白血病染色体MLL基因断裂（易位）FISH探针的研究

目的自主研制可以检测白血病染色体 MLL 基因断裂的双色 FISH 检测试剂盒。
　　方法根据染色体基因图谱，选定合适的 BAC 克隆重叠群分别作为 MLL 基因断裂点5'端探针和3'端探针。采用缺口平移法，制作出5'端标记绿色荧光素，3'端标记红色荧光素的探针。用双盲法检测白血病临床样本40例，对自制探针和同类进口探针在各项技术参数上进行对比研究。结果自制探针检测 MLL 基因断裂（易位）的阴、阳性率与同类进口产品完全相符；在 Spectrum Green 和 Cy3?v1通道中，自制探针的平均荧光信号强度比进口探针明显提高（自制探针分别为：2930.5±38.00，2766±59.54；进口探针分别为：2239±45.13，1986±59.56；P<0.01），自制探针信噪比分别为进口探针的2.4倍和1.9倍。
　　结论自制的 MLL 基因 FISH 检测探针设计合理、质量可靠，与进口探针相比，荧光信号更强，信噪比更高，将来可能替代价格昂贵的进口产品。

微生物转化灯盏乙素制备野黄芩素的研究

目的野黄芩素较其糖苷——灯盏乙素具有更好的生理活性，开发将灯盏乙素转化为野黄芩素的生物转化工艺具有潜在的应用价值。
　　方法筛选专一性高的微生物菌株，利用其发酵清液作为粗酶液转化灯盏乙素为野黄芩素，优化产酶发酵培养基和转化条件，提高野黄芩素转化得率和产率。
　　结果筛选到一株黑曲霉 JH-2菌株，该菌株产酶转化灯盏乙素为野黄芩素的专一性较高，产物降解性弱；优化后的较佳培养基组成为：蔗糖20 g/L，(NH4)2SO45 g/L，酵母浸出粉3 g/L，KH2PO41 g/L，MgSO40.5 g/L，FeSO40.01 g/L， pH 6.0；经转化条件优化后，提高了底物浓度和产物得率，在底物浓度为3 g/L，35℃下转化12 h，野黄芩素的得率可达93.7%。
　　结论成功开发了一种简便高效的野黄芩素制备方法，具有一定的应用价值。

人脐带间充质干细胞复合脱细胞软骨细胞外基质取向支架修复山羊膝关节全层软骨缺损的实验研究

目的探索人脐带间充质干细胞复合脱细胞软骨细胞外基质取向支架构建组织工程软骨，用于修复山羊膝关节负重区全层软骨缺损的可行性。
　　方法从人脐带中分离、扩增培养人脐带间充质干细胞，并进行鉴定；以猪源脱细胞软骨细胞外基质取向支架为组织工程软骨支架载体；在成年山羊膝关节负重区股骨髁处造全层软骨模型；实验分为两组，以人脐带间充质干细胞复合脱细胞软骨细胞外基质取向支架修复组为实验组，单纯全层软骨缺损造模作为对照组，每组3只山羊。术后7 d、14 d 分别抽取关节液涂片行 H&E 染色，观察炎症反应。在术后3、6个月后分别处死两组实验动物，取材进行大体形态学观察及评分、组织学染色及评分、软骨特异性基质成分定量检测。
　　结果①关节液涂片 H&E 染色结果显示，术后两组膝关节炎症反应未见明显差异。②大体形态学观察及组织学染色结果均证实，实验组修复区再生的关节软骨更加接近天然软骨，且与周边整合良好，获得更好的修复效果。大体形态学及组织学评分均证实，实验组的评分均要明显高于对照组（P<0.05）；③糖胺多糖定量检测结果显示实验组明显高于对照组（P<0.05）。
　　结论人脐带间充质干细胞复合脱细胞软骨细胞外基质取向支架构建组织工程软骨，可用于修复山羊膝关节负重区全层软骨缺损，是未来治疗软骨损伤较有应用前景的方法之一。

注射用脑蛋白水解物对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞增殖与MPP+诱导的氧化损伤的影响

目的探究注射用脑蛋白水解物对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤（PC12）细胞增殖与1-甲基-4-苯基吡啶（MPP+）诱导的细胞氧化损伤的影响，为建立评价脑蛋白水解物活力检测方法提供科学依据。
　　方法通过 MPP+损伤 PC12细胞后，采用 MTT 法测定不同厂家、不同浓度的注射用脑蛋白水解物对 PC12细胞的修复作用，通过测定其吸光度与正常细胞吸光度的比值来计算样品对 PC12细胞损伤的修复率，以此作为注射用脑蛋白水解物活力考察的指标。同时还对注射用脑蛋白水解物对于 MPP+损伤的不同亚型的 PC12细胞作用进行了研究。
　　结果注射用脑蛋白水解物作用时间为48 h、浓度为60μg/ml 时对 MPP+诱导的 PC12细胞的氧化损伤具有较好保护作用，并且对低分化型的 PC12细胞具有更明显的保护作用。
　　结论注射用脑蛋白水解物可促进低分化型 PC12细胞的增殖，并减轻 MPP+的损伤作用。研究建立的活力测定方法已经被国家标准采纳。

评估术前系统免疫炎症指数与贲门癌患者预后的相关性

目的探讨系统免疫炎症指数（SII）对贲门癌手术患者预后的相关性。
　　方法回顾性分析2008年1月至2009年12月在苏州大学附属第三医院进行根治性贲门癌手术治疗的192例患者的临床病理资料，分析术前 SII、CRP/Alb 比值、临床病理特征与患者生存预后的相关性。
　　结果单因素分析显示，术前 SII >543.86和 CRP/Alb >0.064是贲门癌患者总生存时间的危险因素。进一步的多因素分析表明：SII 是贲门癌手术患者总生存时间的独立预后影响因素，风险比：1.584，95%置信区间：（1.072，2.342）， P=0.021；CRP/Alb>0.064，亦应考虑有不良预后风险，风险比：1.316，95%置信区间：（0.909，1.906），P=0.146。结论术前 SII 对判断贲门癌患者的预后评估具有重要意义。

生物敏感MRI造影剂的研究新进展

磁共振成像（magnetic resonance imaging，MRI）以其非侵入性，无辐射损伤，无骨质伪影，安全性好，空间分辨率和对比度高，可向任意方位断层扫描等技术灵活性，成为了临床医学诊断的重要手段。但是，某些不同组织或肿瘤组织的弛豫时间差别较小，成像时很难获得足够的信号差，造成 MRI 诊断困难，不能进行动态扫描和测定器官的功能等缺陷，因此需在被检测对象中加入一类能改变氢质子弛豫时间的物质来提高磁共振成像的敏感性和分辨率，这种物质被称为磁共振成像造影剂。临床上50%以上的磁共振扫描需要用造影剂来增强成像对比度。

治疗感染性疾病抗体药物的概况及趋势

感染性疾病是指由致病微生物（细菌、病毒等）侵袭人体，从而引起机体发生一系列感染性临床症状的疾病。感染性疾病涉及范围广，影响全身各个器官和系统，严重威胁着人类的健康和生命。目前对于细菌感染，一般采用抗生素治疗，但是越来越多的耐药性菌株，尤其是超级细菌的出现，抗生素治疗受到了很大的挑战。同时对于病毒引发的感染，目前并无很好的预防和治疗措施。单克隆抗体药物具有特异性高，副作用小等优点，可以通过中和病毒、中和毒素、杀伤感染细胞、吞噬调理作用等多种方式抑制病原微生物感染，受到了越来越多的关注。近年来，抗感染抗体药物研究发展迅速，截止到2016年9月已经有25种抗感染单抗药物正在进行临床研究（表1）。

抗菌肽来源、分类方式、生物学活性、作用机制及应用研究进展

近年来，抗生素的滥用引发大量耐药菌株产生、抗生素疗效下降等一系列问题，严重威胁着人类和动物的健康。作为抗生素的一类可能替代物，抗菌肽（antimicrobial peptides， AMPs）具有广谱抗菌活性，对部分病毒、寄生虫、肿瘤细胞等也具有抑杀作用，且不易产生耐药性，在医学、兽医学和生命科学等研究领域有着良好的应用前景。本文从抗菌肽的来源、分类方式、生物学活性、作用机制和应用研究等几个方面，综合阐述了国内外关于抗菌肽的研究动态。

多靶点药物治疗前列腺癌研究进展

前列腺癌是男性群体中常见癌症，在所有癌症种类中，其致死率位列第六[1]。治疗早期前列腺癌常用外科手术摘除和放射疗法然后辅以药物治疗，但是对于去势性抵抗前列腺癌（castration resistant prostate cancer，CRPC），药物治疗仍然是首选策略。根据与前列腺癌有关的生物信号通路及靶标来开发抗前列腺癌药物是目前该类药物研发的常用方法。随着技术的进步，越来越多的研究表明，药物的多靶点效应是药物发挥药效的不可或缺的因素[2]（图1）。多靶点药物的研发近年来日益受到研究者的重视，尤其是针对癌症、神经退行性疾病以及心血管疾病等发病机制复杂的疾病，多靶点药物拥有独特优势[3]。本文回顾了近几年多靶点药物在治疗前列腺癌领域的研究及应用进展，以期能帮助研究者进一步认识该领域的相关情况。

应用新型药物递送系统预防和治疗生物被膜所致感染

在抗菌领域研究之初，人们认为细菌在体内呈单个存在且浮游生长。科学家将可抑制体外培养的浮游致病菌生长和繁殖的抗生素应用于体内病原菌感染的治疗，取得了良好的治疗效果。后来，随着抗生素的广泛使用，临床发现抗生素药物在体内的抗菌效果大不如前。在20世纪初期，科研人员对细菌生长状态重新进行了研究，陆续发现多种细菌可集聚存在于自身所产生的胞外聚合物内，且黏附于外界活性或非活性材料表面生长[1]。这种胞外聚合物与细菌共存的物质被称为生物被膜[2]。胞外聚合物对其内部的致病菌具有保护作用，从一个方面解释了致病菌耐药性产生的原因。

生物信息学分析mircoRNA在乳腺癌中的调控网络

生物信息学是指综合应用信息科学、数学的理论、方法和技术来管理、分析和利用生物分子数据的一门科学。科学地利用生物分子数据及其分析结果，可以大大提高研究和开发的科学性及效率[1]。miRNA（mircoRNA）是一类由内源基因编码的长度为20~24个核苷酸的非编码单链小分子RNA。miRNA 能够与靶信使 RNAs（mRNAs）3'-端非翻译区（3'-UTR）互补配对，阻碍 mRNA 翻译或使其稳定性降低而被降解，从而参与到转录后调控[2]。近年许多研究表明， miRNA 在肿瘤的发生发展中起着重要的作用[3-4]。乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤之一，是发达国家中引起女性死亡的第二大癌症（在发展中国家位居第一）[5]。已有大量文献报道，多种 miRNAs 在乳腺癌的发生、发展及肿瘤的治疗过程中发挥着重要的作用[6-8]。因此，探讨 miRNA 在乳腺癌细胞中的分子调控机制，能够为抗癌策略提供新的思路。

多囊卵巢综合征生物样本库建设及管理

多囊卵巢综合征（polycystic ovary syndrome，PCOS）是育龄女性常见的一种生殖内分泌疾病，影响世界5%~10%的育龄妇女[1]，其临床表现呈多态性，包括月经紊乱或稀发、闭经，多毛和肥胖，伴卵巢多囊性增大等。PCOS 与不孕和肥胖有关，可增加患 II 型糖尿病、胰岛素抵抗、高血压、氧化应激、血脂异常和心血管等疾病的终身风险[2]， PCOS 的研究已经取得了很大的进展，但是发病机制至今不明，目前认为是环境[3]和遗传因素[4]的共同作用的结果。PCOS 基因组研究揭示异常基因改变参与多方面生物过程，主要包括细胞分化[5]、细胞增生[6]、细胞凋亡[7-8]、基因[9]及蛋白表达[10]等。明确多囊卵巢综合征发生发展的机制、个性化治疗方案、疗效的随访、药物敏感性研究及新药研发等离不开大量的生物样本，因此，江苏省苏北人民医院建立了高质量、标准化、规范化、信息化的多囊卵巢综合征生物样本库。

生物交叉领域专利中技术领域跨度对创造性的判断浅析

三步法是判断专利是否具有创造性的常规方法，所谓三步法是指，第一步确定接近的现有技术；第二步确定发明的区别特征和发明实际解决的技术问题；第三步判断要求保护的发明对本领域技术人员来说是否显而易见[1-2]。在确定接近的现有技术的第一步中提到了“应首先考虑技术领域相同或相近的现有技术”。通常来说，比较容易判断技术领域是否相同，但对于技术领域是否相近，以及相近程度如何，《专利审查指南》中并没有给出明确的解释，在实际操作过程中会因领域差异、技术发展状况、技术转移难度、技术效果的可预期性等因素的影响而产生不同的理解[3-4]，因此对专利申请创造性的判断带来了一定的困扰。C12M 领域是指酶学或微生物学装置，这类装置一般用于生物学培养、检测、制备、控制等，不仅主要利用或基于生物学原理，还需要借助于机械、光学、电学、计算机、通讯等领域的技术知识或技术手段，因此对于其相近技术领域的判断更加困难，如生物反应器中的搅拌装置与化学反应器中的搅拌装置、建筑机械中的搅拌装置、家用电器中的搅拌装置是否属于相近领域？这些问题需要结合实际情况和技术特定、发明构思进行具体判断，为了解决这一困境，本文试图通过实际案例，并参考法院判例，美、日、欧审查意见进行讨论，希望对 C12M 领域相关专利的申请和审查提供帮助。

美国、欧盟、日本细胞治疗监管政策研究

生物治疗作为外科手术、药物治疗、放射治疗之后的第四大治疗技术，已经得到全球的广泛认同。生物治疗主要由细胞治疗、基因治疗、组织工程等领域组成，其中细胞治疗由于发展的快速性和重要性，引起了科学界与临床应用的更多关注。作为一个冉冉升起的新兴医药产品领域，细胞治疗受到了全球发达国家政府的战略重视和投入，也成为产品研发和风险投资关注的热点领域。目前以干细胞治疗和免疫细胞治疗为主流的细胞治疗产品在人类疾病治疗中的地位和价值已经初步显现，尤其是在众多未满足需求的难治性疾病领域，如恶性肿瘤、疑难重症的治疗和严重创伤修复的再生医学领域，细胞治疗已经成为弥补传统治疗不可或缺的有效手段。对于一些传统药物或治疗手段束手无策的重大疾病，如重症肝病、移植物抗宿主病（GvHD）、肾移植排斥、系统性红斑狼疮、帕金森病、老年痴呆等，细胞治疗均显示出了明确的疗效。

干细胞制剂制备质量管理自律规范

干细胞研究是近年来医学前沿重点发展领域，给一些疑难疾病的治疗提供了希望，受到各国政府与学术界高度关注。近我国科技部公布的国家重点研发计划2017年度项目，干细胞及转化研究再次成为重点支持的专项。为了规范干细胞临床研究，2011年以来国家卫生行政和药品管理部门开始对干细胞临床研究和应用进行规范整顿，并于2015年8月由国家卫生计生委、食品药品监管总局联合发布了《干细胞临床研究管理办法（试行）》和《干细胞制剂质量控制及临床前研究指导原则（试行）》，为干细胞临床研究的规范开展奠定了政策基础。

对《抗菌药物临床应用指导原则（2015年版）》的不同意见

时隔11年，新版《抗菌药物临床应用指导原则》2015年正式颁布[1]，对临床抗菌药物应用有巨大的指导意义。随着我们对新版指导原则学习的深入，发现本指导原则仍存在一些问题，特此提出，敬请同道指正。

《中国医药生物技术》2016年第11卷关键词索引