中国医药生物技术杂志
Chinese Medicinal Biotechnology 중국의약생물기술
- 主管单位： 中华人民共和国卫生部
- 主办单位： 中国医药生物技术协会
- 影响因子： 0.36
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1673-713X
- 国内刊号： 11-5512/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
-
超声微泡造影剂携带PE38生物毒素杀伤血管内皮细胞的实验研究
目的 研究超声微泡造影剂PLGA-COOH联合生物毒素PE38对内皮细胞的杀伤效应.方法 制备超声微泡造影剂PLGA-COOH,包裹生物毒素PE38后形成复合物,将血管内皮细胞分为空白对照组、辐照微泡组、PE38组、复合物组、辐照复合物组,以TUNEL实验检测凋亡指数,以Western blot实验检测cleaved caspase-3,并进行组间比较.结果 TUNEL结果显示:辐照微泡组细胞凋亡与空白对照组无显著差异(P=0.946);PE38组细胞凋亡较空白对照组显著增加(P<0.001);复合物组细胞凋亡较PE38组显著下降(P<0.001),较空白对照组显著增加(P<0.001);辐照复合物组细胞凋亡较PE38组显著增加(P<0.001).蛋白检测结果与凋亡检测相符.结论 超声造影剂微泡复合物联合生物毒素杀伤血管内皮细胞具有较高的安全性、特异性及有效性,是一种具有前景的肿瘤血管杀伤方法.
-
重组蛋白AdipoR1-EGFP真核表达质粒的构建和表达
目的 构建重组pEGFP-N1-AdipoR1真核表达质粒并于HEK293T细胞中瞬时表达.方法 提取HepG2细胞总RNA,逆转录合成cDNA,以其为模板,PCR扩增AdipoR1基因,将其插入到pEGFP-N1质粒中,构建重组真核表达质粒pEGFP-N1-AdipoR1,通过脂质体法转染HEK293T细胞,采用酶标仪测定荧光强度,Western blot方法鉴定融合蛋白AdipoR1-EGFP的表达情况.结果 Western blot结果显示,融合蛋白AdipoR1-EGFP在分子量约70 kD处可见明显的目的条带;同时,与未转染质粒的空白对照组相比,转染pEGFP-N1和pEGFP-N1-AdipoR1的细胞中荧光强度都有明显升高,表明融合蛋白AdipoR1-EGFP在HEK293T细胞中成功表达,并且EGFP的荧光强度测定能很好地反映细胞中融合蛋白的表达水平.结论 构建并表达AdipoR1-EGFP融合蛋白,所采用的EGFP融合蛋白表达方法简单高效,重复性好,为今后AdipoR1蛋白的表达及功能研究提供了重要参考.
-
人肝细胞核因子4基因 Ⅱ 型启动子的双向转录调控的特性
目的 探讨人肝细胞核因子4α基因Ⅱ型启动子(hHNF4α-P2)双向调控基因表达的作用.方法 克隆hHNF4α-P2–23~–1291(1268 bp)序列;构建由该段正、反序列驱动的荧光蛋白真核表达载体;将其通过细胞转染和显微注射导入细胞或斑马鱼体内,考察其表达的时空特性.通过DNA缺失实验和序列预测分析寻找hHNF4α-P2的正、反向核心启动序列.结果 hHNF4α-P2的正向和反向DNA序列(–23~–1291)均可驱动其下游报告基因在人正常肝细胞L02及肝癌细胞Huh7中表达;在斑马鱼体内正向启动子驱动的红色荧光蛋白基因可在耳石、嗅泡和神经丘等感觉器官中高表达,在肝区可见较弱的红色荧光.反向启动子驱动的绿色荧光蛋白基因可在血细胞、神经细胞、体节及脊索等组织表达.该启动子正链存在一段核心序列,反链存在两段核心序列.结论 首次发现hHNF4α-P2的 –23~–1291序列具有双向调控基因在不同组织表达的功能.
-
新型酰腙席夫碱类化合物的设计、合成及抗结核活性研究
目的 设计合成新型酰腙席夫碱类化合物,并评价其体外抗结核分枝杆菌活性.方法 以羟基苯甲醛为起始原料,经酰肼化、脱水缩合反应制备目标化合物,其结构均经MS和1H-NMR分析确证.采用平皿二倍稀释法测定目标化合物体外抗结核杆菌标准株(H37Rv)的小抑菌浓度(MIC).结果 合成20个新型酰腙席夫碱类化合物,部分化合物具有一定的抗结核活性,其中化合物b1~b5具有较好的体外抗结核分枝杆菌活性,化合物b2、b3和b5体外抗结核分枝杆菌活性(MIC<0.125μg/ml)是先导化合物IMB-HC109(MIC=0.25μg/ml)的2倍以上.结论 目标化合物结构中A部分含有2-吡啶羰基或4-吡啶羰基片段,B部分含有3-苯甲醚或4-苯甲醚片段,C部分含有吡啶基片段有利于提高该类化合物体外抗结核活性,其中化合物b2、b3和b5的体内抗结核分枝杆菌活性值得进一步研究.
-
新颖糖基转移酶对抗菌药物金霉素的糖基化修饰
目的 发掘新颖糖基转移酶并对金霉素进行糖基化修饰.方法 对来源于木立芦荟的重组糖基转移酶进行金霉素糖基化功能筛选,发现重组AaGT1能催化金霉素与葡萄糖糖基供体进行反应.放大反应液经乙酸乙酯萃取去除未反应底物,剩余含糖基化产物的水相部分采用反相半制备HPLC技术进行分离纯化.通过质谱和核磁共振波谱等技术对产物结构进行鉴定;对底物与糖基化产物的水溶性进行测定,并评价两者抑菌活性.结果 糖基转移酶AaGT1催化金霉素获得两个金霉素异构体的糖基化产物,异金霉素10-O-β-D-葡萄糖苷和4-差向异金霉素10-O-β-D-葡萄糖苷.异金霉素10-O-β-D-葡萄糖苷的水溶性是盐酸金霉素水溶性的3.3倍;糖基化产物对金黄色葡萄球菌没有明显的抑制活性.结论 糖基转移酶AaGT1对金霉素能够进行糖基化,产物异金霉素10-O-β-D-葡萄糖苷和4-差向异金霉素10-O-β-D-葡萄糖苷均为新化合物,对底物进行糖基化修饰能提高其水溶性.
-
壳聚糖流体敷料膜的制备及其促伤口愈合的研究
目的 探讨壳聚糖流体敷料膜的透气性、阻菌性、促伤口愈合等效果.方法 制备壳聚糖流体敷料膜,对其透气、阻菌、皮肤刺激、细胞毒性等性能进行考察,建立家兔伤口模型,以创面愈合时间、创面愈合率为指标,评价其促伤口愈合能力.结果 壳聚糖流体敷料膜能在9 min内成膜,透气率为(2431±63)g/(m2·d),具有阻菌性,良好的细胞相容性、无皮肤刺激性,在促伤口愈合方面,实验组、阳性组和阴性组创面愈合时间分别为(12.88±0.71)、(15.67±0.41)、(17.17±0.61)d(P<0.05).与对照组相比,实验组在伤后各时间点的创面愈合率明显提高(P<0.05).结论 壳聚糖流体敷料膜具有良好透气性、阻菌性,无皮肤刺激性及具有促伤口愈合的能力,在医用敷料领域具有一定应用价值.
-
羧胺三唑联合地塞米松有效缓解小鼠过敏性气道炎症
目的 评价羧胺三唑(CAI)联合地塞米松对小鼠过敏性气道炎症的治疗效果,为哮喘性疾病探索安全、有效的联合用药方案.方法 将小鼠分为对照组、模型组、40 mg/kg CAI治疗组(CAI40)、低剂量地塞米松治疗组(DL)、高剂量地塞米松治疗组(DH)、低剂量地塞米松联合20 mg/kg CAI治疗组(DL20)、低剂量地塞米松联合40 mg/kg CAI治疗组(DL40).建立过敏性哮喘模型,取肺泡灌洗液(BALF),ELISA法检测其中IL-4、IL-13、IFN-γ 水平;计BALF中总细胞数和嗜酸性粒细胞数;ELISA法检测血清中IgE水平;取左肺切片,HE染色后观察肺组织病理水平改变.结果 与对照组相比,模型组小鼠呈现出明显的气道炎症反应,包括BALF中IL-4、IL-13水平及炎性细胞数明显升高,而IFN-γ 水平显著降低,血清中IgE水平显著升高,肺组织病理切片的HE染色结果呈现出明显的炎症细胞聚集浸润.与模型组相比,各治疗组均有缓解炎症的效果.联合用药组小鼠的BALF中IL-4、IL-13水平及炎性细胞数均低于CAI40组和DL组,而IFN-γ 水平高于三个单药治疗组.联合用药组血清中IgE水平均低于三个单药治疗组.肺组织病理结果显示,联合用药组的肺组织炎症细胞浸润、杯状细胞增生、气道平滑肌增厚等气道重塑程度均低于CAI40组和DL组,与DH组相当.结论 低剂量地塞米松联合低、高剂量羧胺三唑对卵清蛋白诱导的小鼠过敏性气道炎症有良好的治疗效果,比单药治疗组表现出更强的抗炎作用.因此,适当降低地塞米松剂量,通过联合羧胺三唑来治疗过敏性气道炎症,减少地塞米松耐药性和依赖性等不良反应,或可成为治疗过敏性气道炎的一种新方法.
-
抗体类药物在非小细胞肺癌中的临床评价进展
肺癌在我国恶性肿瘤发病率及死亡率均位于第 1 位[1],其中非小细胞肺癌(non-small-cell lung cancer,NSCLC)占肺癌总数的 80% ~ 85%[2].NSCLC 包括腺癌、鳞癌、大细胞癌三类,与其他恶性肿瘤相比,大部分肺癌患者确诊时已经失去了手术的机会,以药物治疗为主的全身姑息治疗是目前肺癌治疗的重要手段.近 10 年来,随着靶向治疗特别是免疫治疗的兴起,抗体类药物在治疗 NSCLC 上取得巨大成功,贝伐单抗和派姆单抗更是获得 FDA 批准用于一线治疗非小细胞肺癌.作为一名从事生物大分子药物开发的专业研究人员,作者就已上市的相关抗体类药物(表 1)在NSCLC 中的临床研究作简要概述.
关键词： -
维生素D受体及其基因多态性与哮喘相关性的研究进展
支气管哮喘(简称哮喘)是一种多因素引起的以气道高反应、慢性气道炎症和可逆性气道阻塞为特征的异质性疾病,发病率逐年上升[1],已成为威胁儿童健康常见的慢性肺部疾病[2-3],但是在不同群体、不同环境因素和不同基因作用下,哮喘发生的过程不同.维生素 D 是人体生长发育所必需的,在钙磷代谢和骨骼重塑中发挥决定性作用.目前越来越多的研究表明,维生素 D 是免疫系统反应的重要调节剂,它通过维生素 D 受体(VDR)发挥免疫调节作用,在自体免疫和炎性疾病[4-5]中起重要作用,包括哮喘以及过敏性疾病[6-8].越来越多的学者重视从哮喘易感基因水平防治哮喘,已有研究表明许多基因参与哮喘的发生发展[9-10].
关键词： -
线粒体与体细胞核移植
1996 年克隆羊"Dolly"在英国诞生.此后,体细胞核移植(somatic cell nuclear transfer,SCNT)技术广泛应用于克隆动物和转基因动物研究,迄今已有 10 多种不同物种的克隆动物相继问世.然而,克隆效率偏低以及克隆动物表征缺陷是一直存在的问题.核质的互作与协调是所有细胞正常活动的基础,克隆胚重编程和正常核型的维持取决于供体核与受体卵母细胞的同步协调和相互作用[1].作为细胞能量来源的线粒体是哺乳动物细胞中唯一具有自身遗传物质的细胞器,其正常功能的行使受到核基因组和线粒体基因组的共同调控.在核移植实验中,卵母细胞的线粒体 DNA (mitochondria DNA,mtDNA)与供体细胞的核 DNA 能否有效地协同工作是影响核基因组重编程效率的一个重要因素.mtDNA 在不同物种之间、同一物种不同个体间均存在大量的核苷酸差异,这种由 mtDNA 多态性产生的不同mtDNA 单倍型也可导致种内核-线粒体互作产生不同效应.此外,克隆胚胎中,存在受体卵母细胞和供体细胞两种来源的线粒体,这两种线粒体的相互作用影响着重构胚的发育.本文对 SCNT 中线粒体的功能与特性以及两种来源的线粒体的异质性及其对克隆效率和重构胚发育的影响进行综述和讨论.
关键词： -
更优生物创新药——长效重组人血清白蛋白融合蛋白
更优生物药是指治疗用生物制品蛋白质药物,其可通过生物药经化学分子修饰、或蛋白质与小分子药物化合价偶联,形成新的物理结构或改善构象,或通过生物药物与蛋白质、生物药物之间的基因融合以达到延长生物药物在体内半衰期、或达到生物药物可定向作用于药靶为目的所研制的创新生物药.白蛋白与生物药形成的融合蛋白,抗体、抗体片段(Fc)与生物药形成的融合蛋白的研制都属于更优生物药研发领域.生物药基因融合形成二聚体融合蛋白,白蛋白-紫杉醇偶联以及聚乙二醇修饰的生物药则也可归类于更优生物药,但它们不属于药物分子结构的创新,而是属于化学修饰类药物创新.
关键词： -
金黄色葡萄球菌噬菌体效价测定方法的建立
金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)是引起人类及动物化脓性感染的常见致病细菌,是引起烧伤患者创面感染的主要病原体.对于金黄色葡萄球菌感染的治疗药物,人们一直在努力探索.自从 1928 年 Fleming 发现青霉素, 20 世纪 40 年代用于治疗金黄色葡萄球菌后不久,即出现耐青霉素的金黄色葡萄球菌.20 世纪 50 年代,Beecham发现了耐青霉素酶的 β-内酰胺类药物甲氧西林,但仅仅几年后,耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(methicillin-resistan Staphylococcus aureus,MRSA)就相继在欧洲和美国出现[1].20 世纪 80 年代以后,MRSA 感染呈现上升趋势,甚至引起医院的暴发流行[2-3].万古霉素曾被誉为抗感染治疗领域的"后一道防线",但从 1996 年至今,全球范围内已报道多例对万古霉素耐药的病例,引起医学界的高度重视[4-5].目前,需要一种不同于抗生素的新型金黄色葡萄球菌感染治疗方法.
关键词： -
盐酸左氧氟沙星注射液灭菌前已灌封样品微生物限度检查方法学的建立
盐酸左氧氟沙星为氧氟沙星的左旋体,其抗菌活性约为氧氟沙星的两倍,主要作用机制为抑制细菌 DNA 旋转酶的活性,阻碍细菌 DNA 复制,对大多数革兰阴性菌和革兰阳性菌均有较强的抗菌作用[1].因其抗菌谱广,抗菌作用强,维持时间长,疗效高,不良反应轻微,临床应用范围广泛[2].
关键词： -
人成体神经干细胞长期培养后遗传稳定性研究
神经干细胞因具有自我更新、增殖和多向分化潜能[1],神经干细胞移植已成为治疗神经系统的损伤和神经退行性疾病的新方法[2-5].但神经干细胞的体外培养仍存在许多技术难点,培养过程中细胞易分化或凋亡,难以长期培养[6].且培养过程中易产生遗传漂变、微生物污染、细胞交叉污染等问题[7].培养传代时,一般使用化学性酶,如胰蛋白酶等分离神经干细胞球,酶的多次使用对长期培养的神经干细胞可能产生累积损伤[8-11].因此,经体外长期培养后神经干细胞的增殖分化能力,尤其是遗传信息稳定性依然未知.我们以物理方法切割分离神经干细胞球,并改良了神经干细胞培养液,成功实现神经干细胞的体外长期培养[12].但该方法是否存在遗传不稳定性仍需要进行研究.本文通过对体外传代培养不同时间的神经干细胞进行短串重复序列(STR)分析和端粒酶活性鉴定,为神经干细胞的体外长期培养的遗传稳定性提供实验依据.
关键词： -
浅析新政策形势下我国科研机构医药科技成果转化的影响因素
促进科技成果转移转化是实施创新驱动发展战略的重要任务,是加强科技与经济紧密结合的关键环节,对于推进结构性改革尤其是供给侧结构性改革、支撑经济转型升级和产业结构调整,打造经济发展新引擎具有重要意义.为此党中央、国务院实施了一系列重大决策部署.2015 年 8 月31 日,第十二届全国人民代表大会常务委员会通过了新修订的《中华人民共和国促进科技成果转化法》,加快推动科技成果转化为现实生产力,依靠科技创新支撑稳增长、促改革、调结构,进一步为科技成果的转化提供了法律保障[1].2016 年 2 月 26 日国务院印发实施《中华人民共和国促进科技成果转化法》若干规定,进一步明确支持科技成果转移转化的政策措施,促进科技与经济深度融合.鼓励研发机构、高校、企业等创新主体及科技人员转化科技成果,推进经济提质增效升级[2].
关键词：
