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PI3K/Akt信号通路在胰岛素抵抗中作用的研究进展
众所周知,2型糖尿病是非胰岛素依赖型糖尿病,其主要特征是胰岛素抵抗.终会引起胰岛β细胞功能障碍导致胰岛素分泌受损[1].2型糖尿病发病率在全球范围内呈逐年增高趋势,尤其在发展中国家增加速度将更快(预计到2025年可能增加170％),呈现流行势态[2].糖尿病现已成为继心血管病和肿瘤之后,第3位威胁人们健康和生命的非传染性疾病.胰岛素抵抗(Insulin Resistance,IR)是指脂肪细胞、肌肉细胞和肝细胞对正常浓度的胰岛素反应敏感性降底,它是2型糖尿病和代谢综合征的主要特征.
关键词： PI3K/Akt信号通路 胰岛素抵抗 2型糖尿病 -
Zyflamend诱导人舌鳞癌SCC-15细胞自噬及其机制的研究
目的 探讨Zyflamend对人舌鳞癌SCC-15细胞自噬的影响及其相关分子机制.方法 MTT法检测Zyflamend对细胞增殖的影响;透射电镜检测细胞的超微结构;Western blot法检测相关蛋白的表达.结果 1.MTT实验结果显示,Zyflamend对人舌鳞癌细胞SCC-15的增殖有明显的抑制作用并呈一定的剂量-效应关系.2.透射电镜观察发现Zyflamend用药后,可见大量的自噬小体;3.Western blot检测显示,Zyflamend作用于SCC-15细胞48h后,Akt蛋白表达无明显变化;p-Akt蛋白表达降低,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1蛋白表达上调,p62蛋白表达减少,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05).结论 Zyflamend能够抑制SCC-15细胞增殖,诱导细胞自噬,其机制可能与PI3K/Akt信号通路中Akt蛋白的磷酸化有关.
关键词： Zyflamend PI3K/Akt信号通路 自噬 口腔癌 -
神经母细胞瘤对TRAIL的不同药理反应与PI3K/AKT信号通路无关
方法取神经母细胞瘤手术标本4例,通过胰酶消化后培养在DMEM细胞培养液中.4个标本各自分为2组:正常培养基培养组与PI3K/Akt抑制剂处理24 h组.然后这些细胞加入100 ng/mL的TRAIL处理90 min后收获.细胞通过流失细胞术检测凋亡,通过western blot检测AKT以及磷酸化AKT的变化.结果 Akt的基线表达因标本的不同而变化;经过PI3K抑制剂LY294002处理24 h后,磷酸化AKT在每个标本中的表达都有所下降;磷酸化AKTPI3K/AKT的抑制没有改变了两个对TRAIL敏感的标本中caspase-3、-8、-9的活化,但没有改变任何标本中TRAIL诱导的凋亡.结论 抑制PI3K/Akt通路不增加神经母细胞瘤细胞株对TRAIL诱导凋亡的敏感性.由于对TRAIL的药物抵抗具有多个重复的途径,神经母细胞瘤在激活PI3K/AKT信号通路上的独特性既对TRAIL的药物抵抗无关,也不会抵消TRAIL的作用.
关键词： 神经母细胞瘤 TRAIL 药理反应 PI3K/Akt信号通路 -
中药干预PI3K/Akt信号通路调节糖尿病认知功能障碍研究现状
磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(Akt)信号通路是胰岛素信号通路的主要传导途径,同时对神经细胞有着重要的保护作用,近年来,PI3K/Akt信号通路与神经退行疾病间关系的研究日益增多.研究证实,糖尿病能够导致大脑神经生理及结构的改变,从而引发认知障碍.认知功能障碍与脑内胰岛素信号通路异常相关,其中,PI3 K/Akt通路起着重要的作用.研究显示,中药能够作用该通路,对PI3K/Akt信号通路的影响或许是中药预防和改善糖尿病认知功能障碍的机制之一.
关键词： PI3K/Akt信号通路 糖尿病认知功能障碍 中药 -
基于PI3K/Akt信号通路探索益气活血祛风通络法治疗糖尿病肾病的作用机制
目的 基于PI3K/Akt信号通路探索益气活血祛风通络法治疗糖尿病肾病的分子机制.方法 40只GK大鼠,随机分为模型组、假手术组、益气活血组、祛风通络组、益气活血祛风通络(全方)组,每组8只.糖尿病肾病模型通过高脂高糖喂养加单肾切除术复制.益气活血组、祛风通络组、全方组分别给予益气活血颗粒、祛风通络颗粒、益气活血祛风通络颗粒,模型组、假手术组给予纯净水.干预8周,观察大鼠在干预后肾脏的病理改变以及24小时尿蛋白变化,同时肾脏组织的p-PI3K、p-Akt和PTEN的表达情况采用Western blotting以及免疫组化法检测,PI3K mRNA、Akt mRNA以及PTEN mRNA的表达水平采用RT-PCR法检测.结果 HE染色结果显示,中药干预的大鼠肾小管上皮细胞空泡变性程度、纤维化以及肾小球硬化比模型组以及假手术组要轻,且在肾间质纤维化方面,全方组要好于益气活血组以及祛风通络组;PASM染色和Masson染色阳性率均显示益气活血组、祛风通络组、全方组阳性率明显低于模型组(P<0.01),但全方组阳性率与益气活血组以及祛风通络组无统计学差异(P>0.05);益气活血组、祛风通络组、全方组的24小时尿蛋白在中药干预后明显减少,而且与模型组对比具有显著性的差异(P<0.01).Western blotting结果显示,中药干预的三组p-PI3K、p-Akt的表达明显高于模型组(P<0.01),而PTEN的表达显著低于模型组(P<0.01).免疫组化结果显示,p-PI3K、p-Akt在药物干预的三组表达显著低于模型组(P<0.05);PTEN在祛风通络组以及全方组的表达显著低于模型组(P<0.01),在活血化瘀组表达水平与模型组差异无统计学意义(P>0.05).RT-PCR结果显示PI3K mRNA、Akt mRNA在中药干预的三组均明显低于模型组(P<0.05),而PTEN mRNA的表达水平则显著高于模型组(P<0.01).结论 益气活血、祛风通络法治疗糖尿病肾病均可以起到降低蛋白尿、减轻肾间质纤维化以及延缓肾小球硬化的作用,二者结合在延缓肾间质纤维化方面效果更好,三者作用分子机制均可能与抑制PI3K/Akt信号通路有关,且祛风通络法及益气活血祛风通络法抑制效果要略强于单独益气活血法.
关键词： PI3K/Akt信号通路 益气活血祛风通络法 糖尿病肾病 -
醒脑静介导PI3K/AKT信号通路影响老年患者术后认知功能的临床研究
目的:观察醒脑静对下肢矫形手术的老年患者术后认知功能,探讨其基于脑脊液中PI3K/AKT信号通路的作用机制.方法:选取2015年8月至2016年1月我科收治的拟行下肢矫形手术ASAⅠ~Ⅱ级老年患者90例,随机分成对照组和观察组,每组45例.观察组在患者术毕清醒时注射醒脑静注射液20 mL,对照组注射等量生理盐水.在术前1 d及术后3 d,7 d使用术后恢复质量评估(Physician Quality Reporting System,PQRS)量表新认知评价体系评估患者的认知功能水平.利用蛋白免疫印迹法检测蛛网膜下腔穿刺置管成功后(T0)、插入喉罩后即刻(T1)及手术后6 h(T2)、24 h(T3)和48 h(T4)不同时间点脑脊液中PI3K、AKT、pAKT、Bcl、Bax的浓度.结果:1)术后2组患者认知功能均出现降低,对照组变化较观察组明显,2组患者术后7 d的MMSE评分恢复正常,而PQRS评分则显示患者仍存在认知功能缺损.2)PQRS评分显示,对照组术后发生术后认知功能障碍(Postoperative Cognitive Dysfunction,POCD)14例(40%),观察组术后发生POCD10例(28%);MMSE评分显示,对照组术后发生POCD12例(34%),观察组术后发生POCD8例(23%).PQRS评分显示POCD发生率明显高于简易智能量表(Mini-mental State Examination,MMSE)评分(P<0.05).3)Western blotting结果显示:与T0相比,2组T1、T2、T3及T4时间点PI3K、pAKT、bcl水平明显降低,而bax水平明显升高,其中各时间点对照组各标志性蛋白水平变化的趋势较观察组明显(P<0.05).结论:醒脑静可促进老年人下肢矫形手术患者术后认知功能的尽快回复,其影响机制可能与介导PI3K/AKT信号通路的标志性蛋白表达水平有关.
关键词： 醒脑静 认知功能 老年 术后 PI3K/Akt信号通路 -
针刺足三里、曲池对MCAO模型大鼠梗死周围组织PI3K/AKT信号通路表达的影响
目的:评价针刺曲池穴及足三里穴对MCAO模型大鼠运动功能的影响及观察脑梗死灶周围组织PI3K/AKT信号通路表达的变化.方法:将45只SD大鼠随机分为假手术组、模型组及干预组,各15只.假手术组仅予切开皮肤分剥离神经血管后缝合,模型组及干预组大鼠予线栓法进行MCAO模型制备,造模成功后干预组大鼠予针刺曲池穴及足三里穴,1次/d,30 min/次,假手术组及模型组大鼠仅模仿捉拿、回笼,连续干预14 d,用Homecage Scan行为学评价大鼠不同时间段运动能力的变化,免疫组化检测PI3K、Bax的表达差异,免疫蛋白印迹(Western blotting)观察AKT、p-Akt的浓度变化.结果:1)Homecage Scan行为学检测显示:假手术组大鼠未见明显异常,造模大鼠出现明显偏瘫,随着时间的推移模型组及干预组大鼠花费在行走、后肢站立、舔毛3种行为的时间逐渐延长,其中干预组改善得更为明显(P＜0.05).2)造模组大鼠脑组织TTC染色出现明显白色梗死区域,干预组大鼠梗死区域明显小于模型组.3)免疫组化显示造模后大鼠PI3K降低,Bax升高,针刺足三里穴及曲池穴可上调PI3K及AKT的磷酸化程度,抑制了Bax的表达;4)Western blotting显示针刺足三里、曲池穴可上调造模大鼠AKT的磷酸化程度.结论:针刺曲池穴、足三里穴可改善脑缺血大鼠的神经缺损症状,其作用机制可能与PI3 K/AKT信号通路有关.
关键词： MCAo模型 大鼠 曲池穴 足三里穴 PI3K/Akt信号通路 -
抗癌扶正方对人肝癌细胞SMMC-7721PI3K/AKT信号通路的影响
目的:研究抗癌扶正方(KFP)对肝癌抑制作用的分子机制.方法:体外培养人肝癌细胞5MMC-7721,分别予以9.72,19.44,38.88 g·L-1的3个质量浓度的KFP作用于细胞,采用MTT法检测KFP对人肝癌细胞SMMC-7721生长增殖的影响,并通过Western Blot法检测KFP对人肝癌细胞SMMC-7721 PI3K/AKT通路凋亡相关蛋白表达的影响.结果:KFP以浓度及时间依赖的方式抑制人肝癌细胞SMMC-7721的增殖；Western Blot显示KFP作用于人肝癌细胞SMMC-7721后,人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN),caspase-9的活性增强,p-AKT的表达降低,且呈剂量依赖性.结论:KFP能增加入肝癌细胞SMMC-7721 PTEN的表达,进而抑制PI3K/AKT信号通路的激活,继之激活下游caspase-9促凋亡分子的表达,诱导人肝癌SMMC-7721发生凋亡.该研究表明PI3K/AKT信号通路在KFP诱导的人肝癌细胞SMMC-7721凋亡中起了重要作用.
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PI3K/Akt信号通路与血管性痴呆的关系及中药干预作用研究进展
血管性痴呆(vascular dementia,VaD)的临床表现主要包括脑血管病变和认知功能障碍,其发生、发展与脑血流量和神经元存活状态密切相关.研究表明,磷酸肌醇3-激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase,PKB/Akt)信号通路广泛存在各种细胞中,在脑微血管内皮细胞(brain microvascular endothelial cells,BMEC)中可以通过下游内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)/一氧化氮(nitric oxide,NO)途径调节血管舒缩功能及脑血流量;在神经元中可以对抗神经元凋亡,促进神经元存活,是VaD发生、发展过程的重要环节之一.到目前为止,一些研究发现部分中药、有效成分及复方可通过激活PI3K/Akt信号通路而发挥神经保护作用,有必要对该方面研究进展做一综述,以期为今后深入研究提供参考.
关键词： PI3K/Akt信号通路 血管性痴呆 中药 -
基于PI3K/AKT信号通路探讨标本配穴电针对慢性心肌缺血大鼠的保护作用及机制
目的:观察标本配穴电针治疗对慢性心肌缺血模型大鼠心肌线粒体超微结构及Bcl-2、Bax蛋白表达影响,探讨标本配穴改善心肌缺血的腧穴配伍效应及实现保护心肌缺血作用的基因调控途径.方法:将经过筛查心电图无异常的70只SPF级Wistar雄性大鼠根据随机数字表法分为正常组、模型组、LY294002组、IGF-1组、内关组、标本配穴组、标本配穴+LY294002组,每组10只,采用盐酸异丙肾上腺素(ISO)注射大鼠腹部皮下的方法制作心肌缺血模型(2mg/kg,共14d);所有针刺组在造模前进行电针针刺预处理,每次10min,电流1mA,波形疏密波,频率2Hz,共治疗21d.治疗后采用电镜观察线粒体超微结构的变化,采用免疫组化技术检测心肌组织中Bcl-2和Bax蛋白表达的变化.结果:与正常组比较,其它各组出现不同程度的心肌线粒体损伤,模型组心肌线粒体损伤明显,LY294002组线粒体损伤重,各组Bcl-2、Bax蛋白表达增加(P＜0.01);标本配穴+LY294002组线粒体损伤及Bcl-2、Bax蛋白表达介于两者之间.与模型组比较,IGF-1组、内关组及标本配穴组心肌线粒体损伤明显改善,而Bcl-2蛋白表达增加(P＜0.01),Bax蛋白表达相应减少(P＜0.01,P＜0.05),并且标本配穴组心肌线粒体损伤改善程度和Bcl-2蛋白表达增加、Bax蛋白表达减少与内关组明显比较差异显著(P＜0.01,P＜0.05).结论:标本配穴电针治疗通过PI3K/Akt信号通路可有效调控Bcl-2和Bax蛋白的表达活性,从而起到对慢性心肌缺血大鼠的保护作用.
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丹蒌片调控PI3K/Akt通路抗动脉粥样硬化研究
目的:探讨磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号转导通路在丹蒌片治疗动脉粥样硬化(AS)中的作用.方法:雄性日本大耳白兔30只随机分为空白对照组、高脂组、可定组、丹蒌片组、丹蒌片+可定组,每组6只.空白对照组饲喂普通饲料,高脂组在普通饲料中加入2％胆固醇及0.02％蛋氨酸;可定组、丹蒌片组、丹蒌片+可定组在普通饲料中加入2％胆固醇及0.02％蛋氨酸及相应的对照药物,复制家兔动脉粥样硬化病变模型.9周后取胸主动脉上段,苏木素-伊红(HE)染色法观察病理组织学改变;Western blot检测PI3K、p-Akt蛋白表达.结果:丹蒌片组、丹蒌片+可定组与高脂组比较AS病变明显延缓;丹蒌片组、丹蒌片+可定组PI3K及p-Akt蛋白表达水平均明显下调,与高脂组相比差异显著(P＜0.05,P＜0.01).结论:丹蒌片可通过抑制PI3K/Akt信号转导通路发挥抗AS药理作用.
关键词： 丹蒌片 动脉粥样硬化 PI3K/Akt信号通路 -
电针治疗对慢性心肌缺血大鼠心电图、心肌病理形态及PI3K/Akt信号通路的影响
目的:探讨标本配穴改善心肌缺血的腧穴配伍效应及实现保护心肌缺血作用的基因调控途径.方法:将70只SPF级Wistar雄性大鼠根据随机数字表法分为正常组、模型组、LY294002组、IGF-1组、内关组、标本配穴组、标本配穴+LY294002组,每组10只.正常组注射等剂量0.9％ NaCl溶液,余组采用盐酸异丙肾上腺素(ISO))大鼠腹部皮下注射的方法制作心肌缺血模型.于造模前开始干预,LY294002组和IGF-1组分别给予LY294002溶液和IGF-1溶液注射,共14 d.内关组电针“内关”干预,连接HAN-200型电针仪,每次10 min;标本配穴组电针“内关”“足三里”“关元”,连接HAN-200型电针仪,每次10 min;标本配穴+LY294002组,LY294002水溶液给药14d,造模前即给予电针“内关”“足三里”“关元”,均每日1次,共持续21d.所有针刺在造模前进行电针针刺预处理.检测干预前后大鼠心率(HR)及ST段电压的变化,采用HE染色观察各组大鼠心肌组织病理形态学的变化,并检测心肌PI3K、Akt mRNA表达.结果:造模后,各干预组大鼠心率、ST段电压均高于正常组(均P＜0.01);干预后,标本配穴组、IGF-1组和内关组心率、ST段电压较模型组改善(P＜0.01,P＜0.05),以标本配穴组、IGF-1组心率、ST段电压改善明显(P＜0.01).心肌组织病理形态学方面,模型组心肌缺血明显,LY294002组重,标本配穴+LY294002组介于两者之间;干预后,IGF-1组、内关组及标本配穴组心肌病理损伤明显改善,且IGF-1组和标本配穴组心肌组织病理损伤较内关组改善明显.PI3K、Akt mRNA表达方面,与正常组比较,造模后各组PI3K mRNA表达升高(P＜0.01,P＜0.05),IGF-1组与标本配穴组升高明显(均P＜0.01);LY294002组和标本配穴+LY294002组Akt mRNA表达降低(均P＜0.01,P＜0.05),余组Akt mRNA表达均升高(P＜0.01,P＜0.05),IGF-1组与标本配穴组Akt mRNA表达升高更明显(均P＜0.01).结论:标本配穴可改善慢性心肌缺血大鼠心率、ST段电压变化,减轻心肌组织病理损伤,效果明显优于单取“内关”者,PI3K/Akt信号通路可能参与了标本配穴对慢性心肌缺血大鼠保护的调节机制.
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健脾解毒方对过表达HBx肝癌HepG2细胞PI3K/AKT通路的影响
目的 观察健脾解毒方对过表达乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)的肝癌细胞增殖及PI3K/AKT信号通路相关因子表达的影响.方法 构建过表达HBx肝癌的HepG2细胞,给予不同浓度健脾解毒方药物血清进行干预,实验分为肝癌细胞空白组、pcDNA3.1组、pcDNA3.1-HBx组和健脾解毒方低、中、高剂量组.采用MTT法及流式细胞仪检测细胞增殖及凋亡水平,采用Western blot检测肝癌细胞p-PI3K、p-AKT蛋白表达.结果 成功构建过表达HBx的肝癌HepG2细胞,发现有促进肝癌细胞增殖及上调p-PI3K及p-AKT表达的作用.健脾解毒方药物血清干预后,可不同程度抑制肝癌细胞增殖、促进肝癌细胞凋亡,以及下调p-AKT、p-PI3K表达的作用,而健脾解毒方低剂量组对p-PI3K表达作用不显著.结论 健脾解毒方有抑制肝癌细胞增殖及促进凋亡的作用,其机制与下调PI3K/AKT通路相关因子表达有关.
关键词： 肝癌细胞 PI3K/Akt信号通路 乙型肝炎病毒X蛋白 健脾解毒方 -
艾烟可吸入物对大鼠神经细胞氧化损伤的影响
目的 探讨艾烟可吸入物(PM10)对大鼠神经细胞氧化损伤的影响及PI3K/Akt信号通路在其中的作用.方法 采用24 h内新生SD大鼠乳鼠前额叶皮质及海马组织体外培养原代神经细胞,H2O2诱导建立氧化损伤细胞模型;随机分为空白组、氧化损伤组、氧化损伤+PM10组、氧化损伤+PM10+抑制剂组、PM10组.采用TUNEL和DAPI染色观察神经细胞凋亡形态;MTT法及Western blot分别检测细胞存活率及目的蛋白表达,并用PI3K/Akt通路抑制剂LY294002验证作用通路.结果 MTT检测显示,200μmol/L H2O2能降低神经细胞50％存活率(P<0.001),0.1、0.5 ng/mL艾烟PM10能明显抑制H2O2诱导氧化损伤的神经细胞凋亡(P<0.001);TUNEL和DAPI染色显示,0.5μg/mL艾烟PM10能拮抗H2O2诱导氧化损伤神经细胞凋亡的形态学变化(P<0.001);Western blot检测显示,H2O2及LY294002能降低p-Akt、Bcl-2的表达(P<0.05,P<0.001),上调active-Caspase-3的表达(P<0.01,P<0.001),而艾烟PM10作用相反(P<0.01,P<0.001).结论 艾烟PM10能减少神经细胞氧化应激的凋亡,其机制可能是激活PI3K/Akt信号通路并调控下游凋亡蛋白Bcl-2、active-Caspase-3的表达,拮抗细胞凋亡.
关键词： 艾烟PM10 过氧化氢 细胞凋亡 PI3K/Akt信号通路 大鼠 -
和于泰辅助降糖片联合二甲双胍对糖尿病大鼠骨骼肌胰岛素抵抗的影响
目的 观察和于泰辅助降糖片联合二甲双胍对糖尿病大鼠骨骼肌胰岛素抵抗的影响,探讨其作用机制.方法 6~7周龄雄性ZDF(fa/fa)大鼠随机分为模型组、二甲双胍组、和于泰辅助降糖片组(降糖片组)、和于泰辅助降糖片联合二甲双胍组(联合组),另选ZDF(fa/+)大鼠为正常组,各给药组给予相应药物灌胃,连续6周.检测体质量、空腹血糖(FBG)、三酰甘油、总胆固醇(TC)、游离脂肪酸(FFA)、血清胰岛素水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),并进行口服葡萄糖耐量实验(OGTT);HE染色观察骨骼肌病理变化;RT-PCR和Western blot分别检测骨骼肌相应基因和蛋白表达.结果 与二甲双胍组、降糖片组比较,联合组大鼠TC、FFA、FBG水平及HOMA-IR显著降低(P<0.05,P<0.01);OGTT各时间点血糖水平及曲线下面积显著降低(P<0.05,P<0.01);HE染色肌纤维排列整齐,细胞核无增多及内移,未见明显炎细胞浸润;骨骼肌胰岛素受体(InsR)、蛋白激酶B(Akt)、葡萄糖转运蛋白4(Glut4)mRNA表达显著升高(P<0.05,P<0.01);骨骼肌磷酸化InsR、磷酸化Akt、Glut4蛋白表达显著升高(P<0.05,P<0.01).结论 和于泰辅助降糖片联合二甲双胍能够改善2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗,效果优于单独应用.
关键词： 和于泰辅助降糖片 二甲双胍 联合应用 PI3K/Akt信号通路 大鼠 -
金丝桃苷预处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤作用与PI3K/Akt信号通路的关系
研究金丝桃苷(hyperoside,Hyp)预处理对抗大鼠心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia reperfusion injury,MIRI)的保护作用及其与PI3K/Akt信号通路的关系.通过可逆性左冠状动脉前降支结扎法建立心肌缺血再灌注模型,给予大鼠心肌缺血30 min,复灌120 min.健康雄性SD大鼠60只,随机分为5组:假手术组(Sham组)、缺血再灌组(MIRI组)、Hyp预处理组(Hyp组)、Hyp预处理联合PI3K/Akt信号通路抑制剂LY294002组(Hyp+ LY组)及PI3 K/Akt抑制剂组(LY组).记录各组大鼠心脏血流动力学指标,测算心肌梗死面积和大鼠血清中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肿瘤坏死因子(TNF-α)及白介素-6(IL-6)活性.Western blot法检测心肌p-Akt,Akt,Bcl-2和Bax的蛋白表达.结果显示,与MIRI组比较,Hyp组大鼠心脏血流动力学指标明显改善,心肌梗死面积显著降低;血清中MDA含量和CK,CK-MB,TNF-α,IL-6活性降低,SOD,CAT和GSH-Px活性明显增强;p-Akt的蛋白表达和Akt磷酸化水平明显增强,且Bcl-2蛋白表达增强,Bax蛋白表达减弱(P＜0.01).而LY294002可显著取消Hyp的以上作用(P＜0.01).结果表明,Hyp对抗大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用机制可能与其激活PI3K/Akt信号通路,上调Bcl-2蛋白表达,下调Bax蛋白表达等作用有关.
关键词： 心肌缺血再灌注损伤 金丝桃苷 预处理 PI3K/Akt信号通路 -
丹皮酚通过抑制PI3K/AKT-NF-κB通路对LPS诱导的与平滑肌细胞共培养的大鼠血管内皮细胞的保护作用
该研究为观察丹皮酚(Pae)对脂多糖(LPS)诱导的与平滑肌细胞(SMC)共培养内皮细胞(VEC)的保护作用以及对磷脂酰肌醇3激酶(phosphoinositide-3-kinase,PI3K)/丝/苏氨酸激酶(ser-ine threonine kinase,AKT)/核因子κB(nucler factor-kappa B,NF-κB)信号通路的影响.采用组织块预消化贴壁法原代培养大鼠血管内皮细胞和大鼠血管平滑肌细胞;用Tran-swell小室建立VEC-SMC共培养模型;LPS(100 μg· L-1,7h)诱导VEC损伤;MTT法检测VEC活性;LDH试剂盒检测细胞通透性;Western blot法检测Pae(15,30,60 μmol·L-,24 h)对LPS诱导损伤的共培养VEC的PI3K/AKT及NF-κB信号通路的表达;Western blot法检测VEC的细胞核p-P65表达的影响.研究证实不同浓度的Pae可显著性抑制LPS诱导的VEC损伤,提高细胞活性;并且Pae能够明显下调LPS诱导的PI3K,p-PI3K,AKT,p-AKT的表达;下调NF-κB的表达水平并降低P65蛋白的生物活性,下调p-P65蛋白的表达;下调P65的转移入核.Pae对LPS损伤的VEC有保护作用,可能通过抑制H3K/AKT及NF-κB信号通路相关信号蛋白的表达.
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PI3K/Akt通路在芍药苷抗Aβ25-35诱导PC12细胞凋亡中的作用
目的:研究PI3 K/Akt通路在芍药苷对PC12细胞神经保护中的作用.方法:芍药苷组(5,10,20 μmol·L-1)预处理30 min,然后加入Aβ25-35(20 μmol·L-1)共同作用24 h;抑制剂LY294002(10μmol·L-1)于芍药苷(10μmol·L-1)作用前预处理30 min.用MTT比色法检测细胞存活率,Annexin-V/PI双染检测细胞凋亡率,以及Western blot法检测p-Akt,Bax,Bcl-2,cleaved caspase-3蛋白表达.结果:芍药苷可抑制Aβ25-35所诱导的PC12细胞毒性和凋亡,其保护作用可能是通过上调Akt磷酸化水平,增加Bcl-2蛋白表达、降低Bax蛋白表达、抑制caspase-3等的激活而实现的;抑制剂LY294002可减弱上述芍药苷的保护作用.结论:芍药苷可通过激活PI3K/Akt信号通路对Aβ25-35诱导PC12细胞损伤具有保护作用.
关键词： β淀粉样蛋白 芍药苷 阿尔茨海默病 PI3K/Akt信号通路 -
PI3K/Akt信号通路在乳腺癌内分泌治疗耐药中的作用及对策
乳腺癌是女性常见的肿瘤,大约75％的乳腺癌表达雌激素受体和/或孕激素受体.激素受体阳性的转移性乳腺癌患者通常采用内分泌治疗,然而由于内分泌治疗耐药的产生,其应用受到了限制.近年来发现,PI3K/Akt(丝氨酸/苏氨酸激酶)信号通路在乳腺癌的发展中发挥着重要作用.本文对PI3K/Akt信号通路在乳腺癌内分泌治疗耐药中的作用进行了综述,以期为雌激素受体阳性乳腺癌治疗提供新对策.
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单侧输尿管结扎对大鼠肾间质PI3K/AKT表达的影响
目的 探讨PI3K/AKT信号通路是否参与肾间质纤维化的发病过程.方法 将30只SD大鼠随机分为假手术组、UUO模型组,模型组行左侧输尿管结扎术.术后5、10和15 d分别处死各组中的5只大鼠,取左肾行HE和Masson染色,并用免疫组化方法检测肾小管-间质中TGF-β1、AKT1、磷酸化AKT1的表达.结果 模型组大鼠肾小管-间质细胞增多,肾小管基底膜增厚皱缩,纤维化明显,随时间进展而加重.不同时间的UUO模型组肾组织AKT1、磷酸化AKT1、TGF-β1表达显著高于假手术组(P＜0.01);于第10天模型组AKT1表达达高峰,于第15天磷酸化AKT1、TGF-β1表达达高峰;UUO大鼠肾组织第5天和第15天TGF-β1的表达与AKT1活性呈正相关,第10天和第15天梗阻肾的AKT1活性与肾小管-间质纤维化指数呈正相关(均P＜0.05).结论 AKT1、磷酸化AKT1在大鼠梗阻性肾病模型肾小管-间质中表达及AKT1活性明显增加,提示PI3K/AKT信号通路可能参与肾小管-间质纤维化的过程.
关键词： PI3K/Akt信号通路 TGF-β1 肾小管-间质纤维化
