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1-07 镍化合物诱发细胞恶变过程中P53基因突变
目的探讨3种镍化合物在诱发细胞恶变过程中不同阶段P53基因突变情况,并比较它们之间的差异.方法 3种镍化合物转化细胞接种BALB/c裸鼠,应用PCR-SSCP法进行肿瘤细胞和转化细胞P53基因第5~8外显子检测.结果硫化镍、氯化镍、硫酸镍分别诱发的转化细胞都在BALB/c裸鼠皮下形成肿瘤,病理组织学检查确定为纤维肉瘤.硫化镍组1个经软琼脂筛选的转化细胞系和相应的肿瘤细胞系P53基因第8外显子检出突变.氯化镍组的肿瘤细胞系第6外显子检出突变.结论 3种镍化合物所诱发的细胞转化为恶性转化,且都具有体内致瘤性.镍化合物诱发细胞恶变的晚期发生P53基因突变.
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眼部“长肉”,或是淋巴瘤
一个月前,67岁的魏先生发现左眼看东西越来越模糊,且眼周围还慢慢长出了“一坨肉”,快将整个眼睛都遮住了.他急忙到医院检查,后被确认其眼部“长肉”竟是淋巴瘤在“作怪”.淋巴瘤属于免疫系统疾病.一般身体每天都会受到很多细菌、病毒等侵袭,淋巴系统在防御的过程中,会发生细胞恶变,然后形成恶性淋巴瘤,通常认为,它的发生与病毒感染和自身免疫功能障碍有关.然而,淋巴瘤不一定发生在淋巴结上,也可发生在结外淋巴组织,全身上下除了头发和指甲,任何部位都可能发生淋巴瘤.
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研究表皮生长因子受体(EGFR)与非小细胞肺癌的相关性
原发性肺癌是指由支气管粘膜上皮细胞恶变而来的恶性肿瘤.原发性肺癌又可大体上分为小细胞肺癌(Small Cell Lung Cancer,SCLC)和非小细胞肺癌(Non-small Cell Lung Cancer,NSCILC).非小细胞肺癌易由血道和(或)淋巴道播散,是全世界普遍的癌症之一.据估计,全世界每年约有17万新发病例[1].随着对肺癌发生、发展过程中分子生物学机制和癌基因突变的深入研究和认识,在非小细胞肺癌组织中发现了表皮生长因子受体(Epidermal growth factor receptor,EGFR),现已成为研究NSCLC的热点.本文拟研究EGFR的表达与非小细胞肺癌的相关性.
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人神经蛋白synuclein gamma的原核表达及纯化
synucleins是脊椎动物中高度保守的小分子量蛋白家族,主要在神经元表达,在突触前末梢尤为丰富.SNCG(synuclein gamma; spersyn; breast cancer-specific protein 1)是该家族的第三个成员,在脑中广泛表达,其表达异常与神经退行性病变和细胞恶变都有一定的相关性.它在神经元胞质中广泛分布,可能起到维持神经纤维网络完整性的作用[1].γ-synuclein蛋白的N末端与脑中参与多种信号通路的14-3-3蛋白家族成员有较高的同源性,具有分子伴侣的特性,参与 MAPK途径的调节.为了研究SNCG基因及其表达产物在神经系统中的作用,本研究采用RT-PCR的方法克隆得到SNCG基因的全编码区,在大肠杆菌中表达了全长蛋白,并用亲和层析得到纯化的蛋白.
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肿瘤抑制基因变异的分子病理学研究进展
肿瘤分子生物学研究已经证实,肿瘤是一种基因病,是由多基因变异并长期累积所致,其中肿瘤抑制基因(TSG)在肿瘤发生过程中持续丧失功能被认为是导致细胞恶变的重要事件之一。TSG变异的常见分子机制是因其2个位点相继因点突变和杂合性缺失(LOH )而导致功能完全失活,即广为接受的Knudsen“二次打击” 理论。另一个受到高度重视的基因变异类型是DNA错配修复基因(mismatch repair, MMR)功能的失活,其分子特征是基因组DNA微卫星小体不稳定性(microsatellite instability, MSI )。这两种基因变异形式终都将导致细胞分裂和增殖活动脱离正常调控而发生肿瘤。由于LOH和MSI路径是肿瘤细胞的重要标志性特征,并具有分子病理学上的诊断意义而受到广泛关注。
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肝细胞癌中XIAP mRNA及蛋白表达的意义
目的:通过检测XIAP mRNA及蛋白在肝细胞癌中的表达程度,探讨XIAP在原发性肝细胞癌发生中的作用.方法:应用RT-PCR技术检测正常肝细胞株L-02,肝癌细胞株SMMC7721,HepG2和30例肝癌及其相应癌旁组织中XIAP mRNA的水平,同时应用免疫组织化学方法检测了上述细胞株及组织中XIAP蛋白的表达.结果:三株细胞株均有XIAP mRNA的表达,XIAP/β-actin均值分别为L-02:0.418±0.045,SMMC7721:0.719±0.069,HepG2:0.654±0.055.其中L-02细胞株的XIAP mRNA水平显著低于SMMC7721及HepG2(P<0.05),两株肝癌细胞株的XIAP mRNA表达无显著性差异(P>0.05).三株细胞亦均有XIAP蛋白的表达,其细胞爬片平均光度分别为0.158±0.016,0.291±0.022,0.238±0.011,三株细胞的XIAP蛋白水平存在显著性差异(P<0.05).肝癌组织XIAP mRNA表达较癌旁组织显著升高,XIAP/β-actin均值分别为:0.587±0.064,0.313±0.059(P<0.05).免疫组化染色显示:XIAP蛋白表达主要集中在肝细胞胞质中,其在肝癌组织中的表达显著高于癌旁组织,平均光度分别为:0.276±0.054,0.095±0.014(P<0.05).结论:XIAPmRNA及其蛋白在肝癌组织及肝癌细胞系中表达水平明显升高,提示他可能是促进肝细胞恶变的一个重要因素.
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胆囊癌hTERT、c-myc的表达及相关性的研究
端粒酶(telomerase)与细胞恶变、肿瘤的发生发展密切相关[1].而端粒酶催化亚单位(hTERT)可能在端粒酶活性调节中起重要作用[2].
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胆管癌病人死亡相关蛋白激酶基因启动子区甲基化的分析
死亡相关蛋白激酶(death-associated protein kinase,DAPK)基因是一种钙调蛋白调节的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,其编码的死亡相关蛋白激酶参与γ-干扰素、Fas、p53、肿瘤坏死因子等多条凋亡途径[1,2],是细胞凋亡的正性调节因子之一,其5'端启动子区域的CpG岛甲基化已在多种肿瘤组织中被发现[3],并可致凋亡途径异常,导致细胞恶变.
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恶性肿瘤早期诊断的傅立叶变换红外光谱研究
为寻找恶性肿瘤的早期诊断方法,人们一直进行着不懈的努力.组织和细胞的恶变总是从构成它们的分子开始的.在组织和细胞恶变的过程中,蛋白质、脂类、碳水化合物和核酸等构成组织和细胞的主要物质在结构、构象和数量上都发生了明显的变化,这些变化并不出现临床症状和医学影像学改变.所以研究这些变化是更早期诊断的研究方向.红外光谱主要是研究分子中以化学键联结的原子之间的振动光谱和分子的转动光谱[1].早在五十年前,Sutherland和Thompson就认为各种化合物的红外光谱是该化合物具特色的性质,它能够反映物质的结构,因此红外光谱有可能成为恶性肿瘤早期诊断的重要手段.20世纪80年代以来,傅立叶变换技术引入红外光谱.傅立叶变换红外光谱仪不仅具有高光通量、低噪声和测量速度快等优点[2],而且红外线波长长,能量小,不破坏样品的结构,具有无损伤的优点,而被广泛应用于蛋白质、脂类、碳水化合物和核酸等生物分子的结构、构象的研究.在此基础上,人们比较各种类型的恶性肿瘤及其相应正常组织或细胞的红外光谱特点,为恶性肿瘤的早期诊断及其发生发展机理的研究开辟了一条新的途径.本文就消化系统、生殖系统、呼吸系统和血液造血系统等恶性肿瘤的红外光谱研究予以文献综述.
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射线、顺铂对小鼠乳腺癌端粒酶活性的影响
端粒是染色体末端的蛋白质和DNA组成的特殊结构,其功能是完成染色体末端的复制,端粒酶是维持端粒功能的酶.人体大多数癌和其他的恶性肿瘤中均能检测到端粒酶活性.认为端粒酶活化是细胞获得永生化的必须途径和细胞恶变的重要环节.从而将这个酶与永生化和肿瘤的形成密切联系在一起.
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细胞角蛋白片断19检测对肺癌的临床意义
细胞角蛋白( Cytokeratin,CK)是一种分化特异的蛋白质,广泛存在于上皮细胞,是组成细胞骨架的蛋白质之一,而间叶组织缺乏角蛋白.在细胞恶性转化和肺癌发生过程中,角蛋白继续存在于上皮性肿瘤内,间叶细胞恶变后仍不表达角蛋白,这为角蛋白的应用提供了理论依据.迄今为止,已发现 20种角蛋白的多肽,角蛋白 19( CK- 19)是其中之一. [1]近 10年来,角蛋白 19片断( CYFRA21- 1)作为一种新发现的肿瘤标记物,对它的研究非常活跃. CYFRA21- 1是一种分子量为 10× 103的酸性蛋白质,在恶性上皮细胞中,激活的蛋白酶加速了角蛋白的降解,使得大量角蛋白片断释放入血,尤其是 CYFRA21- 1在肺癌中含量丰富 [2].下面就 CYFRA21- 1检测对肺癌的临床意义作一综述.
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肿瘤规范化、标准化诊治第10讲小细胞肺癌的综合治疗策略
肺癌系严重威胁人类健康的常见恶性肿瘤,虽然非小细胞肺癌占肺癌发病的比例较高,但小细胞肺癌(SCLC)在肺癌中所占的比例仍可占约20%~25%.SCLC由肺Kulchitsky细胞恶变而来,WHO将其又分为燕麦细胞型、中间细胞型和混合细胞型三种.该病男性多发于女性;发病部位以大支气管(中心型)居多.
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破译人体"疾病密码"
肝病"密码"04070407指每年的4~7月,这是肝功能不良者患病的高风险期,此时外界细菌、病毒滋生较多,会大大增加肝的解毒负担.临床检测发现,肝细胞恶变及其恶性生长的活跃期也在4~7月.肝病发作前一般会出现食欲不振、肝部隐痛、易怒、易疲劳等症状.中老年朋友4~7月若出现上述症状,应及时到医院检查,并在生活中重视养护肝脏.
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从诺贝尔奖看 PCD研究进展
程序性细胞死亡 (programmed cell death, PCD)是一种由基因控制的细胞自杀行为. PCD与生物体组织器官的发育、机体正常生理功能的维持,某些疾病的发生及细胞恶变等过程密切相关,是近年来生命科学领域的热门研究方向.
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绒毛膜上皮癌病人的化疗护理
绒毛膜上皮癌(简称绒癌),绝大多数的绒癌继发于正常或不正常的妊娠之后,主要发生于育龄妇女,是由妊娠滋养细胞恶变所致.治疗以化疗为主,且疗效满意,生存率高,绒癌是第一个单用药物达到根治的妇科恶性肿瘤[1],我院自1989年-2006年对46例绒癌病人进行化疗,现将护理体会介绍如下.
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α-L-岩藻糖苷酶在原发性肝癌诊断及治疗中的应用
原发性肝癌(PHC)是目前世界上常见的恶性肿瘤之一,在我国农村和城市分别处于恶性肿瘤的第一位和第二位,以细胞恶变程度强及死亡率高为其主要特征.近些年随着医疗水平的提高,癌症并非如此可怕,有研究显示2/3癌症患者可通过早期发现、早期诊断及早期治疗,延长生存时间,提高生活质量.世界卫生组织也曾提出"若癌症患者能早期发现,其治愈率高达80%以上".因此,早期肿瘤诊断已成为全球医务工作者长期以来全力研究的课题.
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早期宫颈鳞状细胞癌淋巴结DNA倍体分析的临床意义
诊断宫颈鳞状细胞癌(SCC)淋巴结微转移的方法初使用连续切片法,目前多采用免疫组织化学法(IHC)[1],该法较连续切片法更加敏感.但就每个早期宫颈SCC术后病例而言,花费时间和精力在清扫的大量淋巴结组织中依靠薄层切片来寻找微小转移灶(大径≤2 mm)又是不切实际的,其准确性依赖于足够的淋巴结取样.本实验在一定程度上克服了上述取样不足的缺点,选择了一项既能反应细胞增殖活性,又可体现细胞恶变早期特征的生物学研究指标--DNA倍体,通过流式细胞术(FCM)进行倍体分析,探讨DNA异倍体在早期宫颈SCC患者淋巴结中检出的临床意义.
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血液系统疾病(二)
5 急性白血病急性白血病是造血干细胞恶变、大量增殖的白血病细胞抑制正常造血并浸润全身器官和组织的恶性血液病.其病情发展迅速,自然病程仅数月.根据主要受累的细胞系列可将急性白血病分为急性淋巴细胞白血病和急性非淋巴细胞白血病.
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氧自由基在胆管癌形成过程中的作用
自由基是一种活泼不稳定的粒子,在胆管癌细胞的发生过程中起了很重要的作用.氧自由基能攻击胆管细胞膜、细胞内生物酶及DNA,导致胆管疾病如胆结石和炎症从而导致细胞恶变.氧自由基还能影响、调节细胞信号通路来促使细胞增殖与转移.本文就自由基在胆管癌形成中的几方面作用进行综述.
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鞘糖脂研究的创新思路
鞘糖脂作为真核细胞质膜的组成成分之一,不仅维持着细胞的基本结构,而且在细胞粘附、生长、分化、增殖、信号转导等细胞基本活动中发挥重要作用,还参与了细胞恶变、肿瘤转移等过程[1~3].本实验室在国家自然科学基金的资助下,对肿瘤相关中性鞘糖脂进行了深入研究,已经发表10余篇论文,并且将研究成果申请了一项国家发明专利.下面就我们在研究过程中的创新体会做一个总结.