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特异性CD8+T细胞与人巨细胞病毒感染
人巨细胞病毒(Human Cytomegalovirus,HCMV)是疱疹病毒科β属的一种双链DNA病毒,在正常人群中普遍易感,在发达国家人群血清HCMV抗体检出率约40％ ～ 60％,而在发展中国家几乎达到100％ [1].与其他人类疱疹病毒不同,HCMV原发性感染通常为隐性感染,临床上表现为无症状状态,潜伏感染是依赖病毒复制的慢性免疫抑制而不是依赖病毒转录模式的改变.对于免疫抑制人群来说,HCMV容易发生激活感染,病毒复制难以控制,可以出现明显的组织损坏.HCMV激活感染是异基因造血于细胞移植和实体器官移植后患者发病率和死亡率不断攀升的主要原因,骨髓抑制、肾毒性、耐药病毒株的出现等治疗的不良反应限制了抗病毒药的抢先治疗[2-3].
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复发性流产慢性内膜炎患者内膜免疫细胞的变化
目的 观察复发性流产(RM)患者中慢性子宫内膜炎(CE)患者内膜免疫细胞表达的变化,以期探讨子宫内膜免疫平衡受损的机制. 方法 回顾性分析2015年10月至2017年2月在深圳中山泌尿外科医院生殖医学中心就诊的177例RM患者的临床资料,按照是否合并CE分为CE组和非CE组,于黄体中期取子宫内膜样本.免疫组化分析两组内膜CD138、CD56、CD8、Foxp3及CD68的表达情况,并运用Vectra(R)自动病理成像定量分析系统分别计算各阳性细胞占内膜总细胞的比例. 结果 RM患者中CE的发生率为10.2％.与非CE组比较,CE组子宫内膜CD56+ NK细胞和CD68+巨噬细胞比例无显著变化(P＞0.05),而CD8+T细胞比例[(6.29±4.26)％ vs.(3.45±1.79)％,P=0.003]和Foxp3+ Treg细胞比例[(0.18±0.86)％vs.(0.11±0.75)％,P＜0.001]显著增高. 结论 在RM人群中,CE可能导致子宫内膜CD8+T细胞和Foxp3+ Treg细胞比例上调,但其具体的分子机制还需进一步研究.
关键词： 慢性子宫内膜炎 复发性流产 CD8+T细胞 Foxp3+ Treg -
Treg、CD8+T细胞在食管胃交界部腺癌中的分布及其与临床病理参数的关系
目的:探讨Treg、CD8+T细胞在食管胃交界部腺癌(AEC)中的分布及其与临床病理参数的关系.方法:收集60例AEC癌组织病蜡块作为实验组;选取永州市中心医院收治的18例胃溃疡患者的病理蜡块作为对照组.应用免疫组织化学方法对实验组和对照组的胃溃疡组织进行染色,以Foxp3作为Tregs的标价,检测Tregs和CD8+T细胞的表达水平,并对两者在实验组和对照组的分布情况与TNM分期、分化程度、淋巴转移、肿瘤部位的关系等在组别内进行分析.结果:实验组中Foxp3、CD8+T细胞分布阳性率明显高于对照组,P＜0.05,具有统计学意义;实验组中有淋巴结转移组Foxp3+的分布阳性率高于无淋巴结转移组,肿瘤组织学分级为低分化组Foxp3+的分布阳性率显著高于组织学分级为高-中分化组,肿瘤的TNM分期较晚(Ⅲ)组明显高于TNM分期较早(Ⅰ～Ⅱ)组,P＜0.05,具有统计学意义;肿瘤组织中Foxp3和CD8在AEG中分布呈负相关,P＜0.05,具有统计学意义.结论:Foxp3+ Treg的表达水平与AEG的发生发展相关,Treg和CD8+T细胞在AEG肿瘤组织中分布呈负相关性,肿瘤的发展,可能是由于Treg对CD8+T细胞功能的抑制.
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咳喘宁对病毒诱发哮喘模型大鼠CD4+、CD8+T细胞内信号转导子和转录激活子6表达的影响
目的通过观察咳喘宁对呼吸道合胞病毒(RSV)诱发哮喘模型大鼠CD4+、CD8+T细胞内信号转导子和转录激活子6(STAT6)表达的影响,阐明咳喘宁防治RSV诱发支气管哮喘的机理。方法分别从磷酸盐缓冲液(PBS)对照组、模型组大鼠外周血中提取单个核细胞,采用免疫磁珠法分离获得CD4+、CD8+T细胞并对其行纯度鉴定与活力检测。采用免疫荧光法,使用流式细胞仪测定T细胞内STAT6蛋白的表达水平,以中药咳喘宁进行干预,动态观察细胞培养过程中,咳喘宁对CD4+、CD8+T细胞中STAT6蛋白表达的调节作用。结果免疫磁珠法获得的CD4+、CD8+T细胞纯度与活力均支持实验的下行进展。与 PBS 对照组比较,模型组 CD4+T 细胞含量显著升高(P＜0.01),CD8+T 细胞含量升高不明显(P＞0.05)。模型组大鼠CD4+T与CD8+T细胞内STAT6的表达增高,咳喘宁治疗组CD4+与CD8+T细胞内STAT6的表达水平比模型组显著下降,差异有统计学意义(P＜0.01)；与地塞米松、沙丁胺醇组比较,咳喘宁组 CD4+、CD8+T 细胞内 STAT6的表达水平略高,但差异无统计学意义(P＞0.05)。结论咳喘宁通过下调哮喘模型大鼠CD4+、CD8+T细胞内STAT6的表达,纠正哮喘中Th2细胞的过度增殖分化,影响Th2免疫应答优势,从而减少伏痰的产生,达到防治支气管哮喘的目的。
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TGF-β/Smad信号通路在艾滋病患者CD8+T细胞功能损害中的作用
探讨TGF-β/Smad信号通路在艾滋病患者CD8+T细胞功能损害中的作用.在HIV感染者(CD4+T细胞计数≥200个/μL)和艾滋病病人(CD4+T细胞计数＜200个/μL)中各抽取30例,另以30例健康成人为对照.取研究对象的外周静脉血,流式细胞术检测CD8+T细胞CD28分子和磷酸化Smad2/3蛋白(p-Smad2/3),酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血浆中TGF-β1、IFN-γ和TNF-α.健康人、HIV感染者和AIDS病人CD8+ CD28+双阳性细胞占CD8+T细胞的比例分别为47.75％、47.40％和36.20％(中位数),AIDS病人低于正常人和HIV感染者(P＜0.05);p-Smad2/3阳性CD8+T细胞占CD8+T细胞的比例分别为79.15％、55.60％和60.60％(中位数),HIV感染者和AIDS病人低于健康人(P＜0.05);血浆TNF-α分别为(147.92±1.47) pg/mL、(60.04±1.78)pg/mL和(54.43±2.03)pg/mL,HIV感染者和AIDS病人低于健康人(P＜0.05);血浆TGF-p1和IFN-γ的组间差异无统计学意义.TGF-β/Smad信号通路可能参与了艾滋病患者CD8+T细胞的异常激活与功能损害.
关键词： 艾滋病 TGF-β/Smad信号通路 CD8+T细胞 免疫功能 免疫激活 -
卵巢癌细胞通过P38MAPK通路促进CD8+调节T细胞的生成
目的 探讨丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路在卵巢癌细胞(SKOV3)诱导CD8+ Treg分化过程中的作用.方法 建立SKOV3与健康人CD8+T细胞体外共培养体系,设置CD8+T细胞单独培养组为对照组.共培养5 d后,收集各组CD8+T细胞,荧光定量PCR和流式细胞术检测CD8+T细胞中Treg相关标志物(CD25、Foxp3、CD28)的表达率;功能抑制试验检测两组CD8+T细胞对na(i)ve CD4+T细胞增殖能力的影响;Western blot检测MAPK通路相关蛋白(ERK/p-ERK、JNK/p-JNK、P38 MAPK/p-P38 MAPK)的表达水平;P38 MAPK特异性抑制剂SB203580预处理CD8+T细胞后,评价CD8+T细胞中Treg相关标志物(CD25、Foxp3、CD28)的表达变化.结果 共培养组CD8+T细胞中CD25及Foxp3表达率均显著高于对照组(P＜0.05),CD28表达率显著低于对照组(P＜0.05);共培养组CD8+T细胞相比对照组,抑制na(i)ve CD4+T细胞的增殖力增强;Western blot结果显示,共培养组p-P38 MAPK的表达水平显著高于对照组(P＜0.05),SB203580预处理后CD8+T细胞中Treg相关标志物表达率均下调.结论 卵巢癌细胞通过活化CD8+T细胞的P38 MAPK信号通路诱导具有抑制作用的CD8+ Treg的生成,促进肿瘤进展.
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鸦胆子与补骨脂治疗大鼠卡氏肺孢子虫肺炎的研究
目的 研究中药鸦胆子和补骨脂对卡氏肺孢子虫肺炎病鼠的治疗作用.方法 用地塞米松皮下注射SD大鼠6周,建立卡氏肺孢子虫肺炎动物模型.用中药鸦胆子与补骨脂合剂治疗大鼠,设立1周治疗组、2周治疗组、阳性对照组1、阳性对照组2和健康对照组.观察大鼠体重、肺组织病理、肺印片中每视野虫体包囊均数及血液CD4+和CD8+T细胞、IFN-γ的动态变化.结果 鸦胆子和补骨脂合剂治疗组大鼠体重回升,1周治疗组和2周治疗组体重回升率分别达到26.85%和31.77%;肺组织虫体包囊数目明显减少或消失,两个治疗组包囊减少率分别为94.44%和98.15%;血液CD4+、CD8+T细胞和IFN-γ水平较阳性对照组升高,其中CD4+T细胞和IFN-γ显著升高(P＜0.05).结论 中药鸦胆子和补骨脂对卡氏肺孢子虫肺炎大鼠有明显的治疗效果.
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疟原虫全虫疫苗长效保护性下降机制初探
目的 探讨疟疾红外期全虫疫苗免疫保护性随时间逐渐降低的机制. 方法 取C57BL/6及BALB/c小鼠,经尾静脉分别接种10 000或50 000约氏疟原虫(P.yoelii)17XNL子孢子,3h后给予氯喹控制红内期感染的发生.一部分小鼠于接种后30、90、180d用10 000同种疟原虫子孢子进行攻击检查保护性;另一部分在相同时间点取血,分离淋巴细胞,进行流式抗体染色,检测免疫保护性及其与肝脏淋巴细胞表型间的相互关系. 结果 疟原虫全虫抗原免疫后 30d两种小鼠均可产生100％的免疫保护;免疫后90d,C57BL/6保护性开始下降,180d时保护性将至40％,而BALB/ c小鼠保护性无明显变化.C57BL/6小鼠肝脏CD8+TEM细胞PD-1的表达在免疫后180d显著上升(t=7.369,P＜ 0.01),BALB/c小鼠无明显变化(t=1.368,P＞0.05).C57BL/6小鼠肝脏CD8+TEM细胞PD-1的表达免疫后随时间增加而升高,其中免疫后180d较90d时上升趋势更显著(t=6.175,P＜0.01). 结论 在C57BL/6小鼠,疟原虫红外期全虫疫苗免疫保护性随免疫时间延长逐渐降低与肝脏CD8+T细胞PD-1表达增高有关.
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疟原虫红前期适应性免疫相关机制的研究进展
红前期是疟原虫进入宿主的第一个时期,阻断红前期疟原虫的发育,就能够从源头上阻断疟疾的发生和传播,有效的红前期疟疾疫苗对于控制疟疾的发病及阻断疟疾的传播有着重要意义.对红前期免疫机制的深入研究对于合理的红前期亚单位疫苗的设计具有重要的指导意义.本文仅就目前疟原虫红前期适应性免疫相关机制的研究做一综述.
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CD8+T细胞及其分泌的细胞因子在再生障碍性贫血发病机制中的作用
再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA)是由多种因素引起的骨髓造血干细胞严重受损,造成骨髓造血功能降低或衰竭,以全血细胞减少为主要表现的一组综合征.AA发病机理复杂,尚未完全明了,故对其病理机制的深入研究有利于提高其诊疗水平.目前AA发病机制的研究主要集中在异常免疫,而异常免疫的研究热点为CD8+T细胞及其分泌的细胞因子.本文就近年来CD8+T细胞及其分泌的相关细胞因子在AA发病机制中的作用作一综述.
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急性髓细胞性白血病细胞培养上清对CD4+和CD8+T细胞增殖和凋亡的影响
为了研究不同的急性髓细胞性白血病(AML)细胞株培养上清对CD4+和CD8+T细胞增殖以及凋亡的影响,探讨AML的免疫抑制的形成机制,将3种AML细胞株(HL-60、NB4和U937)培养上清和普通培养液按不同比例混合,用于培养CFSE染色的淋巴细胞.抗CD3抗体和抗CD28抗体刺激3天后,标记7AAD和相应荧光抗体.利用流式细胞术检测不同T细胞亚群CFSE荧光强度和7AAD表达率的变化,分析其增殖和凋亡变化情况.结果表明:3种AML细胞株中有2种(HL-60和NB4)培养上清可显著抑制CD4+T细胞和CD8+T细胞的增殖,并随浓度增加而增强.同样,HL-60和NB4细胞株培养上清亦可抑制刺激后的CD4+T细胞的凋亡,但对刺激后的CD8+T细胞的凋亡并无明显影响.相反,HL-60和NB4细胞株培养上清可显著增加增殖的CD8+T细胞的凋亡.结论:AML细胞株培养上清液对CD4+T细胞和CD8+T细胞增殖的抑制以及对增殖的CD8+T细胞凋亡的诱导作用,可能是AML患者免疫功能缺陷的机制之一.
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人骨髓间充质干细胞体外对异基因T淋巴细胞表型的影响
为了研究间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)的免疫调节作用,探讨防治异基因骨髓移植中移植物抗宿主病(GVHD)和移植排斥反应(HVGR)的可能途径,从人骨髓中分离培养间充质干细胞,并通过其形态的均一性及流式细胞术检测表面标志以鉴定其纯度,将MSC分别以8×104(A组)、4×104(B组)和2×104(C组)个细胞/孔分别接种于6孔板,并与经分离的外周血T淋巴细胞共培养7天,以单独培养的外周血T淋巴细胞为对照组,用流式细胞仪分别在培养0、24、72小时和7天测定各组T细胞上CD3、CD4、CD8、CD25表达的变化.结果表明:T细胞和MSC共培养组与T细胞单独培养组相比,A组和B组CD4+CD25+免疫调节性T细胞和CD8+T细胞明显增多,A组和B组之间无明显差别.实验组和对照组相比CD3、CD4、CD25表达无明显差别.结论:骨髓MSCs在体外可使外周血T细胞表型发生改变,CD4+CD25+免疫调节性T细胞和CD8+T细胞明显增多,本研究结果为临床异基因造血干细胞移植预防GVHD时MSCs的输注数量提供了参考.
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rhG-CSF动员的外周血采集物与稳态骨髓中CD4+、CD8+初始及记忆T细胞亚群的比较
本研究探讨重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)动员的外周血采集物(G-PB)与稳态骨髓(SS-BM)中CD4+、CD8+初始、记忆T细胞亚群的差异.依据细胞表面CD45RA和CD62L的表达将CD4+、CD8+ T细胞划分为初始T细胞(naive,CD45RA+ CD62L+)、中心记忆T细胞(central memory,TCM,CD45RA-CD62L+)、效应记忆T细胞(effector memory,TEM,CD45RA-CD62L-)、终末分化效应记忆T细胞(terminally differentiated effector memory,TTD,CD45RA+CD62L-).用流式细胞仪测定G-PB与SS-BM中CI4+、CD8+初始和记忆T细胞的比例组成,并计算每微升采集物中各细胞亚群的绝对数量.结果表明:G-PB中CD4+、CD8+T细胞的比例组成及CD4+/CD8+比值均高于SS-BM(P＜0.05);G-PB中CD4+初始T细胞的比例显著低于SS-BM(P＜0.001),而CD4+ TEM比例显著高于SS-BM(P＜0.001);G-PB中CD8+初始和记忆T细胞亚群的比例与SS-BM无显著差异(P＞0.05);与SS-BM相比,G-PB中CD4+ CD62L+ T细胞的比例明显降低(P=0.001),每微升G-PB移植物中的各淋巴细胞亚群均明显高于SS-BM(p＜0.001).结论:G-PB与SS-BM中CD4+、CD8+初始和记忆T细胞亚群在相对和绝对数量方面存在明显的差异,这种差异可能影响G-PB和SS-BM移植后急性、慢性移植物抗宿主病发生率及其程度的异同.
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再生障碍性贫血、骨髓增生异常综合征、急性髓系白血病患者CD8+T细胞亚群的变化及临床意义
本研究检测再生障碍性贫血(AA)、骨髓增生异常综合征(MDS)和急性髓系白血病(AML)患者细胞毒T细胞亚群平衡及其活性的改变,探讨三种疾病造血异常的细胞免疫机制,为临床治疗选择提供实验室依据.采用流式细胞术检测AA组17例、MDS组35例(其中RA 19例,RAEB 16例)、AML组15例和正常对照组10例的细胞毒性T细胞(Tc1、Tc2)以及部分T细胞亚群比例并进行对比分析.结果表明:与正常对照组相比,AA组、MDS-RA组Tc1、Tc1/Tc2、CD8+ HLA-DR+、CD3+ CD8+ CD28+、CD8+ CD45RO+显著升高,Tc2无明显统计学差异,CD8+CD45RA+显著减低；MDS-RAEB组Tc1、CD3+ CD8+ CD28+、CD8+ HLA-DR+比例显著减低,Tc、Tc1/Tc2无明显变化,CD8+ CD45RA+减低但差异不明显,CD8+ CD45 RO+显著升高；AML组Tc1、CD3+ CD8+ CD28+、CD8+ CD45RA+、CD8+ CD45RO+、CD8+ HLA-DR+,Tc1/Tc2显著减低,Tc2显著上升.结论:AA、MDS不同阶段、AML患者的细胞免疫状态不同,在AA和MDS早期阶段,Tc1/Tc2的平衡向Tc1偏移,且伴有T细胞亚群活性增加；而在MDS晚期和AML阶段,则向Tc2偏移,T细胞亚群活性减低.前者可能与骨髓造血衰竭密切相关,而后者可能是恶性克隆免疫逃逸的重要机制之一.
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HIV感染无症状者外周血中HIV特异性T细胞及其亚群表达CD160情况的研究
目的 探讨HIV感染无症状者外周血中CD160在HIV特异性T细胞及其各亚群中的表达情况.方法 采集2014年6月至2015年11月于解放军第302医院就诊的43例未经抗病毒治疗的HIV感染无症状者和18例健康者的外周血,分离外周血单个核细胞,用免疫荧光染色法标记CD160后,以流式细胞仪检测其在HIV特异性T细胞及其各亚群(Tn、Tcm、Tem和Teff)细胞上的表达情况.结果 HIV感染无症状者外周血中,CD160在总体HIV特异性CD4 +T细胞和CD8+T细胞中表达的频数和MFI均较健康对照组高(P＜0.01);HIV特异性CD4+T细胞的各亚群中,CD160在CD4+ Tn细胞中MFI,CD4+ Teff细胞中频数和MFI显著升高(P＜0.01);HIV特异性CD8+T细胞的各亚群中,CD8+ Tn细胞、CD8 +Tcm细胞及CD8+ Tem细胞表达CD160的频数和MFI均显著升高(P＜0.01).结论 慢性HIV感染可导致HIV特异性T细胞及其不同亚群中CD160高表达,引起细胞免疫功能紊乱,可能进而损伤了对HIV病毒的控制能力.
关键词： 人获得性免疫缺陷病毒 CD160 CD4+T细胞 CD8+T细胞 -
类风湿关节炎患者外周血CD4+T和CD8+T细胞TIGIT的表达和意义
目的 探讨含T细胞免疫球蛋白和ITIM结构域蛋白(T cell immunoreceptor with Ig and immunoreceptor tyrosine-based inhibitory domains, TIGIT)在类风湿关节炎(RA)患者外周血CD4+T和CD8+T细胞上的表达及临床意义,以阐明其在RA发生和发展中的作用.方法 应用流式细胞仪检测81例RA患者和33例健康对照者外周血各白细胞表面TIGIT表达水平,比较RA组和健康对照组之间各白细胞表面TIGIT表达水平,并分析CD4+T、CD8+T细胞TIGIT表达与实验室检查数据的相关性.两组间比较采用t检验或者非参数检验,两变量之间相关性采用Pearson或Spearman相关分析.结果 (1) RA组CD3+T细胞TIGIT表达百分率高于对照组(P<0.01),RA组CD3+T细胞TIGIT表达平均荧光强度(MFI)高于对照组(P<0.01),而在B细胞、单核细胞和中性粒细胞上表达的TIGIT无差异.(2)RA组CD4+T和CD8+T细胞TIGIT表达百分率显著高于健康对照组(P<0.01),RA组CD4+T和CD8+T细胞TIGIT表达MFI显著高于健康对照组(P<0.01).(3) RA患者外周血CD4+T细胞TIGIT表达百分率与红细胞沉降率(ESR)呈正相关(rs=0.355, P<0.01);RA患者外周血CD8+T细胞TIGIT表达百分率与ESR呈正相关(rs=0.277, P=0.013).(4)RA患者外周血CD4+T细胞TIGIT表达百分率与类风湿因子(RF)呈正相关(rs=0.265, P=0.017);RA患者外周血CD4+T细胞TIGIT表达MFI与RF呈正相关(rs=0.226, P=0.043);RA患者外周血CD8+T细胞TIGIT表达百分率与RF呈正相关(rs=0.366, P<0.01);抗CCP抗体阳性RA患者外周血CD4+T细胞TIGIT表达百分率与抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体呈正相关(rs=0.324, P=0.012).(5) RA患者外周血CD4+T细胞TIGIT表达百分率与RA疾病活动性评分(DAS28)呈正相关(r=0.232, P=0.038);RA患者外周血CD4+T细胞TIGIT表达MFI与DAS28呈正相关(r=0.343, P<0.01).结论 RA患者外周血T细胞TIGIT表达异常,与炎症水平、自身抗体产生和疾病活动性有明确的相关性.
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B7-H3在人肝癌细胞株HepG2对外周血CD8+T细胞活化、周期及分泌IL-17调节中的作用
目的 研究B7-H3在人肝癌细胞株HepG2对人外周血CD8+T细胞活化、周期及IL-17分泌等调节中的作用.方法 RT-PCR及FCM检测B7-H3在HepG2细胞上的表达；应用脂质体法将PGPU6/GFP/neo-B7-H3shRNA质粒转入肝癌细胞株HepG2,阻断B7-H3的表达；免疫磁珠分选健康人外周血CD8+T细胞；FCM分析B7-H3分子在HepG2细胞对PHA刺激下CD8+T细胞活化、周期及PMA刺激下CD8+T细胞分泌IL-17调节中的作用.结果 肝癌细胞株HepG2高表达B7-H3分子,PGPU6/GFP/neo-B7-H3 shRNA质粒能有效阻断B7-H3在HepG2细胞上的表达；FCM分析结果显示,肝癌细胞株HepG2对CD8+T细胞活化及周期均有抑制作用；阻断B7-H3的表达后,明显减弱HepG2细胞对CD8+T细胞早期活化表型CD69表达的抑制作用,且能够通过下调CD8+T细胞Go/G1期细胞数量,上调S期细胞数量逆转HepG2细胞对CD8+T细胞周期的阻滞作用；在HepG2存在条件下,CD8+T细胞对IL-17的分泌明显增加,阻断B7-H3的表达后,IL-17的分泌被进一步上调.结论 HepG2细胞高表达B7-H3分子；B7-H3能够协同HepG2细胞对CD8+T细胞活化表型CD69的表达及细胞周期的抑制作用；HepG2细胞上调CD8+T细胞对IL-17的分泌作用,但B7-H3可抑制该上调作用.
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IL-2促进PBMC来源的NK、NKT、CD8+T细胞高表达NKG2D
目的 观察大剂量IL-2活化的人外周血单个核细胞(PBMC)中,NKG2D在NK细胞、T细胞和NKT细胞表面的表达规律.方法 使用三重免疫荧光标记的流式细胞术检测NKG2D的表达情况.使用sMICA蛋白与人PBMC共同培养,之后使用流式细胞术分析NKG2D在NK细胞中的表达情况.使用半定量RT-PCR方法检测大剂量IL-2活化的人PBMC中NKG2D及其锚定蛋白DAP10mRNA的表达变化.结果 使用大剂量IL-2活化人PBMC细胞后,NKG2D在NK细胞、CD8+T细胞和NKT细胞表面的表达均增加,但是在CD4+T细胞表面始终不表达.同时IL-2可以拮抗sMICA对NKG2D的下调作用.半定量RT-PCR结果显示,使用大剂量IL-2活化人PBMC之后,NKG2D及其锚定蛋白DAP10的mRNA水平并不发生明显变化.结论 大剂量IL-2培养人PBMC之后,NKG2D在NK细胞、CD8+T细胞和NKT细胞表面的表达均增加,可能是PBMC活化并获得广谱抗肿瘤效应的机制之一.
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C D4＋T 细胞剔除对复制型重组痘苗病毒免疫原性及毒力的影响
目的：探讨CD4＋T细胞剔除对复制型重组痘苗病毒免疫原性及毒力的影响。方法BALB／c小鼠经腹腔注射CD4单克隆抗体剔除CD4＋T细胞后，尾部划痕接种重组痘苗病毒rTV或天坛株VTT，同时设正常小鼠对照。免疫后定期观察小鼠体重变化和接种部位痘斑变化，并检测病毒排出量和CD4＋T细胞比例。免疫后第28天处死小鼠，检测小鼠体液和细胞免疫，取卵巢组织检测病毒滴度。结果 CD4＋T细胞剔除小鼠和正常小鼠在接种rTV或VTT后均出现典型的种痘后局部反应，但均未出现次级或卫星病损。 CD4＋T细胞剔除小鼠的痘斑愈合时间、病毒排出时间及体重恢复时间均长于正常小鼠。 CD4＋T细胞剔除小鼠和正常小鼠的卵巢中均未检测出痘苗病毒。 CD4＋T细胞剔除小鼠的HIV抗体和痘苗病毒抗体平均A值分别为0．119和0．168，显著低于正常小鼠的平均A值（P＜0．05，P＜0．01）。 McAb／rTV组的痘苗病毒中和抗体滴度几何均值为1∶321，显著低于rTV组1∶1286（P＜0．05）。 McAb／rTV组诱导的痘苗病毒特异性IFN-γ＋／CD4＋T效应细胞百分比均值为0．654％，显著低于rTV组（P＝0．0004），但IFN-γ＋／CD8＋T效应细胞百分比与rTV组的差异无统计学意义。结论剔除CD4＋T细胞的小鼠能有效控制重组痘苗病毒的复制和播散。 CD4＋T细胞的剔除显著降低了体液免疫应答和CD4＋T细胞免疫应答，对CD8＋T细胞免疫应答无显著影响。
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呼吸道合胞病毒对致敏小鼠气道炎症和CD8+ T细胞功能的影响
目的观察呼吸道合胞病毒(RSV)对致敏小鼠气道炎症和CD8+T细胞功能的影响.方法BALB/c小鼠40只,随机分成4组,分别为磷酸盐缓冲液(PBS)对照组、鸡卵白蛋白(OVA)组、RSV组、OVA/RSV组;应用OVA腹腔注射致敏、OVA气道雾化结合RSV滴鼻激发哮喘;支气管肺泡灌洗液(BALF)作细胞分类计数;酶联免疫吸附试验(ELISA)测定BALF上清中白细胞介素(IL)-4、IL-5、干扰素(IFN)-γ含量;苏木精-依红(HE)染色观察肺病理变化;采用三色光流式细胞分析法测定气管旁淋巴结(PBLN)中CD4+、CD8+T细胞及细胞内细胞因子IFN-γ、IL-4、IL-5表达与TH2/TH1、Tc2/Tc1比值变化.结果(1)BALF中细胞总数及分类:与OVA组比较,OVA/RSV组细胞总数、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞均明显增加(分别P＜0.01);与RSV组比较,OVA/RSV组细胞总数、嗜酸性粒细胞明显增加(分别P＜0.01).(2)BALF上清中细胞因子含量:与OVA组比较,OVA/RSV组IFN-γ、IL-4、IL-5含量均明显升高(分别P＜0.01);与RSV组比较,OVA/RSV组IFN-γ无明显变化,而IL-4、IL-5显著上升(分别P＜0.01).(3)肺组织病理:OVA/RSV组与其他各组比较气道黏膜增厚,管腔狭窄、收缩,上皮破坏,管壁周围炎症细胞浸润明显加重.(4)PBLN中CD4+(WN-γ+、IL-4+、IL-5+)、CD8+(IFN-γ+、IL-4+、IL-5+)T细胞各占CD3+T细胞百分比及TH2/TH1、Tc2/Tc1比值变化:与OVA组比较,OVA/RSV组CD8+(IFN-γ+、IL-4+、IL-05+)T细胞百分比、Tc2/Tc1比值增加(分别P＜0.01),TH2/TH1比值无明显变化.与RSV组比较,OVA/RSV组CD4+(IL-4+、IL-5+)T细胞、TH2/TH1比值、CD8+(IL-4+、IL-5+)T细胞、Tc2/Tc1比值均明显上升(分别P＜0.01).结论(1)OVA致敏小鼠RSV感染后可明显加重气道炎症,TH2、TH1型炎症均加强,且以TH2型炎症加重为主.(2)OVA致敏小鼠RSV感染后可引起CD8+T细胞数量及功能改变,即由产生IFN-γ+为特征的Tc1细胞向产生IL-4+、IL-5+为特征Tc2细胞转化,并可能与气道内IL-4、IL-5升高及嗜酸性粒细胞的大量募集有关.
