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中国10个省级疾病预防控制中心无形体检测实验室质量控制分析
目的 对10个省、市级疾病预防控制中心(CDC)无形体及立克次体实验室检测质量控制进行评估.方法 现场培训血清学及分子生物学标准化操作.其中血清学技术采用WHO立克次体协作中心推荐的标准方法--微量间接免疫荧光试验(mIFA),分子生物学技术使用2套巢式PCR分别扩增立克次体科(groEL基因)及无形体科(16S rRNA)大部分成员.标准化质控血清S1及S2、PCR模板P1、P2、P3、P4、P5及部分关键试剂,采用双盲法由中国CDC传染病预防控制所无形体室向参加单位发放,按统一实验操作程序,参加单位在各自本土化仪器、设备条件下进行操作.结果 参加培训的10个省(市)CDC实验室,7个单位反馈血清学结果,S1及S2标准血清质控合格率均为71.4%(5/7).反馈PCR结果的8个参加单位,其灵敏性存在较大差异,P2和P3模板合格率为62.5%(5/8),P4、P5、P6模板合格率为50%(4/8).各单位血清学及PCR操作重复性评估均在允许误差范围内.结论 参加单位均存在不同程度实验操作系统误差,应分析各自原因,加以改进并进一步优化条件,提高该类疾病诊断及鉴别诊断能力.强调室内质控日常化管理并定期参加外部质量控制活动.
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中国嗜吞噬细胞无形体及无形体病研究进展
无形体病是严重威胁人畜健康的新发蜱传人兽共患病.2006年,我国某医院发生无形体病院内感染事件,引起卫生部、临床及疾病监测组织的高度重视.2008年和2009年,卫生部先后下发文件要求认真做好无形体病的防治工作.本研究就近年我国无形体病的监测、临床防治及基础研究等作一综述.
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中国无形体人与人传播院内感染事件引发的公共卫生思考
2008年美国医学会著名杂志JAMA第300期第19卷发表了由中国疾病预防控制中心(CDC)传染病预防控制所等国内外7家专业机构共同发表的研究论文,题目为"中国人粒细胞无形体院内传播感染"[1].这是世界范围内首次报告的人粒细胞无形体病发生在人与人之间相互传播的事件,也是中国第一次报道的人粒细胞无形体感染确诊病例.同期,美国纽约州医学院著名流行病学与公共卫生学专家Peter J.Krause和Gary P.Wormser教授对该文做了充分的肯定并发表了重要述评[2].作为该项研究的第一完成单位及作者,就中国人粒细胞无形体院内感染事件引发的公共卫生问题与广大临床工作者与疾病监测工作者做以下借鉴式的探讨.
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未来传染病
1983-2002二十年间,我国发现了大约十种新发传染病,包括莱姆病、军团菌肺炎、小肠结肠耶尔森氏菌感染、大肠杆菌O157:H7感染、成人轮状病毒、肾综合征出血热、C型肝炎、空肠弯曲菌感染、HIV、O139霍乱等[1].2003-2015年间,我国发现了大约12种新发突发传染病,包括SARS、H5N1禽流感、H7N9禽流感、H1N1流感、人粒细胞无形体病、序列7型猪链球菌感染、C群流脑、新型布尼亚病毒感染、福氏志贺氏菌XV血清型感染,MERS(Middle East Respiratory Syndrome),手足口,登革热等[2,3].
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新疆和硕地区荒漠景观中无形体感染的流行病学调查
目的 明确无形体病在新疆南部和硕地区人群、山羊与媒介蜱种群中流行状况,探明该地区无形体种属多样性.方法 采集当地健康人和山羊的血液样本,捕捉蜱样本;利用间接免疫荧光方法检测血清无形体特异性IgG抗体;通过巢式PCR方法检测无形体16S rDNA基因片段,通过序列比对分析确定无形体种属特征.结果 和硕地区农牧民、山羊血清中无形体特异性IgG抗体阳性率分别为43.31%(55/127)和27.50%(55/200);采集获得蜱共367只,包括3属4种,其中主要为亚洲璃眼蜱(47.41%)和短小扇头蜱(37.60%);蜱、羊血样本无形体核酸阳性率分别为5.00%(18/360)和4.49%(7/156),人血中未检出无形体;序列测定与比对分析表明,阳性扩增序列与嗜吞噬细胞无形体(GU046565、GU064897、AB 196721)同源性高,分别为99.2%、99.5%和99.5%,与中央无形体16S rDNA(GU064903)序列一致,同源性为99.2%.结论 新疆和硕地区荒漠景观中存在人嗜吞噬细胞无形体与中央无形体的流行,并可能通过亚洲璃眼蜱与短小扇头蜱传播.
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无形体与人粒细胞无形体病
无形体病(Anaplasmosis)是一类新发的重要人兽共患自然疫源性疾病[1].人粒细胞无形体病(Human granulocytic anaplasmosis,HGA)是由嗜吞噬无形体(Anaplasma phagocytophilum)引起,主要侵染人末梢血中性粒细胞的蜱源立克次体疾病[2].
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2005-2010年北京市立克次体病流行病学特征分析
立克次体(Rickettsia)是一类严格细胞内寄生的原核细胞型微生物,人类通过节肢动物人虱、鼠蚤、蜱或螨的叮咬而感染立克次体.近几年,恙虫病、人粒细胞无形体病等立克次体病在我国部分地区发病呈上升趋势,目前我国至少存在10余种立克次体病,其中包括流行性斑疹伤寒、地方性斑疹伤寒、恙虫病、北亚蜱传斑点热、黑龙江蜱传斑点热、内蒙古蜱传斑点热、Q热、人单核细胞埃立克体病、人粒细胞埃立克体病、人粒细胞无形体病,以及巴尔通体病等疾病[1-3].为了解北京市立克次体病的发病趋势及流行规律,为合理制订防控措施提供科学依据,笔者对2005 -2010年北京市恙虫病、斑疹伤寒和人粒细胞无形体病等3种立克次体病病例的流行病学特征进行分析,现报告如下.
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浙江省家畜动物无形体分子流行病学调查
目的 调查浙江省天台、安吉及金华县家畜动物牛及山羊无形体感染状况.方法 以在册户籍为准,采用随机方法抽取调查点每农户5只山羊及5头牛,采集5ml静脉血分离血清,采用WHO推荐的微量间接免疫荧光方法(mlFA)进行血清IgG抗体检测;动物血球标本用于提取DNA进行无形体16S rRNA基因扩增.PCR产物测序并进行同源分析比较,同时进行遗传变异分析.结果 当地家畜动物存在较高无形体携带率(39.42%),主要分布在天台县;无形体流行株16S rRNA基因存在较大变异性,除发现15种独立核酸变异序列外,至少存在5种优势序列变异株.结论 浙江省家畜动物普遍存在无形体携带状况;进一步开展人群无形体病调查及分子流行病学研究十分必要.
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东北林区啮齿动物中蜱媒立克次体检测及复合感染研究
目的 了解东北林区啮齿动物感染多种蜱媒立克次体情况.方法 采用PCR方法对吉林省集安、辽宁省宽甸林区采集的野鼠标本进行无形体、埃立克体16S rRNA和斑点热立克次体(SFGR) ompA基因片段检测.结果PCR检测鼠脾标本共132份,埃立克体、无形体、SFGR阳性率分别为14.39%、6.06%和10.61%.其中,集安66份,埃立克体、无形体、SFGR的阳性率均为7.58%;宽甸66份,埃立克体、无形体和SFGR的阳性率分别为21.21%、4.55%和13.64%,埃立克体感染率明显高于无形体和SFGR(x2=8.058,P=0.018).宽甸野鼠以埃立克体感染为主,阳性率明显高于集安(x2=3.935,P.=0.047).不同鼠种埃立克体、无形体和SFGR的检测阳性率分别为黑线姬鼠13.79%、6.90%和13.79%,林姬鼠20.00%、4.00%和8.00%.132份野鼠标本中,埃立克体与无形体复合感染标本2份(1.52%),埃立克体与SFGR复合感染标本3份(2.27%),复合感染率为3.79%.结论 调查地区野鼠中无形体、埃立克体、SFGR感染普遍,且存在复合感染,说明可能存在三者混合自然疫源地.
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浙江省建德市蜱媒传染病综合监测研究
目的 了解建德地区蜱媒传染病主要宿主和媒介的种群密度、季节消长、染带关系和病原体携带状况,为蜱媒传染病预防控制提供科学依据.方法 采用布旗法、宿主动物体表检蜱法采集蜱,用鼠笼捕捉鼠形动物,采用PCR方法检测其蜱媒传染病感染情况.结果 建德地区主要蜱种有长角血蜱、中华硬蜱和镰形扇头蜱,长角血蜱为优势种,布旗法6月蜱密度高,体表检蜱法6月带蜱率高.在蜱及宿主动物中检出嗜吞噬细胞无形体、巴贝西原虫、查菲埃立克体、立克次体、巴尔通体、肾综合征出血热病毒6种蜱媒传染病病原体,并存在病原体复合感染.结论 建德地区蜱媒传染病的宿主和媒介广泛分布,而且携带多种病原体,需要采取措施进行防制.
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发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒概述
2007年以来,中国疾病预防控制中心在对湖北、河南、江苏、浙江等地所报告的高度散发发热伴血小板减少病例(SFTS)进行了人粒细胞无形体感染监测,但发现,大部分病例不能检测到无形体特异性核酸或抗体.
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浙江西天目山部分动物感染无形体种属调查
目的:了解浙江西天目山家畜和啮齿动物中流行的立克次体无形体属种型,分析其16S rRNA基因变异。方法从动物肝脾和血液中提取DNA,PCR扩增无形体属16S rRNA片段;测序,采用MEGA5.0软件进行序列比对和系统发生分析。结果129只动物中,1只牛、8只羊、8只啮齿动物检出无形体属16S rRNA 片段,序列比对和系统发生分析表明,检出的无形体属16S rRNA包括嗜吞噬细胞无形体、边缘无形体、中央无形体和牛无形体,还检测到变异较大的16 S rRNA基因。结论西天目山动物中存在无形体属立克次体感染,其中啮齿动物中发现的变异株可能为一种与牛无形体紧密相关的新种型。
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新型布尼亚病毒感染的流行病学及诊治进展
近年来,中国部分地区相继发现并报道了以发热伴血小板减少为主要表现的感染性疾病病例,其中少数重症患者因多器官功能损害,救治无效死亡[1-2].部分病例为人粒细胞无形体病[3-4],但大多数病例不能检测到人粒细胞无形体的核酸和特异性抗体.2011年3月,Yu等[5-6]报道在中国河南、湖北等6省发热伴血小板减少综合征(severe fever with throbocytopenia syndrome,SFTS)大部分病例标本中存在一种属于布尼亚病毒科的新病毒,初步认定这些发热伴血小板减少病例与检测发现的该新病毒感染有关,并确定为布尼亚病毒科白蛉病毒属的一种新病毒,命名为发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒 (severe fever with throbocytopenia syn-drome bunyavirus,SFTSV).
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新型布尼亚病毒感染17例临床观察
"发热伴血小板减少综合征"是以发热、血小板减少和多脏器功能损害为主要临床表现的一类疾病,其病因尚不确切,根据我国疾病预防控制中心研究表明,人粒细胞无形体、新型布尼亚病毒可能是该综合征的致病原,是经蜱传播的一种自然疫源性疾病[1].2006年,我国安徽省报道了首例人粒细胞无形体病[2],此后在其他省份陆续有散发病例报道.
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对不明原因发热者要考虑到人粒细胞无形体病的诊断
立克次体病是由各种立克次体感染导致的人兽共患自然疫源性疾病.立克次体是革兰阴性胞内寄生菌,生物学特征介于病毒和细菌之间,在动物宿主包括啮齿动物如鼠类和家畜等贮存宿主体内繁殖,传播途径主要是由节肢动物蜱、螨、蚤、虱等媒介的叮咬或暴露,以及气溶胶方式进行传播.传统的立克次体病包括斑疹伤寒、恙虫病、斑点热、战壕热、Q热,其主要致病机制是病原体侵染血管内皮细胞导致小血管炎和血管周围炎.近年来世界范围内新发立克次体病不断出现,如人粒细胞无形体病及人单核细胞埃立克体病等.
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发热伴血小板减少综合征——由新型布尼亚病毒感染导致的一种新发传染病
多种病原可导致"发热伴血小板减少",包括病毒性出血热如肾综合征出血热、新疆出血热和登革热等,立克次体类疾病如斑疹伤寒、人埃里克体病及粒细胞无形体病等,以及严重细菌感染脓毒血症、DIC.近年来,我国部分地区相继发现以"发热伴血小板减少"为主要表现的感染性疾病病例,主要传播途径疑为经蜱虫叮咬.
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光山县蜱虫叮咬部分人群新型布尼亚病毒隐性感染的筛选
发热伴血小板综合征是近年来一类新发的人兽共患自然源性疾病。2007年5月河南省信阳市光山县连续出现几个以腹痛腹泻、恶心呕吐、厌食乏力和不明原因发热伴多脏器损伤、其中3例初步诊断为“急性肠胃炎”的患者,因不能确诊并出现了死亡病例。经流行病学调查,部分患者有蜱虫叮咬史,当时称为“疑似无形体病”。2007年7月光山县人民医院在患者身上捉住第1只蜱虫[1]。目前研究认为是蜱虫叮咬所致的新布尼亚病毒感染所致,即发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒(severe fever with thrombocytopenia syndrome bunyavirus,SFTSV),但是蜱虫叮咬后是否一定感染SFTSV,SFTSV阳性携带者是否发病等规律亟待进一步研究。
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我国附红细胞体感染人畜流行病学
附红细胞体病(Epery throjoonesis)简称附红体病,它是由附红细胞体(Eperythrozoon)感染引起的人畜共患传染病.附红体是寄生于人畜红细胞表面、血浆及骨髓中的一群微生物.1928年在齿齿动物中查到类球状血虫体,以后相继在绵羊、牛和猪等家畜中发现类似的微生物.1986年Puntaric等正式描述人类附红体病.虽然如此,对附红体分离培养尚未成功,故尚无准确定位,暂列为立克次体目、无形体科、血虫体属.在国际上尚未见到对人畜附红细胞体感染人畜的流行病学的报道.
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Q热、埃立克体病的研究进展
立克次体病是一类严重危害人类健康的自然疫源性疾病,在历史上曾经造成重大灾难,现已成为世界性关注的疾病,但我国立克次体方面的相关报道较少.近年来,发现了一系列新的立克次体所致疾病,成为公共卫生领域的新课题.立克次体疾病复杂多样,且临床表现无明显特异性.现对Q热及埃立克体病的相关研究进展进行综述.
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咸宁市一起不明原因发热疫情实验室检测结果分析
目的 查明不明原因发热疫情的病因,为制定防治措施提供实验依据.方法 采集病人及密切接触者静脉血液、粪便、鼻咽拭子、尿液等样品.应用胶体金法检测病人鼻咽拭子.利用全自动血球、生化等分析仪器进行全血、尿液及血清标本的检测,同时应用酶联免疫吸附试验(ELISA)、间接免疫荧光(IFA)等方法对血清标本进行急性期、恢复期抗体(IgM、IgG)检测,血液、粪便等标本采用增菌培养等方法进行病原分离鉴定.结果 运用ELISA、IPA等方法检测首发病例及续发病例血清(急性期、恢复期)标本6份,临床及血清学等实验室共检测白细胞、丙氨酸转氨酶、伤寒、流感、流行性出血热、登革热、无形体等20项指标,其中抗无形体抗体(IgG)2份阳性,其效价分别为1∶64、1∶128.其他血清学结果均阴性.结论 该疫情试验结果还有待于无形体病原分离及相关的实验鉴定证实.