主动脉缩窄模型组(模型组)、心复康口服液治疗组(治疗组).采用腹主动脉部分缩窄法制作心衰大鼠模型,RT-PCR和Western blot检测分别大鼠第4、8、12周心肌线粒体ND4 mRNA和蛋白的表达.结果 ①术后第8周,与假手术组比较,模型组大鼠ND4 mRNA和蛋白表达均显著降低(P<0.01);与模型组比较,治疗组ND4 mRNA表达升高(P<0.01),ND4蛋白表达也升高(P<0.05).②术后第12周,与8周时比较,模型组大鼠ND4 mRNA含量降低(P<0.05),ND4蛋白显著降低(P<0.01);与同期模型组比较,治疗组ND4 mRNA和蛋白表达均显著升高(P<0.01),较8周时也均显著升高(P<0.01).结论 心复康口服液可上调压力超负荷心衰大鼠心肌线粒体ND4 mRNA的表达,提高心肌细胞ND4蛋白含量,改善心肌能量生成障碍.
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AR、MMP-10和Bcl-2在非小细胞肺癌中的表达
目的 探讨AR,MMP-10和Bcl-2在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及临床意义.方法 用免疫组织化学S-P法检测AR、MMP-10和Bcl-2在65例非小细胞肺癌及癌旁正常组织中的表达,并分析与临床病理特征的关系.结果 AR、MMP-10和Bcl-2 在肺癌中的阳性表达率分别是29.2%、70.8%、55.4%,显著高于癌旁正常肺组织(P<0.05).AR 的表达与临床分期和淋巴结转移有统计学意义(P<0.05),MMP-10的表达与分化程度、临床分期、淋巴结转移有关(P<0.05),Bcl-2在鳞癌中的表达显著高于腺癌(P<0.05).结论 AR的阳性表达可能与淋巴结转移和进展相关,与MMP-10联合检测更能提示患者的预后.
