第三军医大学学报杂志
Journal of third military medical university 제삼군의대학학보
- 主管单位： 第三军医大学
- 主办单位： 第三军医大学
- 影响因子： 1.01
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1000-5404
- 国内刊号： 50-1126/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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儿童房间隔缺损封堵术后低分子肝素抗凝疗效分析
目的 评价低分子肝素用于儿童房间隔缺损(atrial septal defects,ASD)封堵术后的抗凝疗效及安全性.方法 48例ASD患儿分为低分子肝素组(试验组)和普通肝素组(对照组),分别在术后24 h内给予皮下注射低分子肝素2次或持续静脉滴注普通肝素.检测术后24 h和48 h活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)和凝血酶原片段(prothrombin fragment 1+2,F1+2)水平,并于术后第1、3个月复查经胸超声(transthoracie echocardio-graph,TTE).结果 共有43例(试验组22例,对照组21例)完成3个月随访,均无封堵器血栓形成或严重出血并发症.术前两组APTT和F1+2水平无显著性差异(P>0.05),与术前相比,术后试验组AFIT无显著延长(P>0.05),对照组术后24 h APTT显著延长(P<0.01),术后48 h恢复术前水平(P>0.05).术后两组F1+2水平与术前比较均显著升高(P<0.01),但两组间比较无显著性差异(P>0.05).结论 低分子肝素用于儿童ASD封堵术后安全、有效、简便,可以替代普通肝素.
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南蛇藤素对ApoE基因敲除小鼠主动脉壁MIF及MMP-9表达的影响
目的 观察南蛇藤素对ApoE基因敲除小鼠在动脉粥样硬化斑块形成的早期阶段主动脉壁中巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)表达的影响.方法 8周龄雄性ApoE基因敲除小鼠12只,按随机数字表法分为南蛇藤素干预组和对照组,每组6只,均给予高脂饮食饲养8周,在高脂饲养的后4周,分别予以2 mg·kg-1·d-1南蛇藤素和相当剂量的溶剂二甲基亚砜(DMSO)腹腔注射,每日1次,连续用药4周;小鼠处死后行主动脉连续石蜡切片,HE染色观察组织形态学改变,测定ApoE基因敲除小鼠主动脉根部粥样斑块面积,同时采用免疫组化方法观察主动脉壁MIF和MMP-9蛋白表达的强度.结果 图像分析测量结果显示对照组形成了早期斑块;南蛇藤素干预组斑块面积较对照组明显减小(P<0.01),斑块面积/动脉壁横切面积也明显降低(P<0.01);南蛇藤素干预组与对照组比较,MIF、MMP-9的表达均明显降低(P<0.01).结论 南蛇藤素可能通过下调ApoE基因敲除小鼠主动脉壁MIF、MMP-9表达,发挥一定的抗动脉粥样硬化作用.
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HIV-1准种变化与人类白细胞抗原限制性细胞毒性T淋巴细胞表位的相关性研究
目的 研究HIV-1准种变化与人类白细胞抗原(human leucocyte antigen,HLA)限制性细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)表位的相关性.方法 从2对母婴传播HIV-1感染者血清内提取HIV-1核酸,进行逆转录-套式PCR(RT-nested PCR)扩增,产物克隆后,挑选阳性克隆行CSGE分析,对优势和劣势准种进行克隆测序分析,对氨基酸序列中可能的CTL表位进行分析.结果 第1对感染的母子:母亲YJ体内存在的CTL表位在其54 d的女儿wYF体内都存在,而WYF体内存在1株突变准种,其CTL表位在YJ体内不存在;第2对感染的母子:母亲CM和其12个月的儿子ZDB体内HIV-1 env准种无相同的CTL表位.结论 HIV-1在改变宿主后,随着时间的延长,HIV-1突变准种所导致HLA限制性CTL表位发生改变的概率增大.
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CT及MRI对脑白质疏松症的诊断价值探讨
目的 评价螺旋CT及磁共振(MRI)对脑白质疏松症(leukoaraiosis,LA)的诊断价值及其CT、MRI表现.方法 收集本院2007年1-12月神经科诊治的患者120例,分别进行颅脑CT及MRI检查,对其CT、MRI图像进行对照分析研究.结果 病灶主要位于大脑皮质下脑白质区域、半卵圆中心、侧脑室周围或/和深部脑白质.CT表现为两侧基本对称的密度减低改变,而MRI则表现为形态不规则、边缘模糊的斑点状及点片状异常信号影,SE序列呈T1,AI,为等或低信号,T2WI呈稍高信号改变,T2flair(水抑制序列)呈略高或高信号改变.LA常伴有多灶性脑梗死、脑萎缩等脑血管病变.LA也可见于正常老年人.结论 LA有比较特征性的CT及MRI表现.螺旋CT对LA有一定的诊断价值,有其经济性、易操作性.但在有条件时,采用MRI检查更容易显示病灶.T2flair显示脑白质疏松特别敏感,MRI可作为诊断LA的首选方法.
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戊酸雌二醇对去势大鼠阴道雌激素受体亚型α、β表达的影响
目的 通过研究戊酸雌二醇对去势大鼠阴道雌激素受体(estrogen receptor,ER)亚型α、β表达的调节,探讨雌激素受体亚型与绝经期泌尿生殖道萎缩的相关性.方法 4月龄sD雌性大鼠80只,分为正常组、假手术组、去势组、药物干预组,每组20只.药物组大鼠于术后4周每天戊酸雌二醇灌胃给药,其余3组给予等量生理盐水灌胃.8周后处死大鼠,分离摘取阴道进行ERα、ERβ免疫组织化学染色及mRNA半定量RT-PCR检测.结果 ①ERα、ERβ在正常阴道鳞状上皮细胞、基质纤维细胞、血管内皮细胞、平滑肌细胞核及细胞质中均有表达,以阴道鳞状上皮细胞表达强,且ERβ较ERα表达弱(P<0.05).②去势组ERα较正常组、假手术组表达减弱(P<0.05),ERβ表达减弱更为明显(P<0.01).③药物干预组ERα表达较去势组明显增强(P<0.05),与正常组、假手术组比较无显著差异(P>0.05),ERβ表达无明显增强.结论 ERα是大鼠阴道优势表达的雌激素受体亚型;去势后阴道ER亚型表达下调,以ERβ明显;戊酸雌二醇可明显上调去势大鼠阴道ERα的表达,但不上调ERβ的表达.
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重组人内皮抑素联合紫杉醇+顺铂化疗方案治疗人乳腺癌裸鼠移植瘤的研究
目的 探讨重组人内皮抑素(endostar,商品名恩度)联合化疗方案对人乳腺癌(MCF-7)裸鼠模型的治疗,观察其对裸鼠血管生成及肿瘤生长的抑制作用.方法 将48只荷瘤鼠按随机数字表法分为A组及B组,每组24只,两组再分为化疗组、内皮抑素组、联合用药组及对照组,化疗组给予紫杉醇+顺铂(TP),紫杉醇20 mg/kg,腹腔注射,第1、7、14天,顺铂5 mg/kg,腹腔注射,第1、7天;内皮抑素组给予重组人内皮抑素10 mg/kg,静脉推注,连续14 d;联合用药组给予重组人内皮抑素+TP:紫杉醇20 mg/kg,腹腔注射,第1、7、14天,顺铂5 mg/kg,腹腔注射,第1、7天,重组人内皮抑素10 mg/kg,静脉推注;对照组连续14 d静脉推注等体积生理盐水,比较各组的抑瘤率,绘制肿瘤生长曲线.ELISA方法检测血清血管内皮生长因子(VEGF),肿瘤组织病理切片,观察微血管密度(MVD)、凋亡指数,B组动物观察其生存期.结果 联合用药组VEGF、MVD与其他各组比较明显减低(P<0.05),凋亡指数与其他各组比较明显增加(P<0.05),生存时间与对照组比较明显延长(P<0.05).结论 重组人内皮抑素联合TP方案治疗人乳腺癌裸鼠移植瘤对肿瘤生长及肿瘤血管抑制优于单一化疗,但1个周期联合化疗用药不能延长生存期.
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新型血小板添加液对血小板低温液态保存效果的实验研究
目的 探讨使用改良的血小板添加液(PAS)替代70%自体血浆在低温液态条件下对血小板的保存效果.方法 采集6单位单采血小板,每一单位单采血小板平均分为3组,A组加入70%PAS-Ⅲ M/30%血浆10℃保存;B组加入100%血浆22℃保存;C组加入100%血浆和海藻糖-85℃保存.A、B组在第1、5、7、9天取样检测,C组在20 d后复苏取样检测.分别检测PLT计数、PDW、MPV、CD62p、HSR、PAgT、pH值、LDH以及GLU的变化.结果 保存期内随保存时间延长,A组和B组CD62p表达增加,HSR和大聚集率降低;A组的LDH释放、GLU消耗、CD62p表达、HSR、血小板大聚集率与B组比较,差异有统计学意义(P<0.05).B组pH值在第5天起明显降低(P<0.05).C组LDH释放明显较其他两组增多,但CD62p表达较少(P<0.05).C组PDW显著升高,除与B组第5天结果相似外,均高于A、B组各时间点结果(P<0.05).各组PLT计数相差不显著.结论 改良的PAS-ⅢM能够很好的替代血浆用于血小板的保存,同时在低温条件下能够很好地保护血小板的功能,保存效果好于血浆常温保存.
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Bmi-1 siRNA对人白血病K562细胞增殖的影响及其机制
目的 探讨Bmi-1 siRNA对人白血病K562细胞增殖的影响及其作用机制.方法 通过脂质体将化学合成针对Bmi-1基因的siRNA转染K562细胞,采用MTT法观察Bmi-1 siRNA对K562细胞增殖的抑制作用;流式细胞术分析细胞周期变化;Western blot检测Bmi-1 siRNA对K562细胞中Bmi-1和P16蛋白表达的影响.结果 Bmi-1 siRNA能明显延长K562细胞的倍增时间、G1期比例增加;下调Bmi-1表达的同时上调P16蛋白表达.结论 体外化学合成的Bmi-1siRNA对K562细胞的体外增殖具有明显的抑制作用,下调Bmi-1蛋白表达的同时上调P16蛋白表达.
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长程高脂饲料对雌雄大鼠胰岛功能损害差异的探讨
目的 动态观察长程高脂饲料对雌雄大鼠糖耐量和胰岛素作用的影响,并探讨其可能的机制.方法 取正常sD大鼠100只,抽签式随机分组,其中雄性和雌性大鼠普通饲料组各20只,雄性和雌性大鼠高脂饲料组各30只.每个月动态监测大鼠体质量及空腹血糖的变化,在第14个月时进行腹腔注射糖耐量试验(IPGTT),检测葡萄糖耐量减退(IGT)的情况,测定第14个月时的空腹胰岛素分泌量及大鼠胰腺组织匀浆液中线粒体和微粒体的丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)和过氧化氢酶(catalase,CAT)水平.结果 第14个月时无论普食组或高脂组雄性大鼠腹腔注射糖耐量都受损,而雌性大鼠都未达到糖耐量受损,腹腔糖耐量测试表明雌雄大鼠在120 min时血糖有显著性差异(P<0.05);14个月时高脂组雄性大鼠空腹胰岛素分泌量显著高于雌性大鼠(P<0.05);胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)显示高脂组雄性大鼠胰岛素抵抗程度较雌性大鼠显著升高(P<0.05);早相胰岛素分泌功能显示经过长程高脂喂养,雄性大鼠早相胰岛素分泌功能显著低于雌性大鼠(P<0.05);胰腺组织匀浆液中线粒体的MDA、细胞质的GSH和CAT的水平雌雄大鼠问虽然无显著性差异(P>0.05),但总体趋势是无论是普食组还是高脂组,雄性大鼠氧化应激水平都高于雌性大鼠,抗氧化应激水平都低于雌性大鼠.结论 雌性大鼠具有抵抗高脂诱导的糖耐量受损作用,其胰腺组织氧化应激水平较低可能是机制之一.
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儿童难复性肱骨髁上骨折的外科治疗
目的 探讨肘关节内外侧联合小切口微创治疗儿童难复性肱骨髁上骨折的临床疗效.方法 从2001-2007年,本科对51例难复性儿童肱骨髁上骨折采用内外侧联合手术人路,透视下复位,交叉克氏针固定,观察术后伤肢肿胀情况、早期功能锻炼时间、骨折愈合时间及肘关节功能恢复情况.结果 伤肢肿胀程度轻,术后2-4 d完全消退,术后2-3周即可取石膏进行早期功能锻炼.随访3个月至5年,全部骨折均愈合,按Flynn标准对术后肘关节功能恢复情况进行评价,其中优43例,良6例,差2例,发生肘内翻3例.结论 肘关节内外侧联合小切口治疗儿童难复性肱骨髁上骨折具有微创、肘关节功能恢复良好及肘内翻发生率低等特点.
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TIA-1通过影响肝细胞转录因子的活性调节HBV的e抗原和s抗原表达
目的 证明TIA-1分子具有调节HBV基因表达的功能.方法 TIA-1真核表达质粒pcDNA3-TIA-1,用脂质体转染HepG 2.2.15细胞后,ELISA检测e和s抗原的表达;RT-PCR检测与HBV复制有关的转录因子HNF1、HNF2、HNF3、HNF4、RXRa、PPARa、C/EBP的表达.结果 与正常的HepG 2.2.15细胞相比,转染pcDNA3-TIA-1质粒的HepG2.2.15细胞,其e抗原的表达量明显的增高,而s抗原表达量明显的降低.与正常的HepG 2.2.15细胞相比,转染pcDNA3-TIA-1质粒的HepG 2.2.15细胞中的HNF1、HNF2、RXRet mRNA含量有明显的下降.结论 TIA-1蛋白能通过影响与HBV复制有关的转录因子活性,调节HBV e抗原和s抗原的表达.
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阿莫西林/克拉维酸钾(16:1)缓释片治疗急性细菌性感染141例临床观察
目的 评价国产阿莫西林/克拉维酸钾(16:1)缓释片治疗急性细菌性感染的有效性和安全性.方法 采用多中心随机、双盲双模拟、平行对照临床试验设计方法,对人组的286例病例进行观察分析,其中纳入临床疗效FAS人群分析的病例数为284例,试验组和对照组分别为141例和143例;纳入PPS人群分析的病例数为266例,试验组和对照组各133例.试验组口服阿莫西彬克拉维酸钾(16:1)缓释片每次500 mg/31.25 mg,对照组口服阿莫西林/克拉维酸钾(4:1)每次500 mg/125 mg,用法均为2次/d,疗程均为5-10 d.结果 疗程结束时,试验组和对照组的总临床痊愈率、总有效率、总细菌清除率、不良事件发生率、药物相关不良反应发生率相比较,均无统计学差异(P>0.05).结论 国产阿莫西林/克拉维酸钾(16:1)缓释片治疗急性细菌性感染的临床疗效和安全性与进口阿莫西林/克拉维酸钾(4:1)普通片相当.
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木犀草素脂质体制剂处方和工艺优化研究
目的 优化制备注射用木犀草素脂质体的处方工艺.方法 采用薄膜分散法和冻干工艺进行木犀草素脂质体制备,并以载药量、包封率为评价指标,优化制备处方和工艺.结果 木犀草素脂质体制备的佳工艺处方为磷脂:木犀草素10:1,磷脂:胆固醇4:1,水化介质为注射用水,温度为50℃.按照此处方工艺制备的木犀草素脂质体平均载药量、平均包封率、平均粒径分别为7.21%、66.8%、278.4 nm.结论 按优化处方和工艺制备的木犀草素脂质体各项指标基本符合静脉应用要求.
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二氮嗪预处理对大鼠缺血性损伤心肌线粒体功能的保护作用
目的 探讨线粒体ATP敏感性钾通道开放剂二氮嗪预处理对大鼠心肌细胞线粒体功能保护作用.方法 采用大鼠异丙肾上腺素心肌损伤模型,30只大鼠分成对照组、异丙肾上腺素(ISO)损伤组、二氮嗪(DZ)预处理组;以氧电极法测线粒体呼吸,罗丹明123为荧光探针测定线粒体膜电位,采用定磷法检测Na+-K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活性.比较各组心肌细胞线粒体Ⅲ态呼吸速率、线粒体Ⅳ态呼吸速率、线粒体呼吸控制率和线粒体膜电位以及线粒体ATP酶的活性.结果 ISO组线粒体Ⅲ态呼吸速率呼吸控制率、线粒体膜电位以及Na+-K+-A11P酶和Ca2+-ATP酶活性与对照组比较显著下降(P<0.01);Dz预处理组Ⅲ态呼吸速率、呼吸控制率和线粒体膜电位(P<0.05)以及Na+-K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活性较对照组低(P<0.01),但与ISO组比较明显恢复.各组对Ⅳ态呼吸速率没有明显影响.结论 线粒体ATP敏感性钾通道开放剂二氮嗪能增强心肌细胞线粒体酶活性,产生预处理心肌细胞线粒体保护效应.
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Rho激酶在大鼠严重烧伤后肠黏膜通透性改变中的作用及机制研究
目的 观察严重烧伤早期不同时相点大鼠肠黏膜通透性的变化,探讨Rho激酶在这一过程中的作用及机制.方法 常规制备烧伤大鼠模型后取回肠末段,分为正常对照组、烧伤组和烧伤6 h+Y27632组,以荧光素标记法(FITC-D)检测大鼠肠黏膜在未烧伤、1、2.6、12、24 h等不同时相点通透性的变化指标;用Western blot法检测肠黏膜肌球蛋白轻链(myosin light chain,MLC)、磷酸化MLC(p-MLC)和Rho激酶蛋白水平的变化.结果 严重烧伤后大鼠肠黏膜通透性明显增加,并呈时相依赖性变化,6～12 h达到高;p-MLC以及Rho激酶蛋白表达均明显增加.上述蛋白表达的增强可在加入Rho激酶特异性抑制剂Y27632后消失.结论 严重烧伤后肠黏膜Rho激酶激活和p-MLC表达增加,是导致其通透性增加及屏障功能损害的分子机制之一.
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氟比洛芬口腔崩解片的制备及质量控制
目的 制备氟比洛芬口腔崩解片并建立其质量控制方法.方法 采用湿法制粒压片法制备口腔崩解片,运用高效液相色谱法(HPLC法)测定其含量.结果 制备的氟比洛芬口腔崩解片外观完整光洁,硬度为2 kg,崩解时间小于30 s;含量测定线性范围为1.0～10.0μg/ml,r=0.999 9,平均回收率为99.32%,RSD=1.09%.结论 本制备法与质量控制方法简便、可行.
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拉米夫定治疗乙型肝炎病毒相关性肝衰竭疗效的Meta分析
目的 系统评价拉米夫定治疗乙型肝炎病毒(HBV)相关性肝衰竭的疗效.方法 检索1989年1月至2007年7月有关在常规内科治疗的基础上加用拉米夫定后对患者病死率、总胆红素(TBIL)及凝血酶原活动度(FFA)影响的文献,应用Meta分析的方法以比值比(伽)或加权平均数(WMD)为效应量进行合并分析.结果 上述研究指标纳入研究文献分别为13、10篇和10篇,合并效应量及95%可信限(95%CI)分别为0.29(95%CI:0.21,0.40)、-0.88(95%CI:-1.27,-0.48)和0.60(95%CI:0.42,0.78).结论 与常规内科治疗组比较,加用拉米夫定可以显著降低肝衰竭患者的病死率,改善患者的TBIL和PTA水平.
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人结肠癌耐药细胞系HT29/L-OHP的建立及其生物学特性
目的 建立人结肠癌奥沙利铂耐药细胞系HT29/L-OHP,探讨结肠癌对奥沙利铂(Oxaliplatin,L-OHP)产生耐药的特征规律和耐药的机制.方法 采用逐步递增L-OHP浓度,间歇作用体外诱导法培养建立了人结肠癌L-OHP耐药细胞模型HT29/L-OHP.MTT法测定生长曲线、交叉耐药性和耐药指数;并用光镜、电镜、流式细胞仪(FCM)等方法观察其一般生物学特性的改变.结果 历时3个月建成了L-OHP耐药细胞模型HT29/L-OHP,其耐药性能稳定,耐药指数为10.64;并且与5-氟尿嘧啶、长春新碱、阿霉素等多种抗癌药有不同程度的交叉耐药性.H329/L-OHP的细胞形态及染色体数目发生了改变;体外细胞群体倍增时间较亲代细胞延长29.71 h;细胞周期分析结果显示其S期与G0/G1期细胞减少、G2/M期细胞增多.结论 HT29/L-OHP细胞是模拟临床用药特点建立的耐药性较稳定的多药耐药细胞,具有耐药细胞的基本生物学特性,是研究L-OHP耐药机制及筛选逆转剂的理想细胞模型.
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男性青年急进高原初期心率变异性的变化及意义
目的 采用时域、频域及非线性分析方法探讨急进西藏高原初期心率变异性(heart rate variability,HRV)逐日动态变化及其意义.方法 86例汉族男性新兵在海拔560 m平原完成5 min短程HRV检测后,分为A组(n=12)、B组(n=48)和C组(n=26),飞抵3 675m西藏高原.进藏后,A组于第2天、B组于第3天、C组于第4天分别接受了高原HRV检测.结果 与平原相比,进藏第2天SDNN、HF、TP均显著下降(P<0.01),rMSSD、PNN50及HFnu也显著下降(P<0.05).而LFnu和LF/HF均显著升高(P<0.01);进藏后第3～4天,SDNN、rMSSD、HF、11P及HFnu呈逐日回升趋势,LFnu及LF/HF呈逐日回落趋势;FD在进藏第2-4天保持低水平波动.结论 急进高原初期,HRV下降、自主神经系统(ANS)调节功能受到抑制,随后ANS功能呈逐日缓慢恢复至类似平原状态.
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微小RNA分子miR-21和miR-22对C2C12细胞成肌分化影响的研究
目的 探讨微小RNA(microRNAs)分子miR-21和miR-22对于C2C12细胞体外成肌分化进程的影响.方法 以C2C12细胞体外成肌分化为模型,Northern blot检测miR-21和miR-22两个分子在分化过程中的表达变化及组织表达谱,转染DNA/LNA杂合体反义链进行loss-of-fuction功能研究,RT-PCR分析其对分化相关分子的影响.结果 成功建立C2C12细胞体外成肌分化模型,2个分子在分化过程中均表达上调,且它们具有各自的组织分布特点；建立了以DNA/LNA杂合体反义链为手段的microRNAs研究的loss-of-fuction平台；与对照组比较,抑制这2个microRNAs对于成肌分化相关的骨骼肌α-肌动蛋白、成肌素和MEF-2D等分子的表达没有影响.结论抑制miR-21和miR-22在C2C12细胞成肌分化过程中的上调不影响其分化,说明这2个分子对于分化的进程影响不大.
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自体间充质干细胞构建组织工程骨修复人长骨缺损的临床观察
目的 观察个体化组织工程骨用以修复患者长骨缺损的疗效与安全性.方法 利用组织工程技术,通过抽取临床上骨源缺乏的患者少量骨髓分离出其中的人骨髓间充质干细胞(human mesenchymal stem cell,hMSCs),并在体外对其进行扩增培养并诱导分化后,与自制的同种异体脱钙骨基质相复合,构建个体化的组织工程骨并应用于临床,通过临床随访其放射学及血液学结果评价其疗效与安全性.结果 30例个体化组织工程骨临床应用患者均达到随访半年以上,随访资料显示成骨速度及效果均与自体骨类似,且术后肝.肾功、血沉等指标均无明显异常,长随访达4年未发现病灶复发.结论 由患者自体间充质干细胞构建的组织工程骨具有良好的生物安全性和成骨效能.
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膝关节髌内侧滑膜皱襞直接关节造影磁共振表现与关节镜分型的临床对比研究
目的 对比研究膝关节髌内侧滑膜皱襞在直接关节造影磁共振(MRA)检查下的影像和在关节镜检查下的形态表现,分析滑膜皱襞MRA影像与镜下分型之间的相关性,以提高MRA对髌内侧滑膜皱襞综合征的诊断率.方法 甲组,选取我院33例已在关节镜下确诊为膝关节髌内侧滑膜皱襞综合征的患者,按照Sakakibara分型标准分为4组,测量患者术前膝关节MRA影像中髌内侧皱襞相对宽度,拟定在MR图像中使用滑膜皱襞相对宽度作为指标进行分型诊断的初步数据范围.乙组,选取34例已行MRA检查的患者,按照MRA分型标准分为3组,关节镜下对MRA分型诊断的初步标准进行验证.结果 甲组33例患者33膝MRA图像测量结果显示,Sakakibara A型滑膜皱襞相对宽度为(0.226±0.039);B型(0.463±0.053);C型(0.738±0.037);D型(0.825±0.026).A、B型与C型皱襞相对宽度测量结果具有明显的统计学差异(P<0.05);D型与C型之间无明显差异.乙组34例34膝MRA分型和关节镜分型的一致性检验结果:Kappa值>0.6;符号秩检验Wilcoxon法的P值>0.05.结论 膝关节髌内侧滑膜皱襞MRA表现与关节镜下形态紧密相关.MRA分型诊断的初步标准与关节镜下Sakakibara分型具有一致性.MRA是诊断膝关节滑膜皱襞极有价值的方法,是采用膝关节镜手术治疗髌内侧滑膜皱襞综合征术前的重要检查.
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小鼠支气管肺泡干细胞的培养鉴定和分选
目的 对正常成年小鼠肺内支气管肺泡干细胞(bronchoalveolar stem cell,BASC)进行克隆培养、鉴定和流式细胞仪分选.方法 用胶原酶和分散酶联合消化小鼠肺组织制备肺单细胞悬液,并经免疫磁珠分选Sca-1+细胞;胶原蛋白和小鼠Swiss-3T3成纤维细胞系包被培养板;无血清乳腺上皮细胞培养基培养Sca-1+细胞;双重免疫荧光染色Clara细胞抗原(CCA)和肺泡表面活性蛋白c(sP.c)鉴定BASC,并用流式细胞仪分选BASC.结果 通过胶原酶和分散酶联合消化小鼠肺组织,平均每只成年小鼠可得到有核细胞总数(1.6-1.8)×107;经磁珠分选后的Sca-1+细胞纯度明显高于未经分选的肺Sca+1+细胞[分别为(87.3±5.9)%、(9.6±1.8)%,P<0.05];在无血清乳腺上皮细胞培养基中Sca-1+细胞在第4天可形成BASC克隆和其他不表达CCA、SP.c的细胞克隆;流式细胞仪检测CD45-CD31-Sca-1+CD34+细胞占肺细胞总数的0.7%～1.1%,根据此分子标记能够分选出高纯度的BASC.结论 通过胶原酶和分散酶联合消化,免疫磁珠分选的Sca-1+细胞在无血清乳腺上皮细胞培养基中能够形成非纯化的BASC克隆,而流式细胞仪可以分选出高纯度的BASC.
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MDC、STxB与CVB3 VP1融合DNA疫苗的免疫效果比较
目的 比较小鼠巨噬细胞源趋化因子(macrophage-derived chemokine,MDC)和志贺毒素B亚单位(Shiga tox-in B subunit,STxB)与柯萨奇病毒B组3型(coxsackievirus B3,CVB3)VP1融合DNA疫苗的免疫效果.方法 将120只雄性BALB/c小鼠分为6组,每组20只,分别肌内注射peDNA3、pcDNA3/MDC、pcDNA3/STxB、pcDNA3/VP1、pcDNA3/MDC-VP1和pcDNA3/STxB-VP1,每3周1次,共3次,每次免疫后20 d取血清,用微量中和试验检测CVB3中和抗体,第3次免疫后3周,每组取3只小鼠,取脾脏制备脾细胞,用CCK-8法检测特异性CTL杀伤活性,其余小鼠用IOLD50的CVB3攻击,观察小鼠的生存情况.结果 pcDNA3/VP1、pcDNA3/STxB-VP1和peDNA3/MDC.VPl组均能诱导小鼠产生中和抗体;除peDNA3/STxB-VP1组外,另两组抗体滴度随免疫次数增加而提高;第3次免疫后,pcDNA3/MDC-VP1组平均抗体滴度和脾淋巴细胞特异性CTL杀伤活性高于pcDNA3/VP1(P<0.05).病毒攻击后,pcDNA3/MDC-VP1组21 d生存率高于其他各组(P<0.05).pcDNA3/STxB-VP1组抗体滴度和生存情况与peDNA3/VP1组无明显差异.结论 融合基因疫苗pcDNA3/MDC-VP1能诱导小鼠产生较强的体液和细胞免疫,提高了小鼠生存率,免疫效果优于pcDNA3/STxB-VP1.
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低功率毫米波辐照对HL60细胞增殖的影响
目的 为探讨低功率毫米波对HL60细胞活力影响的机制.方法 应用细胞培养、活细胞计数、光镜、电镜及增殖细胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen,PCNA)免疫组化染色及图像分析等方法,检测低功率(功率密度约2 mW/cm2)及频率41.32 GHz的毫米波辐照HL60白血病细胞增殖的影响;分为辐照时间15、30、45、60 min组和对照组(0 min组)共5组.结果 与对照组比较,毫米波辐照45 min和60 min组,HL60细胞活性增加和PCNA阳性细胞增多,光镜观察各组未见明显差别,超微结构显示HL60细胞形态呈增殖改变.结论 低功率毫米波辐照对HL60细胞有促进增殖的作用.
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通过生物信息学技术预测铜绿假单胞菌噬菌体内溶素的作用机制
目的 对20种铜绿假单胞菌噬菌体基因组中可能的内溶素基因进行生物信息学分析,探讨其可能的作用机制.方法 采用开放阅读框预测、同源检索、多重序列比对、蛋白质模型自动匹配等方法预测可能的内溶素及其内溶素相关基因.结果 通过铜绿假单胞菌噬菌体基因组进行分析,新发现8种内溶素基因和2种穴蛋白基因,对新发现基因的类型做了相关推定.结论 利用生物信息学手段分析已知序列,可以迅速、方便、有效地确定未知基因的功能及作用方式.
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氧化应激对肺泡Ⅱ型上皮细胞MAPKs的激活及N-乙酰半胱氨酸的干预作用
目的 探讨氧化应激对肺泡Ⅱ型上皮细胞(alveolar type II epithelial cells,AT II)丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinases,MAPKs)活化的影响及N.乙酰半胱氨酸(N-Acetylcysteine,NAC)对MAPKs活化及细胞存活凋亡的干预.方法 原代培养大鼠ATⅡ,分为4组:正常对照组、NAC组、H2O2组和H2O2+NAC组.电镜观察H2O2刺激后细胞形态改变;四甲基偶氮唑盐反应比色法(MTT法)检测各组细胞存活率;流式细胞术检测凋亡率和细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测p-ERK、P-p38和p-JNK的表达.结果 与正常对照组比较,H2O2刺激后ATⅡ呈典型凋亡改变,细胞存活率下降(P<0.05),凋亡率和细胞内ROS水平上升(P<0.05),p-ERK、p-p38和p-JNK的表达也明显增加(P<0.05),而NAC干预后可提高细胞存活率,降低凋亡率和细胞内ROS水平,并抑制p-ERK、p-p38和p-JNK的表达.结论 氧化应激能激活MAPKs并诱导AT II凋亡,NAC通过清除细胞内ROS和抑制MAPKs的磷酸化而对AT II起保护作用.
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轴索损伤后热休克蛋白70的变化对Tau蛋白表达的影响
目的 观察大鼠轴索损伤后相应神经元内热休克蛋白(heat shock protein 70,HSP70)和Tau蛋白表达的变化及热应激对其表达的影响,探讨HSP70神经保护作用的机制.方法 将57只雄性Wistar大鼠分为正常对照组(A组,3只)、单纯视神经牵拉伤组(B组,18只)、单纯热应激处理组(C组,18只)和热应激预处理牵拉伤组(D组,18只).对B组大鼠右侧视神经施予牵拉,对c组大鼠施予热应激处理,D组大鼠经热应激预处理24 h后再对右侧视神经施予牵拉.B、C、D组分别在伤后4、8、16 h,1、3、5 d各处死3只动物.光镜下观察视神经、视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)的形态学变化,免疫组化染色检测各组动物RGCs中HSP70、Tau蛋白的表达情况.结果 牵拉伤后视神经轴索、RGCs的形态发生明显的病理变化,热应激预处理再致伤后上述病理改变有显著改善.单纯牵拉伤可使RGCs中HSP70、Tau蛋白的表达增强,单纯热应激处理后HSP70的表达增强、Tau蛋白的表达不受影响,热应激预处理后再致伤使HSP70的表达明显增强、高峰表达时间提前、维持时间延长,而Tau蛋白的表达明显减弱.结论 Tau蛋白表达增强可能参与了迟发性轴索断裂及迟发性神经元凋亡;HSP70可能通过减轻Tau蛋白的异常聚集而发挥神经保护作用;增强内源性神经保护作用可能是弥漫性轴索损伤治疗的新途径.
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以严重骨病为主要表现的原发性干燥综合征1例
干燥综合征(Sjogren's syndrome,SS),是一种主要累及外分泌腺体的慢性炎症性自身免疫病,分为原发性和继发性两类.原发性SS(pSS)是指非继发于另一诊断明确的结缔组织病的SS[1].pSS临床表现多样,病情轻重亦不同,对于不典型的SS,临床常易漏诊或误诊.本科曾诊治1例以严重骨病、肾小管性酸中毒、顽固性腹泻为主要表现的pSS,现报告如下.
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前列腺术后真性压力性尿失禁功能尿道重建术的护理
良性前列腺增生术后真性压力性尿失禁发生率为2.6%[1],为泌尿外科临床的一道难题.目前治疗方法主要有经尿道腔内注射、球部尿道悬吊和人工括约肌安置术,疗效均不够满意,后两种方法采用人工材料,手术并发症多,尿道受压坏死和发生感染率分别达5%和3%[2,3].2003年2月至2007年4月,我科采用了球部尿道-膀胱出口吻合功能性尿道重建术,治疗前列腺术后真性压力性尿失禁患者20例,疗效较满意,现将护理体会报告如下.
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宫颈花瓣状畸形3例
1临床资料病例1:32岁,因"白带多,外阴瘙痒1个月"来我院就诊.妇科门诊检查:外阴红肿,阴道壁充血,有较多豆渣样白带,宫颈畸形,似花瓣状,共有12瓣,分布均匀.宫体前位,正常大小,双侧附件正常.阴道B超检查提示:宫颈畸形,子宫附件未见异常.化验报告:清洁度Ⅳ,芽生菌(+).追问病史:12岁月经初潮,周期30 d,经期5 d.经量中,无痛经史.25岁结婚,人工流产2次,人工流产时已发现为宫颈畸形,未引起重视,而且足月剖宫分娩一男孩,现已6岁,体健.在外院安环时也诊断为宫颈畸形.特别提醒避孕环有脱落的可能,经常B超或x线检查环位.已安环避孕5年无任何不适.
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CT诊断气管腺样囊性癌3例
原发性气道肿瘤较为罕见,约占呼吸系统肿瘤的2%,其中恶性肿瘤占60%-83%,腺样囊性癌(adenoid cystic carcinoma,ACC)仅次于鳞状细胞癌(48%),在气道恶性肿瘤中发病率居第2位(33%)[1].尽管ACC为相对低度恶性肿瘤,但手术切除率极低,文献报道不足10%.为了加深对该病CT征象的认识,收集经本院手术病理证实的ACC 3例,探讨CT对ACC的诊断价值.
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实用新型仿生乳头按摩器的研制及临床应用
静脉滴注缩宫素是目前临床常用的引产方式,但需要专人管理,定时调节滴速,且难以模拟垂体脉冲式的缩宫素释放模式.婴儿吸吮母亲乳头能诱发宫缩的现象提示按摩乳头能诱发或加强宫缩.据此,本院于2004年1月开始进行仿生乳头按摩器的研究和设计,经反复技术和材料改进,成功推出了试用产品并获得了国家实用新型专利(专利号:200520010184.6).经80例孕妇临床应用证实,该按摩器能诱发符合生理状态的宫缩,且具有操作方便、安全等优点,现将其研制及临床应用报告如下.
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子(癎)前期重度胎盘细胞凋亡与血清一氧化氮的关系研究
妊娠期高血压疾病是妊娠期所特有的疾病，该病严重危害母婴健康，尤其是子(癎)前期重度母婴并发症高，其发病原因目前尚不完全清楚。
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带血管蒂骨移植治疗26例先天性假关节
先天性假关节是一种较为罕见的骨科疾病,发生率为1/14万-1/25万,临床上易误诊为外伤性骨折,常规方法治疗极为困难,常需多次手术[1,2].我院从1978年开始应用显微外科技术进行带血管蒂的骨移植治疗先天性假关节26例,治疗效果理想.现报告如下.
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经单鼻孔-蝶窦入路显微手术治疗巨大型垂体瘤13例
垂体腺瘤是常见的颅内肿瘤,随着显微神经外科技术的发展,对垂体瘤的治疗水平不断提高,手术方法也越来越多[1].现将本院2004-2007年经单鼻孔一蝶窦入路显微手术切除巨大型垂体瘤经验总结如下.
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1例由原发性骨髓纤维化转化为急性巨核细胞白血病患者骨髓MRI及相关基因的表达变化
目的 报告1例我院诊治的由原发性骨髓纤维化转变为急性巨核细胞白血病的病例,并讨论原发性骨髓纤维化与急性巨核细胞白血病在MRI骨髓表现的改变及部分相关基因表达.方法 对我院1例由原发性骨髓纤维化转化为急性巨核细胞白血病(AML-M7)的患者在转化前后进行骨髓细胞形态学、遗传学、相关基因检测和髂骨骨髓的MRI检查,并予以化疗.结果 患者染色体核型在转化前后均为正常核型;GFI1/GFI1B、VEGF及其受体表达在缓解前后均有明显改变;处于原发性骨髓纤维化阶段时髂骨骨髓在MRI上表现为T1WI及T2WI上的片状低信号,转化为AML-M7后T2WI上表现为散在高信号;患者经IDA+HAE两疗程后缓解.结论 原发性骨髓纤维化与AML-M7的骨髓MRI表现有明显的改变,引起该改变的原因与构成骨髓的细胞成分及局部微血管环境的改变有关;转化后的AML-M7生物学特征发生明显改变,经HAE治疗仍可能达到完全缓解.
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高效稳定表达人缺氧诱导因子抑制因子肠上皮细胞株的建立
目的 通过转染含有人FIH全长cDNA的质粒pcDNA3.1-V5-His-A-FIH,建立FIH高效表达的肠上皮细胞株.方法 对pcDNA3.1-V5-His-A-FIH进行扩增、提取,用脂质体Lipofectamine 2000将pcDNA3.1-V5-His-A-FIH转入Caco-2细胞,经G418筛选并逐步传代,RT-PCR和Western blot法检测阳性细胞克隆FIH mRNA和蛋白表达.结果 转染pcDNA3.1-V5-His-A.FIH后Caco-2细胞FIH mRNA是普通Caco-2细胞的1.98倍,而FIH蛋白含量是普通Caco-2细胞的1.70倍.结论 成功建立了高效、稳定表达人FIH基因的肠上皮细胞株.
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一种高度敏感检测C肽的磁分离酶联免疫荧光法
目的 建立一种低成本、高敏感性检测人血清C肽(C-Peptide,C-P)的磁分离免疫荧光方法(magnetic separa-tion enzyme immunofluorescence,MEIF).方法 用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AP)标记的抗C肽特异性单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb),与异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)偶联的另1个抗C肽mAb配对构成双抗体夹心免疫结合,用抗FITC的多抗免疫磁珠作为固相分离载体,用4-甲基磷酸伞型酮(4-methylumbelliferyl-phosphoricacid,4-MUP)为荧光底物建立磁分离酶联免疫荧光分析法.结果 方法灵敏度0.033 ng/ml,批内变异系数(CV)为4.4%-5.9%,批间CV为4.3%-8.6%,稀释回收率为82.4%-119.4%,加标回收率为94.1%-113.0%.将实际样品测定与磁分离免疫发光系统检测的结果相比较有较好的相关性.结论 MEIF定量测定C肽的方法成本低、灵敏度及特异性高、稳定性好,具有较好的应用前景.
