微型血管吻合夹与针线吻合方法的比较研究

目的为显微外科探索更理想的血管吻合方法.方法选用新西兰兔20只,以颈动脉为吻合血管,左侧用微型吻合夹吻合,右侧用传统针线吻合,对比研究两种吻合方法及其吻合口术后第1天、第14天手术显微镜、光镜及电子显微镜下的组织变化.结果针线吻合法用时平均15分钟,吻合夹法用时为2～5分钟;两组吻合方法的血流通畅率相同;吻合口内皮细胞生长速度相似,但是,吻合夹不损伤血管内膜,管腔内无异物.结论微型血管吻合夹方法操作简便,可明显节省吻合时间,并减少血栓形成因素,吻合效果可靠.

特殊毁损性创面的修复与重建

目的报道特殊毁损性创面的修复与重建.方法 1993年1月～2000年12月收治147例患者的毁损性创面175处,其中电烧伤96例,热压伤18例,一氧化碳中毒昏迷、癫痫发作等原因烧伤18例,药物渗漏、创面感染致深部组织坏死6例,放射性烧伤3例,化学烧伤2例,爆炸伤2例,冻伤2例.175处毁损性创面应用局部皮瓣,前臂逆行岛状皮瓣,胸大肌皮瓣,胸三角皮瓣,背阔肌皮瓣,腓肠肌肌皮瓣,胫前、胫后动脉岛状皮瓣等修复.创面缺损范围1 cm×1 cm～20 cm×28 cm,皮瓣大22 cm×30 cm,小1.5 cm×2.0 cm,同时行去细胞异体肌腱移植,修复缺损肌腱7例.结果 169个皮瓣全部成活,创面Ⅰ期愈合;6个皮瓣远端小部分坏死,经切除坏死痂皮植皮愈合;7例去细胞异体肌腱移植全部成活.28例经4个月～8年随访,功能、外形均满意.结论根据毁损性创面部位、范围和程度,选择不同类型的皮瓣进行修复和去细胞异体肌腱移植,是恢复功能、改善患者生活质量的理想方法.

膨体聚四氟乙烯补片修复胆管缺损的实验研究

目的探讨膨体聚四氟乙烯(ePTFE)修复胆管缺损的可能性.方法 36条重庆地区成年犬,通过切除部分胆管壁(A组,14条)、整段切除2～4 cm胆总管(B组,10条)和完全结扎胆总管(C组,5条;D组,7条)的方式建立胆管损伤模型,分别采用ePTFE补片修补胆管缺损,管形材料替代胆管,间置材料在胆囊、十二指肠或空肠吻合修复胆管.观察动物在手术前后的活动状况,结合胆道造影了解胆管的通畅情况,并在术后3天,2、4、8、12及52周切取胆管修复处的组织,观察胆管组织的变化,不同手术方式对肝脏形态结构的影响.结果 A组采用ePTFE补片修补胆管,胆管上皮能覆盖材料表面,通畅率达75%(9/ 12),胆汁引流通畅,肝脏无损害;B组通畅率为40%(4/10),伴有不同程度的肝脏形态结构改变;C组和D组的材料均被排除,形成胆囊十二指肠或胆囊空肠瘘.结论 ePTFE补片具有操作简便、通畅率高的特点,可作为修补胆管缺损的材料.

跟腱瘢痕瓣的Z形设计和临床应用

目的设计Z形跟腱瘢痕瓣用于烧伤或外伤后的跟腱瘢痕挛缩畸形的修复.方法根据跟腱挛缩和足内翻的程度,设计Z形瓣切开的中轴位于跟腱部位的纵行挛缩线上,长8～12 cm,侧臂长度5～ 8 cm,夹角各为60°.形成的两跟腱瘢痕瓣相互沿中轴滑动以达到松解和延长跟腱.1994年3月～1999年8月临床应用7例,烧伤6例,外伤1例.结果 7例均能达到踝关节功能位矫正,无一例发生瘢痕瓣缺血和坏死.结论 Z形跟腱瘢痕瓣的血供丰富,挛缩的跟腱易于松解,手术安全可靠.

电针促进周围神经功能康复的实验研究

目的探讨电针对受损伤的周围神经功能恢复的影响.方法 Wistar大鼠60只切断左侧坐骨神经并缝合,随机分成对照组与实验组.实验组每天穴位电针20分钟.分别于术后2、4及8周动态观察神经电生理、肌力及坐骨神经功能指数的变化.对照组不作任何处理.结果实验组神经肌肉动作电位(MAP)、运动神经传导速度(MNCV)均优于对照组(P＜0.01);腓肠肌收缩力明显增强(P＜0.05);坐骨神经功能指数明显升高(P＜0.05).结论穴位电针能促进受损周围神经的功能康复.

体外刺激对培养成纤维细胞功能与表达c-fos基因的影响

目的研究采用碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)刺激对体外培养成纤维细胞形态、功能以及表达原癌基因c-fos的影响,探讨成纤维细胞生长因子与原癌基因之间在调控创面愈合中可能的网络机制.方法将处于对数生长期的乳鼠成纤维细胞分成bFGF刺激组和对照组,在分别采用bFGF和对照物刺激后继续培养,于刺激后1小时和3、5及7天采集细胞用于形态学和细胞活力检测.同时用SP法对原位培养法和甩片法收集的成纤维细胞检测c-fos基因表达.结果培养的成纤维细胞经bFGF刺激后其形态较对照明显增大,MTT检测活性明显增高,在刺激后表达c-fos基因显著增加,其中以刺激后1小时为明显.结论 bFGF刺激可以使培养的成纤维细胞形态与功能发生明显改变,使c-fos基因表达显著增加.结合既往研究表明,c-fos不仅可以直接上调bFGF基因表达,同时bFGF本身也可以诱导c-fos基因表达,表明二者之间可能存在相互作用的网络机制.其可能的调控途径涉及ras以及酪氨酸激酶等.

带血管蒂骨膜瓣移位修复肱骨骨折及骨不连

目的探讨带血管蒂的肱骨远端骨膜瓣移位修复肱骨难愈性骨折及骨不连.方法 1995年以来应用该骨膜瓣修复肱骨难愈性骨折及骨不连23例,其中粉碎性、多段骨折等难愈合性骨折12例,骨不连11例,合并桡神经损伤7例.手术方式为开放复位,内或外固定及应用带血管蒂骨膜瓣移位覆盖骨断端.结果术后经6～24个月随访,除2例骨不连患者对关节活动不满意外,其余病例均获得良好的效果,骨膜瓣成骨好.难愈性骨折愈合时间为2～3个月,骨不连愈合时间为3～5个月,桡神经功能均恢复.结论桡侧副血管蒂肱骨远端骨膜瓣对肱骨骨折及骨不连具有很好的修复作用.

回收式自体输血在脊柱前路稳定手术中的应用

目的讨论通过回收式自体输血在脊柱前路减压内固定手术中的应用,提高手术的安全性,减少用血量.方法在19例脊柱胸腰段骨折患者进行前路减压髂骨植骨椎体钉内固定时,采用回收式自体输血(洗涤式),减少异体血使用.同时回顾20例同组手术医师同种手术患者的输血量做对照.结果 19例(进口设备16例,国产设备3例)平均回输浓聚红细胞536 ml,其中2例补充少量异体血.对照组输异体血947 ml,明显多于回收式自体输血者(P＜0.05).结论在行胸腰段脊柱前路稳定手术中,采用回收式自体输血,可以明显减少输血量,有利于提高手术安全性,降低医疗费用.尤其是利用国产设备进行自体回收输血,成本低廉,操作简便,宜于推广.

安信医用抗菌贴加速慢性难愈合创面愈合

目的观察安信医用抗菌贴对慢性难愈合创面(溃疡)的促修复作用并探讨其修复机制.方法 34例共44个慢性难愈合创面,其中创伤性溃疡15例(23个创面),压迫性溃疡9例(11个创面),糖尿病溃疡5例,放射性溃疡5例.所有创面经清创后用安信医用抗菌贴外敷于创面,每2～3天更换一次.结果所有经安信医用抗菌贴治疗的创面都明显愈合,其中2周内愈合26个创面,3周内愈合7个创面,4周内愈合9个创面,超过4周愈合2个创面.4周内总愈合率为95.5%.结论安信医用抗菌贴可以显著地加速慢性难愈合创面的愈合,其机制为广谱速效杀菌,改善局部微循环,有效激活并促进组织细胞生长.

组织工程血管构建的研究进展

目的探讨组织工程化血管的构建模式.方法广泛查阅近期有关组织工程化血管的文献,归纳目前用的血管支架材料,评价已报告的工程化血管构建模式,比较已建成组织工程血管的生物学性能.结果佳的组织工程血管构建模式尚未确立,但近两年组织工程血管构建有重大创新.结论构建组织工程血管必须参照天然血管的形成条件、结构、性质及功能.

鼠肌肉转录调节因子MyoD基因真核表达载体的构建

目的构建肌肉转录调节因子MyoD基因真核表达载体,为深入研究MyoD在肌肉修复中的分子调节机制,探讨其在肌肉损伤方面的生物学行为,为临床应用提供物质基础.方法含MyoD cDNA的质粒PEMMBC2 β5于大肠杆菌E.Coli DH5a内扩增;提取及纯化PEMMBC2 β5质粒;经DNA序列分析含MyoD cDNA;限制性酶切MyoD cDNA片段,连接酶连接到真核表达质粒pcDNA3-neo内,克隆出真核表达载体 pcDNA3/MyoD.结果提取及纯化的PEMMBC2 β5质粒含有大小正确的MyoD cDNA碱基片段,其碱基序列为编码目的基因的正确序列,凝胶电泳结果证明已将此片段正确地克隆到pcDNA3/MyoD内.结论成功的构建了MyoD基因的真核表达质粒 pcDNA3/MyoD.

可注射性生物材料构建同种异体工程化软骨

目的研究在有免疫力的动物体内应用生物材料聚氧化乙烯丙烯凝胶构建同种异体工程化软骨的可行性.方法无菌条件下取新生兔关节软骨,经II型胶原酶消化8～12小时后,将软骨细胞和生物材料复合成细胞浓度为5×107/ml的复合物并移植于兔皮下,并以边注射,边后退的方法做条索状注射,以了解可否形成预定棒状软骨.同时分别设立单独注射细胞和材料两个对照组.分别于4、6、8及12周取材行大体观察,石蜡切片HE染色、Safranin O染色、Masson's三色染色,了解软骨形成情况.结果 2周后即可于皮下触及新生结节,4周后取材即有基质分泌及胶原形成.于6周左右软骨接近成熟,生物材料基本吸收.8周、12周软骨基本接近正常软骨.同时可以见到以注射的方式塑形而成的棒状软骨.实验中未见明显的免疫排斥反应.而对照组未见软骨形成.结论生物材料聚氧化乙烯丙烯凝胶具有良好的生物相容性、可降解性、无细胞毒,是较理想的组织工程生物材料;应用该实验方法可在有免疫力的动物体内形成同种异体工程化软骨,并可以通过注射的方法进行简单的塑形.

生长板损伤修复的研究进展

目的综述生长板损伤修复研究过程及其近期进展.方法广泛查阅近期有关生长板损伤修复研究文献,着重阐述对生长板损伤修复的认识发展,比较几种主要修复方法.结果生长板损伤修复是小儿矫形外科实验研究和临床治疗面临的一大难题.游离生长板和软骨移植,因缺乏血供而应用困难,血管化生长板移植解决了循环问题,但两种方法都涉及供体来源受限和免疫反应.非软骨类组织和材料只能阻止小面积生长板缺损内骨桥形成,无再生修复能力.组织工程软骨移植可能是生长板损伤修复的佳选择.结论考虑到移植物来源、修复效果及不良反应等因素,组织工程软骨修复生长板损伤值得进一步研究.

原代人胚成肌细胞体外培养增殖及分化特性

目的分离培养人胚胎成肌细胞,观察原代细胞体外增殖与分化特性.方法选择健康妇女捐赠的胎儿骨骼肌标本,参照Blau等的胰蛋白酶与胶原酶混合、多步消化法分离成肌细胞.经差速贴壁法纯化后,在含20%胎牛血清的生长培养基中培养,以生长曲线评价其增殖情况;含5%胎牛血清的融合培养基中培养,以磷酸肌酸激酶-MM型合成量及成肌细胞融合率评价其分化能力.通过光镜、透射电镜、免疫细胞化学方法(小鼠抗人肌球蛋白单克隆抗体)鉴定所得细胞.结果电镜下可见所得细胞含大量游离核糖体,肌球蛋白免疫细胞化学染色强阳性,能合成磷酸肌酸激酶,能融合形成肌小管,证明其为骨骼肌成肌细胞.在生长培养基中原代细胞倍增时间为4.8天,在融合培养基作用下,肌小管融合率及磷酸肌酸激酶合成量明显增加.结论多步酶消化法与差速贴壁法能获得足量、纯净成肌细胞,所得细胞增殖能力强,能表达骨骼肌特异的收缩蛋白;融合培养基能促进其体外分化.

人体肌卫星细胞培养的实验研究

目的了解人体肌卫星细胞在体外培养条件下的生物学特性.方法标本取自创伤病例的四肢骨骼肌,消化、提纯后,在生长培养液内培养10天,细胞生长至汇合后分化培养5天.倒置显微镜观察,绘制细胞生长曲线,计算细胞融合率,结蛋白免疫细胞化学方法(ABC)法鉴定肌卫星细胞.结果细胞消化、提纯后纯度为90%.在生长培养液内肌卫星细胞分裂增生;在分化培养条件下,汇合状态的肌卫星细胞发生融合,形成肌管,分化培养24小时细胞融合率开始明显增加,分化72小时融合率达到高峰.结论人体肌卫星细胞在适当的培养条件下可以增生、分化,形成肌纤维.结蛋白免疫细胞化学染色是早期鉴定肌卫星细胞的有效方法.

改进高分子材料细胞亲和性的研究--聚(D,L-乳酸)的等离子体处理改性

目的研究氨等离子体处理对聚(D,L-乳酸)(PDLLA)膜表面改性的效果.方法用无水氨在不同条件(射频放电功率、放电时间和反应室气体压力)下对聚(D,L-乳酸)膜进行等离子体处理,放电后再抽真空10分钟,依次关闭氨的进入并充入大气,得到不同表面改性程度的10组PDLLA改性膜.分别测定改性膜和未经离子体处理对照膜的表面接触角,计算表面自由能,并将试膜用于鼠3T3成纤维细胞的培养.结果通过等离子体处理的改性膜亲水性得到改善,表面自由能得到提高.对鼠3T3成纤维细胞的培养结果表明,用氨等离子体处理的聚(D,L-乳酸)改性膜能有效地促进3T3细胞在膜表面的粘附与生长;经过4天的细胞培养实验表明,改性膜上细胞的数量几乎是对照膜的两倍.结论氨等离子体处理能有效提高聚乳酸材料的细胞亲和性.

组织工程中药物控制释放技术的应用研究

目的研究应用药物控制释放技术,在组织工程中实现对生长因子的活性保护和控制释放.方法应用药物控制释放技术,采用生物降解高分子对药物进行包埋或微包囊.结果用脂肪族聚内酯为各类药物,包括生物活性物质的药物载体,通过调节脂肪族聚内酯的分子结构和控制释放方法,在采用聚丙交酯为神经导管和对生长因子实行包埋后,成功地实现了对大鼠坐骨神经5、10、15和20 mm缺损的修复.结论可利用脂肪族聚内酯作为药物载体,保护各类生长因子的生物活性,并实现对它们的持续释放.

壳聚糖-明胶网络/羟基磷灰石复合材料支架的研究--制备及形貌

目的制备壳聚糖-明胶网络/羟基磷灰石(CS-Gel/HA)复合材料多孔支架,并考察组分和制备条件对其微观形貌的影响.方法采用相分离法制备CS-Gel/HA多孔支架;利用扫描电镜观察微观形貌;液体替代法测孔隙率.结果采用相分离法,通过控制组分配比和预冷冻温度可制备不同密度和孔隙率的CS-Gel/HA多孔支架.结论 CS-Gel/HA复合材料三维支架有望成为培养自体成骨细胞的支架材料.

膝上软组织缺损的修复

1996年1月～1999年2月,我科采用带蒂组织瓣游离移植修复膝上软组织缺损9例,疗效较满意,报告如下.1 临床资料1.1 一般资料本组9例,男6例,女3例.年龄17～56岁.左侧5例,右侧4例.辗压伤5例,砸伤3例,爆炸伤1例.9例均有股骨下段或股骨髁间开放性粉碎性骨折.9例膝上软组织缺损范围大10 cm×14 cm,小5 cm×8 cm.

《中华神经外科疾病研究杂志》创刊