第三军医大学学报杂志
Journal of third military medical university 제삼군의대학학보
- 主管单位： 第三军医大学
- 主办单位： 第三军医大学
- 影响因子： 1.01
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1000-5404
- 国内刊号： 50-1126/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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不同剂量环磷酰胺对裸鼠A549细胞移植瘤凋亡的影响
目的 探讨小剂量环磷酰胺对裸鼠肺腺癌移植瘤凋亡的影响.方法 建立裸鼠人肺腺癌移植瘤模型,不同剂量环磷酰胺干预,测定抑瘤效果和副作用,免疫组化检测NF-κB P65表达,电镜、TUNEL检测肿瘤细胞凋亡情况.结果 小剂量组经环磷酰胺处理后肿瘤体积与大剂量组和对照组相比明显减小;电镜下出现典型凋亡小体,凋亡指数明显增高(P＜0.05)而P65蛋白表达比对照组显著减少(P＜0.05).结论 小剂量环磷酰胺能抑制肺癌移植瘤增长,诱导肿瘤细胞凋亡,可能与下调NF-κB信号传导途径有关.
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NHE-1特异性抑制剂DMA逆转HL-60/ADM细胞多药耐药的实验研究
目的 探讨钠/氢交换器-1(Na+/H+ exchanger-1, NHE-1)特异性抑制剂二甲基氨氯吡咪(dimethyl amiloride, DMA)是否能在体外逆转耐药细胞株HL-60/ADM的多药耐药及其可能机制.方法 以阿霉素诱导产生多药耐药(multidrug resistance, MDR)的HL-60/ADM细胞株为研究对象,用MTT法检测化疗药物敏感性,流式细胞仪检测细胞内柔红霉素积累量,RT-PCR法检测mrp、bcl-2、bax mRNA表达,免疫细胞化学法检测细胞膜多药耐药相关蛋白(MRP)表达,TUNEL法检测原位细胞凋亡.结果 与50 μmol/L DMA共同培养24 h后,HL-60/ADM细胞对ADM、MIT、VCR、HAR 4种化疗药物的IC50值分别由(839.5±45.2 )、(321.2±28.9)、(70.5±15.5)、(65.2±20.7)ng/ml降低至(180.5±38.9)、(76.4±12.0)、(30.2±7.5)、(31.7±7.2)ng/ml;分别与50、100 μmol/L DMA共培养24 h后,HL-60/ADM细胞内DNR积累量荧光强度由作用前的33.56升高到48.74和70.10,细胞内mrp mRNA表达量、MRP蛋白表达量及bcl-2 mRNA表达量明显降低,bax mRNA表达量明显升高;与100 μmol/L DMA共同培养24 h后,5 μg/ml ADM作用下的HL-60/ADM细胞凋亡率明显增高.结论 DMA可逆转HL-60/ADM细胞的MDR,其机制可能与下调MRP表达及促进bcl-2/bax凋亡途径有关.
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无呼吸机支持反复冷冻法建立大鼠急性心肌梗死模型
目的 探讨建立无呼吸机支持,短时间反复冷冻法制作大鼠急性心肌梗死(AMI)模型方法.方法 将60只Wistar大鼠(雄雌各半),按照总共冷冻损伤时间随机分3组:15 s组(5 s/次,共3次);25 s组(5 s/次,共5次);40 s组(5 s/次,共8次),各20只.胸骨左缘前外侧第4肋间进入胸腔充分暴露心脏,用浸入液氮之直径6 mm铜充分接触左室游离壁,持续时间5 s/次,随即闭合胸腔,待自主呼吸恢复正常后,按分组情况再次原位反复共3、5次或8次进行心肌冷冻损伤.观察术中、术后28 d内大鼠存活率及术后28 d行病理切片Masson染色计算梗死面积.结果 ①3组病理学检测均为透壁梗死,面积超过20%,心肌坏死完全且边界清楚.②15 s组存活率(16/20)较40 s组(5/20)高(P＜0.05),但其梗死面积(28.277 5±5.192 6)%较40 s组梗死面积(37.768 0±10.564 4)%小(P＜0.05).③25 s组存活率(9/20)(P＞0.05)和梗死面积(31.380 0±6.496 0)% (P＞0.05)与其他2组比较无明显差异.④40 s组梗死面积变化范围较其他2组大,且存活率较低.25 s组较15 s组操作繁琐且死亡有增多趋势.结论 无呼吸机支持、短时间、反复3次超低温冷冻左室游离壁15 s可以建立稳定的大鼠AMI模型.
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ATP对大鼠逼尿肌不稳定膀胱的作用研究
目的 初步探讨ATP对大鼠逼尿肌不稳定膀胱的作用.方法 建立雌性SD大鼠BOO DI 模型,以正常雌性逼尿肌稳定(detrusor stability, DS)大鼠作对照,制作离体膀胱并Krebs液孵育,膀胱内分别给予0.9%NaCl、ATP、PPADS液后用0.9% NaCl液以0.1 ml/min的速度灌注膀胱,同法灌注膀胱时向浴液中加入ATP以及先浴液中加入PPADS孵育膀胱10 min后再灌注膀胱,并向浴液中加入ATP,记录灌注膀胱和停止灌注后各4 min内的膀胱压力曲线,测量20 s、50 s、4 min、8 min时的膀胱压力值.结果 离体膀胱内给予NaCl、ATP、PPADS后,2组大鼠膀胱压力曲线形态和组内和组间各时间点膀胱压无显著性差别(P＞0.05).灌注时浴液中加入ATP,离体膀胱出现膀胱收缩,50 s时DS组膀胱压高于BOO DI组;先PPADS孵育膀胱后再加入ATP,膀胱收缩幅度显著降低,50 s时组间膀胱压无差别.结论 膀胱内给予或膀胱上皮细胞释放的ATP通过神经反射引起尿频和参与逼尿肌不稳定收缩,支配逼尿肌的嘌呤能神经释放的ATP可直接作用于逼尿肌引起收缩.
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去甲二氢愈创木酸宫腔灌注对大鼠胚胎的影响
目的 探讨去甲二氢愈创木酸(nordihydroguaiaretic acid, NDGA)对大鼠早期胚胎及子宫蜕膜发育的影响,为计划生育新药研究奠定基础.方法 在大鼠妊娠第1、7天(E1和E7)分别宫腔内插管灌注NDGA,观察第9天的胚胎种植数、血清孕酮值和胚胎直径及足月胎鼠的数目和体质量,检测子宫蜕膜和胎盘中内皮细胞生长因子VEGF和增殖细胞核抗原PCNA的表达,测量微血管密度(MVD).结果 E1给药后,NDGA各组灌注侧的胚胎数较对侧减少(P＜0.05),胚胎直径显著减小(P＜0.05),足月胎鼠数较对侧减少(P＜0.05);E7给药后,胚胎直径减小(P＜0.05);E1给药比在E7给药的胚胎直径减小更有显著性(P＜0.01);蜕膜和胎盘中VEGF和PCNA表达显著减少,平均光密度值显著减小(P＜0.01),MVD显著减少(P＜0.01);血清孕酮值与对照组比较无显著性差异(P＞0.05).结论 宫腔灌注NDGA对大鼠早期胚胎和蜕膜的发育有明显抑制作用,对大鼠血清孕酮值无明显影响.
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1个新的胰腺癌相关基因的筛选和初步鉴定
目的 筛选和鉴定胰腺癌相关基因.方法 提取胰腺癌和癌旁正常胰腺组织中的RNA和mRNA,应用抑制消减杂交技术(SSH)构建消减cDNA文库.采用随机数字表法挑选有插入片段的阳性克隆进行测序及同源性分析.应用RT-PCR和Northern blot检测新基因在12例胰腺癌和癌旁正常胰腺组织以及4种胰腺癌细胞株(PaTu8988、SW1990、BxPC-3、AsPC-1)中的表达情况.结果 随机挑取50个直径＞1 mm的白色克隆进行PCR扩增分析,其中47个克隆有插入片段,克隆阳性率为94%.对47个有插入片段的阳性克隆进行测序, 得到42个可用序列.同源性分析发现41个为已知基因,1个为无任何功能线索的未知基因,可能代表了新基因.RT-PCR显示新基因在12例胰腺癌组织和4种胰腺癌细胞株中均表达,而在正常胰腺组织中未见表达.Northern blot分析得到相同的结果.结论 应用SSH技术成功构建了人胰腺癌抑制消减cDNA文库,并筛选出1条新的胰腺癌相关基因.新基因与胰腺癌的发生、发展密切相关,可作为胰腺癌诊断和基因治疗的分子靶标.
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应用酵母双杂交系统筛选MRP2胞内区相互作用蛋白
目的 应用酵母双杂交技术研究与多药耐药蛋白MRP2发生相互作用的蛋白.方法 应用酵母双杂交系统,以人MRP2胞内区C末端220个氨基酸为诱饵,筛选成人肝cDNA文库,寻找能与之相互作用的蛋白.利用生物信息学分析,一对一酵母回复性杂交等提供的信息,筛除假阳性.结果 经过酵母双杂交共获得162个克隆,经过验证分析,终确定3个无重复阳性克隆.结论 获得的3个基因编码的蛋白可能揭示MRP2新的作用机制.
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食管鳞癌转移淋巴结蛋白质双向凝胶电泳图谱差异分析
目的 分析食管鳞癌转移淋巴结与正常淋巴结组织蛋白质表达差异.方法 采用双向凝胶电泳(2-DE)技术和计算机辅助的图像分析方法,对食管鳞癌转移淋巴结与正常淋巴结组织蛋白质进行分离和比较分析.结果 获得了背景清晰、分辨率和重复性较好的双向凝胶电泳图谱,比较分析显示23个蛋白点的表达量存在明显差异,其中新增蛋白点4个,缺失1个,14个蛋白点表达发生明显上调,4个蛋白点表达发生明显下调.结论 食管鳞癌转移淋巴结与正常淋巴结蛋白质表达存在明显差异,可能与食管鳞癌淋巴结转移机制有关.
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半环槽外固定器建立山羊胫骨缺损模型
目的 探索半环槽外固定器建立山羊胫骨段缺损模型.方法 山羊9只分3组,制备胫骨中下段20%的骨膜和骨缺损,半环槽外固定器外固定,术后第5、10、15周分别处死1组动物.用放射学、组织学方法评价骨缺损修复情况.结果 术后山羊胫骨段缺损处固定稳定,5、10、15周骨缺损处未见骨修复,15周时见骨断端硬化,放射学和组织学检查未见骨形成.结论 应用半环槽外固定器建立组织工程用大段骨缺损动物模型效果较好,山羊胫骨20%的骨膜和骨缺损不能自行修复.
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采用基因芯片技术筛选人小细胞肺癌SH77/CDDP多药耐药相关基因表达谱的研究
目的 获得人小细胞肺癌(SCLC)SH77/CDDP 多药耐药(MDR)相关基因表达谱,为进一步阐明顺铂(CDDP)所致SCLC MDR的机制奠定基础.方法 在成功建立CDDP诱导的人SCLC MDR细胞系SH77/CDDP的基础上,分别提取SH77/CDDP 和其亲代SH77细胞的总RNA,反转录合成双链cDNA,通过反转录合成生物素标记的cRNA探针,片段化处理后分别与Affymetrix GeneChip人类U133系列芯片(U133A、U133B,共包含3.9万个转录本,其中有3.3万个已知基因,0.6万个未知的cDNA序列表达标签) 杂交,杂交信号经扫描等处理并用生物信息学对检测结果进行分析.结果 与SH77亲代细胞相比,在SH77/CDDP细胞中有2 389个(6.13%)基因表达增高,其中增高1倍以上的有464个(1.19%),增高2倍以上的有89个(0.23%),增高3倍以上的有26个(0.07%),增高4倍以上的有7个(0.02%).其中差异显著的36个基因包括 ABCC3、HSP70、CYP26B1、CYP4A11、IGF1R、LOX2、CAP2、LRP2BP、AKNA、ELTD1等,上调幅度2.5～5.1倍,根据Gene Ontology分类和Tree View分析,这36个基因的功能主要为运输、细胞黏附、信号转导、转录和离子结合等.结论 高通量的基因芯片技术筛选出大量CDDP所致SCLC MDR相关基因,对这些耐药相关基因功能的验证有助于揭示CDDP所致人SCLC MDR的发生机制.
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气腹对肝硬化大鼠肠黏膜屏障功能的影响
目的 研究CO2气腹对肝硬化大鼠肠道黏膜屏障功能的影响.方法 采用腹腔多次注射硫代乙酰胺建立肝硬化大鼠模型,设正常对照组(A组),实验对照组(B组),8 mmHg气腹组(C组)和13 mmHg气腹组(D组),气腹作用时间2 h ,分别于气腹结束后0.5、2、6、12 h 4个时间点,测定各组及各时间点门静脉血内毒素、D-乳酸水平、回肠黏膜厚度及绒毛高度值.结果 B组与A组相比,内毒素、D-乳酸水平、回肠黏膜厚度及绒毛高度值均存在统计学意义(P＜0.05);C、D 2组各时点与B组相比各项指标均有统计学意义(P＜0.05);C组与D组相比:内毒素(P＜0.05)、黏膜厚度(P＜0.01)和绒毛高度(P＜0.01)均存在统计学意义.结论 在本实验条件下,CO2气腹加重了肝硬化大鼠已有的肠黏膜屏障障碍,且此种变化有随气腹压力增高而加大的趋势,但在解除气腹后6、12 h已有恢复趋势.
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大鼠血清中喹啉酸含量的气质联用测定
目的 建立用于测定大鼠血清中喹啉酸含量的气质联用(gas chromatography- mass spectrometry, GC-MS) 技术.方法 动物分为对照组和炎症模型组.经内眦静脉取血,对采集的血清样品进行纯化和衍生化,采用GC-MS联用技术测定喹啉酸含量,以全扫描方式定性,选择性离子监测 ( selected ion monitoring, SIM) 方式定量检测.结果 测定方法的专一性良好,检出限为50 nmol/L,喹啉酸浓度在0.05～20 μmol/L范围内线性关系良好.结论 本方法检测结果准确、干扰少,检定快速,适合需要多次少量取血的动物实验应用.喹啉酸的六氟异丙醇衍生物较为稳定,但血清不宜长时间冻存,宜尽快测定.
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不同来源茶树油抑制LPS诱导TNF-α释放的体外实验
目的 比较国产和进口茶树油(tea tree oil,TTO)对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导炎症的抑制作用.方法 四唑盐(MTT)比色实验筛选无细胞毒性作用的TTO溶液浓度;各浓度TTO水溶液按量效和时效关系预处理细胞后,测定LPS激活RAW264.7细胞分泌肿瘤坏死因子-α(tumor necrotic factor-alpha, TNF-α)的浓度,以观察国产和进口TTO水溶液对LPS诱导炎症的抑制效果.结果 浓度低于0.001%的国产和进口TTO溶液对细胞无毒性作用;0.000 125%～0.001%进口TTO和0.000 25%～0.001%国产TTO各浓度组均能非常显著地抑制LPS诱导细胞释放TNF-α;0.000 25%进口和国产TTO分别在3 h和6 h内对细胞有显著的保护作用.结论 国产和进口TTO对LPS诱导的炎症均有显著抑制效果.
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四川黑熊NADH脱氢酶亚基4基因的序列分析
目的 探讨黑熊线粒体ND4基因的序列特点.方法 根据已报道的若干物种的NADH脱氢酶亚基4基因(ND4)设计引物.运用PCR技术从四川黑熊毛囊组织的总DNA中扩增出ND4基因.并对ND4基因进行分析.结果 PCR扩增所得DNA序列长度为1 402 bp,该序列包含了ND4基因,其ORF为1 377 bp,编码459个氨基酸,编码蛋白的分子量为51.5×103,pI为9.37.四川黑熊的ND4基因序列及其所编码的氨基酸序列与美洲黑熊、马来熊、棕熊、北极熊、人、大鼠、小鼠和狗等其他哺乳动物的ND4基因序列和对应的氨基酸序列具有较高的相似性,分别为68%～91%和71%～95%.拓扑结构预测显示四川黑熊ND4基因的蛋白质上分别存在N-糖基化位点、蛋白激酶C磷酸化位点、酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点、N-酰基化位点、亮氨酸拉链以及富含亮氨酸的区域.结论 哺乳类动物的ND4基因具较高的保守性,而其所编码的蛋白在功能上具有高度的一致性.
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老化大鼠髓鞘蛋白脂蛋白表达变化及意义
目的 观察老化大鼠髓鞘蛋白PLP的改变、髓鞘结构、中枢传导功能变化及其关系.方法 采用免疫组化方法检测大鼠老化时髓鞘蛋白PLP表达变化,透射电镜观察脑白质区域的超微结构变化,电生理方法记录中枢神经传导功能.结果 PLP免疫组化:2组于纹状体、胼胝体、前联合、皮层下区均可见阳性染色.但老年组大鼠各部位PLP表达量明显减少,其积分光密度值明显增大(P＜0.01).白质区超微结构变化:老年大鼠轴突直径增加,轴突内含有巨大线粒体,轴突周围间隙扩大.髓鞘致密层分离,部分板层结构排列紊乱、破坏.中枢传导功能:2组间存在显著差别,老年大鼠中枢传导潜伏时较青年组显著延长(P＜0.01).结论 髓鞘蛋白PLP表达减少,与髓鞘形态结构改变有关,髓鞘及轴突超微结构存在明显变化,是白质功能减退的重要原因,这种变化可能与大鼠老化时中枢神经传导功能降低有关.
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CVF在大鼠移植心脏缺血再灌注损伤中的保护作用研究
目的 研究中华眼镜蛇毒因子(cobra venom factor, CVF)对同种大鼠移植心脏缺血再灌注损伤的保护作用机制.方法 近交系雄性B/N大鼠为供体,Lewis大鼠为受体,建立腹腔异位心脏移植模型.实验组术前给予CVF尾静脉注射,观察移植心的存活时间,并设B/N大鼠同系对照组.免疫组化法测定各组术后第1、3、5 天移植心脏的C3沉积,并观察移植心的病理变化.结果 接受CVF 20 μg/kg,2 d 1次,尾静脉给药的大鼠,移植心存活时间明显延长,平均达(11.69±0.72)d,而对照组为(6.65±0.35)d(P＜0.01),组织内C3沉积较对照组同期明显减轻,病理损害程度减轻,优于同期对照组.结论 CVF消耗补体显著延长移植心脏存活时间,能明显减轻近交系大鼠移植心脏缺血再灌注损伤.
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戊四氮癫痫模型失神发作期脑电图及意识状态的实验研究
目的 探讨戊四氮失神发作癫痫模型在发作期是否伴有特异性的痫样放电和意识障碍,为判断该模型是否为可靠的失神发作癫痫模型提供确切的实验依据.方法 ①记录10只戊四氮模型大鼠癫痫发作期的脑电图,以证实是否伴有特异性的脑电图痫样放电.②利用双向穿梭箱,以主动回避反应(active avoidance response, AAR)、被动回避反应(passive escape response, PER)及逃逸失败的阳性率为观察指标,判断大鼠痫性发作期的意识状况.结果 ①戊四氮注射大鼠痫性发作期均伴有双侧同步的棘波发放.②癫痫发作中,戊四氮注射大鼠主动回避反应潜伏期(active avoidance response latency, AARL)明显延长,AAR阳性率下降85%,PER阳性率增加56%,逃逸失败阳性率增加29%.结论 戊四氮注射大鼠可致特异性的痫性放电,同时并存意识障碍.
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牛磺酸营养干预下缺氧大鼠视网膜中葡萄糖转运蛋白1的表达
目的 观察高原缺氧条件下大鼠视网膜中葡萄糖转运蛋白1(GLUT-1)的变化,探讨牛磺酸对视网膜缺氧适应的影响.方法 96只SD大鼠随机分为6组,对照组(C)、牛磺酸组(T)、4 500 m缺氧组(45H)、4 500 m缺氧+牛磺酸组(45HT)、5 500 m缺氧组(55H)和5 500 m缺氧+牛磺酸组(55HT),分别以基础饲料和添加了2.4%牛磺酸的饲料喂养1周,营养干预后C组、T组继续在平原饲养,45H组、45HT组和55H组、55HT组放入低压氧舱分别模拟4 500 m和5 500 m高度的高原缺氧条件.在处理0、1、2、3 d后取视网膜,提取总RNA和总蛋白,应用RT-PCR和Western blot方法检测视网膜GLUT-1 mRNA和蛋白表达.结果 缺氧第1天视网膜中GLUT-1 mRNA与蛋白的表达显著降低(P＜0.05).缺氧第2天 mRNA与蛋白的表达开始回升,第3天 mRNA的表达恢复正常水平,蛋白的表达高于对照,牛磺酸处理后表达量均比对应的缺氧组高.结论 高原缺氧条件下,牛磺酸能通过上调GLUT-1的表达促进视网膜缺氧适应性调节机制的建立.
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肠腔分流下巴马小型猪肝脏耐受入肝血流阻断的安全时限研究
目的 了解在肠腔分流条件下正常巴马小型猪肝脏耐受缺血的安全时限,为临床上阻断肝脏血流的时间及设计合理手术方案提供实验依据.方法 将18只正常小型猪随机分为A组(肝血流阻断90 min)、B组(肝血流阻断100 min),在肠腔分流的条件下,观察2组动物的术后存活情况、入肝血流阻断前后,再灌注0、1 h、1～5 d时肝功能及组织病理改变.结果 ①A组动物长期存活率显著高于B组(100%与44.4%, P＜0.05).②2组动物ALT在术后2、3 d显著升高,术后4 d时与术前无显著差异,术后2、3 d时B组显著高于A组;复流1 h时2组AST水平达峰值,此后逐渐下降,术后3 d与术前无显著性差异,复流1 h、术后1、2 d时B组AST显著高于A组;A组动物缺血时D-BIL、T-BIL显著升高,复流1 h后降至正常水平,B组动物至术后5 d才恢复正常水平,于复流前、复流1 h、术后1、2、3、4 d时B组动物D-BIL、T-BIL均显著高于A组.③2组动物缺血时肝组织损伤明显,复流1 h时损伤进一步加重,A组及B组长期存活动物肝组织结构于术后4 d恢复正常;与A组比较,B组肝组织损伤显著,坏死灶明显增多.结论 避免门静脉淤滞条件下正常巴马小型猪常温耐受入肝血流阻断的安全时限可达90 min.
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肾上腺肾脏及其毗邻关系的薄层断面与MRI影像的对照研究
目的 应用数字化人体的有关腹膜后脏器的形态学数据,为肾脏和肾上腺疾病的影像学诊断提供薄层解剖学的对照依据.方法 应用中国第5例可视化人体数据集,提供出腹部肾上腺、肾脏的横断面图像,与相对应的MRI轴位图像进行对照研究观察.结果 在人体断面解剖图像与相应的MRI水平位图像上,清楚地显示出了肾脏、肾上腺的形态以及与周围结构的相互毗邻关系.结论 采用数字化人体技术形成了高清晰度、真彩色的断面解剖图像,为临床影像学MRI提供了良好的对照图像,有利于临床医生更深入地了解MRI图像中肾脏、肾上腺在正常或病态情况下的形态、解剖位置和与周围脏器的相互毗邻关系.
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颈交感神经阻滞调节放烧复合伤小鼠巨噬细胞GR的表达及细胞因子分泌的影响
目的 探讨颈交感神经阻滞(cervical sympathetic ganglia block, SB)在放烧复合伤小鼠腹腔巨噬细胞糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor, GR)表达及炎性细胞因子分泌中的作用.方法 TBSA 15%Ⅲ度烧伤合并5 Gy放射损伤小鼠分为单纯放烧复合伤组、放烧复合伤后单侧颈部SB治疗组、放烧复合伤后双侧颈部SB治疗组,另设正常对照组,每组8只,比较各组巨噬细胞GR水平及巨噬细胞分泌炎性细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6的差异.结果 单侧及双侧SB组腹腔巨噬细胞GR蛋白水平均显著高于放烧复合伤组(P＜0.01),单侧及双侧SB组腹腔巨噬细胞分泌TNF-α、IL-1β、IL-6的作用均显著低于放烧复合伤组(P＜0.05).放烧复合伤后颈部单侧SB组与双侧SB组间巨噬细胞GR蛋白水平及TNF-α、IL-1β、IL-6的表达释放无明显差异(P＞0.05).结论 单侧或双侧颈部SB均可改善放烧复合伤巨噬细胞GR功能,抑制其过度分泌炎性细胞因子.
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细菌潜生体与IBS关系的初步研究
目的 探讨肠道细菌潜生体(cryptic growth cell, CGC)与肠易激综合征(IBS)的关系.方法 应用显微培养结合形态观察等方法对IBS患者的粪便标本进行CGC检测,并在实验室进行CGC诱导产生和体内定植的模拟研究.结果 IBS患者粪便标本中常存在大量CGC并可在体外传代;在发病期间,其粪便标本中CGC出现明显的自溶现象.模拟实验显示IBS患者常使用的抗生素多可诱导CGC形成和体内定植.结论 初步可推断CGC与IBS的发病有一定联系.
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组蛋白乙酰化修饰对IEC-6恶性转化细胞细胞周期和p53、p21WAF1基因表达的调控
目的 分析和探讨IEC-6恶性转化细胞不同时期组蛋白乙酰化修饰对肿瘤发生相关基因表达的影响.方法 采用我们已建立的3个转化期(化学致癌剂MNNG和诱导剂PMA共同作用6、12、24次) 的IEC-6转化细胞进行培养,提取不同转化时期的IEC-6转化细胞的细胞核蛋白,采用免疫印迹检测H3乙酰化水平;并用ChIP及RT-PCR检测组蛋白H3乙酰化对p21WAF1表达的影响.结果 24次IEC-6恶性转化细胞组蛋白H3乙酰化水平高于6次IEC-6转化细胞,而组蛋白H3去乙酰化水平低于6次IEC-6转化细胞;同时发现p21WAF1的启动子区PCR产物减少.在6、12次IEC-6转化细胞中均有较弱的p53、p21WAF1表达;在24次IEC-6恶性转化细胞中仍可检测到较弱的p53表达,但p21WAF1表达缺如.结论 IEC-6恶性转化细胞过程中,组蛋白H3乙酰化水平增高,导致p21WAF1基因表达受抑,近而可能影响转化细胞的细胞周期.
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壳聚糖膜在兔眼巩膜瓣下的降解及对眼内压的影响
目的 观察壳聚糖膜在兔眼巩膜瓣下的降解,眼组织病理学变化,眼刺激反应及眼内压变化,评价壳聚糖膜的生物相容性及降眼压效果.方法 新西兰大白兔16只32眼,随机分为2组,A、B组各16只眼;A组单纯行小梁切除术,作为手术对照;B组行小梁切除术联合壳聚糖膜巩膜瓣下植入.术后观察眼压、炎症反应等,并分别于7、14、28、56 d取标本行组织学检查.结果 观察兔眼角膜、虹膜无异常发现,结膜轻度充血水肿,眼刺激程度评价为无刺激性.病理学观察:术后7 d,局部组织可见炎症反应;术后14 d,壳聚糖膜部分降解,炎症反应减轻;术后56 d,壳聚糖膜降解为碎片状,炎症反应基本消失;B组植入材料周围有组织间隙和滤泡存在,无明显纤维组织增生,A组组织结构紊乱,瘢痕形成,未见明显组织间隙和滤泡.术前A组眼压为(18.22±2.56) mmHg,B组眼压为(18.40±2.48) mmHg;术后8周,A组眼压为(16.87±2.45) mmHg,B组眼压为(13.78±1.89) mmHg,B组与A组之间有显著性差异(P＜0.01).结论 壳聚糖膜有良好的组织相容性,有一定抑制纤维组织增生的作用,能够有效维持滤过,降眼压效果满意.
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IL-2和IL-10对Treg细胞体外扩增影响的差异研究
目的 分析细胞因子IL-2和IL-10对Treg细胞体外扩增的促进作用,比较扩增的Treg细胞和自然分选Treg细胞对CTL功能活性的影响.方法 采用不同浓度细胞因子IL-2和IL-10作为诱导剂,分析2种细胞因子体外诱导Treg细胞增殖的有效性及适浓度,同时以2种细胞因子诱导扩增的Treg细胞和自然分选的Treg细胞分别作用于CTL,分析采用体外扩增Treg细胞抑制CTL活性的可能性.结果 100 ng/ml IL-2能够诱导Treg细胞增殖明显增加,经48、96 h和144 h诱导后,其增殖比例分别达到10%、18%和20%,而IL-10的使用浓度需达到150 ng/ml才能获得同样的扩增比例;与自然分选的Treg细胞对比,采用细胞因子体外扩增的Treg细胞具有同等抑制CTL功能活性的效力,组间无显著性差异(P＞0.05).结论 采用添加IL-2培养体系是体外扩增Treg细胞的优选方法,其增殖效能强于IL-10;体外扩增Treg细胞与自然分选Treg细胞对CTL的功能抑制没有明显差异.
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腰椎间盘突出症术后椎间盘炎的诊治体会
腰椎间盘术后椎间盘炎是一种严重的并发症, 临床较少见.1997年5 月至2004年10月本科收治术后腰椎间盘炎12 例,现报告如下.
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胃肠道神经内分泌肿瘤1例
1 临床资料患者,男性,37岁,因反复上腹胀痛4年,反酸3个月于2005-11-20收入我院普通外科.患者4年前因上述症状在当地某医院行胃镜检查诊断为"胃炎",仅给予对症处理,3个月前再次出现上腹部烧灼感、反酸,在某医院行胃镜检查提示"胃炎、十二指肠球炎",治疗(不详)无缓解;于2005-11-08来我院胃镜检查,见胃底贲门下2个大小约0.4 cm× 0.2 cm× 0.2 cm息肉样隆起,表面粗糙,活检结果为腺癌;4 d后复查胃镜,活检结果为神经内分泌癌.
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放射性核素骨显像在临床法医学中的初步应用
单光子发射计算机断层显像仪(single photon emission computed tomography, SPECT)自1979年研制成功后,经过20余年的技术发展和经验积累,已广泛应用于临床各科,尤其在功能显像方面[1].本研究尝试将其应用于隐匿性骨折、新旧骨折的鉴别等一些复杂疑难伤情的司法医学鉴定,收到了良好的效果.现报告如下.
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氨基胍和维生素C调节糖尿病大鼠主动脉层黏连蛋白B1 mRNA表达的研究
1 材料与方法1.1 实验动物、仪器和试剂雄性SD大鼠70只,2月龄,体质量200～250 g,购自中南大学动物部.怡成 SENTEST手持式快速全血葡萄糖测试仪,日丽7170型自动生化.氨基胍(AG, Sigma, Co.USA);维生素C(VitaminC, VitC,天津药业焦作有限公司,批号:040217-1);链脲佐菌素(Streptozotocin, STZ, Sigma, Co. USA).
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Marfan综合征屈光状态异常1例
1 临床资料患者,女性,8岁,因"发现双眼视力差2年"于2003年11月28日来我院就诊,患儿自诉双眼视物模糊,喜很近距离看物,不伴疼痛、畏光.父母非近亲婚配,其母怀孕期间无高热、惊厥及服药史,患儿足月顺产,既往体健,患儿祖父患有类似晶状体脱位.
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10例隐匿性血管畸形的诊疗探析
隐匿性脑血管畸形(angiographically occult cerebrovascular malformation, AOVM)比较少见,脑血管造影检查难以准确显示,所以诊断较为困难.下面结合我院2000-2005年收治经病理证实的AOVM出血10例患者,进行诊治探讨.
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误诊为病毒性心肌炎的房室结双径路1例
1 临床资料患者,女性,19 岁.主因反复胸闷半月,晕厥1次入院.急诊心电图显示:Ⅱ度Ⅰ型房室传导阻滞(AVB).查体: 发育正常,无颈静脉充盈,心界不大,心率60 次/min,心律不齐,无杂音.血常规、血沉、心肌酶谱、胸片及超声心动图检查均无异常.入院诊断: 病毒性心肌炎.给予能量合剂、维生素C、辅酶Q10,并用琥珀氢化可的松200 mg静滴1周后复查心电图正常出院.出院后1 d患者再次出现上述症状,急诊心电图显示:Ⅰ度AVB.
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成人哮喘患者生命质量影响因素分析
WHO生存质量研究组认为:生存质量是不同文化和价值体系中的个体对于他们的目标、期望、标准以及所关心的事情、有关生存质量状况的体验[1].
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悬浮状物质的样品制备及扫描电镜观察
目的 通过改进物质的样品制备,以提高扫描电镜观察的图像质量.方法 将体外培养的人骨髓间充质干细胞(hMSCs)悬液经2.5%的戊二醛(pH 7.2～7.4)固定后,用吸管直接吸出固定液,经洗涤、梯度脱水、叔丁醇梯度置换,再制成细胞悬液进行涂片,空干燥,离子溅射镀膜进行扫描电镜观察.结果 hMSCs饱满、表面结构清晰,凸现质量改善明显.结论 用直接移液法处理悬浮物质扫描电镜样品明显优于传统的样品制作方法.
