中国医药生物技术杂志
Chinese Medicinal Biotechnology 중국의약생물기술
- 主管单位： 中华人民共和国卫生部
- 主办单位： 中国医药生物技术协会
- 影响因子： 0.36
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1673-713X
- 国内刊号： 11-5512/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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羟胺三唑与小剂量地塞米松合用对A549肺癌移植瘤生长抑制作用的研究
目的 观察羟胺三唑(CAI)对A549肺癌移植瘤生长及肿瘤环境中肿瘤坏死因子-a含量和血管生成的影响,研究小剂量地塞米松(DEX)是否能通过降低肿瘤环境中肿瘤坏死因子-a含量和抑制血管生成增强CAI对移植瘤生长的抑制作用.方法 向裸鼠腋下接种A549肺癌细胞,建立A549肺癌移植瘤模型,接种第2天随机分5组,并开始给药,分别是PEG400溶剂对照组(每天一次灌胃给药,0.1 m1/10 g体重)、CAI组(每天一次灌胃给药,20 mg/kg)、DEX组(每周两次背部皮下注射给药,1 mg/kg)、CAI与DEX合用组(CAI,每天一次灌胃给药,20 mg/kg;DEX,每周两次背部皮下注射给药,1 mg/kg)及英夫利昔单抗组(每周两次腹腔注射给药,10 mg/kg).40 d后剥离瘤组织,拍照并称重:将部分新鲜肿瘤组织速冻后制作冰冻切片,进行CD31荧光染色:另一部分新鲜瘤组织制备匀浆后用ELISA方法对其TNF-a含量进行检测.结果 CAI,DEX和TNF-a抗体(英夫利昔单抗)对移植瘤生长均有抑制作用,而CAI与DEX的联合应用抑癌作用强,PEG、CAI、DEX、COM和TAB组瘤重分别为(0.23±0.04)、(0.21±0.02)、(0.17±0.04)、(0.12±0.03)和(0.17±0.04)g.CD31血管染色显示,CAI和DEX均能减少肿瘤组织内的血管数目,两者合用在极大程度上抑制了血管的生成;CAI能够降低肿瘤组织内TNF-a含量,与DEX合用使TNF-a含量降至更低水平,PEG、CAI、DEX、COM和TAB组肿瘤组织匀浆中TNF-a的含量分别为(933.9±286.8)、(636.1±157.4)、(684.9±170.1)、(364.7±50.1)和(606.8±190.3)pg/mg蛋白.结论 CAI不仅能够直接影响肿瘤细胞的增殖和凋亡,还能通过调控肿瘤环境中的TNF-a抑制血管的生成,从而减缓肿瘤的生长,这可能是CAI发挥抗肿瘤作用一个新的机制.小剂量DEX与CAI联合用药对移植瘤生长的抑制作用明显增强,优化了CAI的抗肿瘤作用,可能成为一种新的联合用药方案.
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不同来源成体干细胞BMP-2基因转染并微囊化后细胞活性及分泌量观察
目的 比较不同来源成体干细胞BMP-2基因转染并微囊化后的存活情况,并检测分泌至微囊外的BMP-2蛋白数量.方法 从大鼠的骨髓、脂肪和滑膜组织内分离培养不同类型的成体干细胞:骨髓间充质干细胞(BMSCs)、脂肪干细胞(ADSCs)和滑膜干细胞(SMSCS).利用高压静电装置制备海藻酸钠一聚赖氨酸一海藻酸钠(APA)微囊,在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白(GFP)标记细胞在微囊内的存活情况.利用含有BMP-2基因的重组腺病毒感染不同来源的成体干细胞后微囊化包裹,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测分泌到微囊外的BMP-2蛋白量.结果 包裹4周后荧光显微镜观察发现,BMSCs、ADSCs和SMSCs可在微囊内长期存活.ELISA检测发现,3种转基因细胞在微囊化后都可以持续分泌BMP-2蛋白,其中BMSCs分泌多,在第2、3、4周和其他2种细胞相比有明显差异(P < 0.01).结论 3种来源的成体干细胞都可以作为BMP-2基因给药促进骨再生研究的候选细胞,其中以骨髓来源的间充质干细胞为首选.
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抗DRS单抗CTB006联合5-FU对结直肠癌细胞系作用研究
目的 探讨肿瘤坏死因子相关诱导配体受体(DR5)激动型单抗CTB006对人结直肠癌细胞系SW1116、SW480、SW620、Colo205的影响.方法 采用ATPlite法检测CTB006组、5-FU组及两药物合用组作用后的细胞存活率,流式细胞仪技术检测细胞系表面DR5的表达水平,研究两者之间的关系.结果 CTB006和5-FU对四种结直肠癌细胞增殖均表现出抑制作用.CTB006对早期细胞SW 1116增殖抑制效果欠佳,对中晚期细胞SW480、SW620、Colo205有着良好的增殖抑制作用(P < 0.05).当联合使用5-FU后,对后三者有明显的协同作用.流式细胞仪检测DR5表达水平,SW 1116细胞表达(47.01±30.4)%,SW480细胞表达(76.11±15.1)%,SW620细胞表达(86.77±9.3)%,Colo205细胞表达(93.55±7.9)%.结论 CTB006对中晚期结直肠癌杀伤作用较强,联用5-FU具有显著的协同作用.
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人参SQE基因干扰载体的构建及转化
目的 探讨SQE基因对人参皂苷合成的影响.方法 根据SQE基因保守区序列,分别设计合成其正反义片段引物行RT PCR扩增,扩增产物分别与pMD 18-T质粒连接后转化Ecoli DH5a,获得的pMD18-TSQE-S、pMD 18-TSQE-A重组质粒经双酶切后,将正反义片段与质粒pMHZ 112反向连接,转化E.coli DH5a,构建SQE基因RNAj双元表达载体pMHZ112-SQE.电击法将鉴定正确的重组质粒pMHZ112-SQE转化农杆菌GV3101感受态细胞,再利用农杆菌介导法转化人参愈伤组织,提取抗性人参愈伤组织细胞基因组DNA,进行PCR检测并计算抗性愈伤转化率;同时提取人参皂苷,采用HPLC方法检测抗性人参愈伤组织的皂苷含量.结果 结果显示总RNA较完整无降解,质量较好;RTPCR扩增产物正反义片段大小与预期一致;重组质粒pMD18-TSQE-S、pMD18-TSQE-A和pMHZ112-SQE分别经双酶切进行测序鉴定,结果表明目的 基因已插入重组质粒且连接方向正确.人参愈伤组织细胞基因组DNA的PCR检测结果显示1个菌落经2对引物扩增结果均呈阳性,证明构建的pMHZ112-SQE重组质粒已成功整合入植物基因组中,其抗性愈伤转化率为1%.转化pMHZ112-SQE重组质粒后,人参抗性愈伤组织中单体皂苷Rgl、Re、Rc含量明显下降,Rbl略有升高,实验组与对照组(转化空质粒)间Rgl、Re、Rbl、Rc的含量差异显著(均P < 0.05);而2组均未检测出Rb2和Rd.结论 成功构建了SQE基因RNAi双元表达载体,通过转化人参愈伤组织抑制SQE基因的表达,可以调控人参皂苷含量发生相应的改变.
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两种具长效性重组人血清白蛋白/干扰素α融合蛋白表达工程菌的构建及融合蛋白的理化特性研究
目的 对两种长效干扰素a融合蛋白原料药的理化特性多项指标开展分析和进行比较.方法 利用基因工程技术分别构建了可高效表达重组人血清白蛋白/干扰素a2a融合蛋白(rHSA/IFNa2a)或重组人血清白蛋白/干扰素a2b融合蛋白(rHSA/IFNa2b)的毕赤酵母工程菌.融合蛋白直接分泌到组分简单的无机盐培养基中,并经特别建立的高效分离纯化工艺进行纯化,随后对两个融合蛋白进行详尽的理化特性分析.结果 获得的融合蛋白纯度在98%以上;N端前15个氨基酸序列与理论序列相同;质谱分子量分别为85640.8 D和85781.5 D;圆二色光谱分析比对蛋白空间构象未变:等电点PI约在5.1左右;为非糖基化蛋白;紫外光谱呈典型蛋白质光谱;自由疏基含量测定值为1.4;肽图批次间一致;肽质量指纹图谱可匹配分别达83%和82%;对制备的2个融合蛋白原料药中的细菌内毒素、宿主蛋白质、外源性DNA、甲醇和甘油的残留量检测符合标准要求;融合蛋白的免疫学鉴别为阳性;体外细胞生物比活性约为2.5×10~5IU/mg,并且2个融合蛋白生物比活性测定值无不同,由此,获得了符合临床用药标准的原料药.结论 研究所获得的结果可以作为指导<注射用重组人血清白蛋白/干扰素a2a融合蛋白>和<注射用重组人血清白蛋白了干扰素a2b融合蛋白>2个新药的原料药生产质量标准的建立和检定方法的确定.
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微生物来源的Aurora-B激酶抑制剂的分离、结构鉴定和抗肿瘤活性研究
目的 从微生物代谢产物中分离和纯化Aurora-B激酶抑制剂并检测其抗肿瘤活性.方法 以野生型酵母菌Y300和ipll-321温度敏感型突变株为模式菌跟踪活性组分;从阳性放线菌I07A-01038发酵产物中分离纯化活性化合物并进行结构鉴定:体外酶学实验验证阳性化合物对Aurora-B激酶的抑制活性;MTT法检测阳性化合物对肿瘤细胞增殖的抑制活性;AnnexinVFITC/Pl双染法检测活性化合物对肿瘤细胞早期凋亡的诱导作用.结果 从阳性放线菌I07A-01038发酵产物中得到活性化合物酒渣碱甲酯(flazin methyl ester),酒渣碱甲酯对ipll-321突变株具有特异性抑制作用,其在野生型酵母菌株Y300和突变株ipl1-321的ICso分别为48 jLmol/L和24 pmol/L:体外酶学实验证实其对Aurora-B激酶具有抑制作用,其IC_50为10 pmol/L(ATP = 50 pmol/L):酒渣碱甲酯对HepG2、A549、Hela肿瘤细胞均具有杀伤活性,IC_50分别为13、11和10 μmol/L.并能够诱导Hela细胞发生早期凋亡.结论 得到一个微生物来源的具有抗肿瘤活性的Aurora-B激酶抑制剂-酒渣碱甲酯.
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心力衰竭分子治疗机制探讨
过去的20余年中,由于人们对心力衰竭(心衰)发病的细胞分子机制的理解,并相应制订出了有效的治疗方法,从而使心衰逐渐转变成一种慢性病.但是,心衰尤其是慢性心衰仍然是心源性死亡的主要原因.随着全球老龄化进程,心衰患病率持续增长,从而耗费了巨大的人力和物力.近年来,随着对心衰进程中神经体液调节、心肌能量代谢、细胞钙循环和心肌细胞凋亡等内在机制认识的深入,针对心衰病程各环节中所涉及的分子治疗研究相继展开.
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凝固酶阴性葡萄球菌生物膜形成与检测的研究进展
凝固酶阴性葡萄球菌(coagulase-negative staphylococci,CONS)是人体皮肤和黏膜上定居的正常菌群之一,因其几乎不产生对人体有毒性的酶和毒素,故一般认为是非致病菌.20世纪70年代以前,关于CoNS引起的感染仅有个别报道,20世纪80年代后,由于革兰阳性菌的抗生素广泛使用,以及介入性治疗、留置导管和组织器官移植等治疗手段的应用,CoNS成为医院感染的重要机会致病菌之一,并出现多重耐药株.本文就CoNS生物膜的形成与检测进展进行了综述.
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白藜芦醇新剂型研究进展
白藜芦醇(resveratrol)为非黄酮类多酚化合物,具有抗肿瘤、抗心脑血管疾病、抗突变、抗氧化、抗菌消炎、保护肝脏、诱导细胞凋亡、雌激素样作用及降低血糖等多种生物活性~[1-3].白藜芦醇自然资源丰富,加之具有较高的安全性,故在医药、食品、化妆品等行业中有着广阔的应用前景.基于白藜芦醇难溶于水,口服吸收较差,生物利用度较低~[4].如何利用现代药剂学手段提高溶解度和生物利用度已成为一个备受关注的问题.本文主要针对白藜芦醇新剂型的研究
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肝癌治疗新药临床研究进展
90%的肝癌为肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC),是全球除胃癌和食管癌外的第3种常见肿瘤,全世界每年新增肝癌病例超过100万.我国是全球肝癌发病率高的国家,在常见肿瘤中肝癌发病率仅次于肺癌,居第2位.肝癌恶性程度较高、病情进展快,大部分患者(>50%)就诊时己为晚期,不适合手术切除.即便可以手术切除的肝癌,2年复发率也高达50%.晚期肝癌的治疗相当棘手,尚无标准治疗方案,预后差,传统化疗后平均中位生存期仅为3~5个月.过去的20年间,肝癌患者的相对5年生存率仅由3%增长到4%~7%~[1],主要原因归结于肝癌的高复发性和没有有效的药物治疗.肝癌的药物治疗可归纳为
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度他雄胺PLGA微球的加速释放度试验研究
生物可降解注射微球是近三十年来药剂学的研究热点之一~[1],它能够显著延长给药间隔,大大提高患者用药的顺应性,同时维持低有效浓度,减少给药次数.聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)由于其良好的生物相容性和可降解性,已被FDA正式批准为药用辅料.但缓释微球释放周期较长,给处方筛选和日常质量控制带来较多困难.因此,建立体外加速释放度试验方法,从而快速地评价微球的释药性质,缩短处方工艺优化的周期,有助于制剂工作者更加快速有效地进行处方分析.
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应用鼓泡塔式反应器生产藏红花素的研究
藏红花(Crocus sativus L)被誉为"植物黄金",是一种名贵的妇科良药,有望成为21世纪理想的抗癌药物之一[1-3].但藏红花种植条件苛刻、适宜栽培的地区有限、田间栽培过程易感染病毒,加之其柱头入药、产量极低,致使其资源短缺、价格昂贵~[3-4].通过植物细胞培养体系生产藏红花素,是解决藏红花资源短缺的有效途径之一~[3],其中生物反应器技术是其实现产业化的关键技术之一.
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从专利无效决定试析药品标准类证据的公开性
近年来,在药品注册以及专利侵权诉讼过程中,当事人越来越多地采用向国家知识产权局专利复审委员会(以下简称"复审委")提出无效宣告请求的抗辩手段,其中有代表性的一类无效宣告请求就是专利涉及药品标准.这类案件的争议焦点往往在于药品标准类证据的公开性.
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用SAS软件实现均匀设计定量资料的统计分析
在试验中,有时需要考察多个因素,且每个因素有多个水平,可以选用正交设计,如果用正交表安排试验,试验次数还是太多,可以应用均匀设计.均匀设计是用少的试验次数取得关于总体的尽可能充分的信息,它是只考虑试验点在试验范围内均匀散布的一种试验设计方法.该设计方法较相同规模的正交设计而言,大大降低了试验次数.
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微生物药物研究进展与发展趋势
微生物药物作为广泛使用的临床药物具有重要的地位,尤其是在抗感染、抗肿瘤、降血脂和抗器官移植排异方面具有不可替代的作用.自1929年青霉素被发现后,20世纪40年代以来,已有上百种抗生素先后用于临床的细菌感染治疗、肿瘤化疗、降血脂以及器官移植抗排异反应.总体上,由于微生物药物特别是抗生素的广泛应用使人类的寿命延长了15年.
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生命科学与生物技术研究进展2010(下半年)
2010年下半年生命科学与生物技术研究领域日新月异,新技术、新方法、新成果层出不穷.美国<科学>杂志评出了2010年十大科学突破,其中生命科学就占了八项,这足以说明生命科学研究的发展速度.
