中国医药生物技术杂志
Chinese Medicinal Biotechnology 중국의약생물기술
- 主管单位： 中华人民共和国卫生部
- 主办单位： 中国医药生物技术协会
- 影响因子： 0.36
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1673-713X
- 国内刊号： 11-5512/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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电纺聚乳酸-羟基乙酸共聚物/Ⅰ型胶原-聚己内酯双层膜预防腱周粘连的相关研究
目的 探讨聚乳酸-羟基乙酸共聚物/Ⅰ 型胶原-聚己内酯双层膜的结构、成分、亲水性、组织相容性和细胞毒性,以及该膜对鼠L929成纤维细胞黏附和活性的影响,从而明确该电纺膜在预防肌腱断裂后腱周粘连的可行性.方法 制备单纯电纺聚乳酸-羟基乙酸共聚物膜和电纺聚乳酸-羟基乙酸共聚物/Ⅰ 型胶原-聚己内酯双层膜.通过扫描电镜、红外光谱、接触角检测分析电纺膜的超微结构、成分以及亲水性能;通过溶血试验、热原试验、致敏试验和MTT法验证电纺膜的组织相容性和细胞毒性;将鼠L929细胞种植在单纯电纺聚乳酸-羟基乙酸共聚物膜和电纺聚乳酸-羟基乙酸共聚物/Ⅰ型胶原-聚己内酯双层膜上,体外培养4 d后进行死/活细胞染色,通过共聚焦显微镜观察比较L929细胞在两组膜上的黏附和活性情况.结果 两种电纺膜由纳米级-微米级的纤维丝有序排列,形成致密多孔的网状结构.且溶血试验、热原试验、致敏试验结果均呈阴性.MTT检测发现,L929细胞在电纺聚乳酸-羟基乙酸共聚物/Ⅰ型胶原-聚己内酯双层膜的DMEM浸提液组和正常培养液组中的OD570值的差异没有统计学意义(P>0.05);死/活细胞染色提示,鼠L929成纤维细胞在电纺聚乳酸-羟基乙酸共聚物/Ⅰ 型胶原-聚己内酯双层膜的 Ⅰ型胶原-聚己内酯层上第4天的黏附率和生存率显著高于对照组(P<0.05),而L929细胞在单纯电纺聚乳酸-羟基乙酸共聚物膜上的黏附率和生存率显著低于对照组(P<0.05).结论 电纺聚乳酸-羟基乙酸共聚物/Ⅰ 型胶原-聚己内酯双层膜是由纳米级-微米级有序排列的纤维丝构成的多孔膜片,而且组织相容性良好,无明显细胞毒性.其聚乳酸-羟基乙酸共聚物层可以有效抑制成纤维细胞的黏附和生存,Ⅰ型胶原-聚己内酯层可以促进细胞的黏附和存活.电纺聚乳酸-羟基乙酸共聚物/Ⅰ 型胶原-聚己内酯双层膜对预防肌腱断裂后腱周粘连具有潜在的临床应用价值.
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HIV-1始祖病毒Vpu和Vif拮抗宿主限制因子的能力
目的 研究始祖病毒的生物学和早期进化特征,有助于阐明HIV-1建立感染的关键因素.方法 以过表达的方法比较了始祖病毒和同一亚型的慢性感染病毒Vpu蛋白降解宿主限制因子BST-2的能力,利用流式细胞术检测两者对内源性BST-2细胞表面水平的影响.利用已构建的含荧光素酶报告基因的单循环感染始祖病毒表达质粒,比较了始祖病毒与同一亚型的慢性感染株下调BST-2的能力.用过表达的方法检测了Vif蛋白拮抗宿主限制因子hA3G的能力.结果 对过表达以及细胞表面内源性BST-2,始祖病毒Vpu蛋白降解宿主限制因子BST-2的能力均显著高于同一亚型的慢性感染病毒.但在始祖病毒拮抗BST-2抗病毒活性的能力分析中,尽管始祖病毒Vpu表现出较强的下调BST-2的能力,仍然不足以拮抗外源过量表达的BST-2的抗病毒活性.在Vif降解hA3G的实验中,始祖病毒Vif降解hA3G的能力弱于慢性感染病毒pMJ4或与之类似.结论 始祖病毒具有更高的拮抗宿主天然免疫的能力,有助于其建立早期感染.
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己烯雌酚对人类高位和低位隐睾睾丸引带细胞的影响
目的 研究外源性雌激素己烯雌酚(DES)在体外对高位和低位隐睾患儿睾丸引带细胞的影响.方法 以麻醉下未降睾丸的位置位于内环口以上的腹腔型隐睾为高位组,已出内环口但未出外环口的腹股沟管型隐睾为低位组,分别收集高、低位隐睾患儿术中的废弃引带,经IV型胶原酶消化后原代培养、比较其形态和细胞骨架的差别;将两组细胞分别培养于溶剂对照组(DMSO)和DES浓度梯度为0.01、0.1、1及10μg/ml的培养基内24 h.以鬼笔环肽标记法示DES作用前后细胞的形态学改变;CCK-8法检测其增殖能力的变化;荧光定量PCR法检测RXFP2基因相对表达量的差异.结果 人类高位和低位隐睾睾丸引带细胞大部分为成纤维细胞样,其中低位组的细胞可自发融合成多核肌管样细胞.高浓度DES(10μg/ml)可抑制人类高、低位隐睾的睾丸引带细胞的增殖、改变细胞的光镜特征和微丝骨架,但是其对两组细胞的影响没有统计学差异.高浓度DES上调两组细胞RXFP2的表达水平.结论 人类高、低位隐睾的睾丸引带细胞具有不同的形态特征;高浓度外源性雌激素可改变高位和低位隐睾的睾丸引带细胞骨架、抑制细胞的增殖活力并上调人类引带RXFP2基因的表达.
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质粒介导的摩氏摩根菌KL-225对氨基糖苷类和氟喹诺酮类抗生素的耐药
目的 研究摩氏摩根菌KL-225的超广谱耐药机制,为新型抗菌药物的研发奠定基础.方法 提取纯化摩氏摩根菌KL-225的pKL2683和pKL5933质粒,并进行序列测定,将测序结果进行生物信息学分析找到其可能的耐药基因,再通过将质粒转化入摩氏摩根标准菌株和大肠杆菌,对耐药基因进行验证.结果 pKL2683质粒携带的qnrD基因导致氟喹诺酮类抗生素对KL-225的MIC升高;pKL5933质粒携带的aac(6')-Ib-cr4基因导致KL-225对氨基糖苷类和氟喹诺酮类抗生素的MIC升高.结论 摩氏摩根菌KL-225对氨基糖苷类抗生素的耐药主要来源于pKL5933质粒上携带的aac(6')-Ib-cr4基因;pKL2683质粒携带的qnrD基因和pKL5933质粒携带的aac(6')-Ib-cr4基因导致KL-225对氟喹诺酮类抗生素敏感性降低.
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TaqMan-MGB荧光探针法检测北京地区幽门螺杆菌gyrA基因第87位密码子和第91位密码子耐药突变
目的 采用TaqMan-MGB荧光探针法检测北京地区幽门螺杆菌喹诺酮类耐药位点gyrA基因第87位密码子和第91位密码子突变情况,比较与药敏试验和一代测序法的一致性.方法 收集北京大学第一医院消化内科门诊尿素酶试验阳性的患者252例,所有患者均使用MGB荧光探针法和一代测序法对喹诺酮类耐药位点gyrA基因第87位密码子和第91位密码子进行检测.其中158例患者同时进行药敏试验检测,同时分析耐药位点突变发生率与耐药表型的关系.结果 158例传统培养联合药敏法检测的标本中成功培养出85例,占53.8%,其中耐药型菌株40例,敏感型菌株42例.而MGB荧光探针法成功检出155例,占98.1%,其中野生型93例,突变型62例.在药敏试验检测出的85例阳性标本中,两种方法检出的符合率为94.1%.252例标本中,一代测序法成功检测出234例,占92.9%,其中野生型160例,突变型74例.在74例突变型标本中,含gyrA基因第87位密码子突变的标本占60.8%,含gyrA基因第91位密码子突变的标本占39.2%.MGB荧光探针法成功检测出250例,占99.2%,其中野生型161例,突变型89例.在89例突变组标本中,含gyrA基因第87位密码子突变的标本占64.0%,含gyrA基因第91位密码子突变的标本占36.0%.一代测序法和MGB荧光探针法在区分是否含有突变上的符合率为95.3%.结论 TaqMan-MGB荧光探针法可快速、敏感地检测患者胃黏膜标本中幽门螺杆菌喹诺酮类耐药位点gyrA基因第87位密码子和第91位密码子的突变情况,与药敏试验和一代测序法有较高的符合性.
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肿瘤坏死因子β及其相关疾病的研究进展
肿瘤坏死因子(TNF)超家族由 19个成员组成,多数成员与相应受体结合为三聚体形式激活下游信号通路转导,从而参与一系列炎症和免疫反应.在肿瘤坏死因子超家族成员中,研究为深入和广泛的是肿瘤坏死因子 α(tumor necrosis factor α,TNFα),它与强直性脊柱炎、类风湿性关节炎、炎症性肠炎、多发性硬化、银屑病、急性肝炎等疾病的发生具有重要关系[1-2].肿瘤坏死因子 β(tumor necrosis factor β,TNFβ)是肿瘤坏死因子超家族的另一重要成员,可以膜结合形式(LTα1β2)或者游离形式(LTα3)存在[3].和 TNFα相似,游离形式的 TNFβ(LTα3)通过与肿瘤坏死因子 I型受体(tumor necrosis factor receptor I,TNFRl)和肿瘤坏死因子 Ⅱ型受体(tumor necrosis factor receptor Ⅱ,TNFR2)结合从而介导大部分信号转导,其激活后和 TNFα有某些共同的生物活性,其中主要的是激活经典和非经典的 NF-κB级联信号转导途径[4].TNFβ有广泛的生物活性,从调控二级淋巴器官的发育到调节对于特定微生物的免疫反应等过程都发挥了重要作用[5].TNFβ 主要表达在 CD4+I型 T辅助细胞(T helper cell 1,TH1)、CD8+细胞、NK 细胞、B 细胞和巨噬细胞.它在免疫系统的发生、发展和功能方面有特殊作用,尤其是在淋巴器官的发展,淋巴微环境的维持,宿主防御以及炎症方面有着非常重要的作用[6].然而,许多证据指出这些作用来自基因缺陷小鼠,与人类本身 TNFβ的相关性并不是十分明确.而且,这些动物模型使得确定 TNFβ在以上这些系统中发挥的作用变得比较困难.这是由于 TNFβ基因与 TNFα基因、LTβ基因密切相关联,并且靶向 TNFβ基因可以导致旁系基因的损害[7].而且,TNFβ可以在一定程度上控制 TNFα的表达, TNFβ的缺失可以干扰 TNFα的产生.同一种细胞类型可同时表达 TNFα和 TNFβ,敲除两种细胞因子中任何一种基因的小鼠都可以表现出不同的表型特征,表明这两种细胞因子有着相似但又不同的功能.
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细胞膜仿生纳米粒的研究与应用
现今临床使用的药物绝大多数没有靶向性而且生物利用度较低[1],因此造成了许多药物的非特异性毒性甚至产生其他严重的副作用[2].现代药物制剂专家们致力于开发可靶向性递送药物至病灶部位的药物递送载体,以期实现药物的定时、定位、定量释放目的.目前已开发的药物递送载体材料通常为人工合成高分子化合物,根据使用目的不同对载体材料或载体表面进行修饰.但是这种修饰往往并不能完全发挥识别体内复杂的内源性物质的作用,而且有时甚至还会被视为外源性毒物排出体外,无法按照设计预期到达病灶部位并发挥应有的疗效.于是出现了基于细胞、内源性蛋白及病原体的三大类仿生型药物递送系统[3].仿生药物递送系统通过模拟体内物质或感染力较强的病原体结构功能,复制其体内过程,将药物准确递送至靶部位,从而产生小不良反应,获得佳治疗效果.
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HIV-1整合酶抑制剂研究进展
艾滋病,又称获得性免疫缺陷综合征(acquired immune deficiency syndrome,AIDS),是由人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)感染引起的全身性免疫系统严重损坏为特征的传染性疾病.自 1981年美国报道首例艾滋病病例以来[1],其不断向世界各地蔓延并在全球范围内肆虐流行,给人类的生命健康和社会发展造成了十分严重的危害,已引起各国政府和社会的普遍关注.我国整体上属于 HIV低流行国家,但局部地区呈高发流行[2-3].截至 2015年 10月底,全国报告存活的艾滋病病毒感染者和病人共 57.5万例,死亡 17.7万人.
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生物活性肽制备、纯化和分析的研究进展
生物活性肽具有特殊的生理特性,其在医药和保健食品领域的研究已成为热点.现代科学发展不仅要求能够分离得到具有不同功能的活性肽类,更重要的是能够经过进一步纯化和鉴定得到准确的肽结构、氨基酸序列以及功能通路.
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人诱导多能干细胞向视网膜色素上皮细胞分化及其应用于临床治疗的研究进展
视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞是位于视网膜外层的单层细胞,呈六角形,胞内富含黑色素.其功能主要包括:①吞噬感光细胞外节段;②代谢视紫红质;③参与构成血-视网膜屏障;④合成黑色素等.RPE细胞的功能丧失会引起多种视网膜疾病,如年龄相关黄斑变性、Stargardt 病等[1].RPE 细胞已经到达终末分化阶段,损伤后无法再生,因此细胞移植成为治疗其病变的理想方法.具有多向分化潜能的干细胞可作为 RPE细胞的种子来源.研究者们曾利用胚胎干细胞(embryonic stem cells, ESCs)[2]、成体干细胞如骨髓间充质干细胞[3],定向诱导分化为 RPE细胞进行移植治疗.但由于 ESCs存在伦理学和免疫排斥等问题[4]、成体干细胞存在增殖能力和分化潜能有限等问题[5],阻碍了其在临床上的应用.诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs)的出现为 RPE细胞的移植治疗带来了新的希望.
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血友病B基因治疗研究进展
血友病 B是一种 X染色体连锁的隐性遗传性出血性疾病,患者多为男性,女性患者极为罕见,男性人群的发病率约为 1/25000.因患者凝血因子 IX(factor IX,FIX)基因突变导致 FIX水平缺乏引起,症状的严重程度与体内 FIX水平相关;重症患者血浆 FIX含量小于正常人的 1%,因而频繁发生自发性出血,如关节内出血、软组织血肿、腹腔出血和脑出血等,终导致严重的关节病、慢性疼痛,严重影响患者生活质量甚至寿命.
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骨软骨一体化仿生支架的研究现状与展望
关节软骨在日常关节活动中发挥着重要的作用,而随着社会人口老龄化所导致的退行性软骨损伤与年轻患者不恰当的运动带来的运动损伤等,使得关节软骨损伤的发病率在不断地上升,且损伤患者也渐趋于年轻化.关节软骨虽有其相应的代谢活动,但因其缺乏神经、血管及淋巴组织,软骨一旦破坏便难以自我恢复与再生.如图 1所示,常见的关节软骨损伤中,按其损伤程度大体可以分为三种类型:部分软骨损伤、全层软骨损伤与骨软骨缺损.若部分软骨损伤与全层软骨损伤早期未及时发现并做相应的处理,进一步向下恶化便会演变成严重的骨软骨缺损[1];相应的软骨下骨损伤后,向上侵袭上层的软骨层也会造成整体的骨软骨损伤.因此无论是自上而下所致的骨软骨损伤还是自下而上导致的骨软骨损伤,都严重影响人体关节的正常活动,其不仅给患者的日常生活带来极大的不便,而且给患者造成巨大的经济与心理负担,同时也消耗着大量的社会公共医疗资源.因此,寻求一种有效的骨软骨修复策略,既是社会的迫切需求与盼望,也是临床医生与科学家亟待解决的临床科学问题之一.
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荧光定量法测定DNA熔解温度
DNA熔解温度?指 DNA双链变性过程中一半双链解离为单链的温度[1],是 DNA片段的一个重要特性.准确测定 DNA片段 Tm值,是分子生物学实验方法(如 PCR检测技术、核酸杂交检测技术等)建立的基础,在疾病的分子诊断领域具有重要现实意义[2-4].影响 DNA片段 Tm值的因素有很多,如 DNA片段的长度、DNA片段的 GC%含量[5]、盐离子浓度、pH等[6].传统测定 DNA片段 Tm值的方法多用紫外分光光度法[7-9],该方法有一定的局限性,溶液需要量大,操作起来不方便.利用荧光试剂(如 SYBR Green I)与双链 DNA结合后荧光大大增强的特点,采用荧光定量法可以较好解决这些问题.用荧光定量法测定 DNA样品在含有 SYBR Green I溶液中的熔解曲线,根据其导数曲线熔解峰对应的温度可以确定 DNA样品的 Tm值.荧光定量 PCR仪溶液需求量小,不需太多操作,能很好地控制反应的温度,进行实时自动化检测[10-11].本文用荧光定量法测定不同大小、不同 GC%含量 DNA片段的 Tm值并研究了其影响因素,显示该法可用于实际样品测定.
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生物样本库项目管理流程的规范化
人类即将迈入精准医学时代,对个性化治疗药物及靶标的研究验证离不开高质量临床样本的支持.生物样本库(biobank),是遵循国际标准及行业规范、对临床生物样本及信息进行专业化的采集、处理、存储、管理及应用的医学科研平台,能够为精准医学提供理想的研究材料[1-2].建设标准化、高质量的生物样本库,有利于整合宝贵的临床样本及信息资源,对促进重大疾病基础与临床研究、诊疗方法研发、药物研发、健康研究及产业转化有重要意义[3].
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抗肺癌药物领域全球专利发展态势分析与借鉴
癌症是威胁人类健康的一大杀手,据报道,2012 年全球约有 1410万新发癌症病例,其中,肺癌已成为欠发达国家男性癌症死亡的首要原因,并已超过乳腺癌成为发达国家女性癌症死亡的主要原因[1].世界卫生组织统计的新《世界癌症报告》显示,在整体死亡人数多的肺癌中,2012 年的新增患者中有 36%为中国人[2].Chen等[3]报道中国 2015年大约有 4292000个新增侵袭性癌症病例,2814000个癌症死亡病例.其中,男性普遍的 5种癌症排在第一位的为肺和支气管癌,女性普遍的 5种癌症中,肺和支气管癌仅次于乳腺癌,排在第二位;男性和女性死亡率高的癌症均为肺和支气管癌.
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