解剖学报杂志
Acta Anatomica Sinica 해부학보
- 主管单位: 中国科学技术协会
- 主办单位: 中国解剖学会
- 影响因子: 0.46
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 0529-1356
- 国内刊号: 11-2228/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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下颌神经切断术后Ⅰ型囊泡膜谷氨酸转运体在大鼠三叉神经复合体中表达的变化
目的观察下颌神经切断术后不同存活时间Ⅰ型囊泡膜谷氨酸转运体(VGluT1)样免疫阳性物质在大鼠三叉神经复合体中表达水平的变化.方法免疫细胞化学和图像分析技术.结果正常大鼠三叉神经复合体内可观察到大量的VGluT1样免疫阳性物质,且主要分布于终末内.切断一侧下颌神经后,手术侧与对照侧相比,术后存活1周组的Vp背侧部内VGluT1样阳性物质的表达有所下降(P<0.05);术后存活2周组的Vp背侧部、Vc背侧部、Vi背侧部,以及Vsup和Vmo内VGluT1样阳性物质的表达明显下降(P<0.01),且与术后存活1周组手术侧比较其下降有显著差异(P<0.05);术后存活3周组上述部位内VGIuT1样阳性物质表达的下降更加明显(P<0.01),且与前两组手术侧相比均有显著差异(P<0.01或P<0.05);其中在Vmo内的表达几乎完全消失. 结论切断初级传入神经元的周围突可以导致其中枢突终末内VGluT1的表达水平下降;三叉神经复合体内部分VGIuT1样阳性终末来源于外周.
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β-榄香烯对K562/阿霉素细胞多药耐药性的逆转及其对P-糖蛋白表达的影响
目的探讨β-榄香烯(β-elemene)对多药耐药细胞株K562/阿霉素(ADM)的耐药逆转及其对该细胞P-糖蛋白(P-gp)表达的影响.方法采用MTT法检测细胞的药敏性及耐药逆转,免疫组织化学及免疫电镜观察P-gp的表达,流式细胞术进行定量分析,应用SPSS(10.0 production pacilty)软件包对实验结果进行统计学处理.结果1.非细胞毒性浓度的β-elemene(4.O mg/L)可显著降低ADM对K562/ADM细胞的IC50(P<0.01),逆转倍数为2.18倍;2.P-gp在耐药细胞株K562/ADM中呈高表达,而在敏感细胞株K562中表达很低,进一步定位研究结果表明,P-gp主要分布于细胞膜上;3.非细胞毒性浓度的β-elemene(4.O mg/L)能够显著降低耐药细胞P-gp的表达.结论β-elemene能够明显逆转K562/ADM细胞对ADM的耐药性,降低该细胞P-gp的表达是其主要逆转机制之一.
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人眼睑板腺和Zeis腺性激素受体定性定位的免疫组织化学研究
目的探讨性激素受体在睑板腺和Zeis腺的定性和定位分布.方法采用免疫组织化学技术和DAB显色方法显示雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、雄激素受体(AR)在睑板腺和Zeis腺上皮的表达.结果胎儿4个月睑板腺和Zeis腺上皮呈ER、PR、AR阳性;而儿童至成人组睑板腺和Zeis腺上皮呈ER、AR阳性.各种性激素受体定位同时出现在细胞膜、细胞质和细胞核.ER在睑板腺和Zeis腺上皮阳性表达率在年龄组间比较,均无显著性差异(P>0.05);PR在睑板腺和Zeis腺上皮阳性表达率在年龄组间比较,均有显著性差异(P<0.05):AR在睑板腺上皮阳性表达率在年龄组间比较无显著性差异(P>0.05),而Zeis腺上皮阳性表达率则有显著性差异(P<0.05).ER、PR、AR阳性表达率在胎儿组性别间比较和ER、AR阳性表达率在儿童至成人组性别间比较均无显著性差异(P>0.05).结论胎儿4个月睑板腺和Zeis腺上皮ER、PR、AR即有表达.出生后睑板腺和Zeis腺上皮仅存在ER和AR,以ER为主.ER、PR、AR定位在细胞膜、细胞质和细胞核.
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小分子干扰RNA逆转胃癌SGC7901/VCR细胞mdr1介导的多药耐药
目的研究小分子干扰RNA(siRNA)逆转胃癌多药耐药细胞亚系SGC7901/VCR mdr1介导的多药耐药效应. 方法根据mdrlcDNA已知序列,设计并体外转录2条含21个核苷酸的siRNA(mdr1si2631和mdr1si3071),转染SGC7901/VCR细胞,用RT-PCR检测mdr1基因mRNA的表达,免疫组织化学检测P-gp的表达,流式细胞仪检测阿霉素在细胞内的蓄积,MTT法检测细胞对阿霉素的敏感性. 结果siRNA转染SGC7901/VCR细胞48 h后,mdr1基因mRNA和P-gp的表达水平下降,细胞内阿霉素积累量增加,对阿霉素敏感性的相对逆转率各达79.59%及59.98%. 结论siRNA可逆转SGC7901/VCR细胞mdr1介导的多药耐药.
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地塞米松对哮喘豚鼠肺内、脊神经节及脊髓背角内蛋白激酶C表达的抑制作用
目的探讨地塞米松对哮喘豚鼠肺内、C7~T5脊神经节及对应节段脊髓背角内蛋白激酶C(PKC)表达的抑制作用.方法利用免疫组织化学和Western bloting方法,研究哮喘豚鼠肺内、C7~T5脊神经节及对应节段脊髓背角内PKC的免疫反应变化.结果哮喘组豚鼠肺内、C~T5脊神经节及对应节段脊髓背角内PKC平均光密度值明显高于对照组(P<0.01),而地塞米松组则明显低于哮喘组(P<0.01).结论PKC可能参与哮喘的发病过程,地塞米松抑制哮喘豚鼠PKC的表达可能是其治疗哮喘的作用机制之一.
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碱性成纤维细胞生长因子对人胚肾HEK293细胞蛋白激酶B活性的影响
目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对人胚肾HEK293细胞蛋白激酶B(PKB)活性的影响.方法以[γ-32P]ATP掺入法观察不同作用时间bFGF对HEK293细胞膜、胞浆PKB活性的影响. 结果75μg/LbFGF刺激HEK293细胞10 min,使胞液和膜性PKB酶活性达高峰.Wortmannin预处理后,HEK293细胞膜和胞浆PKB活性在各时间点均明显降低. 结论bFGF能通过PI3K途径迅速激活HEK293细胞的PKB活性.
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Aβ亚单位疫苗接种Tg2576鼠对脑内淀粉样斑块沉积和行为学的影响
目的探讨Aβ亚单位疫苗接种对Tg2576鼠淀粉样斑块沉积和行为学损害的影响.方法24只Tg2576鼠随机分为Aβ1~15组、Aβ36~42组、Aβ42组和对照组,9月龄时开始分别接种相应的疫苗,间接ELISA法检测血清和脑匀浆上清液特异性抗体的滴度;免疫组织化学染色观察脑内淀粉样斑块沉积;Morris水迷宫测试行为学变化;组织染色观察脑、肝、脾、肺和肾的组织学变化.结果第2次接种后各实验组即明显有抗Aβ42抗体产生,抗体滴度随接种次数的增加而增加.停止接种,抗体滴度下降.脑匀浆上清液中也检测出低滴度的抗Aβ42抗体;疫苗接种6个月后,Aβ47、Aβ1~15和Aβ36~42组鼠皮层和海马淀粉样斑块沉积量与对照组相比均明显减少(P<0.01),其认知能力显著高于对照组(P<0.01).Aβ1~15组和Aβ42组相比差异无显著性(P>0.05),但优于Aβ36~42组(P<0.01);各组鼠的脑、肝、脾、肺和肾均未发现病理变化.结论Aβ亚单位疫苗接种能有效阻抑Tg2576鼠淀粉样斑块形成和认知功能退化,未发现不良反应.提示用Aβ1~15疫苗替代其全肽疫苗而用于AD免疫治疗,值得进一步研究.
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大鼠下颌下腺降钙素的定位研究
目的观察大鼠下颌下腺降钙素(CT)的分布.方法取16只健康的SD大鼠下颌下腺,采用免疫组织化学SP法进行染色.结果在大鼠下颌下腺,可见CT反应阳性物,它们主要分布于浆液性腺泡、混合性腺泡的浆液细胞内,各级导管的上皮细胞也呈CT反应阳性.结论下颌下腺可能具有分泌降钙素的功能,提示下颌下腺可能参与钙磷代谢的生理调节.
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谷氨酸脱羧酶67-绿色荧光蛋白基因敲入小鼠三叉神经尾侧亚核内GFP阳性神经元的分布及与小白蛋白的共存
目的观察谷氨酸脱羧酶67-绿色荧光蛋白(GAD67-GFP)基因敲入小鼠三叉神经尾侧亚核(Vc)浅层内,表达GFP的GABA能神经元的分布及其与小白蛋白(PV)的共存.方法分别运用原位分子杂交与免疫组织化学相结合;GFP与神经元标记物--神经元核蛋白(NeuN)或PV免疫荧光染色相结合的双重标记方法,在光学显微镜和激光共聚焦显微镜下进行观察.结果1.Vc浅层内90%以上的GFP阳性神经元同时表达GAD67 mRNA,而几乎所有表达GAD 67 mRNA的阳性神经元都呈GFP阳性;2.GFP阳性神经元主要分布于Vc的Ⅰ~Ⅱ层内,细胞较小,尤其在Ⅱ层内可见大量密集分布的GFP阳性细胞和突起.GFP阳性神经元分别占Ⅰ、Ⅱ层内NeuN阳性神经元总数的19.4%和24.3%;3.GFP/PV双标神经元主要分布于Vc的Ⅰ~Ⅱ层,这些双标神经元大约占PV阳性神经元的62.4%,占GFP阳性神经元的12.8%. 结论在Vc表达GFP的GABA能神经元主要密集分布于与外周伤害性信息传递关系密切的板层内,且大部分PV样阳性神经元属于GABA能神经元.
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双峰驼胸膜下肺微血管构筑的扫描电镜观察
目的探讨双峰驼胸膜下肺微血管的构筑特征及其功能意义,为哺乳动物肺微血管构筑学研究积累资料.方法铸型扫描电镜技术.结果双峰驼胸膜下肺微血管根据其连续分支可以识别出4级血管:微动脉、终末微动脉、毛细血管前微动脉和毛细血管,胸膜下肺毛细血管通常由该部的毛细血管前微动脉发出,也可由终末微动脉直接发出,并终相互吻合成胸膜下肺毛细血管网.胸膜下肺毛细血管网粗疏,网孔孔径一般大于毛细血管管径,网孔多呈六边形和五边形.胸膜下肺微动脉、终末微动脉和毛细血管前微动脉的铸型表面均显示有清晰的、环状排列的平滑肌压迹,毛细血管铸型表面可见卵圆形内皮细胞核的压痕.肺间质毛细血管与胸膜下肺微血管之间存在有广泛的、不同水平上的吻合.结论双峰驼胸膜下肺微血管构筑特征与其他哺乳动物比较,并无显著差异.
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反义VEGF165基因转染对人神经母细胞瘤生物学行为的影响
目的探讨反义VEGF165基因转染在抑制肿瘤血管生成和肿瘤生长中的作用. 方法构建正义和反义VEGF165真核表达载体,用脂质体转染人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y,G418筛选稳定表达细胞克隆.应用RTPCR证实外源性反义VEGFmRNA的表达,免疫细胞化学和ELISA检测VEGF蛋白的表达水平,MTT法检测肿瘤细胞体外生长情况,并接种于裸鼠皮下,观察体内肿瘤增殖能力.结果RT-PCR证实转染反义VEGF的细胞中有外源性反义VEGFmRNA的表达,免疫细胞化学和ELISA显示VEGF蛋白表达明显降低,MTT实验显示转染前后细胞体外生长速度基本一致,而转染反义VEGF的肿瘤细胞裸鼠体内生长速度明显减慢.结论反义VEGF基因转染能够有效抑制SH-SY5Y细胞内源性VEGF蛋白的表达,抑制裸鼠体内肿瘤的生长.
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大鼠心脏Ⅰ型胶原的免疫组织化学和原位杂交表达
目的探讨Ⅰ型胶原在正常大鼠心脏的分布和分泌来源.方法利用免疫组织化学和原位杂交技术显示大鼠心肌组织的Ⅰ型胶原表达.结果Ⅰ型胶原分布广泛,包裹大鼠心每一个心肌细胞,根据部位的不同,胶原网络的密疏程度有差异.纤维细胞、平滑肌细胞和内皮细胞均表达Ⅰ型胶原.结论Ⅰ型胶原是构成心肌胶原纤维网络的主要成分,其分泌来源具有多源性.
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督脉电针与神经干细胞移植联合应用促进脊髓全横断大鼠受损伤的神经元存活及其轴突再生
目的探讨督脉电针与神经干细胞移植联合应用对脊髓全横断大鼠受损伤的神经元存活及其轴突再生的影响.方法将对照组、神经干细胞移植组、督脉电针组和督脉电针+神经干细胞移植组的成年大鼠胸10脊髓段做全横断损伤;其中神经干细胞移植组和电针神经干细胞组在损伤处移植神经干细胞.电针组和电针神经干细胞移植组在术后开始接受督脉电针治疗.所有动物存活67d.结果1.电针神经干细胞移植组脊髓损伤处的去甲肾上腺素能、5-羟色胺受体、降钙素基因相关肽能和生长相关蛋白43阳性染色的4种神经纤维均明显多于其他几组.2.电镜下可观察到脊髓横断处有再生的神经纤维穿越,在电针神经干细胞移植组尤为明显.3.大脑体感运动区皮质和中脑红核受损伤的神经元存活数量也多于其他几组,一些神经元的再生神经纤维可能穿越横断处,进入尾端脊髓组织.结论督脉电针与神经干细胞移植联合应用能促进脊髓全横断大鼠受损伤的神经元存活及其轴突再生.
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免疫球蛋白超家族黏附分子在淋巴管和不同血管内皮细胞的表达
目的比较免疫球蛋白超家族黏附分子在淋巴管、大血管和微血管内皮细胞的表达特点,探讨免疫球蛋白超家族黏附分子在淋巴管内皮细胞表达的意义.方法从狗的胸导管、颈总动脉、颈内静脉、肺微血管分离内皮细胞,利用免疫荧光标记法检测PECAM-1、ICAM-1、ICAM-3、VCAM-1和CD44在各种内皮细胞的表达,在荧光显微镜和激光共聚焦扫描显微镜下观察,并用图像分析仪分析表达强度.结果动脉、静脉和肺微血管内皮细胞表达PECAM-1、ICAM-1、ICAM-3、VCAM-1和CD44.其中,ICAM-1和ICAM-3的表达较弱.VCAM-1在动脉和肺微血管内皮细胞的表达比静脉强.淋巴管内皮细胞表达PECAM-1、ICAM-1、ICAM-3和CD44,未观察到VCAM-1的表达.ICAM-3和CD44的表达比血管内皮细胞强.结论与动脉、静脉和微血管内皮细胞比较,淋巴管内皮细胞不表达VCAM-1,而ICAM-3和CD44表达较强,这有助于解释淋巴细胞和肿瘤细胞与淋巴管内皮的黏附以及淋巴管新生的机制.
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神经再生素促大鼠背根神经节生长作用的研究
目的研究神经再生素(NRF)对体外培养新生大鼠背根神经节生长及NF-H表达的影响.方法体外大鼠背根神经节(DRG)培养;免疫荧光细胞化学、实时荧光定量PCR和Western blot等方法.结果免疫荧光细胞化学结果提示,NRF能促进背根神经节神经突起的生长,浓度为2.0 mg/L时生长状况佳;实时荧光定量PCR和Western blot结果提示,NRF能增加体外培养的背根神经节NF-H mRNA和蛋白的表达,在浓度为2.0mg/L时表达高.结论NRF能促进体外培养背根神经节神经突起的生长和NF-H的表达,表明NRF对发育期感觉神经元具有神经营养作用.
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神经生长因子低亲合力受体在肝纤维化患者和大鼠肝星状细胞的表达
目的探讨神经生长因子低亲合力受体(P75)在肝纤维化患者和大鼠肝星状细胞(HSCs)的分布及作用机制.方法对四氯化碳(CCl4)法制备的肝纤维化大鼠肝组织及肝穿刺获取的肝纤维化患者肝组织,常规石蜡包埋;大鼠离体培养的活化HSCs离心涂片,行免疫组织化学染色,确定P75的表达分布.结果P75在大鼠离体培养的活化HSCs膜,免疫组织化学染色呈阳性,在肝纤维化患者HSCs膜和肝细胞膜,免疫组织化学染色呈阳性,在肝纤维化大鼠HSCs膜和肝细胞膜,免疫组织化学染色呈阳性,在健康人和正常对照大鼠HSCs膜,免疫组织化学染色呈阴性,表明人和大鼠活化的HSCs膜表达P75.结论P75为肝纤维化的治疗提供了新的靶点.
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本体觉传入纤维在小鼠脊髓内的发育变化
目的观察本体觉传入纤维在小鼠脊髓内投射和终止的发育变化. 方法采用小牛白蛋白(PV)免疫组织化学染色特异标记本体觉传入纤维,用免疫荧光单标记和双标记方法观察本体觉传入纤维在脊髓内的生长模式以及与运动神经元的关系.染色后的切片用激光共聚焦显微镜进行观察. 结果PV样免疫阳性(LI)本体觉纤维早于胚胎(E)14 d出现在后索,E15时进入脊髓灰质.E16时,已有较多的PV-LI纤维到达中间带灰质和前角(VH).此后,随着发育阶段的增长,脊髓VH内PV-LI本体觉纤维和终末的数量和密度逐渐增加,并在生后早期P0-P7达到高水平.P14后,上述本体觉纤维和终末的数量逐渐减少.本体觉传入纤维的终末在E17时开始与脊髓VH运动神经元形成密切的接触.结论本体觉传入纤维在脊髓内的定位模式形成于小鼠胚胎后期和生后早期,本研究结果为深入理解脊髓反射运动环路的发育特点提供了依据.
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中药露蜂房蛋白对人红白血病K562细胞增殖的影响
目的研究中药露蜂房蛋白(NVP)抗白血病的作用,为中药露蜂房治疗白血病和开发新的抗白血病药物提供实验和理论依据.方法采用细胞培养和透射电子显微镜技术,观察NVP对人红白血病细胞(K562细胞)的生长抑制作用和形态结构的影响;运用免疫组织化学方法和图像分析系统,研究NVP对K562细胞凋亡相关信号转导蛋白NF-κ Bp65、β-catenin及iNOS表达的影响.结果1.NVP处理组K562细胞生长饱和密度降低,表示细胞增殖减弱.2.透射电镜下发现,NVP处理组K562细胞呈典型的凋亡形态学改变.3.免疫组织化学和图像分析系统测定光密度值(A值)显示,NVP处理组K562细胞中NF-κ Bp65、β-catenin细胞核内转导减少,iNOS表达减弱.结论NVP有明显抑制K562细胞增殖的作用,其作用机制可能通过调节凋亡相关信号传导因子NF-κBp65、β-catenin及iNOS的表达,从而诱导白血病细胞凋亡.
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嗅成鞘细胞条件培养基对PC12细胞促分化作用及对分化后细胞损伤的保护作用
目的研究嗅成鞘细胞条件培养基(OECCM)对PC12细胞促分化作用及其对-OH自由基损伤分化后细胞的保护作用.方法采用原代分离培养的方法培养和纯化嗅成鞘细胞,收集其培养上清作为OECCM,然后用其培养PC12细胞,培养3 d后,进行细胞形态学观察及β-tubulin免疫细胞化学染色,同时在同一批细胞中加入100μmol/L FeSO4和50μmol/L H2O2作用20 min,再用OECCM继续培养48 h,然后进行MTT对细胞活性进行检测和存活细胞计数.结果用OECCM培养的PC12细胞长有突起,形态酷似神经元,并且β-tubulin免疫细胞化学染色呈阳性,而对照组细胞在同样培养时间里,没有明显的形态变化,β-tubulin染色呈阴性.用FeSO4和H2O2产生的-OH自由基对分化后的PC12细胞进行损伤,发现继续用OECCM培养后,反映细胞活性的A值为0.346 5±0.032,对照组0.201 8±0.034(P<0.01);同时两组细胞存活数目的百分比分别为:实验组为(56.7±5.9)%,对照组为(23.8±7.4)%(P<0.01).结论嗅成鞘细胞可以分泌有促PC12细胞分化作用的分子和对分化后的细胞在损伤时有保护作用的分子.
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佛波酯对人胃癌细胞Ha-ras基因启动子及启动子结合蛋白的影响
目的探讨佛波酯(PMA)对人胃癌细胞BGC-823 Ha-ras基因启动子活性及启动子结合蛋白活性的影响.方法通过RT-PCR和运用自行构建的真核表达载体prasEYFP转染细胞进行荧光细胞检测,并应用凝胶电泳移动检测、Southwestern blotting等方法检测PMA(100 μg/L)处理BGC-823细胞72和96 h后,对Ha-ras基因表达水平、Ha-ras基因启动子活性以及对Ha-ras启动子结合蛋白的影响. 结果经PMA(100 μg/L)处理72和96 h,与未处理细胞相比,BGC-823细胞中Ha-ras基因表达显著降低,Ha-ras基因启动子活性分别被抑制65.2%和71.8%;同时两个Ha-ras启动子结合蛋白活性也显著降低,经检测,其分子量分别约为18 kD,35 kD. 结论PMA长期处理通过降低人胃癌细胞中Ha-ras启动子结合蛋白活性使Ha-ras启动子活性被抑制,从而在转录水平上调节Ha-ras基因表达.
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成人、成年狗鼻腔嗅黏膜成鞘细胞的纯化、培养与鉴定
目的研究成人和成年狗嗅黏膜成鞘细胞(OECs)的分离与培养的方法,为探索在人体和大型动物模型的自体嗅黏膜OECs移植修复脊髓损伤奠定基础.方法采用差速贴壁方法分别从成人和成年比格狗的嗅黏膜分离出OECs,分别培养25 d,在第6 d、10 d和25 d进行形态学观察,后进行OECs特异标记物NGFRp75的免疫细胞化学染色,鉴定成鞘细胞.结果原代培养的成人和成年狗嗅黏膜OECs在培养10 d后明显增多,25 d的OECs成熟,具有很长的突起,其形态多为双极和三极,NGFRp75的免疫组织化学染色呈阳性.本实验条件下,狗嗅黏膜OECs的生长状态比成人的好.而未进行差速贴壁的培养细胞则几乎均呈成纤维样细胞.结论差速贴壁的方法可以分离出较为纯化的成人、成年狗鼻腔嗅黏膜OECs.
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脑室内注射β淀粉样蛋白造成大鼠大脑皮层KIF家族基因表达变化
目的探询脑室定向注射淀粉样蛋白对大鼠大脑皮层神经元驱动蛋白超家族(KIFs)基因表达的影响.方法脑室定向注射淀粉样蛋白诱导大鼠产生类似阿尔茨海默病的症状.水迷宫实验验证大鼠记忆损伤程度;胆碱乙酰基转移酶(ChAT)基因的RT-PCR扩增证实大鼠大脑皮层胆碱能神经元损伤.实时荧光PCR方法检测大鼠大脑皮层神经元驱动蛋白(kinesin)、KIFlb、KIFlc、KIF3a、KIF3c与KIF4基因的表达. 结果水迷宫实验与ChAT表达检测表明动物模型制备成功.实时荧光PCR结果显示,淀粉样蛋白脑室内注射造成大鼠皮层KIFs基因表达的普遍上升.结论淀粉样蛋白造成的皮层胆碱能神经元损伤很可能与其兴奋性毒性有关.
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树突状细胞标志分子在人乳腺癌中的表达及与T细胞的关系
目的通过观察人乳腺癌组织中CDlc、S-100、HLA-DR阳性细胞数和表达强度的变化及其与T细胞的关系,了解乳腺癌局部微环境的免疫状态,探讨树突状细胞与乳腺癌发生、发展的关系,为乳腺癌的生物治疗提供实验依据.方法收集手术切除的人乳腺癌组织和癌旁相对正常乳腺组织,用免疫组织化学方法和图像分析技术对20例乳腺癌标本进行检测.结果乳腺癌组织中CDlc、S-100和HLA-DR的表达强度均较相对正常乳腺组织明显减弱(P<O.05);CD1c+DC、S-100+DC、HLA-DR+DC、CD4+T细胞和CD8+T细胞的数量均较相对正常乳腺组织明显减少(P<0.05),且乳腺癌组织中CDlc+DC细胞的数量比S-100+DC细胞的数量减少更明显,HLA-DR+DC与CD4+T细胞的数量呈明显相关关系(r=O.998);结论树突状细胞表面标志分子在人乳腺癌组织中的表达总量下降,树突状细胞在抗乳腺癌的免疫反应中可能起重要作用;这为临床开展乳腺癌的生物治疗提供了实验依据.
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GST-snail融合蛋白的原核表达及其多克隆抗体制备
目的制备snail多克隆抗体,为深入研究其功能和探讨其与肿瘤等疾病的相关性提供工具.方法PCR扩增编码人snail 264个氨基酸的cDNA全长片段,DNA重组入原核表达质粒pGEX-4T-1,转化大肠杆菌BL21菌株,异丙基-β-D-硫代半糖苷(IPTG)诱导表达GST/Snail融合蛋白.经电泳纯化的融合蛋白免疫新西兰白兔,制备抗血清.通过ELISA、免疫荧光和免疫印迹法鉴定血清特异性和效价.结果成功构建了pGEX-4T-1/snail原核表达载体,转化BL2l后可高效表达融合蛋白GST-snail,免疫产生的snail多抗可特异检测snail真核表达载体转染COS-7细胞后snail的表达及定位情况.结论获得了效价和特异性都良好的snail抗体,适合对snail的检测应用.
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整体显示大鼠骨骼和软骨的复合染色法
目的探讨显示不同时期大鼠(胎鼠、仔鼠、近成年鼠)骨骼和软骨的复合染色方法.方法将大鼠整体标本去除皮肤、皮下脂肪组织及内脏,固定于95%酒精;丙酮脱脂;0.1%茜素红S和0.15%~0.3%阿利新蓝染骨骼和软骨;0.5%~2%氢氧化钾溶液分色和透明.结果含钙骨骼呈玫瑰红色,软骨呈蓝色,其他组织均为无色透明状.结论去除皮肤、皮下脂肪组织及内脏的整体大鼠标本采用茜素红S和阿利新蓝复合染色法,可使骨和软骨获得佳染色效果.
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Bmil基因在小鼠睾丸组织中的表达定位
精原干细胞能通过自增殖不断地自我更新,形成不同发育阶段的生精细胞并维持其正常数目.Broil基因属于Polvcomb家族,近发现它对造血干细胞、白血病干细胞、神经干细胞等自增殖有调控作用.我们用自制的BMI1多克隆抗体,通过免疫荧光技术定位该基因在小鼠睾丸组织中的表达,并用FISH做进一步验证,为进一步揭示精原干细胞自增殖的分子机制奠定基础.
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精子蛋白Sp32/OY-TES-1基因mRNA表达的探讨
目的了解精子蛋白Sp32/OY-TES-1基因mRNA的表达特点,研制癌-睾丸抗原(CTA)的肿瘤疫苗.方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测95例正常人组织及125例人肿瘤组织中Sp32/OY-TES-1mRNA的表达,随机选取RT-PCR阳性产物12份进行DNA测序;对所得数据进行统计学分析. 结果Sp32/OYTES-1在正常和肿瘤组织中的表达频率分别为68.4%(65/95)和44.00%(55/125),两者比较有统计学意义(P<0.05).在24种不同器官的正常组织中,21种表达Sp32/OY-TES-1基因mRNA(87.50%).DNA测序结果证实,RTPCR产物为Sp32/OY-TES-1基因. 结论Sp32/OY-TES-1基因的mRNA在正常组织中广泛表达,它是否可归为睾丸和肿瘤限制性表达的基因尚需进一步研究.
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小鼠附植前胚在子宫内的迁移能力
目的观察小鼠附植前胚在子宫内的迁移能力.方法将CD-1小鼠受精卵、2-细胞胚、桑椹胚、囊胚、四倍体胚、孤雌活化胚等6种胚共l042枚单侧(右侧)移植CD-1假孕母鼠的输卵管或者子宫,观察移植胚在两侧子宫角内的附植情况.结果共得到45只妊娠鼠,在这45只鼠的右侧子宫角都有不同数目的着床胚,而仅在6只鼠的左侧子宫角发现了6枚着床胚.结论小鼠胚在子宫内的迁移能力非常有限,单侧移植的多个胚很少的机率迁移到另一侧子宫角内着床,不能进行胚均匀分布.
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雌激素受体在发育不同时期大鼠大脑的表达
目的探讨雌激素受体(ER)在大鼠大脑神经元及神经胶质细胞表达的增龄性变化.方法采用免疫组织化学方法观察不同年龄正常组及脑损伤组SD大鼠脑内ER的表达变化并行统计学分析.结果正常老年组海马齿状回神经元ER表达明显少于青年组;脑损伤组海马各区出现大量ER阳性反应的胶质细胞,且青年组阳性胶质细胞明显多于老年组.结论老年组海马齿状回神经元雌激素受体表达下降,从而更易发生退行性变;在受到伤害性刺激时青年组胶质细胞表达更多的雌激素受体,从而更好地利用雌激素的神经保护作用.
年 | 期数 |
2019 | 01 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 |
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