甘南县音河镇兴业村人间布病流行情况调查报告

兴业村位于甘南县城东10公里处,共有村民500户,1 681人,其中男性825人,女性856人;养畜户139户,直接从事养畜人员162人;牲畜存栏数4 408头(只),其中,奶牛240头、小尾寒羊720只、绵羊3 420只、山羊28只.2004年3月3日该村村民不断有布鲁氏菌病病例报告,至7月10日累计达15例.我们于6月30日至7月10日深入兴业村进行了流行病学调查,现将调查结果报告如下.

连续核移植对异种山羊(Bore)克隆胚胎发育的影响

目的探讨连续核移植与异种山羊克隆胚胎发育之间的关系.方法分别以波尔(Bore)山羊耳部成纤维细胞、山羊-兔异种克隆桑椹胚卵裂球为核供体,以兔卵母细胞为受体,进行连续核移植.结果共构建145枚异种原代重构卵、73枚继Ⅰ代及20枚继Ⅱ代重构卵,经电融合后,获得重构胚数分别为90、58和14枚,融合率分别为62.1%、79.5%和70%;162枚重构胚在同等条件下进行体外共培养,卵裂率分别为72.2%、75.9%和28.6%,囊胚率分别为10%、13.8%和0%;融合率方面,原代、继Ⅰ及继Ⅱ重构卵之间无显著差异(P＞0.05);早期发育率无显著差异,但继Ⅰ代重构胚高于原代重构胚,相反,继Ⅱ代远低于前两者,差异极显著(P＜0.01).结论波尔山羊体细胞核经第1次核移植过程中异种受体卵胞质作用后,比高度分化的体细胞更有利于重构胚的发育,但异种山羊克隆胚卵裂球反复多次暴露在异种卵胞质中,可能不利于细胞核的发育.

山羊输卵管放置镍钛记忆合金硅橡胶可复性避孕栓组织结构观察

目的:观察镍钛记忆合金硅橡胶避孕栓的毒性反应、组织学改变.方法:镍钛记忆合金和硅橡胶制成输卵管避孕栓.18只山羊在常规消毒下提出右侧子宫及输卵管,在近宫角2cm处切开1.5cm纵切口,行右侧输卵管栓堵,将输卵管栓放入输卵管,左侧为自身对照.术后1周、2周、1、3、6、12个月各随访1次,每次有3只山羊将双侧输卵管及实验侧的输卵管栓子同时取出送病理,观察毒性反应及组织学变化.结果:山羊放置输卵管栓子术后1周、2周、1、3、6、12个月肉眼观察均无异常.组织学检查,术后1周输卵管内见有少量炎性细胞渗出、管腔变窄、但管壁无明显变化,也无周围组织粘连.术后半月～6个月,黏膜正常,黏膜下肌层无增生及萎缩,无炎性细胞浸润,浆膜无明显病理异常.术后12个月,输卵管内膜腺体和纤维细胞轻度增生,但浆膜无明显改变.结论:镍钛记忆合金硅橡胶可复性输卵管栓放置后组织相容性好,无明显组织学改变及毒副反应.

新疆和硕地区荒漠景观中无形体感染的流行病学调查

目的 明确无形体病在新疆南部和硕地区人群、山羊与媒介蜱种群中流行状况,探明该地区无形体种属多样性.方法 采集当地健康人和山羊的血液样本,捕捉蜱样本；利用间接免疫荧光方法检测血清无形体特异性IgG抗体；通过巢式PCR方法检测无形体16S rDNA基因片段,通过序列比对分析确定无形体种属特征.结果 和硕地区农牧民、山羊血清中无形体特异性IgG抗体阳性率分别为43.31％(55/127)和27.50％(55/200)；采集获得蜱共367只,包括3属4种,其中主要为亚洲璃眼蜱(47.41％)和短小扇头蜱(37.60％)；蜱、羊血样本无形体核酸阳性率分别为5.00％(18/360)和4.49％(7/156),人血中未检出无形体；序列测定与比对分析表明,阳性扩增序列与嗜吞噬细胞无形体(GU046565、GU064897、AB 196721)同源性高,分别为99.2％、99.5％和99.5％,与中央无形体16S rDNA(GU064903)序列一致,同源性为99.2％.结论 新疆和硕地区荒漠景观中存在人嗜吞噬细胞无形体与中央无形体的流行,并可能通过亚洲璃眼蜱与短小扇头蜱传播.

名人爱喝的养生汤

据说,在古希腊奥林匹克运动会上,每个参赛者都带着一头山羊或小牛到宙斯神庙中去,先放在宙斯祭坛上祭告一番,然后按照传统的仪式宰杀掉,并放在一口大锅中煮,煮熟的肉与非参赛者一起分而食之,但汤却留下来给运动员喝,以增强体力,说明在那个时候,人们已经知道在煮熟的食物中,汤的营养为丰富这个道理.

348 山羊黄芪中新的黄酮醇四苷

3D打印技术建立山羊腰椎融合模型及实验围手术期管理

目的:探讨个体化3D打印技术建立山羊腰椎融合模型的可行性及围手术期管理的注意事项.方法:根据10只雄性1～2岁、体重35～45 kg波尔山羊腰椎术前X线片及CT三维重建数据,术前确定理论撑开高度,再根据理论进钉点确定钢板长度、弧度、放置位置及上下位螺钉长度等参考值,设计并进行3D打印腰椎侧前路接骨板.全麻下切除山羊腰椎椎体及相邻椎间盘,将植骨后的钛笼植入山羊体内,使用3D打印侧路接骨板进行固定.术后进行饲养、补液、抗感染及术后并发症处理、呼吸消化围手术期管理等.结果:成功建模,10只山羊术后X线片及CT三维重建显示钛笼及接骨板位置较好,固定可靠.术后3个月山羊行腰椎CT三维重建及显微CT,观察脊柱融合情况.影像学检查显示,侧路接骨板固定钛笼植骨融合均在钛笼两端与椎体间形成致密的骨小梁.结论:该3D打印技术建立山羊腰椎融合模型,是一种有效,成功率高,融合可靠稳定的方法,围手术期管理其方法科学、实用,且更加人性化,对确保腰椎侧前方钉板内固定系统成功置入,并降低手术并发症的发生具有较强的指导意义.

CT辅助山羊腰椎解剖测量及与人体腰椎的对比研究

目的:通过对山羊腰椎的解剖测量以及与人体腰椎的对比研究,为腰椎假体的动物模型建立奠定基础.方法:通过计算机辅助软件Mimics 16.0对波尔山羊新鲜腰椎标本及健康成人腰椎的椎体、椎弓根、椎间盘等部位的解剖参数进行采集,终运用统计学软件对两者腰椎解剖特点进行对比研究.结果:山羊椎体前高<中高<后高,大值分别为(38.7±2.9)、(40.1±2.6)、(40.7±2.7) mm.其终板宽度大于其深度,整体呈心形或肾形外观.山羊上终板向外凸出,下终板凹陷较小,大值为(1.6±0.6) mm.山羊椎弓根高自L1至L6不断增大,大值为(30.5±1.9) mm;其椎弓根宽与夹角随着椎体序列的增加先减小后增大,小值分别为(6.7±0.4) mm与(45.9±2.6)°.山羊椎间盘前高>中高>后高,三者随着椎间隙的变化数值波动较小;其椎间孔高与宽亦变化较小,分别在(12.9±0.3)～(14.3±1.0) mm与(5.7±1.0)～(6.7±0.9) mm波动.对比结果 显示山羊腰椎椎体高、椎弓根高及夹角明显大于人类(P<0.05),而其终板宽与深、椎间盘高等明显小于人类(P<0.05).此外,两者某些结构如椎弓根高、椎间盘高等随着椎体序数的增加亦呈现出不同变化规律.结论:山羊腰椎虽然在某些方面如终板及椎间孔形态等与人体存在相似性,但是在诸多方面仍存在较大差异.掌握山羊腰椎的解剖特点及与人体之间的差异对于腰椎假体及相关技术的山羊动物研究具有重要的指导意义.

不同充填材料应用于山羊经皮椎体成形术的组织学研究

目的:研究聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)、磷酸钙人工骨(CPC)和复合重组人骨形态发生蛋白-2的磷酸钙人工骨(rhBMP-2/CPC)在山羊骨质疏松症模型上行经皮椎体成形术(PVP)后的组织学表现.方法:6～8岁雌性山羊8只,均行双侧卵巢切除术,术后4个月建立骨质疏松症模型.在C形臂X线机监视下,随机选取8只山羊的L2-L6的两节椎体行PVP,分别充填PMMA、CPC和rhBMP-2/CPC,保证每只山羊的两节穿刺椎体的充填材料各不相同,术后4个月处死所有动物,取出椎体,组织学观察.结果:8只山羊16个椎体的PVP均成功,共出现4个椎体的渗漏.肉眼观察:PMMA与松质骨界限清晰,一个椎体取材时交界面出现破碎和脱落现象;而CPC和rhBMP-2/CPC与椎体内松质骨界限不清,互相融合生长.HE染色光镜观察:PMMA与骨小梁松散结合,界限明显,未见PMMA吸收和新生骨形成;CPC均匀分布于骨小梁和骨髓组织内,有CPC吸收现象,同时可见有新生软骨样团块形成,并有新生骨组织形成向其中心长入;rhBMP-2/CPC除了CPC的表现外,可见成骨活动活跃.结论:在组织学上,rhBMP-2/CPC和CPC均具有降解活性和骨传导活性,优于PMMA.rhBMP-2/CPC还具有诱导成骨活性,可能成为PVP中强化骨质疏松性椎体的首选充填材料.

针刺对山羊"腧穴"pH值的影响

目的:研究针刺对穴位和非经穴位pH值的影响.方法:用针型pH生物传感针单独和同时针刺检测山羊穴位和旁开非经穴位处时pH值的变化.结果:①单独针刺时穴位和非经穴位的pH值都下降,穴位下降的更明显,二者比较差异有显著性意义(P＜0.05);②同时针刺穴位和非经穴位时,二者pH值下降的幅度差异无显著性意义(P＞0.05).结论:①针刺使穴位代谢增强更明显;②同时针刺穴位、非经穴位时局部代谢相互影响.

山羊股骨解剖学观测及其骨缺损模型的建立

目的:为骨组织工程的研究提供理想的动物模型.方法:选取20～25kg重的青山羊后肢6个,观察股骨和肱骨外形,并测量股骨长度、前曲度、髓腔近、中、远端直径.根据所得参数,研制股骨交锁髓内钉固定系统,并在8只山羊股骨上制备长2cm段状缺损模型.结果:山羊股骨外形与人相似,稍前曲.股骨长(15.1±0.86)cm;前曲度为(9±1.26).,髓腔近、中、远端直径分别为(12.6±0.36)mm、(12.3±0.05)mm、(12.5±0.31)mm,其差异无统计意义;自行研制的交锁髓内钉长12cm,直径9mm,用于骨缺损动物模型的内固定,无一例出现断钉和内固定失效,术后抖周骨缺损段仍被纤维组织充填,无骨性连接.结论:山羊股骨适于制备骨缺损和交锁髓内钉固定模型,其2cm段状骨缺损模型是研究组织工程骨较为理想的动物模型.

培养时间和传代次数对山羊输卵管上皮细胞周期和凋亡的影响

目的 利用山羊输卵管上皮细胞(OECs)探讨体外培养时间和传代次数对细胞生长的影响.方法 建立山羊OECs的体外培养体系,用流式细胞术分别对半数贴壁、刚贴满(贴壁1d)、贴满3d和贴满5d,以及原代、Ⅲ代和Ⅴ代细胞分别进行细胞周期和凋亡检测.结果细胞贴满3d和传至Ⅲ代时,细胞凋亡比率较低,处于静止期(G0/G1)细胞明显降低,极性线粒体受损明显降低;培养时间延长和传代次数增加后,凋亡比率显著升高,处于增殖期(S,G2/M)的比率显著降低,极性线粒体受损明显升高.结论采用OECs培养胚胎时,细胞应控制在Ⅲ代以内,且贴满时间不超过3d.

卵泡刺激素受体在山羊颈胸神经节的分布

目的 探讨卵泡刺激素(FSH)是否影响心肺功能活动的自主神经调节.方法 取雄性和雌性成年山羊的颈胸神经节各5对,经免疫组织化学SP法染色后,观察FSH受体在山羊颈胸神经节的分布特点.结果 在颈胸神经节内,FSH受体免疫阳性产物主要存在于神经元的细胞质和细胞膜,为强阳性或中等阳性染色,而细胞核呈空泡状,不着色.此外,在神经节内的支持细胞、过路纤维、施万细胞以及血管内皮细胞中FSH受体呈弱阳性染色,有少量分布.图像分析表明,该神经节内神经元胞体的FSH受体相对表达量极显著高于其他非神经元胞体结构(P＜0.01).结论 颈胸神经节中神经元细胞是FSH作用的主要靶细胞,提示FSH可能通过影响该神经节的神经元活动,从而影响其发出的交感节后神经而调节心肺功能活动.

促性腺激素释放激素受体在雌性山羊颈胸神经节中的分布

目的 探讨颈胸神经节是否具备接受促性腺激素释放激素(GnRH)作用的条件.方法 实验采用免疫组织化学SP法,观察GnRH受体在雌性山羊颈胸神经节中的分布特点.结果 在颈胸神经节中,神经元胞体均为GnRH受体免疫反应阳性,其细胞膜以及膜下胞质中的颗粒状物质呈棕黄色,GnRH受体为强阳性表达,而胞核呈阴性表达.部分神经元可见其突起,呈黄色,GnRH受体为中等阳性表达.卫星细胞也呈黄色,GnRH受体为中等阳性表达.图像分析表明,呈阳性反应的神经元胞体与节内其他阳性成分相比,其GnRH受体相对表达量差异性极显著(P＜0.01).结论 在雌性山羊颈胸神经节中,神经元胞体是GnRH发挥作用的主要靶细胞,颈胸神经节具备接受GnRH作用的条件.提示GnRH有可能通过作用于颈胸神经节交感节后神经元上的GnRH受体来影响心肺器官的功能活动,即颈胸神经节可能是心肺功能活动中协调GnRH内分泌调节和该神经节自主神经调节两途径之间的中继站.

羊乳腺炎乳腺导管及腺泡铸型

目的 揭示金黄色葡萄球菌感染对泌乳期羊的乳腺导管及腺泡的三维立体构造的影响.方法 选取3头产后母羊并建立羊乳腺炎模型,在羊左侧乳腺注射浓度为1012CFU/L的金黄色葡萄球菌1 ml,右侧乳腺作为对照,注入1 ml生理盐水,羊的左侧乳腺在攻菌12h、24 h、36 h、48 h后,观察其临床症状.使用奶牛隐性乳房炎快速诊断技术(BMT)确认乳腺炎模型构造成功,取下乳腺后运用导管铸型技术获得羊乳腺导管、腺泡的铸型标本,利用扫描电子显微镜技术,检测乳腺小导管及腺泡的微观结构.结果 铸型标本结果显示,以输乳管为第1级,多可达14级分支,导管分支间未见吻合现象,各级分支导管与上一级导管主轴延长线的夹角＜ 90°.经扫描电子显微镜观察发现,正常乳腺导管末梢小导管管壁光滑,末端多呈膨大球状,腺泡直径(79.03±14.91) μm,金黄色葡萄球菌感染的乳腺导管表面有凹陷,末端大部分腺泡萎缩,腺泡直径(42.89±17.17) μm.结论 金黄色葡萄球菌感染能破坏乳腺腺泡的正常结构.

山羊心脏中心纤维体内的骨髓组织

目的探讨山羊心脏中心纤维体的组织结构.方法用石蜡切片,HE、Masson和苏木素-美蓝-天青-伊红染色,光镜观察.结果山羊中心纤维体为骨组织,其中有骨小梁和典型的骨髓组织.结论山羊中心纤维体可能具有造血功能.

山羊耳皮肤成纤维细胞的传代培养及活力分析

目的研究体外传代培养山羊耳皮肤成纤维细胞活力及染色体倍性. 方法体外培养山羊耳皮肤成纤维细胞至17 代,并利用TUNEL原位分析、BrDU结合免疫标记以及低渗悬滴制备染色体的方法,对第5代和第17代细胞的细胞凋亡、DNA合成和染色体倍性进行了分析. 结果山羊皮肤成纤维细胞在体外能够传代到17代以上,85%以上(42/49 )的细胞染色体为正常的2倍体,并且与第5代的细胞相比较,细胞凋亡(1.75% vs 1.15%) 、DNA合成(17.43% vs 16.89%)都没有显著的变化(P>0.05). 结论长期传代培养(17代)的成纤维细胞的活力和DNA物质没有受到严重损伤,可以用来作为核移植的供体.

牛-山羊异种克隆早期胚的分叶状线粒体

利用牛卵母细胞和山羊耳皮肤成纤维细胞制作异种克隆胚,分别于激活后1、36、44、60、144 h,观察发育情况,并收集原核期胚,2-细胞胚,4-细胞胚,8-细胞胚和桑甚胚.光镜检查各时期胚,分别选取形态良好的5枚,用2.5%的戊二醛固定24 h后,用1.5%锇酸后固定40 min,再用乙醇逐级脱水并用丙酮置换,Epon-812包埋,后包埋块放入烤箱内聚合(37℃,24 h,45℃,24 h;60℃,24 h).

吉林地区山羊中泰勒虫感染检测及其序列分析

泰勒虫病是由泰勒科(Theileriidae)泰勒属Theileria原虫引起经蜱传播的一种疾病,可以侵袭羊的网状内皮系统细胞和红细胞,本次研究的目的是了解我国吉林地区山羊中泰勒虫的感染情况以及主要的基因型.在吉林珲春地区采集70份山羊血液标本.基于泰勒虫18S rRNA基因,分两段设计扩增全长的属特异引物,对采集到的血液样本进行PCR检测,将扩增产物进行测序,与GenBank中注册的核苷酸序列进行同源性比较,采用MEGA5.0软件进行遗传发育分析.结果表明在吉林珲春地区采集到的山羊血液标本中有51只(72.9％)山羊感染了泰勒虫,通过测序获得近全长1 600 bp的泰勒虫基因序列(KC429038).经过Blast序列比对分析,与吕氏泰勒虫Theileria luwenshuni接近,和T.luwenshuni(JX469518)相差一个碱基,同源性为99％.从构建的系统发育树可以看出本研究所获得序列与吕氏泰勒虫T.luwenshuni接近位于同一小分支.本研究说明我国吉林地区山羊中泰勒虫感染较为普遍,初步认为吕氏泰勒虫可能为本地区的一个较为流行的基因型.

国产狂犬病纯化疫苗的研制和应用前景

众所周知,狂犬病一旦出现症状几乎是100%死亡,因此唯一的预防措施就是在被疯动物致伤前或致伤后注射狂犬病疫苗.70年代前世界各国所用的狂犬病疫苗都是粗制的成年动物(绵羊、山羊、家兔)或乳鼠的脑组织或鸡胚组织生产的疫苗,这种疫苗不但副反应大,免疫效果也很差.