混合培养对骨髓基质细胞转分化为神经元的影响

目的研究神经干细胞(NSCs)与骨髓基质细胞(BMSCs)混合培养对骨髓基质细胞转分化为神经元的影响.方法将BMSCs传代培养2 d,10μg/L bFGF预诱导过夜,DAPI标记后加入到已贴壁分化2 d的NSCs中,神经元培养基混合培养7 d后进行神经元特异性烯醇化酶(Nse)染色.对照组于BMSCs传代2 d后,一组加bFGF处理过夜,另一组不加,神经元培养基培养7 d后NSE染色.结果实验组中部分BMSCs呈NSE染色强阳性,比例为(13.38±5.79)%,对照组呈NSE阴性结论NSCs与BMSCs混合培养可诱导BMSCs转分化为神经元.

染料木素对去卵巢大鼠脑突触体[Ca2+]i及膜流动性的影响

目的观察去卵巢大鼠大脑皮质和海马突触体[Ca2+]i和膜流动性变化以及染料木素的治疗作用.方法雌性SD大鼠随机分为假手术组、去卵巢对照组、染料木素组、苯甲酸雌二醇组.分别皮下注射生理盐水50μl、生理盐水50μ1、染料木素250μg和苯甲酸雌二醇50μg,隔日1次.术后8周测定各组大鼠大脑额、顶叶皮质和海马的突触体[Ca2+]i及膜流动性.结果去卵巢对照组大鼠大脑皮质及海马突触体[Ca2+]i分别为(243.31±31.21)nmol/L和(305.10±54.31)nmoL/L,与假手术组、苯甲酸雌二醇组和染料木素组之间有显著性差异(P＜0.01);但在假手术组、苯甲酸雌二醇组和染料木素组之间无显著差异(P＞0.05);去卵巢对照组海马突触体膜相对黏滞度(η)为3.03±0.39,与假手术组和苯甲酸雌二醇组之间有显著性差异(P＜0.05);与染料木素组相比有高度显著性差异(P＜0.01).染料木素组、苯甲酸雌二醇组及假手术组之间无显著差异(P＞0.05).结论大鼠去卵巢后突触体膜流动性降低及突触体内自由钙增加,染料木素能增加去卵巢大鼠突触体膜流动性及维持钙稳态.

金仓鼠神经管cDNA文库的建立

目的构建金仓鼠神经管cDNA文库,以筛选与神经管发育及神经管畸形发生相关的基因.方法用TRIZOL Reagent提取金仓鼠神经管总RNA;用LD-PCR法反转录合成双链cDNA;经蛋白酶K消化、Sfi Ⅰ酶切、CHROMA SPIN-400柱分离去除小于500bp的片段;将cDNA与载体λ Tripl EX2按一定比例连接;经体外包装,建立cDNA的噬菌体表达文库.结果cDNA文库容量为1.5×106pfu/ml,重组率为99%,平均插入片段大于1kb.结论我们初步构建的金仓鼠神经管cDNA文库为高效的cDNA文库.

室间隔缺损儿童心房肌细胞Cx43蛋白的表达

目的探讨室间隔缺损儿童心房肌细胞连接蛋白43(Cx43)表达的规律.方法应用SP免疫组织化学和图像分析方法,观测室间隔缺损儿童心房肌细胞Cx43的蛋白表达.结果1.正常儿童心房肌细胞Cx43表达:1～3岁组呈斑点状、带状或链状,主要排列于细胞侧面连接处,闰盘处极少.7～16岁组大量分布于细胞侧面连接处和闰盘处.2.室间隔缺损儿童的心房肌细胞Cx43表达:1～3岁组除了分布于细胞侧面连接处,还见于细胞闰盘处及细胞质中,少数无序排列;7～16岁组分布在细胞侧面连接处和细胞质中,闰盘处极少,且无序排列.3.室间隔缺损儿童心房肌细胞Cx43的蛋白表达量未发生显著变化.结论室间隔缺损儿童心房肌细胞Cx43的蛋白分布形式有改变,表达量无变化.提示,室间隔缺损仅对Cx43的分布形式产生影响.

伪狂犬病病毒Ea株诱导牛肾细胞凋亡及核基质蛋白的变化

目的研究伪狂犬病病毒(PrV)是否具有诱导组织培养细胞发生细胞凋亡的功能及探讨凋亡细胞核基质蛋白表达的变化.方法利用锥虫蓝(台盼蓝)染色绘制PrV在不同细胞上的增殖曲线;荧光染色观察凋亡细胞核的形态特征;琼脂糖凝胶电泳分析细胞染色体DNA的片段化;高分辨率双向电泳分析细胞凋亡前后核基质蛋白的表达差异. 结果膜通透性的DNA特异性结合染料Hoechst 33342染色显示,PrV感染后36 h,牛肾(MDBK)细胞核染色质开始固缩、凝聚,细胞核碎裂;DNA提取及琼脂糖凝胶电泳分析表明,细胞染色体DNA发生片段化,形成"DNA梯状"条带(DNA ladder);尽管PrV可以诱导MDBK细胞发生细胞凋亡,但不能诱导IBRS-2,BHK-21及PK-15细胞发生凋亡.MDBK细胞发生凋亡前后核基质蛋白的表达发生改变,存在表达上调、下调、诱导表达及表达遏制等情况.结论PrV诱导细胞发生细胞凋亡是其致细胞死亡的形式之一,间接反映了PrV与宿主细胞间复杂的相互作用.细胞凋亡前后核基质蛋白表达存在的差异说明PrV致MDBK细胞发生凋亡是自身基因产物或诱导或抑制宿主细胞基因表达的结果.

过氧化物酶体增殖物活化的受体γ特异配体罗格列酮对肝星状细胞生物学特性的影响

目的研究过氧化物酶体增殖物活化的受体γ(PPARγ)特异配体罗格列酮对肝星状细胞(HSC)PPARγ表达以及对HSC生物学特性的影响. 方法设立空白对照组、3 μmol/L罗格列酮组、10 μmol/L罗格列酮组;分别用RT-PCR、Western印迹、免疫细胞化学方法检测PPARγ的表达;用Western印迹和免疫细胞化学方法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达;四甲基偶氮唑盐(methythiazolyltetrazolium,MTT)法检测细胞增殖;流式细胞仪分析细胞凋亡. 结果10 μmol/L罗格列酮组HSC的PPARγmRNA表达明显高于对照组(t=10.87,P＜0.01),PPARγ蛋白表达也明显高于对照组(t=4.627,P＜0.01);10μmol/L罗格列酮组HSC的增殖活性显著低于对照组(t≥5.542,P＜0.01),其α-SMA及Ⅰ型胶原表达明显低于对照组(t≥4.627,P＜0.01),其凋亡发生率显著高于对照组(x2=16.682,P＜0.01). 结论 PPARγ特异配体罗格列酮通过增加PPARγ的表达,能够抑制激活的HSC表达α-SMA及Ⅰ胶原,抑制激活的HSC增殖,诱导激活的HSC凋亡.

大鼠肠黏膜微血管内皮细胞的体外培养

目的培养大鼠肠黏膜微血管内皮细胞,为内皮细胞的体外研究提供实验材料.方法利用机械吹打法和酶消化法分别分离出肠绒毛固有层,采用植块培养法培养原代内皮细胞,依次以局部消化法和差速黏附法进行纯化,细胞鉴定采用第Ⅷ因子相关抗原免疫荧光检测和硝酸银染色.结果成功分离培养出大鼠的肠黏膜微血管内皮细胞,纯化后的细胞可传到18代以上. 结论为肠黏膜微血管内皮细胞的体外培养建立了一种操作简单、成本低廉的方法.

胎儿肺Ⅱ型肺泡细胞发育中相关活性物质的表达及其意义

目的探讨诸细胞因子对肺泡Ⅱ型细胞发育、分化和成熟的调控作用.方法12～35周胎儿肺组织共13例,常规石蜡包埋、切片,用免疫组织化学技术检测FGFR、Ras-p21蛋白、BMP-4、SP-B和TTF-1的表达特征.结果FGFR率先在发育早期近端支气管上皮表达.Ras蛋白于16周在近端和远端的支气管上皮有较弱表达,18周时与FGFR一样达到表达的高峰.随着FGFR表达的增强,BMP-4开始表达.发育后期,这三者均不表达.TTF-1因子自16周起定位于上皮细胞核内,远端支气管的反应总是较近端者强.SP-B蛋白在18周胎儿肺Ⅱ型肺泡细胞内出现,伴随着TTF-1的表达,其反应由呼吸道近端逐渐往远端迁移.发育末期至成肺中,TTF-1和SP-B阳性反应均在肺泡Ⅱ型细胞中稳定表达.结论FGF-10、Ras蛋白和BMP-4对Ⅱ型肺泡细胞的作用,是通过细胞外间质的途径促使Ⅱ型肺泡细胞正常增殖分化和达到形态结构的成熟;而TTF-1因子和SP-B的表达,则为Ⅱ型肺泡细胞在胎肺发育晚期已逐渐达到功能成熟的标志,与胎儿一出生即具有自主呼吸的功能相适应.

诱导型一氧化氮合酶与血红素氧合酶在人肠易激综合征结肠中的表达

目的研究诱导型一氧化氮合酶(iNOS)与血红素氧合酶-l(HO-1)在肠易激综合征(IBS)患者结肠中的表达,探讨气体信使分子一氧化氮(NO)和一氧化碳(CO)在IBS发病机制中的可能作用.方法采用免疫组织化学EnVision和SABC染色法,对符合罗马Ⅱ诊断标准的34例IBS患者肠镜活检标本分别检测结肠黏膜组织中iNOS和HO-1的阳性细胞,并以16名健康者做对照.结果iNOS和HO-1主要表达在结肠黏膜上皮细胞,IBS患者表达强于对照组(P＜0.001),且HO-1和iNOS表达呈正相关(r=0.5744,P=0.0004). 结论 iNOS和HO-1在IBS患者结肠中的表达异常,表明CO和NO在IBS等肠动力性疾病的发病机制中可能起重要作用.

自发永生性转化人胚肺上皮细胞系HLEC的建立及鉴定

目的对源自人胚肺组织原代培养、形态似上皮类型的细胞系--人肺上皮细胞(HLEC)的生物学特性进行鉴定,为相关研究和应用提供模型和依据.方法分别采用相差显微镜下观察、细胞计数、β-半乳糖苷酶染色、免疫荧光细胞化学.人Alu序列PCR扩增、染色体计数、软琼脂集落形成实验和裸鼠致瘤实验对HLEC的形态学特征、生长特性、衰老状态、上皮细胞标志物、来源、细胞遗传学特点和恶性转化等生物学特性进行研究鉴定.结果HLEC角蛋白和上皮型细胞间黏附分子钙黏着素E-cadherin免疫荧光染色阳性,染色体众数在41～44,人Alu序列PCR扩增结果阳性,β-半乳糖苷酶阳性细胞的比例未见随细胞代数的增加而升高,软琼脂和裸鼠体内均不生长,微丝及黏着斑结构正常.结论HLEC细胞具有永生化细胞特征、属相对正常人肺上皮亚二倍体细胞,可用于肺癌癌变机理研究和癌细胞的相对正常对照.

CGRP和NGF对全脑缺血再灌注大鼠脑组织Erk mRNA表达的调节作用

目的检测大鼠脑缺血再灌注后细胞外信号调节蛋白激酶信使RNA(Erk mRNA)的表达,探讨降钙素基因相关肽(CGRP)和神经生长因子(NGF)对脑组织的保护作用. 方法采用颈动脉负压分流法制作大鼠脑缺血再灌注模型,采用原位杂交及显微图像分析方法检测海马及皮质内Erk的表达.结果大鼠缺血再灌注海马及皮质内Erk mRNA较正常组增多(P＜0.05),而注射CGRP或NGF后Erk mRNA明显高于缺血再灌注组(P＜0.01),两者联合应用效果更加显著(P＜0.05).结论CGRP及NGF可能参与缺血神经元Erk mRNA的调节,两者对缺血神经元有协同修复作用.

RAB5A反义RNA对人肺腺癌细胞系侵袭转移影响的体外研究

目的已知RAB5A基因过表达与人非小细胞肺癌恶性表型形成相关,本研究在此基础上进一步探讨该基因过表达在人肺腺癌恶性演进中的作用.方法将RAB5A反义表达载体稳定转染入高浸润人肺腺癌细胞系L18和高转移人肺腺癌细胞系95D中,采用重组基底膜侵袭、与基底膜成分黏附能力测定、趋化运动能力测定、明胶酶分泌与活性检测等体外实验方法观察转染前后细胞生物学特性的改变.结果RAB5A反义RNA稳定转染后L18细胞趋化运动和侵袭基底膜能力显著降低(P＜0.05),明胶酶活性检测发现转染后细胞MMP-2的分泌能力明显减弱;稳定转染后95D细胞趋化运动和侵袭基膜能力显著降低(P＜0.05). 结论体外实验显示,RAB5A基因过表达对肿瘤细胞的趋化运动能力和侵袭重组基底膜能力起重要作用,进一步提示RAB5A基因过表达在人肺腺癌的侵袭转移过程中发挥一定作用.

SARS冠状病毒核壳蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

目的制备严重急性呼吸道综合征(SARS)冠状病毒(CoV)核壳(N)蛋白单克隆抗体,为寻求SARS早期诊断的方法及深入研究SARS疾病提供有力的工具.方法以重组SARS-CoV N蛋白免疫小鼠,采用甲基纤维素半固体培养基法制备单克隆抗体.通过间接酶联免疫分析、间接免疫荧光、免疫双向扩散等方法鉴定抗体的特异性、亲和力、类型及亚类、配对效果等.结果共获得15个阳性克隆,其中10个与天然SARS-CoV呈阳性反应.10株单抗的相对亲和常数在108～109mo1/L-1之间;10株中有1株为IgG2b、1株为IgG3,其余均为IgG1;10株单抗中有8株与12种肺炎相关的病原体无交叉反应,1株与流感病毒A、B,副流感病毒有交叉反应,l株与流感病毒A、B有交叉反应;10株单抗中的5株可形成5种配对,其中两种配对用于检测重组SARS病毒N蛋白,灵敏度可达1 μg/L.结论获得了特异性针对SARS冠状病毒N蛋白的单克隆抗体,并初步建立了检测SARS-CoV N蛋白的酶联双抗体夹心法,为SARS的早期诊断、蛋白质组学的研究奠定了基础.

神经激肽A在大鼠回肠发育中的定位定量分析

目的探讨神经激肽A(NKA)在大鼠回肠发育中的表达及变化.方法应用免疫组织化学PAP法和图像分析系统研究大鼠胚胎13 d至成年回肠中NKA的表达.结果1.在回肠,首先于胚胎17 d的肌间神经丛处出现NKA-IR的表达,随发育相继出现在纵肌层、环肌层、绒毛、小肠腺周、黏膜下层、深肌丛,生后30 d已具备成年组的分布特征;2.定量分析中数据的变化与NKA-IR在回肠各层阳性强弱的变化一致;3.NKA-IR细胞具有典型的肠道内分泌细胞的形态特征和分布特征.结论1.NKA在回肠的发生发育主要在生前1周～生后4周内(但绒毛内神经纤维的密度于60d时才达成年水平);2.NKA在回肠的发生发育有两个关键时期,即生前1周～生后1周和生后1月末;3.NKA-IR细胞可能是肠道内分泌NKA的内分泌细胞;4.NKA对大鼠回肠的发育具有重要的作用,可能与回肠功能的建立密切相关.

cDNA微阵列技术比较胚胎大鼠脑和脊髓神经干细胞的基因差异表达

目的从分子水平探讨脑和脊髓来源的神经干细胞(NSCs)的生物学特性,并鉴定这两种来源的NSCs的分子表达差异.方法应用cDNA微阵列技术对脑和脊髓来源的NSCs的基因表达情况进行检测和比较,在成功分离、培养和鉴定脑和脊髓两种来源的NSCs的基础上,抽提细胞总RNA并纯化、定量,以32P逆转录标记合成cDNA探针.AltasTM cDNA Expression Array(Clontech Co)与探针杂交、洗膜后在磷屏上曝光并扫描成像,以Arrayvision5.1软件分析杂交结果.结果cDNA阵列膜上覆盖的1 176个基因中,绝大部分基因表达无明显差异,但也有14个基因在两种来源的NSCs中的表达有显著差异,其中8个在脑来源的NSCs中表达较高,6个在脊髓来源的NSCs中表达较显著.在两种来源的NSCs都明显表达的基因中,许多分子如P-选择素(P-selectin)、钙黏素(cadherin)、乙酰胆碱受体α、cyclins、某些转录因子和原癌基因等可能在NSCs的自我更新(增殖)、神经球形成和保持不分化状态中起重要作用.结论两种来源的NSCs的生物学特性基本相同,但也存在一定的差异.

铁离子对Caco-2细胞内钙离子转运的影响及钙离子浓度变化与细胞凋亡关系的研究

目的研究细胞外铁离子(Fe3+)浓度变化对钙离子(Caco-2)细胞内Ca2+转运的影响及细胞内钙离子浓度升高与Caco-2细胞凋亡的关系.方法采用激光共聚焦扫描显微镜和流式细胞技术进行观察与检测.结果(1)利用激光共聚焦扫描显微镜(CLSM)观察发现,随着Caco-2细胞外Fe3+浓度的减少(DFO终浓度为100～300μmol/L),Ca2+向细胞内的转运量增加;而随着细胞外Fe3+浓度的增加(FAC终浓度为10～100μmol/L),Ca2+向细胞内的转运呈降低趋势;(2)经A23187和Fluo-3/AM处理后Caco-2细胞的存活率较高,达90%以上(用荧光素二醋酸酯检测);(3)A23187升高Caco-2细胞的胞内Ca2+浓度,呈剂量依赖性;经流式细胞技术(FCM)检测发现胞内Ca2+浓度增加具有诱导Caco-2细胞凋亡的作用.结论Caco-2细胞外Fe3+浓度的减少有促进Ca2+向细胞内转运的作用,但胞外Fe3+浓度增加时有抑制Ca2+向胞内转运的作用;胞内Ca2+浓度增加对Caco-2细胞凋亡具有诱导作用.

小鼠胚胎干细胞α-GT基因打靶的研究

目的在小鼠胚胎干细胞上进行α-1,3半乳糖基转移酶(α-GT)基因打靶.方法利用长距离PCR和套式PCR从C57小鼠基因组DNA中克隆出α-GT基因组DNA片段,构建了针对α-GT基因外显子4的置换型基因打靶载体ploxp-GT,同源长臂(5.0kb),同源短臂(3.97kb),同源序列全长共约9.0kb.将打靶载体酶切线性化并以电穿孔方法转移入小鼠ME ES细胞.结果通过G418和Gancyclovir正负选择出171株ES细胞药物抗性克隆,Southern blot鉴定获得11个α-Gal(+/-)小鼠ES细胞克隆,重组频率为6.4%.结论上述方法能够完成α-GT基因敲除,为进一步完成α-GT基因敲除小鼠奠定了基础.

MCF-7细胞瞬时基因表达转染模式的建立

目的建立一种高效、简便、低毒、价廉的瞬时基因表达细胞转染模式. 方法选择人乳腺癌细胞系MCF-7,采用Polyethylenimine(PEI)作为转染剂,对细胞密度、载体DNA量、PEI氮与DNA磷的比率(PEI-N:DNA-P)以及PEI-DNA混合物与细胞共存的无血清培养时间等对转染效率的影响进行了比较分析.结果转染时的24孔板每孔接种的细胞以2×105为宜,PEI-N:DNA-P的优比率不是固定的,它与转染时DNA的量有关,每孔转染1μgDNA时其优PEI-N:DNA-P比率为33:1左右,而每孔转染4μg DNA时其优PEI-N:DNA-P比率为9:1左右.另外,PEI-DNA混合物与细胞共存的无血清培养时间至少需要3 h,佳时间为5～7 h.结论利用转染剂PEI,控制合适的细胞密度、DNA质量、PEI-N:DNA-P比率和无血清培养的时间,可成为一种高效、简便、低毒、价廉的瞬时基因表达的细胞转染模式.

毁损弓状核后血清中不同成分及一氧化氮和脂质过氧化物的变化

目的探讨下丘脑弓状核在动脉粥样硬化(AS)形成中的影响.方法用谷氨酸单钠毁损弓状核后,检测血清中与AS形成密切相关的总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)、氧化型低密度脂蛋白(OX-LDL)、一氧化氮(NO)和脂质过氧化物(LPO)的变化.结果毁损弓状核后血清中促AS形成的物质如TC、OX-LDL、MDA明显增高,而有抗AS作用的NO则降低,HDL无变化.结论毁损下丘脑弓状核对AS的形成有促进作用,下丘脑可能参与AS的调控.

亚硒酸钠对实验性胃癌形成的作用及对P53和P16表达的影响

目的探讨亚硒酸钠对实验性胃癌形成的作用及对p53和p16表达的影响.方法用N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)(20mg/kg)给大鼠灌胃,每天1次,连续10 d,以诱导大鼠胃癌形成.观察到实验的第43d,用HE染色病理诊断和AB-PAS方法探讨了硒在MNNG诱导Wistar大鼠胃癌形成过程中的作用,用免疫组织化学SP法研究了在此过程中p53和p16蛋白的表达及其变化,并对以上结果进行定性、定位、图像分析和统计学处理.结果饮水中加入2 mg/L和4 mg/L的亚硒酸钠加重胃黏膜的糜烂、出血,促进胃黏膜的肠上皮化生(P＜0.05),在MNNG诱癌过程中发生了浆膜下平滑肌瘤,亚硒酸钠可以增加平滑肌瘤的发生率.免疫组织化学结果显示,p53阳性产物定位在胞核和胞质,主要在胞质;实验对照组、低硒组、高硒组的p53蛋白染色的平均光密度(MA)明显高于正常对照组(P＜0.05,P＜0.01).p16蛋白阳性产物表达在大鼠胃腺和胃上皮细胞核内;实验对照组、低硒组、高硒组的MA值比正常对照组略有升高(P＞0.05).结论在MNNG所致胃癌的过程中,饮水中加入2 mg/L,4 mg/L亚硒酸钠可以促进胃黏膜的糜烂、出血、肠上皮化生,提示亚硒酸钠并不能降低大鼠胃癌的发生率,其机制可能与抑癌基因p53的突变与p16的异常表达有关.

Sertoli细胞诱导大鼠胚胎中脑神经干细胞定向分化的研究

目的研究Sertoli细胞对胚胎中脑神经干细胞的营养及向多巴胺能神经元分化的诱导作用.方法将大鼠Sertoli细胞与胚胎13 d大鼠中脑神经前体细胞体外共培养5、7、10、14 d后,免疫荧光检测神经干细胞标记物Nestin、神经元前体细胞标记物β-Ⅲ tubulin、多巴胺能神经元标记物酪氨酸羟化酶(TH)的表达情况.结果随着共培养时间的延长,神经干细胞中nestin阳性细胞数量逐渐减少,β-Ⅲtubulin阳性细胞数在共培养7 d时较多,TH阳性的神经元在共培养10 d时数量多.而且在各时间段TH阳性细胞数均多于单独培养的神经前体细胞.结论Sertoli细胞能够诱导与其共培养的胚胎中脑神经干细胞定向分化为多巴胺能神经元.

降钙素基因相关肽受体及其活性修饰蛋白mRNAs在大鼠中脑导水管周围灰质的表达

目的观察降钙素基因相关肽(CGRP)、降钙素受体样受体(CRLR)、孤儿受体RDC-1(RDC-1)和受体活性修饰蛋白(RAMPs)等,在正常大鼠中脑导水管周围灰质(PAG)的表达.方法用实时定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,以大鼠β-actin为内参,分别记录CGRP、CRLR、RAMP1、RAMP2、RAMP3和RDC-1 mRNAs PCR产物的CT值,计算每一样品对应其内参的相对含量. 结果大鼠PAG区域,脑组织CGRP、CRLR、RAMP1和RAMP2mRNAs均出现特异性DNA扩增产物.其中CGRP和RAMP1 mRNAs表达水平较高,CRLR mRNA次之,RAMP2 mRNA较弱;而RAMP3和RDC-1未出现特异性DNA扩增产物. 结论大鼠PAG区域脑组织存在CGRP,CRLR,RAMP1和RAMP2mRNAs的特异性表达;它们共同参与生理过程的调节.

小脑下前动脉与前庭蜗神经关系的解剖学观察

目的观察人小脑下前动脉的走行和与前庭蜗神经间的解剖学位置关系.方法对20具甲醛固定的人尸颅进行测量,重点观察了小脑下前动脉及主要分支的走行和与前庭蜗神经间的位置关系.结果小脑下前动脉出现率为100%,回返穿通动脉为100%,小脑下前动脉袢为100%.回返穿通动脉位于面神经、前庭蜗神经之间有32例(80%).前庭蜗神经血管接触率为95%,2支或2支以上血管与前庭蜗神经接触的有20例,占50%.结论实验结果为桥脑小脑角手术提供解剖学资料.

大鼠束缚后脑内Fos蛋白的表达

目的探讨大鼠束缚后对大鼠脑内Fos蛋白表达的影响. 方法将大鼠束缚于小的塑料桶内l、3或6 h,于解束后30 min处死,脑组织进行Fos蛋白免疫组织化学染色.结果Fos阳性神经元表达于1.前脑:扣带回、新皮质(尤其是第3和5层)、外侧隔核、杏仁中央核;2.间脑:下丘脑视前区、下丘脑外侧区、视上核、室旁核、第三脑室室周区、弓状核、丘脑室旁核、外侧膝状体、内侧膝状体;3.脑干:中脑的上丘视性层、中脑导水管周围灰质、下丘的皮质部;脑桥的臂旁外侧核、蓝斑、A5区;延髓的耳蜗核、延髓内脏带(MVZ)等处.Fos表达的时间规律是束缚1 h高,3 h次之,6 h少.结论大鼠被束缚后全脑多处核团的神经元发生不同程度的Fos反应,随着束缚时间的延长,动物产生适应性,Fos表达减少.

成年斑马鱼视神经再生期间顶盖表面纤维层和灰质层的突触形态学研究

目的研究斑马鱼视神经再生过程中神经递质的变化,探讨神经递质和神经再生的关系.方法应用斑马鱼视神经再生模型,通过电镜技术观察顶盖表面纤维和灰质层突触的形态变化.结果视神经损伤后顶盖突触变化过程大致可分4个时期:1.视神经损伤后早期顶盖突触结构的退变;突触密度和突触小泡密度均下降,空型终末密度增大,8 d时突触小泡密度降到低水平;而空型终末密度高.2.损伤后14d再生纤维大量进入顶盖;这一时期大核小泡和小核小泡密度都大量增加,但进入顶盖的纤维还没有或很少形成突触,14 d时突触密度降到低.3.损伤后21 d的特征是突触大量形成和圆形清亮小泡、扁平清亮小泡密度增加.4.再生晚期突触形态和功能恢复及精确化;100 d时突触密度和突触小泡密度都大体恢复正常,但大核小泡密度还很高. 结论兴奋性神经递质和抑制性神经递质可能对早期神经再生的启动和突触的形成起重要作用,而肽类和胺类可能对再生轴突的投射和精确化有重要作用;神经递质促进神经再生有先后顺序.

15例成年国人内耳膜迷路及内耳道MRI大密度投影三维重建图像的解剖学研究

目的研究成年国人内耳膜迷路及内耳道大密度投影(MIP)三维重建图像,观测内耳主要结构磁共振成像(MRI)的正常解剖测量值,为临床耳显微外科及神经外科手术提供解剖学依据.方法选用15名健康志愿者,使用GE-signal 1.5T超导型核磁共振机,环行耳颞部线圈,三维快速自旋回波序列(3D/FSE/T2W1)(水成像)及脂肪抑制技术,对两侧耳部同时进行扫描.原始扫描图像行MIP三维重建,多角度旋转对内耳主要结构进行解剖学观测.所得数据用SPSS10.0软件进行统计学分析. 结果MIP三维重建能满意显示两侧内耳膜迷路及内耳道的解剖结构,其中3个膜半规管、椭圆囊、球囊、蜗管及内耳道呈高信号.测量结果内耳主要结构均无显著的侧别差异.结论临床MIP三维重建能直观、立体地显示内耳膜迷路及内耳道的结构,为成年国人内耳主要结构MRI正常解剖测量值的确立提供了一定的基础资料.

鉴定干细胞及描述已分化细胞类型特征时的常用标志(四)