右旋柠烯乳剂对人胃癌移植瘤生长和转移的抑制作用

目的研究并探讨右旋柠烯乳剂(D-limonene)对人胃癌生长和转移的抑制作用及其机制.方法采用人胃癌BGC-823细胞株经反复传代成实体瘤的完整组织块,建立人胃癌裸小鼠原位移植瘤模型.将40只荷瘤裸小鼠随机分成4组,移植后第5d开始分别用生理盐水灌胃、5-氟尿嘧啶(5-FU)腹腔注射、D-limonene灌胃、D-1imonene灌胃+5-FU腹腔注射共7周.第8周处死动物,测量原位肿瘤瘤重并计算抑瘤率,检测肿瘤细胞凋亡指数(AI)、肿瘤微血管密度(MVD)及免疫组织化学测定肿瘤组织血管内皮生长因子(VEGF)的表达变化,光镜与电镜观察组织细胞超微结构变化;观察荷瘤鼠腹膜、肝、其他脏器肿瘤转移及腹水情况.结果D-limonene组、联用组分别与对照组相比,胃癌的原位肿瘤瘤重与抑瘤率、AI、MVD、VEGF下调,差异有显著性(P＜0.05).腹膜、肝转移受到明显抑制(P＜0.05).结论D-limonene通过抑制肿瘤微血管形成,诱导胃癌细胞凋亡,抑制了体内胃癌的生长和转移.

Wistar大鼠成骨细胞体外分离、培养及初步研究

目的研究体外分离、培养的Wistar大鼠成骨细胞的生物学物性.方法取Wistar大鼠双侧股骨,用胰酶冷热交替消化法收集细胞,以1×106/ml的细胞浓度培养,2周后得到贴壁生长的单层细胞.随后进入传代培养,通过倒置显微镜观察、HE染色、碱性磷酸酶染色、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原检测等手段对所获得的细胞进行生物学特性研究.结果获得的细胞呈多种形态,有长短不一、粗细不均,互相连接的胞浆突起,细胞互相重叠呈复层生长,并形成细胞结节.细胞经连续传代,形态与功能不变.细胞富含碱性磷酸酶活性,Ⅰ型胶原染色阳性,这与典型成骨细胞的生物学特性相似.结论用骨组织在体外能培养出成骨细胞,可作为骨组织工程体外构建的种子细胞.

鹿茸多肽对胎大鼠脑神经干细胞体外诱导分化的实验研究

目的探讨鹿茸多肽对胎大鼠脑神经干细胞体外分化的影响.方法从E12～14 d的Wistar大鼠脑中分离扩增获得大量神经干细胞后,加入不同浓度的鹿茸多肽,观察其对胚胎神经干细胞分化的影响,并通过免疫组织化学染色检测神经干细胞分化为神经元和星形胶质细胞的状况.结果 50μg/L组分化细胞总数与对照组相比有显著性差异(P＜0.01);50μg/L、100μg/L、200μg/L组神经元特异烯醇化酶(NSE)阳性率与对照组相比有显著性差异(P＜0.01),并呈一定的剂量依赖性.结论鹿茸多肽在体外可明显促进神经干细胞向神经元分化,为鹿茸多肽应用于神经系统损伤性疾病的治疗提供了实验依据.

人精子甘露糖受体表达与顶体反应的关系

目的研究人精子的甘露糖受体(MR)表达与顶体反应的关系,以探讨体外获能培养精子的MR表达是否为人精子获能的标志.方法将上游法收获的活精子在获能培养基BWW中进行体外获能培养后,加入小鼠透明带溶解液(mZPS)诱导人精子顶体反应,精子悬液用异硫氰酸荧光素标记的甘露糖基化牛血清白蛋白(FITC-DMA)为探针标记MR,用豌豆凝集素(PSA)法检测顶体反应.结果体外获能培养人精子的MR表达率与mZPS诱导的顶体反应率无相关性.结论体外获能培养精子的MR表达可能不是人精子获能的标志.

蛋白聚糖在发育期大鼠大脑皮质的表达

目的观察蛋白聚糖(agrin)在生后大脑皮质不同发育阶段的表达,探讨其与大脑皮质发育的关系.方法免疫组织化学方法.结果 Agrin在生后不同发育阶段的表达变化明显.生后第1d,agrin的表达很低,第2d开始迅速上升,6d时达到高峰,以后逐渐下降,第4周时降至成年鼠水平.并且,agrin的表达与大脑皮质各层神经元发育顺序不尽一致.结论 Agrin是一种与大脑皮质发育有关的蛋白聚糖,它对神经元的发育成熟可能有重要作用.

NGF对哮喘豚鼠下呼吸道及内脏感觉传入部位TNF-αmRNA表达的上调作用

目的探讨神经生长因子(NGF)在哮喘发病中的作用及其神经免疫调节机制.方法应用原位杂交方法结合显微图像分析,研究实验性哮喘豚鼠下呼吸道和内脏感觉传入部位肿瘤坏死因子-αmRNA(TNF-αmRNA)表达的变化以及NGF抗体对其的影响.结果生理盐水组与单纯致敏组TNF-α mRNA的表达没有显著差异(P＞0.05);与这两个对照组相比,哮喘豚鼠TNF-α mRNA的表达在气道上皮、肺内炎性细胞、C7～T5段脊神经节及脊髓后角内均明显上调(P＜0.01);在哮喘+NGF抗体组,上述部位内TNF-α mRNA的表达明显低于哮喘组(P＜0.01).结论 NGF诱发TNF-α的表达可能是NGF参与哮喘发病的机制之一,NGF抗体抑制哮喘时下呼吸道和内脏感觉传入部位TNF-α mRNA的表达可能是治疗哮喘的新途径.

低切应力对体外培养动脉形态学重建的影响

目的研究低切应力对血管的生物学作用,探讨切应力与血管形态学重建的关系.方法采用血管体外应力培养系统,培养猪颈总动脉,通过组织学、免疫组织化学和图像分析等方法,探讨低切应力作用下动脉重建的形态学改变.结果切应力减小时,动脉发生显著的结构重建,其特征为管径缩小,壁面积减小,管壁增厚,壁厚/内径比增加;低切应力作用使动脉部分中膜VSMC由收缩型转变为合成型,表现为α-肌动蛋白含量下降,细胞核朝向改变,发生扭曲,变大变圆,核仁明显.结论低切应力和血压改变所致的血管重建在形态学方面有很大不同,提示:切应力和血压改变对血管重建的作用机制不同;中膜VSMC的表型转换是低切应力引起血管重建的基础.

人肿瘤坏死因子α基因对绒毛膜癌耐药细胞凋亡影响的体内研究

目的研究转染人肿瘤坏死因子α(huTNF-α)基因对裸鼠绒毛膜癌(绒癌)耐药细胞移植瘤组织细胞凋亡的影响. 方法用人绒癌耐药细胞系JEG-3/VP2和转染了huTNF-α的绒癌耐药细胞系JEG-3/VP2/huTNF接种裸鼠各6只,行足叶乙甙(VP16)化疗后,采用RT-RCR、HE染色和TUNEL检测方法,观察移植瘤细胞的凋亡情况.结果在接种JEG-3/VP2/huTNF-α的移植瘤组织中,存在huTNF-α基因的表达;JEG-3/VP2/huTNF-α组出现凋亡小体的细胞和TUNEL阳性细胞明显多于JEG-3/VP2组,P＜0.05.结论转染hTNF-α基因促进了绒癌耐药细胞的凋亡.

脱细胞同种异体神经移植物修复大鼠坐骨神经缺损的实验研究

目的观察脱细胞处理的同种异体神经移植物修复大鼠坐骨神经缺损的作用.方法用组织工程学方法制备的大鼠同种异体神经移植物桥接大鼠坐骨神经缺损,并对再生神经进行电生理学功能测试,光镜、电镜观察移植物内的再生神经,并进行统计分析.结果术后13周内,动物未见炎症及排斥反应.用脱细胞处理的同种异体神经移植物修复神经缺损,再生神经的传导功能、纤维数量、轴突直径、有髓纤维占有的面积与自体神经移植对照及计量学上统计分析均无显著性差异.结论脱细胞处理的同种异体神经移植物具有良好的组织相容性,它对缺损的坐骨神经再生有促进作用.

纹状体星形胶质细胞诱导小鼠胚胎干细胞定向分化的研究

目的探讨纹状体组织对胚胎干细胞向多巴胺能神经元分化的定向诱导作用,及其细胞来源和诱导方式.方法分别用纹状体组织提取液、纹状体星形胶质细胞条件培养液和纹状体神经元条件培养液诱导胚胎干细胞定向分化,通过形态学观察和酪胺酸羟化酶(TH)免疫细胞化学检测,对细胞的分化情况进行鉴定,并对3组结果进行定量比较分析.结果纹状体组织提取液对胚胎干细胞有明显的定向诱导作用,向多巴胺能神经元诱导分化的分化率为15%;纯化培养的纹状体星形胶质细胞条件培养液对胚胎干细胞的定向诱导作用与纹状体组织液无明显差异,分化率为15.2%;纯化培养的纹状体神经元条件培养液对胚胎干细胞向多巴胺能神经元诱导分化的作用很弱,其分化率仅为3%.结论纹状体组织对胚胎干细胞向多巴胺能神经元定向诱导分化作用主要来源于纹状体中的星形胶质细胞,而这种诱导作用主要通过非接触性方式实现.

人ATP7B基因对Wilson病动物模型LEC大鼠暴发性肝炎的治疗

目的探讨人ATP7B基因对Wilson病动物模型LEC大鼠暴发性肝炎的治疗效果.方法将构建的7.1 kb含有鸡β肌动蛋白启动子的人正常ATP7B cDNA,经显微注射法导入人Wilson病动物模型LEC(long-Evans Cinnamon)大鼠受精卵,建立转基因功能恢复大鼠模型.以Western bolt检测人ATP7B在转基因大鼠肝内的表达,用同窝无转基因大鼠及正常野生型LEA大鼠作对照,对6～16周龄的转基因大鼠的血清AST、ALT和总胆红素水平进行连续测定,同时取13周龄转基因大鼠的肝组织进行病理学和组织化学分析. 结果人ATP7B基因在转基因大鼠的肝组织中获得正确和完整的表达:12周龄前后,与同窝无转基因大鼠相比,转基因大鼠的血清AST、ALT和总胆红素水平明显降低,肝组织的炎性病变显著减轻,肝细胞内铜的蓄积减少;至16周龄,转基因大鼠的临床表型未见异常,存活率达100%.说明人ATP7B的导入,成功地抑制了Wilson病动物模型LEC大鼠的暴发性肝炎的发生.结论Wilson病肝炎的发生与ATP7B基因功能缺陷引起的铜蓄积有直接关系.基因转移有可能是一种有效的治疗Wilson病的方法.

低氧条件下低氧诱导因子-1α及p53的表达

目的研究低氧时小鼠肺组织中低氧诱导因子-1α及凋亡相关基因p53蛋白表达的变化,探讨两者之间的关系.方法实验用雄性昆明小鼠,分为低氧组和对照组,低氧仓浓度分别为10%、7%、5%.用免疫荧光组织化学技术及激光共聚焦扫描显微镜技术,检测小鼠在低氧条件下肺组织中HIF-1α及p53蛋白表达的变化.结果正常组小鼠肺组织HIF-1α无表达.p53少量表达;低氧组HIF-1α及p53蛋白表达均增加,并且随低氧时间的延长及低氧强度的增加而增强,P＜0.05,HIF-1α及p53的表达呈显著正相关(r=0.97). 结论低氧可诱导小鼠肺组织中HIF-1α的表达增强,同时肺组织p53蛋白的表达上调,两者呈显著正相关,说明HIF-1α有可能参与肺组织p53蛋白表达的调节,进而调节凋亡的发生.

大鼠肝硬化门腔静脉分流术后运动皮层和脊髓一氧化氮合酶阳性神经元的变化

目的研究大鼠肝硬化门腔静脉分流术后运动皮层和脊髓一氧化氮合酶(NOS)阳性神经元的变化.方法采用NADPH-d黄递酶组织化学法以及NOS荧光免疫组织化学技术结合激光共聚焦扫描显微镜方法.结果肝硬化门腔静脉分流术后运动皮层NOS和nNOS阳性细胞显著减少;脊髓NOS阳性细胞改变不明显.结论大鼠肝硬化门腔静脉分流可引起大脑皮层细胞的改变,NO可能参与了肝硬化门腔静脉分流术后对中枢神经系统的损害.

TrkA、TrkB和TrkC受体在大鼠三叉神经本体觉中枢通路上的表达

目的检查高亲和性的神经营养物质受体(TrkA、TrkB和TrkC)在大鼠三叉神经本体觉中枢四级通路上的分布.方法采用免疫组织化学的抗生物素-生物素-过氧化物酶复合物(ABC)方法并以二氨基联苯胺(DAB)为呈色剂,检查免疫反应细胞.结果 3种受体在三叉神经本体觉中枢四级通路的三叉神经中脑核、二级和三级核团均有表达.同一核团内3种受体的免疫阳性细胞密度不同.在胞体和突起上均观察到TrkA和TrkB免疫反应染色,但TrkB标记的突起较长,TrkC染色多局限于细胞体部分.结论在三叉神经本体觉中枢通路中,3种神经营养物质受体都可能在维持神经元存活和调节递质释放等方面发挥特定的作用.

胃腔内促性腺激素释放激素类似物对大鼠胃和十二指肠生长抑素细胞功能的影响

目的研究胃腔内促性腺激素释放激素类似物(GnRH-A)对大鼠胃和十二指肠生长抑素免疫阳性细胞及血液、胃液中生长抑素含量的影响.方法应用免疫组织化学ABC和ELISA方法分别检测大鼠胃和十二指肠生长抑素阳性细胞的密度及血液、胃液中生长抑素的含量. 结果胃腔注射GnRH类似物后,胃壁内单位面积生长抑素阳性细胞数为26.6±3.893,与对照组48.3±6.019相比具有差异(P＜0.01),十二指肠单位面积生长抑素阳性细胞数为51.7±2.214,与对照组58.5±4.454相比具有差异(P＜0.01).血液中生长抑素ELISA检测的A值为0.15±0.018,与对照组0.27±0.036相比具有差异(P＜0.01),胃液中A值为0.32±0.049,与对照组1.022±0.369相比具有差异(P＜0.01). 结论外分泌的GnRH对大鼠胃和十二指肠中生长抑素的分泌起显著的抑制作用.

Pax-6在大鼠发育脑喙侧神经干细胞迁移流中的表达

目的了解大鼠脑发育过程中,喙侧神经干细胞迁移流中不同时期Pax-6表达水平的时空差异.方法用BrdU对胚胎14 d、出生后0、1和7 d的Wistar大鼠行活体标记,取各时相点鼠脑,冰冻切片,行BrdU、Nestin、Pax-6和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫荧光染色,观察Pax-6在脑内增殖细胞中的表达情况,比较在上述4个时相点,Pax-6于室管膜前下区、迁移流主干部分和嗅球3个部分的表达差异.结果 1.在发育中大鼠脑内,Pax-6主要表达于神经干细胞内,在海马增殖细胞亦有较高表达.2.在喙侧神经干细胞迁移流内,Pax-6在迁移流主干部分的表达高于室管膜前下区和嗅球;在胚胎14 d的表达与出生后0 d和1 d相似,表达水平较高,出生后7 d迅速下降到很低水平. 结论在大鼠脑发育过程中,Pax-6主要表达于神经干细胞及海马增殖性细胞内,在大鼠出生后,随着大鼠脑的发育,Pax-6于喙侧神经干细胞迁移流的表达迅速减弱,但迁移流主干部分的表达始终高于室管膜前下区和嗅球.

胶质瘤血瘤屏障体外模型的形态学观察

目的探讨胶质瘤血瘤屏障体外模型的形态学特征. 方法利用电镜技术观察血管内皮细胞ECV304和C6胶质瘤细胞共培养(混合共培养、Transwell共培养、Transwell膜两面共培养)后的内皮细胞的孔窗、内皮细胞之间的连接及内皮细胞与肿瘤细胞的相互关系、瘤细胞的"血管周足"等的形态学特征;并与4例人脑胶质瘤组织标本的血瘤屏障进行比较.结果电镜下发现ECV304细胞经与C6细胞按3种不同方式共培养汇合后均为无孔窗型内皮细胞,细胞间出现紧密连接;Transwell共培养的膜上C6细胞未见伸出伪足突向膜的微孔;经膜两面共培养的瘤细胞则可通过Transwell的微孔突向内皮细胞侧,但瘤细胞未伸出伪足包绕内皮细胞或突入内皮细胞间隙,瘤细胞的"血管周足"不完整,后两者与脑胶质瘤组织标本的血瘤屏障的形态特征相类似. 结论在体外经Transwell膜两面共培养的ECV304和C6胶质瘤细胞的系统可在一定程度模拟体内的血瘤屏障的形态学特征.

视神经切断诱导金黄地鼠脑内视觉通路小热休克蛋白27的表达

目的观察成年金黄地鼠左侧视神经眶内切断术后,视交叉、视束、外侧膝状体以及上丘内小热休克蛋白27(small heat shock protem,HSP27)表达的变化.方法免疫组织化学染色法及光密度测定.结果在正常对照和手术对照组,双侧视交叉、视束、外侧膝状体和上丘未见明显免疫反应物,光密度值之间亦无显著差异.而在实验组,与左侧相比,右侧视交叉、视束、外侧膝状体和上丘免疫组织化学染色明显增强.术后1周,右侧脑内视觉通路可见免疫反应物明显沉着的阳性细胞,形态类似星形胶质细胞.统计学分析显示,视交叉、外侧膝状体和上丘左、右两侧的光密度差值在术后1周时大,至术后第2周迅速降低,以后下降趋势减缓,到术后8周仍可见右侧光密度值高于左侧.结论一侧视神经切断后,对侧视交叉、视束、外侧膝状体和上丘等区域均有HSP27表达的增强,并可持续至术后8周之久.提示上述区域HSP27表达增强与视觉通路的损伤有关,但其发生机理及生物学意义尚待进一步研究.

周围神经损伤后Tropic 1808基因表达蛋白的免疫组织化学研究

目的研究Tropic 1808基因表达蛋白在受损大鼠坐骨神经中的表达与分布.方法用酶联间接法和双重免疫荧光法进行免疫组织化学染色.并通过计算机图像处理技术,测量阳性区域的强度与面积.结果 损伤神经的近侧端和远侧端中施万细胞均有Tropic 1808基因表达蛋白的阳性免疫反应,阳性免疫反应物主要分布于施万细胞膜上,远侧端的阳性反应物强度和面积强于和大于近侧端.结论周围神经损伤后,Tropic1808基因表达蛋白分布于损伤近侧端和远侧端的施万细胞膜上,并且远侧端中该蛋白的表达强于近侧端.

大鼠心脏Ⅰ、Ⅲ型胶原增龄变化的免疫组织化学观察

目的探讨大鼠心脏Ⅰ和Ⅲ型胶原纤维的增龄变化规律. 方法21只Wistar雄性大鼠随机分为幼年、青年和老年组,应用SP免疫组织化学方法,检测3组大鼠心脏Ⅰ和Ⅲ型胶原的蛋白表达.结果1.Ⅰ型和Ⅲ型胶原纤维均分为粗、细2种.细纤维包绕在每个心肌外围,相互吻合成网;粗胶原呈现斑块状,散在分布于心肌细胞群之间.Ⅰ型胶原纤维较Ⅲ型含量多.2.不同年龄大鼠心肌Ⅰ和Ⅲ型胶原表达有明显差异.幼年组少而密集,均匀;青年组相对疏松而均匀;老年明显增多,分布不均.心脏胶原纤维从幼年到老年一直在增长,青年期以前增长快.3.在幼年大鼠心脏右心室的胶原含量多于左心室,在青年和老年大鼠心脏各部位的胶原含量无差异.结论大鼠心脏Ⅰ型胶原纤维多于Ⅲ型,2种类型的胶原纤维含量均随年龄增长而增加.

实验性肝纤维化大鼠胶原网络构筑的扫描电镜观察

目的探讨肝纤维化大鼠胶原网络的三维形态构筑的变化.方法采用健康雄性Wistar大鼠,随机分为对照组和肝纤维化组,后者采用60%的四氯化碳植物油皮下注射,造成肝纤维化大鼠模型,分别于实验的第10周和12周末取材,作为10周和12周肝纤维化组,行天狼猩红显色,光镜下观察和氢氧化钠浸渍,扫描电镜下观察胶原网络的构筑.结果扫描电镜下,随着肝纤维化程度的加重,增生的胶原纤维交织成网,分隔包裹正常肝组织,形成大小不等圆形或椭圆型肝组织团块,近似于"蜂窝状"囊性的假小叶结构;相邻假小叶之间的胶原纤维沉积明显,并与包裹门管区和血管的纤维鞘相延续为间隔.与对照组相比,10周肝纤维化组形成了尚不完整的假小叶囊,12周组的小叶囊致密完整.结论肝纤维化时胶原纤维超微构筑发生了改变,增生的胶原网络主要由粗、细纤维构成.

中国大鲵(Andrias davidianus)7种组织器官蛋白水解酶的种类和活性分析

目的了解大鲵(Andrias davidianus)脑、心脏、肺、肾脏、眼球、皮肤和肌肉的蛋白水解酶种类和性质.方法采用蛋白水解酶复性电泳(G-PAGE)技术.结果1.脑的蛋白水解酶在pH 4.5时有较弱的活性,在其他pH条件下没有活性;2.心脏和肺的蛋白水解酶在pH 4.5和pH 7.0时有活性;3.肾脏的蛋白水解酶在pH 4.5时有活性;在pH 7.0时,蛋白水解酶的活性强、种类多;4.在pH 4.5和pH 9.5条件下,未检出眼球有蛋白水解酶活性;5.肌肉的蛋白水解酶在pH 9.5时活性较强,在pH 7.0时,蛋白水解酶活性强、种类多;6.皮肤的蛋白水解酶种类与肌肉相似,但活性比肌肉弱.结论大鲵肾脏和肌肉的蛋白水解酶活性强、种类多;脑、心脏、肺、皮肤的蛋白水解酶活性弱、种类少;眼球几乎无蛋白水解酶活性.脑的蛋白水解酶活性的适pH为酸性;心、肺和肾的蛋白水解酶活性的适pH为中性偏酸;皮肤和肌肉的蛋白水解酶活性的适pH为中性.

氟尿嘧啶引起大鼠气管损伤修复过程中干细胞的定位

目的气管干细胞的原位观察.方法使用5-氟尿嘧啶(5-FU)造成大鼠离体气管环的严重损伤,采用光镜、PCNA免疫组织化学,以及Hoechst33342染色观察气管黏膜的修复过程.结果5-FU作用12 h后,气管上皮脱落,可见少量间隔分布的类似裸核的细胞呈钉状位于基底膜上,PCNA染色阴性(G0期细胞),其中少数细胞Hoechst33342染色阴性.去除5-FU 6 h后,气管黏膜由扁平上皮覆盖;48 h后,气管环恢复假复层纤毛柱状上皮.结论5-FU能杀死处于细胞周期的气管上皮细胞,对G0期细胞作用很小,残留于基底膜上的裸核样的G0期细胞中含有干细胞,其Hoechst33342染色阴性,并具有排出荧光染料的能力,正是这些细胞的增殖分化,修复了损伤的气管环.

调控肝再生的基因和生长因子的研究进展

肝脏是哺乳动物具有很强再生能力的器官.随着分子生物学理论和实验技术的不断发展,尤其是1931年Higgins和Anderson建立了大鼠2/3肝切除模型后,人们可以在实验肝脏学基础上研究肝再生的分子机理,极大地促进了有关研究的发展[1].现在知道,肝再生涉及到细胞的激活、去分化、增殖、再分化、组织结构和功能重建等不同阶段,且每个阶段的进程都受到严格调控.与之有关的基因、生长因子和蛋白质等也在不断地被发现和鉴定,我们在本文中就与肝再生有关的基因和生长因子作一简要介绍.

骨髓基质细胞移植对大鼠全横断性脊髓损伤修复的影响

我们先前探讨了移植的骨髓基质细胞在正常大鼠脊髓内的存活、迁移及分化的情况,结果表明,骨髓基质细胞可在正常脊髓内存活、迁移并向神经元及胶质细胞分化.在此基础上,本研究应用骨髓基质细胞移植,观察其对大鼠全横断性脊髓损伤后结构与功能的影响.制备大鼠脊髓全横断模型,手术9d后移植细胞,移植前收集细胞,DMEM清洗,加入核荧光染料Hoechst 33342(储存浓度0.5g/L)至浓度5mg/L,37℃20min,DMEM清洗.将标记的骨髓基质细胞吸附于明胶海绵后移植入T10脊髓全横断处,对照组单纯移植明胶海绵,空白对照组为单纯脊髓全横断模型.

干细胞常用词汇(续九)

小鼠胚胎干细胞构建嵌合体的方法

目的利用本实验室新近分离培养的远交系KM小鼠胚胎干细胞进行嵌合体构建实验.方法从KM小鼠囊胚的内细胞团中分离培养胚胎干细胞,进行近交系C57BL/6J小鼠受体囊胚腔内注射,进行嵌合体构建实验.结果从内细胞团中分离的胚胎干细胞具有胚胎干细胞的典型特征,克隆状生长,碱性磷酸酶染色呈强阳性,核型正常,悬浮培养能形成类胚体,已成功构建1只嵌合鼠.结论利用我们分离的KM小鼠胚胎干细胞可成功地构建嵌合体.