注射液用溴化丁基胶塞中肉桂醛的含量测定及迁移研究

建立了固相萃取-高效液相色谱法对氯化钠注射液进行富集处理,并对注射液用溴化丁基胶塞提取实验及其在氯化钠注射液迁移实验中可能残留的硫化剂N,N-双肉桂醛-1,6-己二胺降解物肉桂醛含量进行测定.结果显示,肉桂醛在0.03098～3.098μg/mL范围内线性良好(R=0.9973),仪器检测限为0.007744μg/mL,氯化钠注射液平均加标回收率为106.6％,对应RSD值为3.34％.该方法测定快速、灵敏度高、准确性和重复性均良好,可用于注射液用溴化丁基胶塞及氯化钠注射液中肉桂醛和硫化剂的质量检测.

肉桂和肉桂醛对氧自由基诱导的自发性高血压大鼠离体主动脉收缩的抑制作用

肉桂醛对0℃冷应激大鼠背根神经节神经细胞胞浆内Ca2+变化及TRPA1和TRPM8mRNA表达的影响

目的:观察肉桂醛对0℃冷应激大鼠背根神经节神经细胞胞浆内Ca2浓度变化,并探讨其对瞬时受体电位通道蛋白A1(TRPA1)和M8(TRPM8) mRNA表达的影响.方法:取大鼠原代背根节神经细胞置于0℃冷应激状态,噻唑蓝(MTT)法检测不同时长冷应激状态下细胞的活性;加入肉桂醛,采用激光共聚焦显微镜观察细胞内外Ca2分布的变化;另以实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测其TRPA1,TRPM8 mRNA的表达.结果:不同时长的冷应激状态下,细胞存活度无明显差异;冷应激可降低背根神经节(DRG)神经细胞胞浆内Ca2浓度(P＜0.05),一定量的肉桂醛则能使Ca2+浓度显著升高(P＜0.01).Real-time PCR检测显示,长时间冷应激TRPA1 mRNA表达上调(P＜0.05);长时间冷应激TRPM8 mRNA表达明显要高于短时冷应激(P＜0.05);适当浓度的肉桂醛使冷应激大鼠DRG神经细胞TRPA1 mRNA表达升高(P＜0.05,P＜0.01),对TRPM8 mRNA的影响尚不明显.结论:冷应激能影响TRPA1,TRPM8 mRNA的表达,降低胞浆内Ca2浓度,作用机制可能为肉桂醛通过活化TRPA1通道,升高细胞浆内Ca2浓度.

基于药效物质基础的肉桂和赤石脂相畏研究

目的:采用HPLC测定肉桂单煎液和肉桂与赤石脂不同比例配伍合煎液的水提液和挥发油中肉桂酸和肉桂醛的含量,从药效物质基础变化研究赤石脂对肉桂的相畏作用.方法:取肉桂,肉桂1∶1配伍赤石脂和肉桂1∶3配伍赤石脂3组药材,采用加热回流提取和挥发油提取法同时提取,同时收集水提液和挥发油两组成分,对提取成分采用HPLC分析.采用Phenomenex-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),柱温30℃,流速1.0 mL·min-1,检测波长254 nm,流动相乙腈(A)-0.1%磷酸(B),二元线性梯度洗脱0～30 min,90%B～65%B(10%A～35%A);30～50 min,65%B(35%A)的条件,测定水提液中肉桂酸和肉桂醛的含量.采用Phenomenex-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),柱温30℃,流速1.0 mL·min-1,检测波长280 nm,流动相乙腈(A)-0.1%磷酸(B),0～30 min,65%B(35%A)的条件,测定挥发油中肉桂醛的含量.结果:肉桂1∶1配伍赤石脂及肉桂1∶3配伍赤石脂水提液中肉桂酸的含量照单煎肉桂药材分别下降30.71%,53.54%,未检测到肉桂醛.挥发油中肉桂醛含量分别下降7.21%,75.89%.结论:肉桂与赤石脂配伍后肉桂酸和肉桂醛含量均下降,且下降程度与赤石脂比例有关.

肉桂醛标准样品的研制

目的:依据GB/T 15000.3-2008《标准样品工作导则(3)标准样品:定值的一般原则和统计方法》,在国家标准化管理委员会批准立项的基础上,研制肉桂醛国家标准样品.方法:以樟科植物肉桂的干燥树皮为原料,通过提取,NaHS03加成反应,制备高效液相色谱,纯化得到了肉桂醛样品,采用元素分析,UV,IR,MS和NMR进行了结构鉴定.进行了薄层色谱的鉴别.建立了高效液相色谱紫外检测分析技术.样品分装成200瓶(每瓶20 mg)样品后,进行了均匀性检验、稳定性检验和8家实验室的联合定值.结果:该样品均匀性良好,0～8℃条件下,24个月内稳定性良好,定值结果为98.41％,95％置信区间的扩展不确定度为0.06％,达到了国家标准样品的技术要求,通过了国家标准化管理委员会组织的验收.结论:成功地研制了肉桂醛国家标准样品,可用于肉桂醛含量测定、检测方法评定、相关产品的检测与质量控制.

热敏通道理论与引火归元

引火归元是中医的治疗方法之一,也是肉桂的主要功效之一.根据热敏通道原理,肉桂中的肉桂醛是寒通道TRPA1的激动剂,具有清热的特性能够清火,而肉桂醛也能通过大脑激活肾上腺分泌肾上腺素产生全身的热感,而有温阳作用,二者功效的叠加产生了引火归元药效.

均匀设计优选肉桂挥发油的β-环糊精包合工艺研究

肉桂为樟科植物肉桂Cinnamomum cassia Presl的干燥树皮,功能补火助阳,引火归源,散寒止痛,活血通经.含挥发油(肉桂醛)、桂皮多糖、鞣质、倍半萜、二萜类化合物等.

肉桂与黄连不同配伍比例对交泰丸水煎剂中肉桂醛溶出率的影响

目的 探讨肉桂与黄连不同配伍比例对交泰丸中肉桂醛溶出率的影响.方法 采取水煎法制备肉桂煎剂、交泰丸复方煎剂1(肉桂∶黄连=1∶2)、交泰丸复方煎剂2(肉桂∶黄连=1∶4)、肉桂醛对照品储备液(0.2 μg/ml),采用高效液相色谱法(HPLC)得到各样品的高效液相色谱图,计算各样品肉桂醛溶出率.结果 以肉桂煎剂的肉桂醛溶出率为100％计算,则交泰丸复方煎剂1、交泰丸复方煎剂2的肉桂醛溶出率分别为64.5％、47.3％.结论 交泰丸水煎剂中黄连对肉桂有效成分肉桂醛的溶出有抑制作用.

肉桂醛对db/db小鼠胰腺抗氧化能力的影响

目的 观察肉桂醛(CA)对db/db小鼠胰腺细胞的抗氧化活性的影响,并探讨其降糖机制.方法 将21只db/db小鼠随机分为对照组(Con)、CA低剂量组、CA高剂量组,分别予安慰剂,CA低剂量和CA高剂量.灌胃3周后,检测各组血糖、血清和胰腺组织抗氧化酶活性及胰腺细胞线粒体活性等.结果 与Con组比较,CA低剂量和CA高剂量组血糖降低(P＜0.05);CA高剂量组胰腺抗氧化酶的活性均增强,胰腺细胞线粒体活性氧簇(ROS)量降低(P＜0.05);CA低剂量组ROS量与Con组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).此外,给药组线粒体膜电位均高于Con组,CA高剂量组琥珀酸脱氢酶(SDH)活性增加(P＜0.05). 结论 CA能降低db/db小鼠血糖,其作用机制是通过提高胰腺组织抗氧化酶活性,减少体ROS等自由基的产生,从而保护线粒体功能,保护胰腺细胞.

肉桂醛对高糖心肌成纤维细胞增殖及胶原蛋白的影响和机制

目的 研究肉桂醛对高糖诱导心肌成纤维细胞增殖,Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白分泌的影响及细胞外信号调节激酶1/2 (ERK1/2)信号通路的作用.方法 体外培养新生大鼠心肌成纤维细胞,MTT检测肉桂醛对高糖环境下细胞增殖的影响;ELISA检测Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达;RT-PCR检测Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白mRNA的表达;Western blot检测ERK1/2、p-ERK1/2的蛋白表达.结果 与对照组比较,高糖组成纤维细胞增殖及Ⅰ、Ⅲ胶原蛋白表达增加(P＜0.05).与高糖组比较,肉桂醛组心肌成纤维细胞磷酸化ERK1/2蛋白表达降低[(3.14土0.12)vs(2.01±0.08),P＜0.05)].结论 肉桂醛能抑制高糖诱导的心肌成纤维细胞增殖及Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达的增加,其作用可能与下调ERK1/2活性有关.

肉桂醛促进神经细胞线粒体功能并抑制Aβ毒性

一些研究表明肉桂及其主要活性成分肉桂醛具有抗阿尔兹海默症(AD)活性.为了阐明肉桂醛的作用机制、促进抗AD药物开发,本文研究了肉桂醛对SH-SY5Y神经细胞特别是线粒体的作用.实验结果表明,肉桂醛能够促进神经细胞在有和无β-淀粉状蛋白(Aβ)负载下的细胞活力,其作用机制包括:保护和恢复Aβ损伤的正常线粒体形态、维持线粒体膜电位和降低ROS的产生.肉桂醛导致Drp1蛋白表达可能与其阻止Aβ诱导线粒体裂解有关.此外,肉桂醛也能抑制Aβ的寡聚化,降低其细胞毒性.但肉桂醛对SH-SY5Y神经细胞Tau蛋白的磷酸化却没有明显作用.总之,肉桂醛可促进神经细胞线粒体功能并抑制Aβ毒性,这两个机制在神经保护方面互相关联.本文结果提示肉桂醛可以作为保健药物用于AD和其他衰老性代谢疾病的防治.

钒化合物与肉桂醛共同作用改善β淀粉样蛋白损伤的SH-SY5Y神经细胞活力

阿尔茨海默症(Alzheimer's disease,AD)是老年人群中常见的认知障碍疾病之一.阿尔茨海默症与糖尿病(diabetes mellitus,DM)拥有某些相似的病理机制,因此我们推测抗糖尿病钒化合物可能具有抗AD活性.本文研究了双乙酰丙酮氧钒(vanadyl acetylacetonate,VO(acac)2)和肉桂醛(cinnamaldehyde,CA)对SH-SY5Y神经细胞及AD模型的作用.结果显示,VO(acac)2在微摩尔浓度水平可以提高SH-SY5Y神经细胞及过表达p淀粉样蛋白(Aβ)细胞的活力;VO(acac)2与CA的联合使用对正常和负载Aβ的神经细胞都具有加和的保护作用.更进一步实验发现,VO(acac)2可以激活神经细胞中PPARγ-AMPK的信号转导通路,抑制导致Tau蛋白的过度磷酸化的重要酶—GSK 3β的活化;而CA可以恢复Aβ诱导的线粒体分裂,从而增强线粒体功能.此外,VO(acac)2与CA都能降低细胞内活性氧水平并抑制毒性的低分子量Aβ寡聚体形成.综上所述,VO(acac)2能与CA协同作用,改善p淀粉样蛋白导致的神经细胞损伤.本工作为钒金属药物的应用提示了新的发展方向.

多指标综合评分法对肉桂不同软化方法的比较研究

目的 以水溶性浸出物、挥发油、肉桂醛及肉桂酸的含量为指标对浸泡法、淋润法、减压冷浸法这3种软化方法 进行研究,选出肉桂的佳软化方法.方法按照《中国药典》规定的方法测定各组样品的水溶性浸出物及挥发油含量,采用高效液相色谱法(HPLC)测定肉桂醛及肉桂酸的含量,采用多指标综合评分法分析结果 .结果各指标综合评分结果为减压冷浸法>浸泡法>原药材>淋润法.结论 减压冷浸法制得的饮片色泽好、香气浓烈,软化时间短,有效成分损失较少,减压冷浸法为肉桂佳的软化工艺.

肉桂醛减轻压力负荷诱导的小鼠心肌纤维化的实验观察

目的 探讨肉桂醛减轻压力负荷诱导的心肌纤维化的具体机制.方法 采用主动脉缩窄术(AB)建立小鼠压力负荷诱导的心肌肥厚和纤维化模型,应用随机数字表法将24只小鼠分为对照组、模型组和肉桂醛处理组,每组8只;采用免疫组织化学染色CD31检测各组血管密度;采用免疫荧光染色标记各组间质细胞标志物α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达改变;采用免疫印迹法检测各组内皮细胞相关标志物和间质细胞相关标志物的表达改变;筛选可能的分子通路;离体实验采用TGFβ1刺激脐静脉内皮细胞向间质转化进一步验证机制.结果 术后8周,模型组小鼠心脏血管密度明显减少,间质细胞标志物表达增加(α-SMA:2.57±0.17;Vimentin:0.58 ±0.01),内皮细胞标志物表达减少(CD31:0.58 ±0.12;CD34:0.62 ±0.09);而肉桂醛处理明显改善小鼠心脏血管密度的减少,增加内皮细胞标志物的表达(CD31:1.51±0.05;CD34:2.37±0.19;P＜0.05),减少间质细胞标志物的表达(α-SMA:1.22±0.06;Vimentin:0.35 ±0.01;P ＜0.05).肉桂醛主要是通过调节转化生长因子(TGFβ)/smad信号通路发挥上述作用.离体实验结果显示10 nmoL/L肉桂醛抑制TGFβ1诱导的内皮细胞向间质转化.结论 肉桂醛通过抑制内皮向间质转化减轻压力负荷诱导的心肌纤维化,其主要通过调节TGFβ/smad信号通路发挥上述作用.

肉桂醛和柠檬醛对黄曲霉及烟曲霉细胞DNA与RNA的影响

目的研究肉桂醛、柠檬醛对黄曲霉和烟曲霉细胞DNA、RNA水平的影响,以期探明其抗真菌的作用机制.方法黄曲霉、烟曲霉接种在含有不同浓度药物的蔡氏固体培养基中,同时设不加药物为空白对照,置26.5℃恒温培养3～6 d,将对照组和用药组真菌细胞进行激光扫描共聚焦显微镜观察并作细胞扫描图像分析,以对DNA、RNA进行定量和定位观察.结果用药组DNA、RNA水平发生不同变化,出现多核分生孢子.结论肉桂醛、柠檬醛直接或间接影响了真菌细胞遗传物质的正常合成,以至不能完成正常细胞周期,影响分生孢子梗的正常分化,从而抑制真菌生长、繁殖.

肉桂醛与柠檬醛抗曲霉菌作用机制的研究

曲霉菌是深部真菌感染的常见病原菌.由于真菌对现有临床使用药物具有抗药性以及药物存在不良反应,人们一直在寻找高效低毒的抗真菌药物.中药副作用小,来源广,价格低廉,较少出现耐药等,使研究开发抗真菌中药具备良好前景.目前对中药的抗真菌作用研究大多停留在从中药中分离抗真菌活性成分,对其机制较少涉及,特别是抗曲霉菌作用机制报道甚少.本研究采用扫描电镜及同位素标记技术,探讨具有良好抗曲霉菌作用的中药活性成分肉桂醛与柠檬醛的抗真菌机制,为开发和研制更理想的抗真菌药物提供有益的线索和理论依据.

肉桂醛微乳的制备及其抑菌活性研究

目的 制备肉桂醛微乳并考察其溶解量、稳定性和抑菌活性.方法 采用相转化法初步筛选出可行的表面活性剂,再采用伪三元相图法选择佳的表面活性剂并制样,用UV法测定肉桂醛大溶解量.用透射电子显微镜观察其形态,纳米粒度分析仪测量其粒径及分布.在不同处理条件下观察变化以评价其稳定性.通过测定其对不同细菌及真菌的小抑菌浓度(MIC)评价其抑菌活性.结果 制备出澄清透明的肉桂醛微乳,佳表面活性剂是聚氧乙烯氢化蓖麻油-40 (RH40)；肉桂醛的大溶解量是(98.88±0.31)mg/mL；肉桂醛微乳的稳定性良好,在本实验的处理条件下均保持澄清透明；肉桂醛微乳对所选细菌的MIC集中在125 μg/mL,对所选真菌的MIC介于16～62 μg/mL.结论 制备的肉桂醛微乳具有较大的载药量、良好的稳定性和较好抑菌效果,达到预期目标.

宝泻灵提取物的体外透皮吸收研究

目的 研究不同透皮促进剂对宝泻灵提取物中各指标性成分体外经皮渗透的影响,筛选出有效的透皮吸收促进剂.方法 采用改良的Franz扩散池,以离体大鼠皮肤为透皮屏障,通过体外透皮实验,用高效液相色谱法测定不同渗透促进剂对提取物中各指标性成分吴茱萸次碱、丁香酚和肉桂醛的累积渗透量、透皮渗透速率等体外透皮吸收动力学参数的影响.结果 低比例氮酮、以及3%氮酮与不同比例丙二醇联合使用时的累积渗透量均有明显提高,其中以3%氮酮+10%丙二醇作为复合促进剂时的促渗作用强.结论 通过考察渗透促进剂对宝泻灵提取物各指标性成分的影响,为研究其透皮给药提供了参考依据.

肉桂醛和柠檬醛对烟曲霉细胞膜中麦角甾醇生物合成的影响

目的研究肉桂醛、柠檬醛对烟曲霉中麦角甾醇生物合成的影响.方法将烟曲霉接种在含有不同质量浓度药物的蔡氏固体培养基中,同时设不加药物为空白对照,置26.5 C恒温培养5 d,刮取平皿上菌苔,称质量、皂化、提取烟曲霉菌中的难皂化脂,高效液相色谱法测定其中的麦角甾醇.结果柠檬醛质量浓度为0.11μg/mL、肉桂醛质量浓度为0.16 μg/mL作用于烟曲霉后,麦角甾醇的质量分数显著降低.结论肉桂醛和柠檬醛影响了烟曲霉中麦角甾醇的生物合成.

桂皮及肉桂醛对氧自由基所致自发性高血压大鼠离体主动脉收缩的抑制作用