中国医药生物技术杂志
Chinese Medicinal Biotechnology 중국의약생물기술
- 主管单位： 中华人民共和国卫生部
- 主办单位： 中国医药生物技术协会
- 影响因子： 0.36
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1673-713X
- 国内刊号： 11-5512/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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线粒体多态性检测寡核苷酸芯片的构建
目的 构建用于线粒体DNA(mtDNA)D-环控制区(D-LOOP区)多态性多个位点集成检测的寡核苷酸芯片.方法根据GenBank中人mtDNA D-LOOP区序列设计2组引物[普通引物和N,N'-对羧苄基吲哚三菁(Cy5)标记引物]和55种寡核苷酸探针.将探针固定于醛基修饰载玻片表面,制备mtDNA多态性检测芯片.提取40例健康人外周血标本mtDNA,应用Cy5标记引物不对称PCR扩增mtDNA D-LOOP区片段.取未变性和变性后扩增产物分别与芯片进行杂交,观察二者杂交信号强度差异,并将芯片检测结果与DNA测序结果进行比较.观察等倍稀释的不对称PCR扩增产物的杂交信号强度,检测芯片的灵敏度;将DNA测序结果与探针进行BLAST2比对,找出与PCR扩增产物完全匹配和仅1个碱基不匹配的探针,分析二者在芯片上相应位点杂交信号强度的差异,观察芯片的特异性;以放置6个月后的芯片检测外周血mtDNA,观察杂交信号强度的变化.结果不对称PCR扩增获得的mtDNA D-LOOP区片段(466 bp)与预期表达片段大小一致.不对称PCR扩增产物直接杂交和变性后杂交的信号强度无明显差异,40例健康人外周血标本mtDNA的芯片杂交检测结果均与DNA测序结果完全吻合.灵敏度检测结果显示,杂交信号强度随扩增产物稀释程度的增加而减弱,芯片检测靶分子的灵敏度为0.1ng;与DNA测序结果完全匹配的探针174和仅相差1个碱基"C"的探针174c的杂交信号强度具有明显差异;而保存6个月后的芯片杂交信号强度基本保持不变.结论构建的寡核苷酸芯片可满足对mtDNA D-LOOP区多态性进行多个位点快速通量检测的需要,具有较高的灵敏度和特异性,适用于法医鉴定及线粒体疾病的检测.
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单层厚块单次激发快速自旋回波重T2加权序列胎儿成像质量分析
目的 评价单次激发厚层快速自旋回波(single-shot turbo spin echo,SSTSE)重T2加权序列行磁共振胎儿成像(magnetic resonance fetography,MRF)的图像质量及其影响因素.方法 2006年4月至2008年2月间,因产前超声筛查诊断或怀疑胎儿异常的孕妇164例,在常规胎儿MRI检查基础上行MRF,采用横断、冠状、矢状多层面多角度对胎儿进行显示,并对MRF图像进行质量评价,分析图像质量与孕周、胎位和羊水的关系及图像质量降低的原因.结果所有胎儿的MRF检查均顺利完成.MRF能在一幅图像上同时捕捉胎儿的解剖和病理,半透明状态和整体表现相结合是对胎儿的一种全新显示.MRF成像质量与胎儿孕龄、胎位、羊水量无统计学差异(p>0.05).运动伪影、卷褶伪影、母亲膀胱过度充盈可使图像质量降低.结论 MRF提供了一种具有三维立体感的胎儿整体图像,且具有快速、多方位、可重复优质成像的特点,图像质量不受孕周、胎位和羊水的影响,可作为胎儿检查的一种辅助方法.
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125I放射粒子植入治疗晚期胰腺癌和放射粒子对正常胰腺组织损伤的实验研究
目的 探讨125I放射粒子植入术治疗浸润性胰腺癌的临床疗效、影响因素和正常胰腺组织放射损伤处理.方法对不能手术切除的浸润性胰腺癌27例,根据治疗计划实施125I放射粒子植入术,比较分析了术后肿瘤局部控制率、生存率、临床受益反应及其影响因素;24只家兔随机分为A、B两组,正常胰腺、肠系膜血管边缘植入125I放射粒子,植入后第40天及第80天分别处死,取粒子植入处直径1 cm范围内胰腺组织和部分肠系膜血管,HE染色评定胰腺组织及肠系膜血管慢性放射性损伤情况.结果 (1)本组病例中,CR 2例(8%);PR 8例(32%):SD 12例(48%);PD 3例(12%);有效率40%;疼痛缓解率为92%.本组病例术后6个月,12个月及18个月生存率分别为81%、29%和7%,术后中位生存时间为11.2个月.肿瘤体积大、植入粒子总活度高、术后未追加局部放疗显示术后生存率降低.本组2例(7.4%)发生术后胰腺炎,其中1例出现胰腺假性囊肿.(2)家兔胰腺慢性放射损伤呈逐渐恢复趋势.血管内膜上皮细胞的损伤性改变出现较晚,肌层变性及肌紊乱有明显修复.结论 125I放射粒子植入术是治疗浸润性胰腺癌的一种有效、安全、并发症较少的姑息治疗方法,其胰腺并发症能够预防.
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脑胶质瘤SHG-44细胞MGMT基因甲基化状态及其与细胞对烷化剂药物耐药性关系的研究
目的 探讨人脑胶质瘤SHG.44细胞O(6)-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(MGMT)基因启动子甲基化状态与其蛋白表达以及细胞对烷化剂药物耐药性的相关性.方法取处于对数生长期的人脑胶质瘤SHG-44和U251细胞,分别加入5-氮-2'脱氧胞苷(5-Aza-CdR)培养6 d后收集细胞,同时以未加5-Aza-CdR的正常培养细胞作为对照.提取细胞基因组DNA,采用甲基化特异性PCR(MSP)检测MGMT基因的甲基化状态,并利用蛋白质印迹方法检测MGMT蛋白的表达.将收集的细胞分为3组,分别加入浓度为125、100、75、50、25、15、10μg/ml的尼莫司汀(ACNU)和50、25、15、10、5、2.5、1μg/ml的替莫唑胺(TMZ)以及等量的完全培养液(阴性对照),采用噻唑蓝(MTT)法分别检测细胞对烷化剂药物的敏感性,以细胞存活50%时所对应的药物浓度(IC50值)作为衡量细胞对药物敏感性的指标,实验重复3次.结果正常培养的SHG-44细胞MGMT基因启动子呈甲基化状态,MGMT蛋白表达缺失,对ACNU和TMZ的IC50值分别为30、11μg/ml,表现为对烷化剂药物敏感;用5一Aza-CdR处理后,SHG-44细胞MGMT基因启动子成功脱甲基化,MGMT蛋白恢复表达,其对ACNU和TMZ的IC50值分别升高了2.5和3.1倍(均P<0.05),对烷化剂药物的敏感性发生逆转.而正常培养和5-Aza-CAR处理的U251细胞MGMT基因启动子均呈未甲基化状态,都能表达MGMT蛋白,并且均表现为对ACNU和TMZ烷化剂药物耐药.结论 MGMT基因甲基化状态能稳定地反映细胞诱导MGMT 蛋白表达的能力,并有可能成为预测肿瘤组织对烷化剂化疗药物敏感性的分子标记.
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计算机导航系统在骨肿瘤切除和重建中的应用
目的 应用计算机导航系统,进行术前设计,探讨在术中精确评判骨肿瘤外科切除边界的意义和可行性.方法2007年11月至2008年6月,共施行红外线主动诱导计算机辅助三维导航下骨肿瘤外科手术30例,其中男性18例,女性12例.术前全部病例进行螺旋CT扫描,导入导航系统配置的工作站计算机,术前进行解剖重建,对比CT显示病变的骨窗、软组织窗和增强扫描窗影像,确定肿瘤范围;部分病例经计算机的CT和MR融合功能,显示的髓腔范围确定肿瘤边界;设计术中肿瘤外科边界,并标记.术中导航引导下,肿瘤切除,并精确评判外科切除边界.结果全部病例依照术前设计进行.18例在导航系统指引下,进行精确的切除,肿瘤标本显示了良好的外科切除边界;12例囊内切除,在导航的指引下,确认切刮边界足够.结论计算机导航技术已经被广泛应用于各个学科领域;术前设计肿瘤切除范围;术中依照计划进行手术;确认肿瘤切除边界,提高了手术的精确度.计算机导航技术的应用有助于骨肿瘤的精确切除,为重建创造条件.
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猪尿酸酶动力学特性研究
目的 研究作用温度、pH值、底物浓度对猪尿酸酶催化反应速度的影响,和猪尿酸酶的热稳定性、酸碱稳定性、保存的稳定性及Kin值.方法通过测定不同温度、pH值、不同底物浓度等反应条件下尿酸酶的活性来确定其适反应条件和酸碱稳定性.测定酶制剂在37℃和70℃保温不同时间后的残余活力,确定尿酸酶的热稳定性.测定酶制剂在4℃和加入不同比例的甘油后并在-20℃保存一定时间后的残留活力,确定尿酸酶保存的稳定性.用Lineweaver Burk法作图确定酶的Km值.结果在一定的条件下,该猪尿酸酶的适作用温度是37℃,适pH为8.4,而且pH在7.0以上活性保持稳定.热稳定性较好,在37℃处理48h时活性保持62.7%,在70℃处理1 h时活性仍保持17%.在适温度及pH条件下,底物浓度在0～30μmol/L酶活力上升明显,30-120 μmol/L 酶活力上升较缓慢,120～200μmol/L,酶活力无明显上升,故该猪尿酸酶达到大反应速度的底物浓度应在120 pmol/L.尿酸酶在4℃中保存2个月活性保持82.4%,加入20%甘油后在-20℃保存的稳定性好,2个月后活性仍保持92.8%.通过底物浓度与酶活力计算得到该酶催化尿酸的米氏常数(Km)为8.03μmo/L.结论该猪尿酸酶的理化性质较优越,适作用温度及反应佳pH接近人体生理条件,热稳定性和酸碱稳定性都较好,与底物的亲和力好,且易于保存,为该酶的临床应用提供了实验依据.
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透明质酸生物活性的研究进展
透明质酸多糖(hyaluronic acid,HA)是一种大分子酸性粘多糖,由N-乙酰氨基葡萄糖(GicNAc)与葡萄糖醛酸(GlcA)双糖单位聚合而成,即[(1→3)-β-D-GlcNAc (1→4)-β-D-GIcA],平均相对分子质量为105-107,其在医药、化妆品、食品等领域有广泛而独特的应用价值.
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抗CD20抗体治疗非霍奇金淋巴瘤
非霍奇金淋巴瘤(non-hodgkin's lymphoma,NHL,)绝大多数是B细胞来源的,是常见的血液系统恶性肿瘤,是威胁人类生命的10大恶性肿瘤之一.NHL还是我国目前发病率增长速度快的血液系统恶性肿瘤[1].但是许多化疗药物对NHL的治疗效果并不好.
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HCV第一高变区的免疫学研究进展
HCV属黄热病毒科,感染人体后可引起机体免疫应答发生异常,导致组织损伤,形成慢性持续性感染,并能进一步发展为肝硬化甚至肝细胞肝癌.目前全世界约有1.7亿HCV感染者,约有75%左右的急性丙型肝炎患者转为慢性感染,其中10%～20%慢性丙型肝炎患者发展为肝硬化,1%-5%发展为肝癌[1].丙型肝炎在治疗和预防方面具有很强的局限性,这主要是由于HCV的高度变异性,其中位于E2 NS1区N端第27位氨基酸的变异性大,通常称之为第一高变区(hypervariable region 1,HVR1).研究证明HVR1中含有优势表位[2],其高度变异性也将对机体产生的针对HCV的细胞和体液免疫应答造成障碍.现本文就近年来有关HCV-HVR1的免疫学研究进展做一综述.
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赤潮藻毒素种类与化学结构研究进展
由于海洋微藻毒素的发现多起源于贝类或鱼类,故又称为贝毒或鱼毒.有毒藻毒素的结构差别很大,既有复杂的多(聚)醚类化合物也有简单的氨基酸.根据毒素对人类引发的中毒症状和藻源来进行分类,常见的藻毒素可分为:麻痹性贝毒(paralytic shellfish poisoning,PSP)、腹泻性贝毒(diarrhetic shellfish poisoning,DSP)、记忆丧失性贝毒(amnesic shellfish poisoning,ASP)、神经性贝毒(neurotoxic shellfish poisoning,NSP)及西加鱼毒(ciguatera fish poisoning,CFP).现从这些毒素的来源、化学结构、毒性作用等方面进行概述.
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抗菌微生物及拮抗性代谢产物的种类和应用
人类一直努力寻找有效的抗菌药物,自从上世纪30年代弗莱明发现青霉素以后,利用微生物防治病原微生物感染一直倍受关注.具有抗菌作用的微生物相关物质很多,包括某些微牛物自身和一些微生物的拮抗性代谢产物.其来源和抗菌谱及抗菌效力各不相同,导致某些微生物物质在临床治疗上受到限制,目前,真正广泛使用于临床的抗菌微生物制剂丰要是天然抗生素.
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口腔黏膜吸收促进剂作用机制的研究进展
近年来,随着国内外对新剂型和新给药系统研究的不断深入,药物经口腔黏膜吸收而发挥药效的吸收方式也日益受到关注.作为口腔内的第一道天然屏障,口腔黏膜的首要作用就是保护口腔内组织不受外源性物质的侵害,但同时也阻碍了药物的透过吸收.
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如何用SAS软件正确分析生物医学科研资料Ⅱ.用SAS软件实现配对设计定量资料的统计分析
编者按生物统计学是生物学领域科学研究和实际工作中必不可少的工具,在分子生物学迅速发展的今天,生物统计学更显示出了它的重要性.实验设计与数据统计分析是现代生物学的基石,是生物学研究者检验假说、寻找模式、建立生物学理论的有利工具,也是生物学研究者探索微观和宏观生物世界的必备基础知识.
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全球生物制药产业概况
以基因工程、抗体工程或细胞工程技术生产的,源自生物体内的,用于体内诊断、治疗或预防的生物技术药物[1-2],已经成为利用现代生物技术生产的重要的产品,并成为衡量一个国家现代生物技术发展水平的一个重要的标志,生物制药已成为制药业中发展快、活力强和技术含量高的领域.
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生物反应器与相关生物工程探讨
生物反应器是指利用酶或生物体(如微生物、动植物细胞)所具有的特殊功能,在体外进行生物化学反应的装置系统.与化学反应器不同,化学反应器从原料进入到产物生成,常常需要加压和加热,是一个高能耗过程,而生物反应器则不同,在酶和微生物的参与下,在常温和常压下就可以进行化学合成.因此生物反应器更有发展前景.
