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淋巴结组织制片中常见问题与对策
病理常规制片技术是病理诊断的基础.切片质量是指导医师作出准确诊断的重要保证.在制片时,会遇到许多问题,如切片时出现裂痕、皱褶、破碎;染色过深或过浅等.特别是淋巴结组织,由于淋巴结组织细胞成分丰富,间质少,外周有一层较致密的结缔组织被膜[1],这样的结构特征决定了淋巴组织的常规制片必须遵循"薄切、淡染"的原则.笔者通过摸索和实践,针对淋巴结组织制片时出现这些的常见问题的原因加以分析,总结出了一些经验和体会.
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淋巴结石蜡制片的体会
由于淋巴结组织外围包有一层比较致密的结缔组织被膜,使得试剂很难浸透到组织内,再加上淋巴结皮质和髓质的细胞比较密集,因此,做好淋巴结组织的石蜡切片比较困难.切片常出现组织碎裂、染色模糊、细胞固缩等现象,给诊断造成困难.现将我们多年来的制片体会介绍如下.
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菊池(Kikuchi)淋巴结炎的病理诊断
菊池淋巴结炎,又称菊池病(Kikuchi disease),1972年由日本菊池教授首先报告.亚洲多发,但后来在欧美国家亦有报告.名称较多,有称组织细胞性坏死性淋巴结炎,亚急性坏死性淋巴结炎等.其临床与病理的特点是:①青少年、女性多发.多数伴发热,持续不退,白细胞减少,应用抗生素治疗无效.好侵犯颈部淋巴结,他处淋巴结亦可受累,数周或数月自愈;②淋巴结皮质区单个或多个凝固性坏死灶.坏死灶以组织细胞为主,并有浆样单核细胞,T免疫母细胞等增生,伴不同程度的凝固性坏死;③病灶内见到不定量的核碎片与胞浆颗粒,分布于吞噬细胞内外,这是一个重要特征;④病灶区不见中性白细胞浸润;⑤病因尚未明确,但多数作者认为是病毒等感染导致Ts诱导的变态反应.Kuo(1995)提出菊池淋巴结炎分3型:①增生型(proliferative):病变区主要为增生性组织细胞、浆样单核细胞(T标记)、免疫母细胞(T为主)等,其中非吞噬性(新生性)组织细胞和T免疫母细胞,核可扭曲不规则,易见分裂象.只有少数核碎片而无明显坏死,此型易与NHL相混淆而误诊.但作免疫组化标记显示以组织细胞为主的多细胞成分组成,加上有核碎片、灶性病变、背景为增生淋巴结组织等与NHL可以鉴别;②坏死型(necrolizing):病灶有明显的凝固性坏死,大量核碎片与明显吞噬现象,一般易于确诊;③黄色瘤样型(xanthomatous):病灶中以泡沫样组织细胞为主.此型较少见.3型改变可能是病变的不同阶段,同一淋巴结可见几种类型改变.
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p15、细胞周期蛋白D1和转移生长因子β1在非小细胞肺癌中的表达及其意义
一、材料与方法1. 材料:实验材料取自内蒙古医学院病理教研室在1996~1998年间的病理组织存档蜡块,共165份.按照1980年WHO肺癌分类标准进行组织学分类,并均经病理证实.其中鳞癌80例,腺癌49例,不典型增生19例,鳞状上皮化生17例;在129例非小细胞肺癌中,同一病例手术切取标本存档蜡块不仅有肺癌组织蜡块也有淋巴结组织蜡块;其中淋巴结组织经HE染色证实有淋巴结转移的35例,无淋巴结转移的28例.其余66例中,或同一病例手术切取标本存档蜡块仅有肺癌组织而无淋巴结组织,或同一病例标本存档蜡块中虽有淋巴结组织,但经HE染色证实为纤维化淋巴结组织.
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生长激素受体在胃癌及其转移淋巴结组织中的表达
本研究通过免疫组织化学方法,了解胃癌及其转移淋巴结组织中生长激素受体(GHR)的表达情况,初步探讨rhGH在胃癌患者术后的适用性.
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子宫颈癌和盆腔淋巴结组织中趋化因子受体CXCR4及其配体CXCL12基因DNA的表达及其意义
宫颈癌转移是一个复杂的、连续的、多阶段的过程,表现出高度的组织特异性.能转移到特定器官的肿瘤细胞,均具有多种机制促进其侵袭组织、刺激血管或淋巴管形成、产生各种细胞因子等作用,为肿瘤转移创造条件[1].趋化因子在肿瘤转移中发挥着多种作用,包括控制白细胞浸润至肿瘤、调节肿瘤相关的血管生成、激活宿主对肿瘤的特异性免疫应答、以旁分泌方式刺激肿瘤细胞增殖、控制肿瘤细胞运动等[2].趋化因子的基本功能就是对表达有相应趋化因子受体细胞的定向趋化作用,趋化因子和趋化因子受体的相互作用能诱导靶细胞趋化性迁移及细胞骨架的重排,增强靶细胞与内皮细胞的黏附能力等,在肿瘤的生长和转移过程中发挥着重要的作用[1].本研究通过对宫颈癌和盆腔淋巴结组织中的趋化因子受体CXCR4及其配体CXCL12基因DNA表达的研究,探寻其临床意义.
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淋巴结结内指突状树突细胞肉瘤一例
患者,男,49岁,因左下腹痛并左腹股沟肿块1个月余于2010年11月收入我院腹外科.查体:左腹股沟区可触及1个约3.0 cm ×2.0 cm大小、触压疼痛、无红肿和发热的肿物,术前检查未发现其他部位病变,于2010年11月3日行左侧腹股沟淋巴结活检,术中发现左腹股沟区多个肿大淋巴结,大者直径1.5 cm,淋巴结相互融合,与皮肤无粘连,游离并完整切除1枚淋巴结;打开腹外斜肌腱膜,分开腹内斜肌、腹横肌,见多枚淋巴结融合成团,肿块大小约4.0 cm×3.5 cm,固定,后方可触及血管搏动,切取部分淋巴结组织,术后标本均送病理检查.
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肺淋巴管平滑肌瘤病
淋巴管平滑肌瘤(lymphangioleiomyomatosis,LAM),早出现于Burell和Ross于1937年的病例报告中,在一例36岁的死亡妇女尸检中发现其肺呈蜂窝状,伴有左侧乳糜胸,淋巴结组织平滑肌增生.Von Stossel在同年也有类似病例报道.到目前为止已有超过300例的病例报道,每年世界范围内约有100例新发患者.
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早期宫颈鳞状细胞癌淋巴结DNA倍体分析的临床意义
诊断宫颈鳞状细胞癌(SCC)淋巴结微转移的方法初使用连续切片法,目前多采用免疫组织化学法(IHC)[1],该法较连续切片法更加敏感.但就每个早期宫颈SCC术后病例而言,花费时间和精力在清扫的大量淋巴结组织中依靠薄层切片来寻找微小转移灶(大径≤2 mm)又是不切实际的,其准确性依赖于足够的淋巴结取样.本实验在一定程度上克服了上述取样不足的缺点,选择了一项既能反应细胞增殖活性,又可体现细胞恶变早期特征的生物学研究指标--DNA倍体,通过流式细胞术(FCM)进行倍体分析,探讨DNA异倍体在早期宫颈SCC患者淋巴结中检出的临床意义.
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无绿藻感染一例
患者男,38岁.患者7个月前无意中扪及左侧颈部淋巴结肿大,无疼痛感,无发热、皮疹、牙龈肿痛、关节痛、体质量减轻等伴随症状.在外院予头孢呋辛治疗后无明显好转,因自觉病灶进行性增大入院.既往体健,幼年时曾有水库游泳史.体格检查:左侧耳后可触及直径为3 cm团块,与皮肤固定,表面皮肤无破损及皮疹.左侧颈部可及数枚肿大淋巴结,质软,可活动.血常规、T细胞分型、免疫球蛋白等检查未见异常.B型超声示左侧颈后部及左锁骨上多个大小不等、成串分布的淋巴结,边界清,髓质结构薄,血流少,较大者约26 mm×12 mm,左颈部包块为融合淋巴结.淋巴结穿刺活检见大量淋巴细胞,较多多核组织细胞,散在嗜酸粒细胞,符合肉芽肿病变.穿刺液涂片示大量孢子类真菌,见图1.淋巴结组织病理活检示淋巴结巨细胞性肉芽肿,结合PAS染色阳性,考虑为真菌性,见图2.光学显微镜下见真菌,培养有无绿藻生长,见图3.药物敏感试验:氟胞嘧啶、氟康唑、伊曲康唑耐药,两性霉素B敏感.予伊曲康唑400 mg,2 d;200 mg,12 d后颈部淋巴结明显缩小.出院随访2个月淋巴结无明显增大.
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CT引导下经皮肺穿刺切割活检对肺原发恶性淋巴瘤的诊断价值
肺原发性淋巴瘤指单纯发生于肺组织内的克隆性淋巴细胞增生性疾病,但无纵隔、肺门和肺外脏器的淋巴瘤.其中大部分是非霍奇金淋巴瘤.大多起源于支气管黏膜相关淋巴结组织(MALT),占全部原发性肺淋巴瘤的70%~80%.其临床表现及影像学缺乏特异性[1],易误诊为肺癌、肺炎、肺结核等.痰细胞学检查及纤维支气管镜检查多为阴性,多需通过手术得到明确的病理和免疫组化证实.
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甲基丙烯酸烃基乙基酯在淋巴结组织制片中的应用
甲基丙烯酸烃基乙基酯(HEMA)作为一种亲水性的树酯包埋剂,因其具有水溶性、切片薄、染色效果好等优点,国内少数实验室应用于骨髓活检和肾活检的包埋[1,2].其技术要点主要为是否需要脱水和如何控制树脂组织块软硬度的问题,我们将HEMA应用于淋巴结组织的包埋制片中,制备出质量较好的半薄树脂切片,现将方法介绍如下.
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穿刺淋巴结组织的处理方法改进
我院病理科对穿刺淋巴结组织的处理程序进行了改进,现报告如下.材料与方法:取材后剩余的淋巴结数枚,用取材刀切成直径0.1 cm、长1 cm的长条状组织90条,模拟穿刺淋巴结组织的大小.
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阴道癌病灶扩大切除术1例
患者女,29岁,未婚,G3 P0。因阴道分泌物增多1个月,发现阴道壁肿物1 d,于2013年3月13日入院。妇科检查示:已婚外阴,阴道畅;宫颈中糜,宫颈右后方阴道壁可见3 cm ×3 cm ×4 cm菜花样赘生物,质脆,有接触性出血,伴异味;子宫常大,水平位,无压痛;双附件区无异常。取阴道壁赘生物活检示:赘生物及右后阴道壁为鳞状细胞癌。分别于2013年3月30日、4月25日行紫杉醇+顺铂化疗。化疗后1个月查盆腔核磁示,阴道后穹窿占位,不除外侵及阴道外壁;双侧腹股沟区及髂血管旁多发稍大淋巴结。遂拟行全子宫切除术+阴道大部分切除术+双侧卵巢悬吊术+盆腔腹股沟淋巴结切除术,但患者及家属拒绝接受此术式,强烈要求保留生育功能。取下腹正中切口进入腹腔,探查子宫居中,正常大小,双侧附件未见异常;探查盆腔淋巴结未及明显肿大,腹腔脏器未及结节,两侧宫旁及盆底组织无增厚;决定行阴道癌病灶扩大切除术+右侧盆腔淋巴结清扫术+右侧附件悬吊术+盆腔引流术。术中切除部分阴道壁,切缘距病灶1 cm以上;取部分宫颈断端及阴道断端组织,送快速病理,回报未见癌灶。将宫颈断端与阴道断端吻合并缝合。依次清除右侧髂总、髂外、髂内、闭孔及腹股沟深部淋巴结组织,将右附件悬吊于右侧盆腔,放置盆腔引流。术后病理与术前一致。阴道切缘未见癌组织,肿瘤侵及肌层1/3,无淋巴结转移。术后化疗1次,随访10个月,恢复良好。
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坏死增生性淋巴结病致无菌性脑炎1例
患者男,32岁.因发热,全身关节、肌肉疼痛,浅表淋巴结肿痛,明显消瘦15d而就诊.曾在当地医院诊断为淋巴结炎,给予"青霉素"等治疗无效于1998-03-05入院.检查:体温39.2℃,血压120/75mmHg(1mmHg=0.133kPa),呼吸24次/min,颌下、颈部、锁骨上、腋下、腹股沟、滑车上广泛淋巴结肿大如黄豆至蚕豆大小,触痛明显、质软,活动度好,心肺无特异,肝不大,脾左肋缘下刚可及.检验:血白细胞3.1×109/L,分类正常.腹部B超示脾肿大,胸部X线片、血生化、尿常规正常.右颈部淋巴结组织1cm×1.5cm活检报告"坏死增生性淋巴结炎".予抗生素预防感染及全身支持疗法.住院第3天患者出现头痛、恶心、频繁呕吐、烦燥不安,对症治疗后缓解.第5天患者突然抽搐、意识不清,瞳孔双侧扩大为3mm,光反射迟钝,体温38.2℃,脉搏94次/min,呼吸36次/min,进入昏迷状态,给予20%甘露醇250ml/8h,快速静脉滴注,速尿20mg/d,监控血压、呼吸、心电等;结合病理报告给予地塞米松20mg/d,3d后意识渐恢复,体温降至正常,续服地塞米松递减至20d停药,出院3月无复发.
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脐尿管癌一例
患者,男,39岁,因"尿频、尿急、尿痛,间歇性肉眼血尿4个月余"人院,入院后CT:膀胱顶壁占位改变,建议膀胱镜检;膀胱镜检见膀胱顶壁肿物,大小约4 cm×3 cm,表面见较多坏死物质附着,呈菜花样或滤泡状,活检回报为膀胱印戒细胞癌.进一步行盆腔MRI:膀胱顶壁向腔内突出占位性病灶,提示膀胱癌,并考虑病灶侵犯顶壁周围脂肪组织,向后累积膀胱三角,盆腔内多发淋巴结转移.行膀胱扩大切除+盆腔淋巴结清扫术,术中切除脐部组织及脐尿管,充分游离膀胱前壁、顶后壁,距离肿瘤5 mm用阻断钳夹闭膀胱、离断,完整切除肿瘤.清扫双侧髂血管周围及闭孔淋巴结组织.
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人甲状腺组织中钠碘转运体基因表达的研究
钠碘转运体(The sodium-iodide symporter-NIS)定位于甲状腺滤泡细胞的基底外侧膜,将2个钠离子和1个碘离子同时转运人甲状腺细胞,从而形成甲状腺细胞内碘的浓聚.我们采用实时荧光定量逆转录一聚合酶链反应(Real timeQuantitative PCR)方法测定人甲状腺乳头状癌及转移淋巴结组织中NIS mRNA的表达,探讨hNIS mRN-A和甲状腺乳头状癌及转移淋巴结的关系.
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颏下甲状腺乳头状腺癌1例
患者,女31岁,3年前,无意发现颏下稍肿胀,并可触及1.5×1.5cm肿块.缓慢长大.于下颌骨、舌骨之间可扪及3.0×4.0cm大小规则肿块,质硬,边界清楚,活动度小,无压痛.穿刺检查为棕色液体.甲状腺I131扫描未见异常.全麻下行甲状腺探查未见异常.切除肿块,并行颌下淋巴结清扫.病理诊断:甲状腺乳状癌,淋巴结组织内有转移癌.
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影响淋巴结组织切片质量的处理方法
近年来,淋巴结组织切片的质量问题倍受关注.因淋巴结具有组织结构致密、细胞丰富等特点,再加上组织周围又有一层较致密的结缔组织包膜,因而使组织在脱水、透明、浸蜡乃至切片染色等方面都受到一定的影响[1],稍有不慎就直接影响到病理诊断的准确性.
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肾结核、膀胱结核并膀胱乳头状瘤1例
患者,女,22岁。因间歇性尿频、尿痛、血尿5年,加重伴左腰背部疼痛1个月入院。5年前出现尿频、尿痛、肉眼血尿及尿中有血块,伴发热、畏寒,在当地按“肾盂肾炎”治疗后症状减轻,出院后继续服药治疗,症状仍间歇发作。1.5年前出现咳嗽、咳痰,痰中带血丝,在当地医院按“肺结核、肾结核”抗痨治疗,症状减轻,出院后继续抗痨治疗1年。1个月前再次出现尿频、尿痛、肉眼血尿,并渐加重,同时伴有左腰背部胀痛。体查:血压14.7/10 kPa,脉搏83次/min,营养较差,消瘦,贫血貌,心脏正常,左肺呼吸音增粗,左肾区叩痛(+)。血红蛋白80 g/L,尿红细胞(+++),尿中未查到抗酸杆菌,血沉15 mm/h,血抗结核抗体弱阳性,血电解质、肝肾功能正常。胸片示左上肺陈旧性结核。B超示左肾结核,膀胱结核,右肾、输尿管扩张积水。KUB+IVP示左肾不显影,左肾区广泛钙化点,左输尿管上段结石,右肾结核并中度积水,肠系膜淋巴结结核钙化。膀胱镜检见膀胱黏膜苍白僵硬,血管纹理不清,部分黏膜充血,有小梁增生,右侧输尿管口僵硬,呈高尔夫球洞样,周围有憩室形成,左侧管口观察不清,左侧壁见小憩室,憩室内及周围可见多簇乳头状肿物,表面有渗血,取活检后行电灼术,术后病理报告为膀胱乳头状瘤。术后血尿消失,抗痨治疗3周后硬膜外麻醉下行左肾切除术,术中见肾周围脂肪内有淋巴结组织成块粘连,左肾增大,色苍白,皮质厚薄不一,表面呈结节状隆起,切除肾脏及上段输尿管,台下剖开患肾,见脓液从高压的肾脏内喷出。病理报告示:肾结核,表面结节状,切面有坏死,内有大量干酪样坏死组织,大部分肾小球纤维化。术后继续抗痨治疗,随访4个月,右肾中度积水,肝肾功能正常,无其他不适。