第三军医大学学报杂志
Journal of third military medical university 제삼군의대학학보
- 主管单位： 第三军医大学
- 主办单位： 第三军医大学
- 影响因子： 1.01
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1000-5404
- 国内刊号： 50-1126/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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直链烷基苯磺酸钠致小鼠肝脏氧化损伤的作用
目的 探讨不同剂量直链烷基苯磺酸钠(linear alkylbenzenesulfonate,LAS)致小鼠肝脏损伤作用.方法 将40只健康成年ICR种小鼠按单纯随机抽样方法分为正常对照组和LAS低(150 mg/kg)、中(300 mg/kg)、高剂量组(600 mg/kg),采用灌胃方法,持续60d,每10天称量1次,观察行为,60d后称量处死,计算肝系数,做病理学检查；检测肝组织中超氧化物歧化酶(super oxidase dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、丙二醛( malondialdehyde,MDA)、乳酸脱氧酶(lactate dehydrogenase,LDH)及一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)几种指标的水平.结果 实验过程中,各组小鼠出现不同程度的体质量增长缓慢甚至减轻(P＜0.05)；低、中、高剂量组肝脏系数分别为(6.25±0.38)％、(6.94±0.52)％和(7.42±0.44)％,均明显高于对照组[(5.32±0.58)％,P＜0.05]；病理学检查发现有不同程度的损伤,高剂量组肝细胞出现水肿、点状坏死,肝窦充血现象；与对照组相比,各剂量组肝组织MDA含量明显增高,SOD及GSH-Px活性均明显降低(P＜0.05,P＜0.01)；同时,LDH与NOS活性有所增强(P＜0.05,P＜0.01)；结论 LAS能抑制小鼠体质量的增长,对肝组织造成一定损伤,影响肝组织抗氧化功能.
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转录辅助因子PC4参与大鼠骨髓间充质干细胞体外衰老过程的调控
目的 研究转录辅助因子PC4( transcriptional positive coactivator4)在骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)体外传代衰老过程中的表达变化特点,初步探讨其在MSCs增殖和衰老中的可能作用.方法 通过CCK-8法检测并绘制MSCs生长曲线,流式细胞术检测MSCs免疫表型,通过RT-PCR和Western blot检测PC4在MSCs长期体外培养中的表达特点,并检测细胞衰老标志物β-半乳糖苷酶活性的变化,进一步通过RNA干扰抑制PC4表达,检测其对MSCs增殖和衰老的影响.结果 本实验分离培养的MSCs早期具有成体干细胞特性,长期体外连续传代后出现细胞衰老,β-半乳糖苷酶染色呈阳性,PC4在衰老细胞中的表达明显降低,RNA干扰抑制PC4表达后,MSCs增殖受到抑制,β-半乳糖苷酶染色阳性率增加[转染后48 h阴性对照组(8.8±2.5)％,空白对照组(5.7±1.8)％,siRNA组(56.3±4.9)％,P＜0.05].结论 转录辅助因子PC4可能参与了体外连续传代培养过程中MSCs增殖活性降低和衰老过程的调控.
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三氧化二砷对前列腺癌DU-145细胞RASSF1A基因的去甲基化作用
目的 研究三氧化二砷( arsenic trioxide,As2O3)对激素非依赖性前列腺癌DU145细胞的生长抑制作用及对RASSF1A基因去甲基化和蛋白表达的影响.方法 应用MTT法检测不同浓度(0.5、1.0、2.0、4.0、6.0、12.0、20.0μmol/L)的As2O3不同作用时间(24、48、72 h)对DU145细胞的生长抑制作用；应用甲基化特异性PCR(MSP)和Western blot检测As2O3对DU145细胞RASSF1A基因甲基化状态及蛋白表达的影响.结果 As2O3可抑制DU145细胞的增殖,在一定范围内随着药物浓度的增高,抑制作用逐渐增强(F=838.089,P＜0.05)；同一浓度作用时间越长,抑制率越高(F=8.849,P＜0.05)；且As2O3可使RASSF1A基因甲基化逆转,蛋白重新表达.结论 As2O3可以逆转前列腺癌DU145细胞RASSF1A基因启动子CpG岛的异常甲基化,诱导该抑癌基因的重新表达,抑制前列腺癌DU145细胞的增殖.
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肉桂醛对恶性黑素瘤A375细胞增殖和分泌VEGF的影响
目的 研究肉桂醛对体外培养的人恶性黑素瘤细胞株A375增殖和分泌血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的影响.方法 A375细胞在体外培养扩增后,在培养基中分别加入10、20、40 μmol/L肉桂醛,分别在培养24、48、72 h MTT法检测细胞活性.同时收集各个浓度肉桂醛处理不同时相的培养液样本,双抗体夹心ELISA法测定其中VEGF分泌量.结果 10 μmol/L肉桂醛作用24h即能抑制A375细胞增殖,10、20、40 μmol/L肉桂醛间的抑制强度具有统计学意义(P＜0.01).40 μmol/L的肉桂醛作用72 h后细胞增殖抑制率高,达(88.91±4.5)％.随肉桂醛作用时间延长,A375细胞分泌VEGF的量逐渐减少,72 h后各浓度间的抑制作用具有统计学意义(P＜0.01).40 μmol/L肉桂醛作用72 h后A375细胞分泌的VEGF含量低,为9.55 pg/ml.结论 肉桂醛能抑制人黑素瘤细胞增殖和VEGF的分泌,其抑制强度与药物浓度和作用时间成正比.
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多巴胺D1类受体对神经肽Y受体介导的促血管平滑肌细胞增殖的影响
目的 探讨多巴胺D1类受体对神经肽Y( neuropeptide Y,NPY)受体介导的Sprague-Dawley (SD)大鼠原代血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖的影响.方法 以NPY( 10-8～10-11mol/L)刺激SD大鼠胸主动脉培养的VSMCs,观察在D1类多巴胺受体激动剂Fenoldopam( 10-8 mol/L)存在的情况下,神经肽Y促VSMCs增殖作用的变化.细胞增殖的检测采用[3H]胸腺嘧啶核苷([ 3H]-TdR)掺入率的变化表示及MTT方法.结果 NPY呈浓度依赖性促进SD大鼠VSMCs的异常增殖,高增殖幅度达(77±9)％(P＜0.05),该增殖作用由NPY Y,受体亚型介导.多巴胺D1类受体激动剂Fenoldopam对VSMCs无增殖影响,但Fenoldopam可抑制NPY Y1亚型受体介导VSMCs的增殖作用,该作用通过PKA途径发挥作用.结论 多巴胺D1类受体激活抑制NPY受体介导的促VSMCs增殖作用,可能参与心血管疾病的发生、发展过程.
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男性青年体成分与军事体力作业能力相关性研究
目的 测定不同体能战士的体成分,并探讨军事体力作业能力与体成分间的相互关系,为构建我军军事体力作业能力预测及评估模型提供依据.方法 选取200名青年男性战士,根据GJB1337-92规定的方法测定5000m跑、引体向上、立定跳远的运动成绩和大摄氧量(VO2max),并参照其评价标准,将受试者按体能分为差、较差、中等、良好和优秀5个组,同时利用多频生物电阻抗技术(multiple frequency bioelectrical impedance analysis,MBIA)测定各组战士的体成分,并探讨战士体成分与军事体力作业能力相关性.结果 随着体能的增强,机体的体脂百分比(percentage body fat,PBF)逐渐下降,肌肉百分比(percentage body muscle,PBM)逐渐增加.其中PBM与VO2 max、引体向上成绩、立定跳远成绩显著正相关(r =0.30,0.48,0.18,P＜0.05),与5000m跑耗时显著负相关(r=-0.26,P＜0.01)；而PBF与VO2 max、引体向上成绩、立定跳远成绩显著负相关(r=-0.30,-0.47,-0.19,P＜0.05),与5000m跑时间显著正相关(r=0.25,P＜0.05)；腰臀脂肪比(waist-hip fat ratio)与VO2 max、引体向上成绩显著负相关(r=-0.16,-0.17,P＜0.05).结论 人体肌肉含量的增加与军事体力作业能力显著正相关,而脂肪含量的增加和腰臀脂肪比的升高与军事体力作业能力显著负相关,肌肉、体脂含量及腰臀脂肪比可作为我军军事体力作业能力预测与评估模型的重要参数因子.
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Smad4条件基因敲出小鼠的前庭功能检测
目的 通过设计的一系列前庭功能检测实验对同窝成组的软骨组织Smad4条件基因敲除野生型、杂合子、纯合子小鼠的前庭功能进行评估.方法 前庭功能检测方法:一般行为观察；空间姿势反射；游泳实验；前庭眼反射(VOR),使用前庭功能检查系统记录眼震电图；短声刺激前庭诱发肌源性电位(VEMP)记录麻醉下椎前颈长肌表面第3颈椎水平的声刺激诱发电位.结果 虽然软骨组织Smad4条件基因敲除小鼠的耳蜗感受声音能力下降,但没有发现软骨组织Smad4条件基因敲除小鼠出现行为、步态、空间姿势反射和游泳实验等前庭综合功能障碍；3个基因型小鼠均能诱出眼震且相互之间没有差别(P＞0.05)；VEMP的潜伏期在3个基因型组间无差异(P＞0.05),与野生型和杂合子相比,纯合子小鼠VEMP的反应阈值明显增加(P＜0.01).结论 只有Smad4条件基因敲除纯合子小鼠的部分球囊功能受到一定程度的影响,其他前庭功能不受影响.
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利用弥散张量成像评估中小量基底节区高血压脑出血微创手术的治疗效果
目的 利用弥散张量成像(diffusion tensor imaging,DTI)评估中小量基底节区高血压脑出血的微创治疗效果.方法 以101例中小量(10～40 ml)基底节区高血压脑出血患者为对象,根据治疗方式不同分为微创手术组(52例)和内科治疗组(49例),血肿体积为15～36 (23.36±7.24) ml.所有患者在发病后48 h内和发病后14 d进行DTI扫描,得到双侧皮质脊髓束(corticospinal tract,CST)的各向异性分数(fractional anisotropy,FA)及弥散张量纤维束成像(diffusion tensor tractography,DTT)图像,并根据CST完整性将微创手术组分为A(1～2级,22例)、B(3级,30例)两个亚组,比较微创手术组和内科治疗组之间及A、B亚组之间在以上指标的差异.结果 发病后首次DTI扫描显示微创手术组、内科治疗组受累侧的内囊区和大脑脚FA值均降低,两组间无明显差异(P＞0.05),第2次DTI扫描提示,微创手术组的FA值[内囊区(0.49±0.02)、大脑脚(0.47±0.03)]较内科治疗组[内囊区(0.39±0.02)、大脑脚(0.43±0.03)明显升高(P＜0.05)],且从DTT图像上可见微创手术组的CST恢复程度明显好于内科治疗组,提示对于这类患者微创手术治疗效果优于内科治疗.微创手术组的A亚组术后FA值[(0.51±0.02)高于B亚组(0.48±0.02)(P＜0.05)],提示CST损伤越小,手术效果越好.结论 微创治疗可以提高中小量基底节区高血压脑出血患者预后,尤其是DTT显示CST以推移、变形为主者(1～2级)应更为积极采取微创治疗.
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TGF-β1刺激下损伤的前交叉韧带和内侧副韧带中BMP-1基因的表达
目的 观察在转化生长因子-β1(transforming growth factor betal,TGF-β1)作用下,损伤的前交叉韧带(anterior cruciate ligament,ACL)和内侧副韧带(medial collateral ligament,MCL)中骨形态发生蛋白-1(bone morphogenetic protein-1,BMP-1)基因的表达,找出TGF-31、BMP-1之间的关系,揭示机械损伤后ACL和MCL细胞中BMP-1的表达差异.方法 采用反转录PCR(RT-PCR)和实时荧光定量PCR方法检测1、5、50 ng/ml TGF-β1处理后2h受损的ACL和MCL细胞中BMP-1的表达以及5 ng/ml TGF-β1作用2、6、12、24h受损的ACL和MCL细胞中BMP-1的表达；Western blot检测5 ng/mlTGF-β1处理48 h后受损的ACL和MCL细胞中BMP-1的表达.结果 受损的ACL和MCL细胞中BMP-1的基因表达比正常状态下偏高,并随着TGF-β1浓度的增大而增高,在MCL中的增高程度比在ACL中高出近1倍(P＜0.05)；与正常组相比,在5 ng/ml TGF-β1处理24h后,ACL细胞中BMP-1的表达在24h达到高比例(约为6.1倍),而在MCL中12h达到高比例(约为9.84倍,P＜0.05).5 ng/ml TGF-β1处理48 h后BMP-1蛋白也明显上调,与无TGF-β1处理的对照组相比,ACL细胞中BMP-1上调2.32倍,MCL细胞中BMP-1上调3.84倍(P＜0.05).结论 TGF-β1刺激BMP-1的变化可能直接影响到细胞外基质中活性赖氨酰氧化酶的表达,对损伤ACL和MCL的修复有极其重要的参考价值和临床意义.
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内皮祖细胞移植对大鼠短暂性大脑中动脉栓塞的治疗作用
目的 观察内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)移植在治疗大鼠短暂性大脑中动脉栓塞(transient middle cerebral artery occlusion,tMCAO)中的作用,探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在其中的可能作用机制.方法 培养、鉴定大鼠骨髓来源EPCs,通过颈内动脉移植到大鼠tMCAO模型.实验动物分为2组:PBS对照组、EPCs移植组,分别观察第1、3、5、7天各项指标.采用HE染色,观察大鼠缺血部位病理变化,采用TUNEL法检测嗅周皮质神经元凋亡情况、免疫组化法检测Caspase-3蛋白表达情况、Western blot检测缺血局部脑组织VEGF表达.结果 EPCs移植后第5天,大鼠缺血嗅周皮质TUNEL阳性细胞数逐渐减少到低值(54.68±3.12),Caspase-3蛋白表达也逐渐降低低值(31.24±2.73),对应的局部脑组织VEGF表达则逐渐升高到高值(0.99±0.03),EPCs移植组各时相点与PBS对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05).结论 EPCs移植tMCAO大鼠可抑制神经元凋亡,减轻缺血导致的神经损伤,部分作用机制可能是通过旁分泌VEGF降低Caspase-3活性这一途径实现的.
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重庆地区汉族与土家族正常殆颅颌骨形态的头影测量比较
目的 利用Delaire整体平衡分析法研究重庆地区汉族及土家族正常(牙合)青年颅颌骨形态结构,并进行分析比较.方法 选取符合正常(牙合)标准的18～26岁青年男性和女性153例(汉族:男性37例,女性41例；土家族:男性36例,女性39例),分别摄头颅侧位X线片,对其进行头影测量分析,计算2组的结构特征值并将其进行比较.结果 重庆地区汉族和土家族青年人群正常(牙合)中男性均较女性颏部后缩,男性下颌角及下颌平面相对女性顺时针旋转.余重庆地区汉族和土家族青年人群正常(牙合)中男性与女性颅骨结构特征数据无显著差异(P＞0.05).汉族青年人与土家族人颅颌骨形态值有显著差异(P＜0.05),汉族青年人的关节窝相对于土家族人来说,在矢状位要后移一些,更靠近颅底.土家族人颅底矢状向长度相对大些.结论 重庆地区汉族青年男女之间和土家族青年男女之间颅颌面特征基本相似.土家族青年人群面型相对直立.
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434例太田痣患者发病特征回顾性分析
目的 描述重庆及周边地区太田痣患者发病特征及变化规律.方法 收集第三军医大学西南医院整形美容科2006年1月至2011年1月临床确诊的太田痣患者434例(男性74例,女性360例；平均年龄24岁),对患者性别、年龄、发病年龄、发病时间、皮损颜色、分布及面积等情况进行统计学分析.结果 受调查患者男女比例为1∶4.86,后天患病者比例约为54.61％.后天患病者中,男性发病高峰出现在儿童早期(3～5岁),女性发病的两个高峰分别是5岁以前、10～14岁.近年来后天患者比例明显升高,病程长的患者黑色皮损比例较高.结论 重庆及周边地区近年太田痣的先后天发病比例随患病时间推移出现变化,皮损颜色与病程长短有关.
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水甘油通道蛋白在非酒精性脂肪变性肝细胞模型中的表达及意义
目的 研究水甘油通道蛋白(aquaglyceroporins)AQP3、AQP7、AQP9基因在油酸钠诱导的脂肪变性肝细胞模型中的表达变化及其意义.方法 以常规培养的人肝癌HepG2细胞为对照,采用油酸钠诱导HepG2细胞脂肪变性,建立非酒精性脂肪变性肝细胞模型,利用油红O染色及细胞内甘油三酯含量测定检测肝细胞脂肪变性程度,并分别于0、12、24、48 h采用实时荧光定量PCR与Western blot方法检测水甘油通道蛋白AQP3、AQP7、AQP9基因的表达.结果 油红O染色观察及肝细胞内甘油三酯含量测定显示HepG2细胞在油酸钠处理12 h后即开始出现脂肪变性,随着刺激时间延长,脂肪变性程度逐渐加重,肝细胞内甘油三酯含量在48 h组(79.76±0.75)较0h组明显升高(P＜0.05).模型组中,AQP3mRNA水平12h时表达开始减低,48 h时(0.39±0.08)表达低,与对照组相比差异具有统计学意义(P＜0.05)；AQP7mRNA表达与对照组相比略有升高,差异无统计学意义(P＞0.05)；而AQP9 mRNA表达水平自12 h(1.59±0.11)即开始增加,与对照组相比差异具有统计学意义(P＜0.05).模型组中,AQP3蛋白水平12 h时表达开始减低,24、48 h组[ (0.016±0.002),(0.012±0.001)]与对照组相比差异具有统计学意义(P ＜0.05)；AQP7蛋白表达与对照组相比较差异无统计学意义(P＞0.05)；AQP9蛋白水平12 h表达开始增高,24、48 h[(0.050 ±0.002)、(0.079 ±0.002)]组与对照组相比差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 肝细胞脂肪变性模型中水甘油通道蛋白AQP3表达下调、AQP9表达上调、AQP7表达无明显差异,提示不同亚型的水甘油通道蛋白可能通过不同的机制参与了肝细胞非酒精性脂肪变性.
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膀胱癌膀胱全切术后早期并发症及危险因素分析
目的 探讨中国人膀胱全切尿流改道术患者术后早期并发症及其危险因素.方法 回顾性分析313例行膀胱全切尿流改道术的膀胱癌患者的术后早期并发症,对并发症进行分级和分类,采用Logistic回归分析术后早期并发症的危险因素.结果 313例膀胱癌膀胱全切术患者术后共118例(37.7％)出现159例次19种早期并发症,重度术后早期并发症占22.9％,死亡4例占总并发症的3.4％ (4/118),死亡率为1.3％.并发症中术后不全性肠梗阻出现多(27例次,17.0％),分类分析显示生殖泌尿系统相关并发症比例高(59例次,37.1％).回归分析示年龄(P=0.014)和ASA分级(P=0.019)是术后早期并发症的高危因素,而尿流重建方式并不影响术后早期并发症.结论 膀胱癌膀胱全切尿流改道术术后早期并发症发生率较高,但重度并发症发生率低,死亡率低.膀胱癌患者的年龄、ASA评分、术后住院时间及输血量和术后早期并发症有关.
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miR-149-5p在肝细胞癌中的表达及其临床意义
目的 分析miR-149-5p在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中的表达及其临床意义.方法 应用qRT-PCR方法检测40对HCC癌组织和癌旁肝组织中miR-149-5p的表达,并分析miR-149-5p的表达与肝癌患者临床病理之间的关系,进一步将以红色荧光蛋白(red fluorescent protein,RFP)为报告基因的miR-149-5p慢病毒(LV-miR-149-5p)感染MHCC97-H肝癌细胞,以过表达miR-149-5p,采用MTT检测感染后细胞增殖的变化,采用流式细胞仪测定感染后细胞周期的变化,并采用Transwell侵袭实验检测感染后细胞的体外侵袭能力的变化.结果 qRT-PCR结果提示miR-149-5p在HCC癌组织中的相对含量(5.522±1.104)低于癌旁肝组织(9.279±1.594)(P＜0.05),统计分析表明miR-149-5p在癌和癌旁肝组织中相对含量的比值与AFP含量负相关(P＜0.05).体外实验证实,miR-149-5p过表达不能影响细胞周期但能抑制细胞增殖(P＜0.05),而在Transwell侵袭实验中,LV-miR-149-5p感染MHCC97-H细胞后,对照细胞组透膜细胞数为(86.3±11.8)/视野,对照慢病毒组透膜细胞数为(83.7±4.0)/视野,LV-miR-149-5p组透膜细胞数为(50.6±3.4)/视野,实验组细胞侵袭能力较对照组细胞显著降低(P＜0.05).结论 miR-149-5p的过表达可抑制MHCC97-H细胞的增殖和侵袭,因此,miR-149-5p可作为一种抑癌基因在HCC的诊断及治疗中发挥作用.
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人脐血单个核细胞移植改善雌鼠压力性尿失禁
目的 探讨人脐血单个核细胞(human cord blood mononuclear cells,HCMNCs)移植对压力性尿失禁(stress urinary incontinence,SUI)大鼠尿道括约肌的修复和功能重建作用.方法 采用反复阴道扩张的方法模拟产道损伤建立雌性SD大鼠SUI模型.40只大鼠按随机数字表法分为模拟组10只、实验组30只(移植组15只,实验对照组15只).羟乙基淀粉沉淀加密度梯度离心的方法制备HCMNCs,并以4,6-联脒-2-苯基吲哚(DAPI)标记.模型制作成功后即在移植组近端尿道注射已标记HCMNCs 2×106个,对照组注射相同质量PBS液.检测尿动力学指标后获取近端尿道组织,观察荧光细胞的形态和分布以及尿道括约肌的变化.结果 通过反复阴道扩张可建立SUI大鼠模型,HCMNCs可在受损尿道括约肌内存活、分布,移植组比较对照组尿道括约肌得以较好修复,SUI大鼠控尿能力明显改善.结论 HCMNCs可成功移植到SUI大鼠尿道括约肌,改善控尿,促进尿道括约肌的修复.
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转录因子FoxO1在食管鳞癌组织中的表达及其临床意义
目的 检测FoxO1在食管鳞状细胞癌组织中的表达水平,分析其与食管鳞状细胞癌各临床病理因素的关系.方法 应用实时荧光定量PCR SYBR Green荧光染料法,检测42例手术切除的食管鳞癌组织及配对的正常食管黏膜组织中FoxO1 mRNA的表达；免疫组化S-P法检测FoxO1蛋白的表达及组织学定位.结果 正常食管黏膜组织中FoxO1mRNA及蛋白均呈低表达,而食管鳞癌组织中FoxO1 mRNA及蛋白表达显著升高(P＜0.01).高分化食管鳞癌组织的相对表达量显著高于中低分化食管鳞癌组织(P＜0.01).食管鳞癌组织中FoxO1 mRNA及蛋白表达与患者性别、年龄、肿瘤发生部位、TNM分期及有无淋巴结转移无明显相关性(P＞0.05).结论 FoxO1在正常食管黏膜组织和食管鳞癌组织中的表达存在明显差异,其表达水平与肿瘤分化程度密切相关.
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胆汁酸G-蛋白偶联受体通过p38MAPK通路诱导巨噬细胞IL-1β、TNF-α和IL-6的转录
目的 观察胆汁酸G-蛋白偶联受体(G protein-coupled receptor for bile acids,TGR5)被齐墩果酸(oleanolic acid,OA)激活后对RAW264.7细胞白细胞介素-1(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor α,TNF-α)和白细胞介素-6( interleukin-6,IL-6)转录的影响及其机制的探讨.方法 通过实时荧光定量(Real-time)PCR法检测OA作用不同时间RAW264.7细胞和原代枯否细胞IL-1β、TNF-α和IL-6 mRNA的表达；并进一步分析在RAW264.7细胞中加入3种不同信号通路的抑制剂对上述3种炎症因子mRNA表达的影响.OA作用RAW264.7细胞和原代枯否细胞不同时间后,Western blot分析p38 MAPK的磷酸化水平.结果 OA刺激RAW264.7细胞6、12、24h后,IL-1β、TNF-α和IL-6 mRNA表达明显升高.OA作用于分离的原代枯否细胞3h和6h后,也可观察到相同的结果.p38 MAPK特异性抑制剂SB203580可以明显地抑制OA诱导的RAW264.7细胞内IL-1β、TNF-α和IL-6 mRNA的表达,但PKA和NF-KB的抑制剂无此作用.RAW264.7细胞和原代枯否细胞经OA刺激后,p38 MAPK磷酸化水平明显增强.结论 TGR5可能通过活化p38 MAPK磷酸化诱导炎症细胞IL-1β、TNF-α和IL-6 mRNA的表达,提示TGR5在无其他刺激因素作用下,具有诱导炎症因子表达的作用.
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肝结核误诊为原发性肝癌1例
结核病感染部位多见于肺部、肠和骨骼,而肝结核在临床上较为少见,原发性肝结核更是罕见[1].因其临床表现不具有特异性,尤其早期病变可无任何症状,或被肺和其他器官结核的症状所掩盖,过程隐匿[2],所以容易造成误诊或漏诊,本研究报告1例.
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双葛解酲丸对酒精性脂肪肝大鼠炎症及脂质代谢的影响
目的 探讨双葛解酲丸对酒精性脂肪肝模型的治疗效果.方法 将65只SD大鼠分为空白对照组(11只)和酒精性脂肪肝(alcoholic fatty liver,AFL)组(54只),后者给予白酒灌胃建立AFL模型.8周后,处死其中5只(空白对照组1只,AFL组4只)病理组织学检查以验证其造模成功,然后将AFL组进一步分为模型对照组、双葛解酲丸高剂量组、双葛解酲丸中剂量、双葛解酲丸低剂量组和海王金樽治疗组.治疗4周末处死所以大鼠,检测血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)、瘦素(leptin,LEP)、脂联素(adiponectin,ADP)和游离脂肪酸(free fatty acid,FFA).同时对肝脏进行病理切片组织学检查.结果 双葛解酲丸高剂量组大鼠血清IL-6[( 62.49±34.16)pg/ml]、TNF-α[ (3.25±0.20) ng/ml]、FFA[ (572.16 ±45.37) μmol/L]和LEP[( 1.89 ±0.21) ng/ml]明显低于模型对照组与海王金樽治疗组(P＜0.01),血清ADP[ (3.05±0.27) mg/ml]明显高于模型对照组[(2.17±0.37) mg/ml]与海王金樽治疗组[ (2.69±0.32) mg/ml,P＜0.01)],双葛解酲丸对大鼠肝脏的脂肪变性及炎症有明显改善.结论 双葛解酲丸对酒精性脂肪肝有治疗作用.
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G蛋白偶联受体激酶4对大鼠血管平滑肌细胞AT1受体的调节作用
目的 应用siRNA干扰抑制大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞G蛋白偶联受体激酶4(G protein-coupled receptor kinase 4,GRK4)的表达,探讨GRK4对血管紧张素Ⅱ1型(angiotensinⅡtype1,AT1)受体的调节作用.方法 免疫组化检测大鼠回结肠动脉血管平滑肌组织GRK4蛋白表达；以大鼠胸主动脉平滑肌细胞株(A10细胞株)为研究对象,免疫印迹检测GRK4、AT1受体蛋白表达变化,免疫共沉淀检测GRK4和AT1受体的相互作用和AT1受体磷酸化改变.结果 大鼠动脉平滑肌组织GRK4表达良好；siRNA干扰后,GRK4蛋白表达明显下降(P＜0.05)；AT1蛋白表达降低(P＜0.05),AT1受体磷酸化明显增强(P＜0.05)；GRK4和AT1受体存在共连接,抑制GRK4表达后增加GRK4与AT1受体之间的共连接.结论 GRK4能够调控大鼠胸主动脉平滑肌细胞AT1受体蛋白表达及其磷酸化状态,该调节作用可能与两者的共连接有关.
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兔动脉粥样硬化组织COX-2、mPGES-1表达及阿伐他汀的影响
目的 通过观察环氧化酶Ⅱ(cyclooxygenase-2,COX-2)、诱导型前列腺素合成酶Ⅰ(membrane associated prostaglandin E-1,mPGES-1)在兔动脉粥样硬化(AS)斑块中的表达水平及阿伐他汀对其的干预作用.方法 取40只体质量为2.0～2.2 kg的3月龄健康雄性新西兰兔,随机分为正常对照组8只(普通饲料)；高脂模型组32只(高胆固醇饲料).8周后将高脂模型组再分为模型组、阿伐他汀治疗Ⅰ组、Ⅱ组及Ⅲ组[剂量分别为2.5、5及10 mg/(kg·d),n=8].6周后取各组兔冠状动脉,检测其COX-2及mPGES-1的表达；同时,采血检测各组血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及极低密度脂蛋白胆固醇(VLDL-C)浓度.结果 模型组血清TC、TG、HDL-C、LDL-C及VLDL-C水平与正常对照组比较差异显著(P＜0.05)；而阿伐他汀治疗Ⅱ组及Ⅲ组上述各项指标与模型组比较差异显著(P＜0.05)；阿伐他汀治疗l组各项血脂水平较之模型组无显著差异(P＞0.05).与正常对照组比较,模型组动脉粥样硬化组织的COX-2及mPGES-1表达显著增高(P＜0.05)；与模型组比较,治疗Ⅱ组、Ⅲ组动脉粥样硬化组织的COX-2及mPGES-1表达明显下调(P＜0.05).结论 阿伐他汀可能通过降低COX-2/mPGES-1表达、降低血脂,进而发挥其对AS的治疗作用.
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BISAP与Ranson's评分对急性胰腺炎患者预后评估的比较
目的 比较BISAP评分与Ranson's评分在预测急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)的严重度及病死率方面的运用价值.方法 以2007年6月到2010年10月入住本院的AP患者为研究对象,资料完整诊断明确者共有652例,采用BISAP( the bedside index for severity in AP)评分与Ranson's评分比较,受试者工作特性曲线(receiver-operating curve,ROC)行回顾性分析,在预计AP的严重度及病死率方面的差异.结果 在652例患者中,通过发病48 h内出现器官衰竭确定为重症者108例(16.6％),共死亡21例(3.2％),BISAP评分≥3分的44例(6.7％),入院48 h内Ranson's评分≥3分者213例(32.7％).BISAP与Ranson's评分二者在评价预后方面的差异有统计学意义,其中严重度的曲线下面积BISAP、Ranson's评分系统分别为:0.846(95％CI0.808～0.883),0.771 (95％ CI0.722 ～0.820)；死亡率分别是:0.809(95％ CI 0.699～0.920),0.762(95％CI0.638 ～0.885).结论 BISAP评分系统在急性胰腺炎早期,针对患者严重度、死亡率的预后评估的准确性明显高于Ranson's评分,是目前简易、及时、连续性强并且对患者而言经济花费少的评分系统,可在临床广泛推广.
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细胞外ATP对U87胶质瘤细胞生长和侵袭的作用
目的 观察细胞外三磷酸腺苷(adenosine Triphosphate,ATP)对体外培养的U87人脑胶质瘤细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响.方法 采用MTT法检测不同浓度细胞外ATP对U87胶质瘤细胞增殖的影响；以相同条件下不加ATP作为对照组,以加入100 μmol/L ATP作为处理组,采用Transwell细胞侵袭实验检测100 μmoL/L细胞外ATP对U87胶质瘤细胞侵袭能力的影响；用时间显微镜动态观察100 μmoL/L的ATP作用下U87胶质瘤细胞的迁移情况.结果 高浓度(5 000 μmol/L)细胞外ATP对U87胶质瘤细胞增殖有显著抑制作用,较低浓度(50、100、500 μmol/L)细胞外ATP对U87胶质瘤细胞增殖无明显影响,5 000 μ mol/L ATP组与其他浓度组比较,差异有统计学意义(P＜0.05)；Transwell侵袭实验中,处理组细胞跨膜细胞数为( 163.83±17.81)明显多于对照组(89.83±13.27)(P＜0.01)；迁移实验中,处理组细胞运动速度为(163.83±17.81) μm/h,对照组细胞运动速度为(89.83±13.27) μm/h,2组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 100 μmol/L的细胞外ATP对体外培养的U87胶质瘤细胞的侵袭和迁移具有明显促进作用.
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以纤维蛋白溶解综合征为主要表现的主动脉夹层1例
1临床资料患者,男性,81岁,因发现全身瘀斑、血细胞减少5d,发热1d于2010年8月25日入院.入院前5d因“突发头晕、呕吐、右上肢乏力”就诊当地医院,查头颅MRI示:多发腔隙性梗死;予丹参酮Ⅱa改善循环处理,头晕、呕吐等症状缓解,但出现皮肤粘膜多处瘀斑,查血常规:WBC 8.6×109/L,HGB 112 g/L,PLT 76×109/L;凝血全套:Fib 0.67 g/L,PT和APTT等指标正常;继续丹参酮Ⅱa治疗,皮肤瘀斑范围扩大,并出现发热,体温高37.5℃,无畏冷,复查血常规:WBC 9.3×109/L,Hb 77 g/L,PLT 87×109/L;遂转诊我院.
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罕见颈胸腹连体分离术后患儿营养治疗体会
我院心外科自1996年10月至2011年5月,共收治了5例连体儿(1例腹部连体、2例胸腹连体、1例颈胸腹连体、1例头部连体).5例连体儿出生时体质量在4.8～5.7 kg范围内,体质量偏低,存在轻度营养不良,现将第4例连体儿(颈胸腹连体儿)的营养治疗经验总结如下.
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两种附着体覆盖义齿在下牙列缺失种植中的应用
下颌牙列缺失经过一段时间的常规下颌全口义齿的修复后,牙槽嵴吸收严重.如何使这类患者通过治疗,具有固位稳定及良好咀嚼效率的修复体是临床医师需要解决的棘手问题.本研究通过在下牙列缺失前牙区种植种植体,待种植体骨性愈合后,做球帽状精密附着体及磁性附着体全口覆盖义齿修复,并对二者临床应用效果进行研究.
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心室同步化治疗并发冠状静脉窦夹层1例
心脏同步化治疗(cardiac resynchronization therapy CRT)已经成为缺血性或扩张型心肌病合并慢性心衰及心室不同步患者的Ⅰ类适应症(证据水平A)[1-2].CRT植入技术相对较困难,除常规右房、右室起搏外,CRT还需行左室起搏,常用的是经冠状静脉窦( coronary sinus,CS)将左室电极导线送到心脏静脉起搏左室.本研究报告1例植入CRT过程中并发CS夹层继续手术获得成功.
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有晶体眼后房型人工晶状体植入81眼术后早期高眼压的原因分析
目前,矫治屈光不正的常用手术方法包括角膜屈光手术和眼内屈光手术等.随着晶体材料的改进以及显微手术的不断发展,眼内屈光手术尤其是有晶体眼后房型人工晶状体(implantable contact lens,ICL)植入术以其矫正度数高、效果稳定丽越来越多的应用于临床,由于病例数的增多,其术后并发症也越来越受到临床的关注[1].本研究按ICL术前纳入标准共纳入41例(81眼)患者,收集其ICL术后围手术期内患者的临床资料,通过对术后高眼压的观察从而推测导致眼压升高的影响因素,以便在高眼压发生时及时做出有针对性的处理,提高手术疗效.
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右美托咪定与咪唑安定在腰-硬联合麻醉下的镇静作用比较
右美托咪定是新型的α2-肾上腺受体激动剂,具有镇静、镇痛及抗焦虑的麻醉辅助作用,常应用于ICU镇静、全麻辅助用药以及神经外科手术的麻醉等[1].目前较少将右美托咪定用于区域麻醉的镇静[2],本研究右美托咪定在腰-硬联合麻醉术中的镇静作用,并与咪唑安定作比较,报告如下.
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氟比洛芬酯复合吗啡用于子宫次全切除患者术后镇痛的疗效分析
阿片类药物吗啡用于术后镇痛效果确切,已广泛使用于临床,但易导致恶心呕吐、皮肤瘙痒、尿潴留和呼吸抑制等不良反应.氟比洛芬酯( flurbiprofen axetil,商品名凯纷,北京泰德制药有限公司)是一种通过抑制前列腺素合成发挥镇痛效应的非甾体类抗炎镇痛药(NSAIDs),具有抗炎、止痛及解热作用,临床用于疼痛或炎症疾病的治疗[1],其对术后镇痛的临床研究亦有很多报道.我院将氟比洛芬酯复合吗啡用于子宫次全切除患者术后镇痛,以减少吗啡的不良反应,提高术后镇痛的效果,现报告如下.
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参附注射液对实验心源性休克犬血浆NO、iNOS及心肌iNOS mRNA的影响
目的 观察参附注射液对心源性休克犬血浆NO、iNOS含量及心肌iNOS mRNA的影响.方法 选择健康成年家犬15只,体质量(14.0±2.7)kg,雌雄不拘.完全随机分为参附组、模型组,并设假手术组(n=5),在结扎前,休克时,给药后30、60、120、180 min抽血,用比色法测血浆NO、iNOS的含量,180 min时取心肌组织,用RT-PCR法测心肌iNOSmRNA的表达,同时监测犬的心功能指标.结果 参附注射液能降低心源性休克时升高的NO[ (66.54±2.42) μmol/Lvs(45.31 ±3.39) μmol/L]、iNOS[(6.60±0.23)U/ml vs( 5.13±0.23)U/ml]水平(P＜0.01),并下调心肌iNOS mRNA的基因表达.参附注射液给药可显著增加心源性休克犬的CO和Cl,明显降低动物的TPVR.结论 参附注射液可以降低血浆中NO和iNOS的水平,抑制心肌iNOS mRNA的表达.
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地塞米松诱导的胰岛素抵抗HepG2细胞模型的建立及鉴定
目的 体外用地塞米松诱导培养法建立及鉴定肝胰岛素抵抗细胞模型.方法 将HepG2细胞置于含不同浓度地塞米松培养基中培养24h,用含胰岛素的新鲜培养基刺激24h,采用葡萄糖氧化酶-过氧化物酶(glucose oxidaseperoxide enzyme,GOD-POD)法检测细胞对葡萄糖的消耗情况,蒽酮法检测细胞内糖原含量,利用Western blot检测细胞内胰岛素受体底物-2表达的变化.结果 用地塞米松处理HepG2细胞24h后,细胞对胰岛素的敏感性显著降低,1.0、3.3、10.0 μmoL/L地塞米松组葡萄糖消耗分别为(0.637±0.018)、(0.535±0.018)、(0.471±0.011) mmol/L(P ＜0.05,P＜0.01),细胞内糖原含量分别为(2.83 ±0.13)、(2.42±0.10)、(2.23±0.06) μmol/mg(P ＜0.05,P＜0.01),胰岛素受体底物-2表达量均下降(P＜0.05,P＜0.01).结论 体外地塞米松诱导培养法可以成功建立肝胰岛素抵抗细胞模型,此细胞模型出现胰岛素抵抗的机制可能与IRS-2表达的下调有关.
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人腱止点软骨细胞的分离培养及形态学特征观察
目的 探讨人膝关节前交叉韧带( anterior cruciate ligament,ACL)腱止点软骨细胞的分离方法,观察软骨细胞的生物学特性.方法 取1例来源于交通事故的健康志愿者膝关节前交叉韧带腱止点标本,胰蛋白酶去除纤维组织后Ⅱ型胶原酶消化,观察细胞形态变化,使用甲苯胺蓝染色鉴定软骨细胞表型.结果 甲苯胺蓝染色见软骨细胞内蓝紫色异染颗粒,细胞核深染；细胞周围有少量异染颗粒出现.Ⅱ型胶原免疫组化染色:软骨细胞细胞质被染成棕黄色,细胞核不着色,具有软骨细胞共同生物学特性.结论 成功分离提取了腱止点软骨细胞,其形态和生物学特性与关节软骨细胞相似,但细胞密度低于相同方法分离的关节软骨细胞.
