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大鼠脊髓微血管内皮细胞的分离培养与鉴定
脊髓微血管内皮细胞(spinal cord microvascular endothelial cells,SCMECs)参与构成血脊髓屏障,其功能变化与多种脊髓相关疾病相关.目前分离SCMECs的文献很少.本研究拟基于分离多种原代内皮细胞的经验[1-2],建立分离纯化SCMECs的方法.1 材料与方法1.1 材料1.1.1 试剂:DMEM(高糖)、胎牛血清(FBS)、Ⅱ型胶原蛋白酶、双抗、庆大霉素、谷氨酰胺和l×PBS(北京协和医学院细胞中心);牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)、胶原蛋白酶/分散酶(collagenase/dispase)(Roche公司);嘌呤霉素(Sigma公司);内皮细胞培养基(ECM)(Scien Cell公司);兔抗大鼠yon Willebrand factor(vWF)抗体(SantaCruz公司);抗GFAP抗体和抗α-SMA抗体(Abcam公司);FITC标记和TRITC标记的二抗(北京中衫金桥公司).
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吗啡备用根大鼠脊髓组织神经营养活性物质的分离纯化和生物活性测定
我室以往的研究表明,吗啡作用的部分去传入大鼠脊髓组织提取液中,大于10kD组份具有神经营养活性作用,但尚不知道是哪些分子量的蛋白质具有神经营养活性.为了寻找这些物质,本研究用Sephacryl S-200凝胶层析、高效液相色谱(HPLC)、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和组织培养等技术和方法,进一步分离纯化吗啡备用根大鼠部分去传入的脊髓组织提取液,以期获得某些神经营养活性物质,为吗啡促进脊髓可塑性变化的分子基础提供新资料.
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骨髓基质细胞移植对大鼠全横断性脊髓损伤修复的影响
我们先前探讨了移植的骨髓基质细胞在正常大鼠脊髓内的存活、迁移及分化的情况,结果表明,骨髓基质细胞可在正常脊髓内存活、迁移并向神经元及胶质细胞分化.在此基础上,本研究应用骨髓基质细胞移植,观察其对大鼠全横断性脊髓损伤后结构与功能的影响.制备大鼠脊髓全横断模型,手术9d后移植细胞,移植前收集细胞,DMEM清洗,加入核荧光染料Hoechst 33342(储存浓度0.5g/L)至浓度5mg/L,37℃20min,DMEM清洗.将标记的骨髓基质细胞吸附于明胶海绵后移植入T10脊髓全横断处,对照组单纯移植明胶海绵,空白对照组为单纯脊髓全横断模型.
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成鼠自体鼻腔嗅粘膜组织和嗅粘膜成鞘细胞系修复脊髓锥体束损伤的实验研究
本研究分为两部分,第一部分用Wistar大鼠40只,将取自大鼠左侧鼻中隔后部嗅粘膜组织作为脊髓移植块(1?mm\+2),植入同体大鼠脊髓(T10)后索内的锥体束缺损处(2?mm).
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外周神经损伤大鼠模型中脊髓μ-阿片肽受体数量的减少与机械性触诱发痛有关
韩国科学家近期的一次实验结果表明,周围神经元受到伤害后引起的脊髓μ-阿片肽受体减少与机械性触诱发痛有关.他们通过切断大鼠尾部的支配神经建立实验模型,根据2周后的von Frey诱发反应,将模型大鼠分为两组,即触诱发痛组和非触诱发痛组.试验者通过免疫组化和蛋白免疫印迹等方法发现,触诱发痛组大鼠脊髓μ-阿片肽受体含量的减少量大于非触诱发痛组.
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大鼠脊髓周围应用高浓度蒸馏水顺铂溶液对脊髓的影响
高浓度蒸馏水顺铂溶液对恶性骨肿瘤细胞有较强的杀伤作用,可以用于恶性骨肿瘤手术术野的浸泡冲洗[1-2],以减少肿瘤的复发.由于脊柱肿瘤可能对硬膜浸润侵袭,手术中经常出现硬膜囊的破裂,局部用化疗药物可能对脊髓产生损伤.该实验旨在探讨在大鼠脊髓周围应用高浓度蒸馏水顺铂溶液对脊髓的影响.
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大鼠脊髓去细胞支架化学萃取方法的初步探讨
脊髓损伤是脊柱外科常见疾病,制备脊髓去细胞支架,获得大然的脊髓基质和三维结构,构建组织工程化脊髓,可能有助于改变目前脊髓损伤治疗效果不理想的现状.应用化学萃取的方法可有效制备同种异体外周神经去细胞支架,而且不出现宿主免疫排斥反应[1-2].本研究采用Sondeli等[3]报道的方法萃取大鼠脊髓,观察其形态学变化特点,为制备具有天然脊髓结构的组织工程化脊髓提供理论依据.
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急性心肌缺血大鼠背根神经节孤啡肽水平的变化
孤啡肽(OFQ)是阿片受体家族中"孤儿受体"的内源性配体,其在脊髓水平痛觉调制过程中起重要作用.外周炎症或神经痛可引起脊髓背根神经节(DRG)细胞OFQ表达上调[1].内脏痛时脊髓DRG细胞OFQ表达情况有待于进一步研究.本实验拟评价急性心肌缺血大鼠脊髓DRG细胞OFQ水平的变化.
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鞘内注射盐酸奈福泮对切口痛大鼠脊髓c-fos表达的影响
奈福泮作为一种新型的非麻醉性镇痛药,现在已经被广泛用于临床,其不具有非甾体抗炎药的特性,亦非阿片受体激动剂,其镇痛作用不被阿片受体拮抗药纳洛酮拈抗,也不与吗啡产生耐药性,本身无阿片类药物的依赖性,也无呼吸抑制作用和中枢抑制作用,本实验就是为了探讨在大鼠切口痛模型中鞘内注射奈福泮对脊髓背角c-fos表达的影响.
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鞘内注射可乐定对甲醛致痛大鼠脊髓c-fos表达的影响
本研究通过对甲醛致痛大鼠蛛网膜下腔给予可乐定,观察大鼠伤害性行为学反应、脊髓背角Fos蛋白表达的改变,旨在探讨可乐定在甲醛致痛模型中的作用及可能的作用机制.
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一氧化氮参与大鼠脊髓中伤害性信号的传递和对此传递的下行抑制:免疫细胞化学研究
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脊髓损伤后蛋白激酶C在脊髓前角神经元的表达
蛋白激酶C(PKC)可能通过多种途径参与脑损伤后继发性损伤,PKC在大鼠脊髓中存在多种PKC同工酶,但PKC在损伤脊髓组织中分布及损伤后变化规律仍不清楚,本实验应用免疫组化定位及图像分析,以明确大鼠SCI后不同时相点PKC的分布变化规律,为进一步研究PKC与SCI的关系提供依据.
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不同功率氦氖激光照射与大鼠脊髓降钙素基因相关肽表达的关系
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左旋咪唑对实验性过敏性脑脊髓炎大鼠脊髓ICAM-1、iNOS及IFNγ mRNA表达的影响
左旋咪唑(levamisole,LMS)为国家和WHO基本药物,长期以来被认为是安全低毒的,但近十年来国内外均发现,LMS可导致一种危害严重的以中枢炎性脱髓鞘为主要特征的白质脑病[1]。
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不同方法制备大鼠脊髓新鲜组织片及免疫组织化学实验的比较
在免疫组织化学的实验中,有一些抗体要求必须在新鲜的组织上进行实验才能有较好的表达.本实验探讨了不同方法制备大鼠脊髓新鲜组织片,并以NMDA-NR2A和NR2B多克隆抗体(一抗)作免疫组织化学实验,对它们的组织形态和表达结果等进行比较,兹介绍如下.
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大鼠脊髓星形胶质细胞培养方法
我们参考国内外有关文献[1],取新生大鼠脊髓进行体外培养星形胶质细胞,并进行传代,现报道如下:1 实验材料1.1 取材新生Wistar大鼠,于其生后48小时颈动脉放血处死,剖开背部的椎骨,将其内的脊髓取出放于D-Hank's液中,剔除脊髓的外膜,将脊髓拉碎备用.
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神经病理性痛对大鼠脊髓水平GABAB受体亚型蛋白表达的影响
大量的研究表明,神经病理性痛等慢性疼痛状态可导致脊髓背角一系列神经递质和神经递质受体系统发生改变.GABAB受体的改变能影响机体GABA能系统的功能,从而影响痛觉信息在脊髓背角的整合、传递和调控.GABAB受体以其两个亚型(GABAB1、GABAB2)的异二聚体形式存在并发挥功能[1,2],但新研究显示GABAB2单独也可以构成功能性的受体[3].GABAB1a和GABAB1b是GABAB1主要的两个剪切异构体.对GABAB受体各亚型在神经病理性痛中的变化进行研究,将有助于更好地了解和阐明GABAB受体和GABA转运体在神经病理性痛发生、发展中的功能,以期发现更具有针对性的疼痛治疗的靶点.
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大鼠蛛网膜下腔置管方法的研究进展
在研究药物对脊髓的镇痛作用、疼痛机制及相关药物对脊神经影响的实验中,常采用经大鼠脊髓蛛网膜下腔给药的方法.如需鞘内多次给药,只能蛛网膜下腔置管注药或反复蛛网膜下腔穿刺给药.任占杰等[1]通过比较麻醉医师进行大鼠经腰椎蛛网膜下腔长期置管和反复蛛网膜下腔穿刺的难易程度及反复7次给药的可行性发现,置管组操作时间(15.0±6.8)min较穿刺组(80.0±20,8)min短,且置管后反复给药对大鼠的应激伤害远远低于穿刺组,同时7d内热缩足潜伏期(thermal withdrawal latency,TWL)的差异则无统计学意义,表明蛛网膜下腔置管注药是一个比较合理的实验方法.本文通过搜索CBM和PubMed上相关文献,对大鼠蛛网膜下腔置管方法及置管材料的研究进展进行综述.
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壳聚糖神经干细胞复合物修复大鼠完全性脊髓损伤的组织学观察
目的:探讨壳聚糖与神经干细胞复合物修复成年SD大鼠完全性脊髓损伤的可行性.方法:制作大鼠脊髓完全缺损模型,在形成的缺损中植入壳聚糖与神经干细胞复合物(实验组),或只植入壳聚糖(对照组),或不加任何材料(空白组),术后2、4、8周灌注取材,观察结果.结果:壳聚糖与神经干细胞复合物在植入SD大鼠脊髓完全缺损模型后,能桥接缺损两端脊髓;其内的神经干细胞能存活、迁移并分化成多种形态的神经组织细胞,并诱导神经轴突向复合材料内生长.结论:壳聚糖与神经干细胞复合物有可能桥接并修复大鼠脊髓完全缺损性损伤.
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鞘内注射右旋美托咪啶对吗啡戒断大鼠脊髓ERK表达的影响
阿片类药物广泛用于治疗各种急慢性疼痛,长时间使用停药将发生戒断综合征.脊髓是介导吗啡依赖戒断反应的一个重要部位,ERK信号通路的激活在吗啡依赖及戒断过程中发挥重要作用[1].右旋美托咪啶(DEX)具有镇静、镇痛及抗焦虑等作用,可抑制脊髓感受伤害性反应[2].