中国医药生物技术杂志
Chinese Medicinal Biotechnology 중국의약생물기술
- 主管单位: 中华人民共和国卫生部
- 主办单位: 中国医药生物技术协会
- 影响因子: 0.36
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 1673-713X
- 国内刊号: 11-5512/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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程控降温法与二步法对胎盘间充质干细胞冻存效果的影响
目的 观察对比程控降温法与二步法对胎盘间充质干细胞深低温冻存效果的影响.方法 分别采用程控降温法和二步法对3个批次的pMSCs进行液氮冻存,3个月后进行复苏,测定细胞存活率、活细胞数,观察体外培养1~4 d时的细胞形态,CCK8法进行细胞增殖检测,同时用流式细胞术鉴定细胞表面标记抗原,用油红O染色、茜素红S染色和Masson染色进行细胞三向分化能力鉴定.结果 程控降温法对比二步法冻存的细胞活率在冻存前、复苏后均无显著差异(P>0.05).倒置显微镜观察细胞形态,均在24 h时贴壁,呈短梭形,96 h时细胞密度达到95%左右,均匀铺满视野.增殖测定结果显示,培养第3~5天为两组细胞的对数生长期,第5天时增殖倍数达到高,分别为第1天的6.44倍和6.29倍,经过短暂的平台期后进入衰亡期,增殖趋势一致;但分别在第4天(P<0.01)、第6天(P<0.05)和第7天(P<0.05)时,程控降温法冻存的细胞存活率极显著或显著高于二步法冻存的细胞.两种方法冻存细胞的表面标志性抗原CD73、CD90、CD105阳性细胞数百分比分别为99.85%、99.87%、96.45%和99.73%、99.73%、96.17%.诱导14 d后两组pMSCs均出现明显的成脂、成软骨、成骨细胞特性.结论 采用程控降温法或二步法冻存pMSCs均能很好地维持细胞活力及生物特性,在条件允许情况下宜采用程控降温法,以获得增殖能力更好的种子细胞.
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三甲氧基二苯乙烯增加胃癌细胞对顺铂敏感性的实验研究
目的 旨在探索三甲氧基二苯乙烯对人胃癌细胞的抑制作用及其对顺铂化疗敏感性的影响.方法 体外培养顺铂耐药胃癌MKN-45/DDP和MGC-803/DDP细胞株,采用不同浓度的三甲氧基二苯乙烯和顺铂单药或联合用药处理.利用MTT法检测各组细胞的增殖活性,利用流式细胞术检测两药单用及合用对细胞凋亡及细胞周期的影响.结果 三甲氧基二苯乙烯可抑制顺铂耐药胃癌细胞的增殖,且其浓度越高,对MKN-45和MGC-803细胞株的抑制率越高,存在着明显的剂量-效应关系.与单独使用三甲氧基二苯乙烯或者顺铂相比,三甲氧基二苯乙烯联合顺铂的细胞凋亡率明显增高,S期细胞比例降低.结论 三甲氧基二苯乙烯不仅能对胃癌细胞的增殖产生抑制作用,同时也可以增强顺铂对胃癌化疗的敏感性.
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阿卡波糖干预新诊断2型糖尿病患者肠道菌群分布及血清GDF-15水平的研究
目的 探讨阿卡波糖对新诊断2型糖尿病(T2DM)患者肠道菌群分布及血清生长分化因子-15(GDF-15)水平的干预情况.方法 选择我院新诊断的120例T2DM患者为研究对象,随机分为试验组(n=60)和对照组(n=60),对照组予以安慰剂,试验组受试者服用阿卡波糖,连续治疗14d.比较两组受试者血糖以及血脂相关指标.采用酶联免疫吸附双抗夹心法(ELISA)测定两组血清GDF-15的表达水平.对粪便样本中所有细菌的16SrRNA-V3区进行DNA测序,对肠道菌群中的分布及丰度进行分析,同时做聚类分析.对肠道菌群通过实时定量PCR进行定量检测.结果 治疗后,试验组和对照组受试者血糖及血脂相关指标、肠道菌群的分布以及GDF-15的表达水平均存在明显差异(P<0.05).治疗后,试验组受试者肠道菌群发生明显变化,且菌群改善组与未改善组血糖及血脂相关指标存在明显差异(P<0.05);血清中GDF-15表达水平与拟杆菌属、IV型梭菌属、韦荣球菌属丰度呈正相关(P<0.05),与厚壁菌门、放线菌门、普雷沃菌属、乳杆菌属、Blautia球菌-直肠真杆菌属丰度呈负相关(P<0.05).结论 阿卡波糖可通过影响患者肠道菌群的分布以及GDF-15的表达水平,对新诊断T2DM患者起到有效的治疗作用.
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人S100A8和S100A9原核载体的构建、鉴定及蛋白纯化
目的 分别构建人S100A8(hS100A8)和S100A9(hS100A9)的PET-28a原核表达载体,并纯化hS100A8和hS100A9蛋白,为进一步研究hS100A8和hS100A9蛋白的分子生物学功能奠定实验基础.方法 用带酶切位点的引物从hS100A8和hS100A9的真核表达载体扩增hS100A8和hS100A9基因片段,用相同的限制性内切酶双酶切PCR产物和pET-28a质粒.将两者用T4连接酶连接后转化入感受态细胞DH5α,提取质粒进行鉴定.将构建成功的pET28a-hS100A8和pET28a-hS100A9分别转化感受态细胞BL21,诱导蛋白表达,将等量纯化蛋白在一定钙离子浓度下室温孵育30 min,通过SDS-PAGE和Western blot验证异源二聚体是否形成.结果 正确扩增出hS100A8和hS100A9基因,重组质粒pET28a-hS100A8和pET28a-hS100A9构建成功,纯化后在室温孵育后可形成异源二聚体.结论 hS100A8和hS100A9蛋白可以在体外形成异源二聚体,为探讨其生物学作用奠定理论基础.
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维生素D促进干细胞分化作用的研究进展
维生素 D(vitamin D,VitD)既是一种脂溶性维生素,也是一种类固醇激素,其生理作用非常广泛,除了广为人知的参与体内钙磷代谢外,VitD 也具有调节免疫力、控制细胞生长与存活、细胞分化、保护 DNA等多种作用.近研究表明,VitD 还对干细胞的增殖和分化有重要影响,涉及干细胞类型广泛,包括起源于各个胚层的干细胞.特别是在干细胞向神经、成骨、造血等方向的分化.另外,VitD 对肿瘤干细胞的分化也有明显影响,这可能对肿瘤的治疗具有提示作用.本文对 VitD在干细胞分化中的作用及其机制进行总结.
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体外肿瘤细胞迁移和侵袭定量方法的建立
侵袭是恶性肿瘤重要的特征之一.肿瘤细胞由其原发部位侵入淋巴管、血管或体腔,部分细胞被血液、淋巴液带到另一部位或器官继续生长,形成与原发瘤同样类型的肿瘤,这一过程即为肿瘤的迁移和侵袭[1].在肿瘤研究中,肿瘤细胞迁移和侵袭实验是研究肿瘤转移相关特性的重要方法[2-3],也是抗肿瘤药物筛选的常用手段[4-6].建立合适的肿瘤细胞迁移和侵袭模型,并建立简便、准确的定量方法,对于肿瘤研究具有重要的意义[7].
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抗病毒药物的发展和研发策略
病毒感染是目前世界上主要的传染性疾病,占传染性疾病病种的四分之三以上,如 DNA病毒引起的疾病包括乙型肝炎(HBV)、疱疹(HSV)、人乳头瘤(HPV)、天花、水痘等;RNA 病毒造成的疾病包括小儿麻痹、甲型肝炎、丙型肝炎(HCV)、乙型脑炎、严重急性呼吸系统综合征(SARS)、中东呼吸道综合征(MERS)、狂犬病、麻疹病、呼吸道病毒感染(流感)、肠道病毒感染(手足口病)、艾滋病(AIDS,HIV 感染,逆转录病毒)、出血热等.目前,全球每年死于 HBV、HCV、HIV的人数分别约为 60、50和 200万人[1].据 2017年世界卫生组织(WHO)的数据,2015 年全世界估计有 2.57亿人存在慢性乙肝病毒感染,7100万人存在慢性丙肝病毒感染.WHO 的调查还显示全球约 3.7亿人感染了 HIV,其中2014年因 HIV感染导致约 120万人死亡.目前流感大流行的威胁一直没有解除,很多对人类造成感染的 RNA病毒没有针对性药物.病毒具有从一个地区传播至另一个地区的特点,因此近些年出现的新发、突发病毒的流行,如 2003年的SARS,2012年的 MERS和 2014年西非的埃博拉(EBOV)病毒疫情的传播均对人类健康产生过较大威胁.
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人巨细胞病毒IgG抗体检测试剂盒国家监督抽验质量评价
人类巨细胞病毒(human cytomegalovirus,CMV),属疱疹病毒科,乙组疱疹亚科,分子量为 150 × 106 D,是直径为 200 nm的线状双链 DNA病毒,人是其唯一的宿主.巨细胞病毒的主要感染途径是与被感染病人接触,包括接触被感染病人的唾液、生殖器分泌物、尿液和乳汁,同时也可通过胎盘传播或发生医源性传染[1-3].CMV 是新生儿先天性致畸的重要病原微生物之一,它对胎儿的危害比风疹病毒要大,易引起胎儿、新生儿、婴儿的急性、慢性感染和迟发后遗症.原发性孕期感染 CMV的胎儿 80%可出现智力低下,视力受损,听力丧失等症状,特别是引起婴儿的巨细胞包涵体病(CI),可致患儿多个系统、多个器官受损,病死率为 10% ~ 20%[4].我国孕期妇女原发感染 CMV的比例为 3% ~ 4%,而原发感染导致胎儿受到影响的几率为 50%,我国每年出生上千万婴儿,因此及早检测 CMV感染对我国优生优育政策的实施具有重要意义[5-7].
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致细胞库质量管理规范制定和公示
进入二十一世纪,继药品、医疗器械和疫苗等三大产业之后,细胞治疗已成为保障人类健康的第四大产业,受到各国政府与学术界高度关注.大量临床实践证明细胞技术给一些疑难疾病的治疗带来了希望.细胞治疗已展示出迅猛发展的趋势,细胞治疗和再生医学前景方兴未艾.
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人类(体)细胞库概念的来源及其管理规范的制定
早在 16世纪,瑞士学者 Paracelsus就提出了利用人体自身活的组织细胞去重建和复活病变或衰老的组织器官的思路.随着时间的推移,以细胞为基础的组织和器官再生的基础研究取得了突破性的进展,对细胞的生物学表型、分化机制、退变机制、再生机制以及去分化和反分化等机制有了更为深刻的认识.部分领域的研究已成功临床应用,如自体关节软骨细胞修复关节软骨损伤的临床应用已有二十年的观察结果,获得了美国 FDA的批准;还有些项目即将进入临床应用.
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细胞库质量管理规范
前 言本标准按照 GB/T 1.1—2009《标准化工作导则第 1部分:标准的结构和编写》给出的规则起草.请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任.本标准由中国医药生物技术协会制定,由中国医药生物技术协会实施.本标准起草单位:中国医药生物技术协会骨组织库分会、浙江金时代生物技术有限公司.
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