第三军医大学学报杂志
Journal of third military medical university 제삼군의대학학보
- 主管单位： 第三军医大学
- 主办单位： 第三军医大学
- 影响因子： 1.01
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1000-5404
- 国内刊号： 50-1126/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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串联亲和纯化技术筛选肠病毒71型3D聚合酶的相互作用蛋白
目的 利用串联亲和纯化技术筛选与肠病毒71型3D聚合酶相互作用的宿主细胞蛋白.方法 利用RT-PCR方法从EV71BrCr株全基因组中获得3D聚合酶全长基因,构建pcDNA3.0-3D-Flag-HA真核表达载体并转染RD细胞,48 h后收集细胞.用Western blot方法检测3D蛋白在RD细胞内的表达情况.串联亲和纯化技术筛选与3D聚合酶相互作用的宿主蛋白并进行质谱分析,确定与3D聚合酶相互作用的蛋白或多肽.并采用免疫共沉淀实验,对候选蛋白CyclinG1与3D的相互作用进行验证.结果 成功构建了pcDNA3.0-3D-Flag-HA载体,在RD细胞内检测到3D蛋白的表达.经串联亲和纯化和质谱分析得到LATS2、Nek2、APC5、CyclinG1、PI3K等一系列参与细胞凋亡及细胞周期调控的蛋白.免疫共沉淀实验证实3D蛋白与CyclinG1的相互作用.结论 3D聚合酶可能与宿主细胞内蛋白相互作用,引起细胞凋亡及细胞周期改变.
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人乳头瘤病毒假病毒体外感染模型的建立及人α防御素5抗病毒作用
目的 建立用人乳头瘤病毒16亚型假病毒(HPV-16 Psv)感染官颈癌细胞模型,并研究3种不同构型人α防御素5(HD-5)抗HPV的作用.方法 将表达HPV-16假病毒衣壳蛋白的重组质粒p16L1L2和含绿色荧光蛋白(GFP)报告基因的质粒Pfwb共转染293FT细胞,分离、纯化病毒颗粒后感染官颈癌细胞株C-33a,同时分别给予20 μg/ml的HD-5/N(天然构型)、HD-5/Acm(半胱氨酸被Acm修饰)或HD-5/Abu(半胱氨酸被Abu替换)处理,培养48 h后荧光显微镜观察和流式细胞分析病毒感染率.结果 Pfwb与P16L1L2成功转染293FT细胞并获得滴度达2.5×108TU/ml的HPV-16假病毒液,镜检和流式细胞术检测显示官颈癌细胞C-33a能够被假病毒感染并表达GFP.HD-5/N、HD-5/Acm和HD-5/Abu对HPV-16感染C-33a细胞的抑制率分别为(96.48±5.67)％、(69.02±7.88)％和(2.71±1.53)％.与HD-5/N相比,HD-5/Acm和HD-5/Abu的抗病毒作用显著降低(P＜0.01).结论 建立了基于流式细胞分析的HPV-16假病毒感染模型并将其用于抗病毒药物活性检测.发现HD-5的空间结构和分子中半胱氨酸对其抗HPV感染的活性有重要作用.
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基于可视人的帕金森病手术靶点核团定位初步研究
目的 利用中国首例女性可视人(Chinese visible humanⅡ,CVH2)头部连续断层图像数据集,为帕金森病深部脑电刺激术前的底丘脑核定位提供参考.方法 选取CVH2头部连续断层彩色图像并建立大脑标准空间坐标系,通过颅内常用定位标志-前后连合将21例健康成年人头部横断位和冠状位3.0T核磁共振成像T2序列图像配准到CVH2大脑标准空间中,利用与底丘脑核毗邻的红核中心坐标来检验配准精度以及该定位方法的可行性.结果 使用该方法定位21例核磁共振成像图像中左右红核的X、Y、Z坐标平均误差(及标准差)为:X方向上为0.33 mm(0.21)、0.40 mm(0.25),Y方向上为0.52 mm(0.39)、0.44 mm(0.36),Z方向上为0.64 mm(0.43)、0.64 mm(0.41).经配准后两者红核中心的X、Y、Z坐标值均无显著性差异(P＞0.05).结论 利用CVH2头部连续断层图像数据集,经与核磁共振成像图像进行空间配准后对定位与底丘脑核毗邻的红核中心具有较高精度,能够为帕金森病深部脑电刺激术前的底丘脑核定位提供参考.
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不同剂量糖皮质激素联合N-乙酰半胱氨酸治疗特发性肺纤维化的研究
目的 为探讨特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)的治疗新方案,比较静脉推注较大剂量糖皮质激素(80～120 mg/d)联合N-乙酰半胱氨酸与较小剂量糖皮质激素(＜80 mg/d)联合N-乙酰半胱氨酸治疗IPF的临床疗效.方法 根据标准纳入35例受试者,分为治疗组与对照组.观察用药3个月后2组p(O2)、p(CO2)、FVC％ pred、FEV1％ pred、VC％ pred、TLC％ pred、DLCO/VA％ pred、症状体征评分、HRCT上磨玻璃影、网格影、蜂窝影、小叶间隔增厚的变化情况及不良反应.结果 对比各组用药前后的变化,用药3个月后2组肺功能(FVC％ pred、FEV1％ pred、VC％ pred、TLC％ pred、DLCO/VA％ pred)及p(O2)较用药前升高,p(CO2)较用药前降低,症状体征较用药前缓解,差异均具有统计学意义(P＜0.05)；而HRCT用药前后变化无显著性差异(P＞0.05).对比2组用药后的变化,治疗组用药后FVC％ pred、VC％ pred、DLCO/VA％ pred改善优于对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 与较小剂量糖皮质激素联合N-乙酰半胱氨酸的治疗方案比较,静脉推注较大剂量糖皮质激素联合N-乙酰半胱氨酸短期治疗特发性肺纤维化更能改善FVC％ pred、VC％ pred及DLCO/VA％ pred,缓解总体症状,且在短期内未表现出明显副作用.
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靛玉红固体分散体的制备及其体外溶出研究
目的 采用固体分散体技术制备难溶性药物靛玉红固体分散体,提高其体外溶出性能.方法 采用溶剂法制备靛玉红-聚乙烯吡咯烷酮(PVPK30)固体分散体；利用扫描电镜(SEM)和差示扫描量热法(DSC)鉴别药物在载体中的存在状态；以靛玉红的溶出百分量作为评价指标,研究靛玉红制成固体分散体后对溶出性能的影响.结果 扫描电镜和差示扫描量热法结果显示靛玉红在载体中以高度分散形式存在,制成固体分散体后药物的累计溶出度(36.93％)与原料药(4.81％)和物理混合物(11.42％)相比都有明显的提高.结论 靛玉红与PVPK30制成固体分散体,靛玉红的分散状态发生了改变,提高了其溶出性能.
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奥氮平联合氟西汀与度洛西汀治疗躯体形式疼痛障碍的疗效比较
目的 比较小剂量奥氮平联合氟西汀与度洛西汀治疗持续性躯体形式疼痛障碍疗效差异.方法 临床病例对照研究设计.35例患者接受小剂量奥氮平联合氟西汀治疗(OFC组),33例患者接受度洛西汀治疗.2组患者完成急性治疗期12周的治疗.治疗前后观察指标:数字疼痛强度量表(PI-NRS)、临床疾病严重程度评定表(CGI-S)及临床总体疗效指数评分(CGI-EI)、汉密尔顿抑郁量表24项(HAMD-24).观察评定时间分别于治疗前,治疗后1、2、4、8、12周末.结果 OFC组患者在治疗后第1周末及随后各时间观察点,PI-NRS显著低于度洛西汀组(P＜0.05,P＜0.01)、CGI-EI在各观察时间点则均明显高于度洛西汀组(P＜0.01),2组患者在治疗后第1、2、4、8、12周末HAMD-24评分没有显著差异(P＞0.05).结论 奥氮平联合氟西汀治疗躯体形式疼痛障碍在急性治疗期比单用度洛西汀疗效更优.
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AMPKa2基因多态性与2型糖尿病及血清脂联素、颈动脉粥样硬化的关系
目的 探讨腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK) a2基因rs1124900G/T单核苷酸多态性与2型糖尿病(T2DM)及血清脂联素( adiponectin,APN)、颈动脉粥样硬化的关系.方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)的方法,收集2010年4-9月期间在本院内分泌科住院治疗的2型糖尿病患者178例,其中男性93例,女性85例,年龄(54.6±10.1)岁,对照组为同期本院体检的健康人员160例,男性84例,女性76例,年龄(51.8±9.8)岁,检测AMPK-rs1124900G/T基因型,分析2组人群之间基因型和等位基因频率的差异.同时测定身高、体质量、血压、血脂、APN、颈动脉内膜中层厚度(carotid intima-media thickness,CIMT)等.结果 ①在T2DM组G/G、G/T、T/T基因型频率分别为29.8％、43.2％、26.9％,T等位基因频率为48.6％.对照组G/G、G/T、T/T基因型频率为32.5％、42.5％、25.0％,T等位基因频率为46.3％,2组间无显著性差异(P＞0.05).②在T2DM组和对照组TT型者的血清TG、LDL-C水平明显高于GG型者,CIMT及斑块发生率显著高于GG基因型者,APN水平明显低于GG型者,差异有统计学意义(P＜0.05).③相关分析表明,CIMT及斑块发生率与血清TG(r =0.349 6,P＜0.01)、LDL-C(r =0.416 7,P＜0.01)正相关,与APN水平负相关(r=-0.262 3,P＜0.05).结论 rs1124900多态性位点与甘肃地区2型糖尿病的发生无关；与脂联素、TG、LDL、颈动脉内膜厚度及斑块有关.
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JAK2-STAT3信号通路在白介素-1β经动脉外膜给药致平滑肌细胞增殖迁移中的作用
目的 研究白细胞介素-1β经血管外膜给药导致动脉平滑肌细胞发生的改变及其与JAK2-STAT3信号通路的关系,明确JAK2-STAT3信号通路在血管增殖性病变中的作用.方法 6～8周龄SD雄性大鼠24只,分离左侧颈总动脉,实验组(n=18)血管外膜包裹含白介素-1β2.5μg的琼脂缓释悬液,对照组(n=6)包裹不含白介素的琼脂悬液,术后2、8、24、48 h,1、2周分别处死实验组大鼠3只,对照组1只,血管标本经切片HE染色观察形态,Westernblot法检测JAK2、STAT3、磷酸化JAK2以及磷酸化STAT3的表达,免疫组化标记定位磷酸化JAK2及磷酸化STAT3；另取SD雄性大鼠9只,分离两侧颈总动脉,左侧滴加JAK2抑制剂AG490缓释凝胶,右侧滴加等量空白凝胶后两侧均包裹等量白介素-1β,术后8、48 h,1周处死动物分别行HE染色及Western blot检测.结果 白介素-1β包裹血管外膜后出现血管平滑肌细胞的增殖、迁移,通道蛋白JAK2、STAT3在不同时间点出现不同程度的磷酸化,经Western blot检测并行灰度分析,p-JAK2相对灰度值对照组(0.337 ±0.216),8h组(1.764±0.513),1周组(0.451±0.229)；p-STAT3相对灰度值对照组(0.125±0.870),24h组(1.909±0.309),2周组(0.448±0.516),各组间有明显差异(P＜0.05).加用抑制剂后,8h组p-JAK2相对灰度值实验侧(0.085±0.031),对照侧(1.416±0.468),48 h组p-STAT3相对灰度值实验侧(0.460±0.065),对照侧(2.425±0.638),提示JAK2、STAT3的磷酸化水平被明显抑制(P＜0.05),平滑肌细胞变化程度下降.结论 炎性因子白细胞介素-1β经动脉外膜给药可致动脉平滑肌细胞增殖、迁移,这种改变与JAK2-STAT3信号通路有直接关系.
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LXRs激动剂T0901317通过PI3K/Akt增强人脐静脉内皮细胞的增殖能力
目的 观察肝X受体(liver X receptors,LXRs)激动剂T0901317对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)增殖活性的影响.方法 体外分离和培养原代HUVEC,不同浓度的T0901317(0、0.5、2、5 μmol/L)干预HUVEC48h后,采用MTS法检测HUVEC增殖情况；Western blot检测磷酸化Akt( Ser473)及总Akt的表达.结果 T0901317(0～5μmol/L)呈浓度依赖性的促进HUVEC的增殖(P＜0.01)和上调HUVEC中p-Akt-Ser473的表达(P＜0.01),PI3K抑制剂LY294002(10 μmol/L)和基因转录抑制剂放线菌素-D(actinomycin D,Act-D,5μg/ml)可以阻断T0901317(5 μmol/L)上调p-Akt-Sep473的作用(P＜0.01),提示T0901317通过基因转录调节的方式激活PI3K/Akt信号,此外,PI3K抑制剂LY294002(10 μmol/L)预处理可以逆转T0901317(5μmol/L)促HUVEC增殖作用(P＜0.01).结论 LXRs激动剂T0901317可通过激活PI3 K/Akt信号通路增强HUVEC的增殖能力.
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17β-雌二醇对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠脊髓Rho激酶表达的影响
目的 探讨17β-雌二醇对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)大鼠中枢神经系统Rho激酶表达的影响及相关机制.方法 75只雌性Wistar大鼠分为正常组、模型组、雌激素组、DMSO对照组和雌激素+雌激素核受体抑制剂ICI组.雌激素组每日皮下注射17β-雌二醇20 μg/(kg·d),连续10 d.雌激素+ICI组于17β-雌二醇注射前先给予雌激素核受体抑制剂ICI 182780 5 mg/(kg·d),比较各组大鼠神经功能评分；HE染色观察病理学改变；免疫组织化学和Western blot观察Rho激酶表达的变化.结果 与对照组和模型组分别比较,雌激素组发病潜伏期延长,神经功能评分降低；HE染色示雌激素组炎性细胞浸润减少；免疫组化检测结果显示,雌激素组Rho激酶阳性细胞数(8.36±1.57)明显低于模型组[(17.55±1.70),P＜O.01]；Western blot检测结果显示,雌激素组蛋白表达相对值(0.833 ±0.022)显著低于模型组[(1.013±0.060),P＜O.05]；雌激素+ICI组Rho激酶阳性细胞数(18.90±2.39)和蛋白表达(1.141±0.046)显著高于雌激素组(P＜0.05).结论 17β-雌二醇能抑制EAE大鼠Rho激酶的表达,这种抑制作用是通过经典的雌激素核受体通路实现的.
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2型猪链球菌89K致病岛进化途径分析
目的 分析2型猪链球菌89K致病岛的结构特征,探索其进化历程.方法 通过BLAST比对,获取89K致病岛的同源序列,构建其同源序列数据库；分析89K致病岛的碱基组成特征,寻找重组热点区域,并对89K进行分区；对各ORF进行功能预测,划分功能模块；对89K致病岛与其同源序列进行系统发育分析及共线性分析,推测其可能的进化历程.结果 89K致病岛可分为4个保守区,4个主要的非保守区及一段Tn916转座子,呈现多个异源序列相嵌合的结构特征.功能分析发现保守区基因主要参与致病岛的横向转移及其在宿主菌基因组中的稳定,保守区的基因呈现出进化上的一致性,且在某些菌株中保守区以连续状态存在.结论 保守区在祖先状态时是一个连续整体,不同来源的非保守区经过多次水平转移和重组事件插入到保守区之间,形成了89K致病岛的嵌合结构.
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56例儿童重症腺病毒肺炎的胸部CT影像表现特点
目的 总结56例儿童重症腺病毒肺炎的胸部CT影像表现特点,提高该病的影像诊断能力.方法 选择本院2010年4月至2011年4月经临床确诊的儿童重症腺病毒肺炎56例,男性43例,女性13例,年龄1个月至7岁,回顾性分析其临床和胸部CT表现特点.结果 56例患儿鼻咽部脱落细胞用免疫荧光法检测腺病毒抗原均阳性,临床均符合WHO儿童急性呼吸道感染防治规划中的重症肺炎诊断标准.胸部CT表现:肺实变56例,其中双侧受累45例,向心分布28例,团簇状影43例,胸膜病变28例,淋巴结肿大16例.气胸2例,纵隔气肿2例.在治疗过程中或随访中出现小气道改变40例.结论 儿童重症腺病毒肺炎以多发团簇状肺实变为主要改变,可伴胸膜病变、气胸、纵隔气肿等肺外表现,如出现小气道改变应警惕闭塞性细支气管炎的发生.
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629例爱贝芙注射去除面颈部横纹的近期效果分析
目的 观察爱贝芙药物注射对面部不同部位除皱的近期效果.方法 收集2004年1月至2010年12月我院整形美容科收治行面部除皱患者629例,男性45例,女性584例,平均年龄43.5(28～64)岁.应用爱贝芙进行面部除皱的患者,根据药物注射部位分为:鼻唇沟皱纹305例、眉间川字皱纹182例、颈部横纹37例、额部抬头纹54例、眼角鱼尾纹32例、鼻梁横纹19例分组观察.在注射当日,注射后1、3、6、12个月分别比较不同组别之间除皱的效果,综合分析爱贝芙注射除皱的近期效果.结果 注射爱贝芙除皱当日,各种面颈部皮肤皱纹均可以消失,或明显消失；注射后1个月,仍然维持在术后当日的效果；注射后3～6个月理想的效果逐渐减弱；12个月效果明显超过注射当日.鼻唇沟皱纹、眉间川字纹、鼻梁横纹、颈部横纹去除的近期效果好于额部抬头纹和眼角鱼尾纹.结论 应用爱贝芙进行注射去除面颈部横纹是一项新兴的技术,经过几年我科广泛运用,术后患者满意度高,是目前值得推广的注射除皱方法之一.
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西地那非干预疑诊早期高原肺动脉高压人群的临床研究
目的 评价口服西地那非干预疑诊早期高原肺动脉高压(high altitude pulmonary hypertension,HAPH)的有效性及安全性.方法 24例常驻高海拔地区(4 500 m)疑诊早期HAPH的青年男性,分为2组,A组(11例)予以吸氧治疗,B组(13例)予以吸氧+口服西地那非治疗,治疗12周后,观察主要终点6 min步行距离试验(6MWT)及次要终点Brog呼吸困难评分、肺动脉收缩压(SPAP)、血氧饱和度及受试者的血压、肝肾功变化情况.结果 ①经12周治疗后,B组6MWT从(405.54±42.40)m增加至(463.34 ±40.12) m(P＜0.05),A组6MWT从(407.53±50.14)m增加至(444.53±56.36)m(P＜0.05),B组比A组增加更明显(P ＜0.05)；Brog呼吸困难评分2组均明显改善(P＜0.05),B组比A组改善更明显(P＜0.05)；B组SPAP由(25.56±1.85) mmHg降低到(21.69±1.88) mmHg(P ＜0.05),A组SPAP由(26.25±1.25) mmHg降低到(25.27±1.10) mmHg;B组比A组明显降低(P＜0.05).②服药前后,受试者血压及肝、肾功能无明显变化.结论 口服西地那非(50 mg,1次/d)干预疑诊早期HAPH人群是安全和有效的.
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经皮肾碎石取石术后输尿管双J管留置时间和拔管方法的探讨
目的 对经皮肾碎石取石术(percutaneous nephrolithotomy,PCNL)后患者输尿管双J管留置时间长短及拔管方法进行探讨.方法 84例行PCNL治疗的上尿路结石患者完全随机分为3组:长期留置组(n=28),术后留置输尿管双J管4～6周,经尿道膀胱镜下拔管；短期留置组(n=28),术后留置输尿管双J管8～12d.经尿道膀胱镜下拔管；短期留置改良组(n=28),术后留置输尿管双J管8～12d,经肾穿刺通道用改良方法拔管.3组患者于拔管后和出院后分别填写问卷调查,手术后1个月复查肾功能和利尿肾图.结果 患者出院后肉眼血尿、腰胀、膀胱刺激征、泌尿系感染、发热、双J管移位、尿液反流等并发症发生率,长期留置组分别与短期留置改良组、短期留置组间存在显著差异(P＜0.05),短期留置组与短期留置改良组间无明显差异(P＞0.05).患者拔管后尿道疼痛、肉眼血尿、尿道损伤、膀胱刺激征、泌尿系感染、发热等并发症发生率,短期留置改良组分别与长期留置组、短期留置组间均存在显著差异(P＜0.05),长期留置组与短期留置组间无明显差异(P＞0.05).手术后1个月复查肾功能、利尿肾图,3组间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 经皮肾碎石取石术后8～12 d,有针对性采用改良方法拔管,可有效缩短双J管的留置时间,避免因带管出院及置管时间过长引起的并发症,减少患者的费用和痛苦,值得临床推广使用.
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子宫脱垂患者骶主韧带MR三维重建模型的研究
目的 通过盆底磁共振成像(MRI)建立三维重建模型,将子宫脱垂患者骶韧带(uterosacral ligaments,USL)和主韧带(cardinal ligaments,CL)测量各参数与健康女性比较,探讨骶主韧带解剖改变的主要几何参数,从MRI三维重建角度客观评价子宫脱垂的各种盆底重建术.方法 选择2010年10月至201 1年10月确诊为子宫脱垂患者20例为研究对象,选取健康女性20例为对照组.对2组进行盆底MRI薄层扫描建立图像集,在计算机三维重建软件上行骶主韧带及盆腔器官三维重建,测量并比较2组骶主韧带起止点、长度、体积、骶韧带弯曲度、骶韧带之间角度、同侧骶主韧带角度等参数值的变化.结果 子宫脱垂患者组骶韧带长度小于对照组(P＜0.05),骶韧带角度大于对照组(P＜0.05),主韧带测量参数无显著性差异.20例子宫脱垂患者中骶韧带起自骶骨2例(10％)、尾骨肌/骶棘韧带复合体16例(80％)、坐骨棘2例(10％)；插入官颈8例(40％)、阴道2例(10％)、宫颈和阴道10例(50％)；主韧带起自同侧骨盆侧壁坐骨大孔,8例插入到宫颈(40％),4例到阴道(20％),8例到官颈和阴道(40％)；健康对照组中骶韧带起自骶骨6例(30％)、尾骨肌/骶棘韧带复合体13例(65％)、坐骨棘1例(5％)；插入宫颈6例(30％)、阴道2例(10％)、宫颈和阴道12例(60％)；主韧带起自同侧骨盆侧壁坐骨大孔,8例到宫颈(40％),2例到阴道(10％),10例到官颈和阴道(50％).结论 MRI三维重建能清楚显示盆底器官与子宫骶主韧带解剖关系及三维几何量化关系；骶韧带之间角度、骶韧带长度是子宫脱垂病变的重要参数,主韧带解剖几何参数变化与子宫脱垂无显著性意义,治疗子宫脱垂各种盆底重建术的中心是骶韧带重建.
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NTIS大鼠血清及脑组织甲状腺激素水平及其转运蛋白OATP1C1和MCT8mRNA变化
目的 观察非甲状腺疾病综合征(nonthyroidal illness syndrome,NTIS)大鼠血清及脑组织甲状腺激素水平及其转运蛋白有机阴离子转运多肽(organic anion transporting polypeptide 1 C1,OATP1C1)和单羧酸转运蛋白(monocarboxylate transporter 8,MCT8)mRNA的变化.方法 选取成年SPF级SD雄性大鼠23只,分为正常组(n=12)和NTIS组(n=11).NTIS动物采用肝纤维化模型,利用四氯化碳(1:6)用玉米油稀释,0.025 ml腹腔注射,3次/周,共8周.正常组大鼠相同剂量玉米油,腹腔注射,3次/周,共8周.造模成功后2组利用水迷宫法测试学习记忆能力.随后处死,取血及脑组织,放免法测定血清甲状腺激素(T3、T4、rT3、TSH)及脑组织甲状腺激素(T3、T4、rT3)；RT-PCR法测定脑组织中OATP1C1及MCT8 mRNA水平.结果 ①NTIS组血清T3、T4水平较正常组明显降低[T3 (0.53±0.18) mmol/Lvs(0.73±0.22) mmol/L,P ＜0.05;T4 (24.58±7.73) mmol/L vs( 39.97±14.74) mmol/L,P＜0.01],rT3、TSH水平2组之间无显著性差异(P＞0.05)；NTIS组脑组织中T3、T4浓度较正常组稍升高,但差异无统计学意义(P＞0.05)；②NTIS组OATP1C1和MCT8 mRNA水平较正常组明显升高[ OATP1C1 mRNA(0.054±0.032) vs (0.019±0.016),P＜0.01；MCT8 mRNA(0.058±0.048) vs(0.017±0.012),P＜0.05]；③2组大鼠空间探索和定位航行之间无显著性差异(P＞0.05).结论 NTIS大鼠脑内通过OATP1C1和MCT8代偿,保持脑内T3、T4水平相对稳定,从而维持中枢甲状腺功能正常.
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难治性颞叶癫痫患者颞叶皮层金属基质蛋白酶-9的表达
目的 研究成人难治性颞叶癫痫患者颞叶皮层中金属基质蛋白酶-9(MMP-9)的表达,探讨其在难治性癫痫发病中的作用机制.方法 收集新桥医院神经外科手术切除的成人难治性颞叶癫痫颞叶皮层标本24例,与15例正常对照皮层比较,运用RT-PCR、明胶酶谱法和免疫组织化学方法检测MMP-9在致痫灶中的表达分布.结果 在难治性颞叶癫痫患者颞叶皮层中,MMP-9在mRNA、酶活性较对照组明显升高(P＜0.05).免疫组化结果显示,在正常皮层中MMP-9弱至中等强度表达于神经元上,偶见胶质细胞表达,而在致痫灶中强表达于锥体神经元和星形胶质细胞上,免疫染色强度明显高于正常皮层[染色强度值:(2.13±0.56)vs(1.52±0.69)；相对光密度值:(55.60±7.20)vs(37.10±8.70)；P＜0.05].结论 难治性颞叶癫痫患者颞叶致病皮层中MMP-9表达增高可能与癫痫发病密切相关,有可能成为新的难治性癫痫的药物靶点.
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巯乙磺酸钠单独及联合环丙沙星抗大肠杆菌生物膜的作用
目的 研究巯乙磺酸钠(Mesna)对大肠杆菌生物膜(biofilm,BF)形成的影响,以及单独及联合环丙沙星(ciprofloxacin,CIP)对大肠杆菌BF的作用.方法 琼脂平板稀释法检测Mesna、CIP的低抑菌浓度,扫描电镜观察Mesna对大肠杆菌BF形成的作用,平板计数法检测Mesna单独及与CIP联用后BF内活菌数,用激光共聚焦显微镜(confocal laser scanning microscopy,CLSM)观察Mesna对已形成的大肠杆菌BF空间结构的影响并结合BF图像结构分析软件(image structure analyer,ISA)定量分析BF结构参数.结果 Mesna能减少BF中基质样物质以及被膜的厚度；单用Mesna (8 mg/ml)才能使BF中的活菌数减少(P＜0.05),单用CIP 1 MIC才可使BF中活菌数降低(P＜0.05),小剂量Mesna(1 mg/nl)与1/2 MIC的CIP联合应用就可使BF上的活菌数明显减少(P＜0.05)；CLSM图像显示经Mesna作用后的BF厚度逐渐减少,密度逐渐稀疏；ISA软件定量分析显示:5 mg/ml Mesna作用后,BF厚度、平均扩散距离(average diffusion distance,ADD)和结构熵(textual entropy,TE)均减少(P＜0.05),区域孔率(areal porosity,AP)增加(P＜0.05),2 mg/mlMesna干预后,效应不如高浓度明显.结论 Mesna能够抑制大肠杆菌BF形成,破坏成熟大肠杆菌BF形态结构；Mesra与环丙沙星存在协同作用,增强其杀菌能力.
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融合蛋白TAP-SSL5对人血小板功能的影响
目的 探讨抗炎抗凝双效融合蛋白TAP-SSL5对人血小板功能的影响.方法 采用健康人富含血小板血浆以凝胶过滤法分离得到人血小板.流式细胞仪检测融合蛋白TAP-SSL5或小鼠抗人CD42b( glycoprotein Ibα,GPIbα)单克隆抗体( HIP1)与血小板的结合情况；以人血小板表面P-选择素的表达及PAC-1的结合反映血小板的激活程度；以全血电阻法定量分析TAP-SSL5对人血小板聚集功能的影响；为评价TAP-SSL5的出血风险,进一步观察了TAP-SSL5对小鼠尾部出血时间的影响.结果 融合蛋白TAP-SSL5可与血小板结合,并竞争性抑制HIP1与血小板的结合,提示TAP-SSL5可与血小板表面的GPIbα结合,进而抑制GPIbα与vWF的相互作用.但高浓度的TAP-SSL5(终浓度30m g/L)也能激活血小板,使人血小板表面P-选择素的表达增加(表达阳性率为90.4％)和PAC-1的结合量上升(阳性率为66.3％)；终浓度为10、30 mg/L的TAP-SSL5可引起血小板的显著聚集.给小鼠单次尾静脉注射10mg/kg的TAP-SSL5,可显著延长尾部出血时间,由对照组的(647.1±33.7)s延长至(753.6±127.3)s(P ＜0.01)；而常规剂量组(3 mg/kg TAP-SSL5)尾部出血时间为(612.8±79.1)s,与对照组相比无显著差异(P＞0.05).结论 融合蛋白TAP-SSL5保留了SSL5与血小板GPIbα结合的功能,有助于进一步提高TAP-SSL5的抗血栓作用,但同时也导致融合蛋白TAP-SSL5在高浓度情况下可延长出血时间和激活血小板.
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PTEN基因对胶质瘤细胞增殖及侵袭性影响的体外研究
目的 探讨PTEN基因转染人胶质瘤U251细胞后对其增殖及侵袭性的影响.方法 应用脂质体转染技术,将含PTEN基因重组表达质粒转染U251细胞系,Western blot鉴定其蛋白表达；应用四甲基偶氮唑蓝比色(MTr)法观察对细胞株生长的影响；流式细胞仪检测细胞周期及凋亡；应用免疫组化检测转染PTEN的U251细胞基质金属蛋白酶( MMP-2、MMP-9)和金属蛋白酶抑制剂(TIMP-1、TIMP-2)的表达变化.结果 PTEN质粒成功转染U251细胞并有PTEN蛋白的表达.与对照组、空载体组相比,转染组细胞生长抑制率下降达52.46％；细胞周期改变,细胞从G1期到S期发生阻滞；转染组MMP-2、MMP-9表达显著下降,而TIMP-1、TIMP-2表达显著上升,两者呈负相关(r=-0.506,P＜0.05).结论 PTEN转染人胶质瘤细胞系U251后,可抑制其增殖、促进凋亡；并可能通过抑制MMPs和促进TIMPs来抑制细胞侵袭性.
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左向右分流型肺动脉高压大鼠肺组织中microRNA的表达谱及初步分析
目的 检测晚期肺动脉高压(pulmonary hypertension,PH)大鼠肺组织中microRNA (miRNA)的表达,初步预测差异表达的microRNA调控的靶基因.方法 4～5周龄健康雄性SPF级SD大鼠20只,体质量90～110 g,按完全随机分组法分成分流组(n=10)和对照组(n=10).分流组采用套管法行右侧颈总动脉-颈外静脉分流术以建立左向右分流型肺动脉高压模型,对照组行假手术,建立左向右分流型肺动脉高压大鼠模型.12周后,取大鼠外周肺组织,运用microRNA表达谱芯片检测分流组和对照组大鼠肺组织microRNA的差异性表达.运用Miranda、TargetScan、PicTar软件预测可能调控的靶基因,实时定量PCR验证miR-98、miR-130b和miR-127等的表达.结果 平均肺动脉压(mPAP)、肺动脉中膜厚度百分比(MT％)及右心室肥厚指数(RVHI)均明显高于对照组(P＜0.01),microRNA芯片结果提示:与对照组相比,在分流组大鼠肺组织中表达明显上调的miRNA有30个(miR-122、miR-130b、miR-146b等),明显下的miRNA有7个(miR-382、miR-192、miR-29c等),RT-PCR结果与芯片结果一致.结论 microRNA在左向右分流型肺动脉高压大鼠中表达存在差异,microRNA可能参与肺动脉高压大鼠肺血管的重构.
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消退训练对大鼠条件性恐惧行为及海马CA1区突触超微结构的影响
目的 研究消退训练对大鼠条件性恐惧行为和海马CA1区突触超微结构的影响.方法 成年雄性SD大鼠40只,简单随机抽样分为正常组(n=8)、消退对照组(n=16)和消退组(n=16).在训练后不同时间(消退后7、21 d,恐惧建立后8、22 d)进行恐惧行为测试.采用透射电镜观察各组大鼠海马CA1区突触超微结构.结果 ①在消退后7d和21 d,消退组的消退保持成绩显著高于消退对照组(P＜0.05,P＜0.01),而与正常组无显著差异(P＞0.05).②消退训练后7d,消退组海马突触数密度显著高于消退对照组(P＜0.05),与正常组之间无显著差异(P＞0.05)；消退训练后21 d,3组之间均无显著差异(P＞0.05).③消退训练后7d和21 d,消退组海马突触间隙宽度显著低于正常组(P＜0.05,P＜0.01),并且在消退训练后21 d,消退组突触间隙宽度显著低于消退对照组(P＜0.05).④与正常组相比,消退训练后7d和21 d,消退组PSD厚度均显著升高(P＜0.01)；且在消退训练后21 d,消退组PSD厚度显著高于消退对照组(P＜0.05).⑤各组之间活性区长度均无显著差异(P＞0.05).结论 恐惧建立后24h进行消退训练能够部分改变条件性恐惧引起的海马CA1区突触超微结构的变化,减轻条件性恐惧大鼠的僵立行为.
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新型斑蝥素类似物LB1协同阿霉素杀伤肝癌细胞的实验研究
目的 通过水溶性化学小分子蛋白磷酸酶2A抑制剂LB1与阿霉素(doxorubicin,DOX)联合应用,研究其在肝癌化疗过程中的协同作用.方法 体外细胞活性分析检测不同剂量LB1对HepG2细胞活性影响及其与阿霉素(DOX)的协同杀伤效应；通过裸鼠体内荷瘤模型以及组织化学分析,进一步观察LB1对肿瘤生长影响以及在体与阿霉素的协同化疗作用.结果 LB1对HepG2细胞生长与作用剂量相关,低剂量时可促进其生长,高剂量时则促进其凋亡,而且在联合阿霉素后,可显著提高对HepG2肿瘤细胞的杀伤作用；体内实验也发现,单纯给予阿霉素抑瘤率为57％,而LB1联合应用后,抑瘤率可达77％,显著提高了阿霉素对肿瘤的杀伤作用(P＜0.05),且无明显毒副作用.结论 LB1联合应用可显著提高阿霉素( DOX)对肝癌细胞的化学杀伤作用.
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血管内栓塞与伽玛刀结合治疗86例脑动静脉畸形的临床分析
目的 评价血管内栓塞结合伽玛刀治疗对脑动静脉畸形的治疗作用.方法 选择泸州医学院附属医院神经外科从2001年9月至2010年12月86例经数字减影血管造影(digital subtraction angiography,DSA)确诊为脑动静脉畸形的患者,并选择了血管内介入栓塞治疗,其中72例随后又进行了伽玛刀治疗.术后疗效利用DSA/CTA/MRI进行影像学评价.结果 68例获得随访(79.1％),随访时间1～6年,平均2.5年.临床症状康复52例,轻残5例,重残1例,癫痫发作8例,再出血2例,无死亡病例.获得DSA/CTA/MRI影像随访65例(75.6％),其中畸形血管完全消失37例(56.9％),大部分消失20例(30.8％),部分消失8例(12.3％).结论 血管内栓塞结合伽玛刀对脑动静脉畸形的治疗具有疗效较好、并发症少、创伤小、安全性高和可重复性等优点.伽玛刀还可以作为手术切除的前期治疗.
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PBMC中CD69、CD107a表达上调在诊断迟发型药物变态反应中的意义
目的 检测药疹患者外周血单个核细胞中CD69和CD107a的表达,评价其与迟发型药物变态反应的相关性.方法 2010年5月至2011年4月采集20例药疹患者和10例健康对照者的外周血,用淋巴细胞分离液分离外周血单个核细胞,按2 ×106细胞/孔种植于24孔板,给予致敏药物刺激,培养72 h后采用流式细胞术染色并检测外周血单个核细胞中CD69和CD107a分子的表达.结果 健康对照组外周血单个核细胞中CD107a阳性、CD69阳性、CD107a与CD69双阳性细胞刺激前的比例分别为(0.41±0.18)％、(0.33±0.13)％、(0.12±0.06)％,经致敏药物刺激后分别为(0.38±0.28)％、(0.35±0.12)％、(0.14±0.08)％,刺激前后无明显差异,药疹患者外周血单个核细胞中CD107a阳性、CD69阳性、CD107a与CD69双阳性细胞刺激前的比例分别为(0.45±0.25)％、(0.31±0.12)％、(0.15±0.07)％,与健康对照组无明显差异,但经致敏药物刺激后外周血单个核细胞中CD69阳性、CD107a阳性、CD107a与CD69双阳性细胞表达比例明显增高[分别为(9.01±2.91)％、(1.78±0.76)％、(0.74±0.19)％],和健康对照组、药疹未刺激组比较有统计学差异(P＜0.01),且随着致敏药物浓度的增加,CD69和CD107a的表达呈剂量依赖性上调.结论 药疹患者外周血单个核细胞经致敏药物刺激后CD69、CD107a表达增加.
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腭黏膜组织瓣修复角化龈缺失牙种植患者1例
1 临床资料 患者,女性,24岁,因“C4、C5牙龈瘤根治术半年后”于2010年12月8日来我院种植门诊,要求人工种植牙修复.患者曾于2009年因牙龈瘤在外院行肿物切除术,术后半年复发累及C4、C5牙根,遂于2010年行牙龈瘤根治术及患牙拔除术,术中去除部分牙槽骨.我院术前锥状束CT(CB-CT)检查发现:C4、C5牙槽骨高度降低约3 mm,C4牙槽骨宽度6.41 mm,管嵴距12.8 mm,C5牙槽骨宽度7.6 mm,管嵴距11.6 mm,牙槽窝愈合可.
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子痫前期患者胎盘中p38MAPK及COX-2的表达及意义
子痫前期是妊娠期特有疾病,目前其病因及发病机制尚未明确.本研究通过检测子痫前期患者胎盘组织中p38MAPK及COX-2的表达及其关系,探讨它们在子痫前期的病理生理过程中,特别是胎盘血管炎症反应中发挥的作用.
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CT增强扫描高压注射器防渗漏智能导流报警系统的研制
CT增强扫描造影剂所引起的副反应在增加,尤其是造影剂渗漏造成的局部组织损伤,不仅影响检查质量,甚至危及患者生命[1].目前采取的陪护人员或远距离观察方法有较大的弊端,因为高压注射器注射速度快、压力高,难以及时纠正渗漏,不能有效杜绝造影剂外渗对患者造成的损害.为了减少CT增强扫描造影剂渗漏造成的危害,并能及时发现和妥善处理减少血管外渗造成的不良后果,需要一种敏感的报警装置.目前在国内外应用的监测装置尚有待进一步改进.因此我们在综合分析了已报道装置的优点与不足之后,设计制作了这套CT增强扫描高压注射器防渗漏智能导流报警系统[2],实时检测高压注射过程,一旦检测到渗漏即进行声光报警,同时自动瞬时进行导流切换,从而有效避免高压注射药液的渗漏.现将其制作、使用等报告如下.
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板栗刺致角膜、前房多发异物伴大泡性角膜病变1例
1 临床资料 患者,男性,57岁.于2011年9月23日工作时不慎被“板栗刺”刺伤左眼,即感左眼疼痛、视物模糊,到当地县医院就诊,分次剔除部分板栗刺并给予输液治疗4d(具体治疗不详),自觉症状好转后出院,2011年10月8日患者感左眼红、胀痛加重,再次到当地县医院就诊,建议患者到上级医院进一步治疗.2011年10月10日我院眼科门诊以“左眼角膜、前房异物,左眼大泡性角膜病变”收入院.眼部检查:右眼视力:0.8,矫正无助;左眼视力0 04,矫正无助;眼压:右眼17.1 mmHg(NCT),左眼14.37 mmHg(修氏眼压).
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高分辨熔解技术检测类风湿关节炎患者IL-1β和IL-1Ra基因多态性
目的 探讨IL-1β和IL-1 Ra基因多态性与类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)易感性及其血清学指标的关系.方法 应用高分辨率熔解(high resolution melting,HRM)技术对452例RA患者和360例对照进行IL-1β和IL-1Ra基因多态性的病例-对照研究,并分析IL-1β和IL-1Ra基因多态性与血清学指标的相关性.等位基因频率比较采用SPSS软件,单倍型构建采用在线SHEsis软件.结果 成功建立了IL-1B-511、-31、+3954和IL-1RN( rs4251961)4个位点的PCR-HRM检测方法.结果显示在女性中,IL-1B+ 3954位点等位基因频率在病例组和对照组之间存在有统计学差异(x2 =5.0,P=0.03),IL-1B-31位点等位基因频率和单倍型IL-1B-511*T/IL-1B-31*C/IL-1B+ 3954*C/IL-IRN*T(TCCT)在抗-MCV阳性组和阴性组之间存在统计学差异(x2 =5.0,P=0.02;x2 =5.3,P=0.02),单倍型IL-1B-511*T/IL-1B-31* C/IL-1B +3954* C/IL-1RN* C(TCCC)在RF、抗CCP和抗MCV 3个指标均为阳性和3指标非全阳性的2组之间存在统计学差异(x2 =5.1,P=0.02).结论 PCR-HRM技术是一种值得推广的常规化基因分型新方法.IL-1B+ 3954*C与女性RA易感性相关,IL-1B-31*C和单倍型TCCT与女性抗MCV阳性相关,单倍型TCCC与女性血清学指标全阳性相关.
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320排动态容积CT冠状动脉成像与冠脉造影对冠心病诊断的对比分析
目的 比较320排动态容积CT冠状动脉成像(CTA)与冠状动脉造影对冠心病诊断的价值.方法 回顾性分析102例接受CTA检查,又接受了冠脉造影(coronary angiography,CAG)检查的疑诊冠心病患者的资料,以CAG为“金标准”,评价CTA对冠心病(coronary artery disease,CAD)、冠脉不同节段病变诊断的一致性以及对冠脉狭窄程度诊断的差异.结果 CTA对冠心病诊断的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值和Kappa系数分别为91.3％、98.5％、93.1％、98.0％和0.904.CTA对CAD、冠脉不同节段病变诊断的一致性较高,对冠脉狭窄程度诊断与CAG的差异无统计学意义.结论 对于临床疑诊冠心病、拟行外科大手术的患者以及CAD高危人群,如不愿接受创伤性的CAG检查,可考虑首选320排CT检查.
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不同肥胖指标对老年高尿酸血症的影响
目的 探索不同肥胖指标与老年高尿酸血症的关系.方法 纳入949例住院患者,年龄(65.4±4.6)岁,其中男性402例,女性547例,测定其血尿酸及各项肥胖指标(腰围、体质指数、腰臀比)、代谢指标.结果 本组老年患者高尿酸血症检出率为16.6％,男性(27.6％)显著高于女性(8.6％).以腰围或体质指数为肥胖指标,不管男性还是女性肥胖组血尿酸水平均显著高于非肥胖组(P＜0.05),以腰臀比为指标,仅男性肥胖组血尿酸显著高于非肥胖组(P=0.006).血甘油三酯[ OR:1.539(1.247,1.900)]和血肌酐水平[OR:1.022(1.003,1.042)]是女性患高尿酸血症的独立危险因素,而腰围[ OR:1.044(1.013,1.076)]、血甘油三酯[OR:1.376(1.117,1.695)]和血肌酐[OR:1.028( 1.013,1.043)]是男性患高尿酸血症的独立危险因素.结论 不同肥胖指标对老年高尿酸血症的影响存在明显性别差异；腰围是老年男性高尿酸血症的独立危险因素.
