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两种二重染色法进行胎仔骨和软骨畸形检查的对比研究
胎仔骨骼畸形检查是基础毒理学中评价化学物是否具有发育毒性的重要内容.而刚出生的胎仔骨骼只有部分被骨化,另一部分骨骼仅以软骨的形式存在.传统的毒理学骨骼畸形检查方法只能使硬骨组织着色,因此仅能检查硬骨组织畸形的变化,而不能观察出软骨组织是否有畸变[1].因此不能全面的衡量化学物质是否具有致骨骼畸形的作用.本研究采用了两种二重染色法对胎仔进行了骨骼及软骨染色检查,比较了两种方法染色的效果及获得标本的质地,为今后进行胎仔骨骼畸形检查时方法的选择提供实验依据.
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针刺压穴二步法治疗落枕32例
笔者采用先循经针刺远道腧穴养老,再按压反阿是穴的"针刺压穴二步法"治疗落枕,现报道如下.1 临床资料32例患者均来自聊城大学医院康复中心门诊,其中男20例,女12例;年龄小18岁,大62岁,平均27.8岁;病程短3 h,长5天,平均2.1天.
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程控降温法与二步法对胎盘间充质干细胞冻存效果的影响
目的 观察对比程控降温法与二步法对胎盘间充质干细胞深低温冻存效果的影响.方法 分别采用程控降温法和二步法对3个批次的pMSCs进行液氮冻存,3个月后进行复苏,测定细胞存活率、活细胞数,观察体外培养1~4 d时的细胞形态,CCK8法进行细胞增殖检测,同时用流式细胞术鉴定细胞表面标记抗原,用油红O染色、茜素红S染色和Masson染色进行细胞三向分化能力鉴定.结果 程控降温法对比二步法冻存的细胞活率在冻存前、复苏后均无显著差异(P>0.05).倒置显微镜观察细胞形态,均在24 h时贴壁,呈短梭形,96 h时细胞密度达到95%左右,均匀铺满视野.增殖测定结果显示,培养第3~5天为两组细胞的对数生长期,第5天时增殖倍数达到高,分别为第1天的6.44倍和6.29倍,经过短暂的平台期后进入衰亡期,增殖趋势一致;但分别在第4天(P<0.01)、第6天(P<0.05)和第7天(P<0.05)时,程控降温法冻存的细胞存活率极显著或显著高于二步法冻存的细胞.两种方法冻存细胞的表面标志性抗原CD73、CD90、CD105阳性细胞数百分比分别为99.85%、99.87%、96.45%和99.73%、99.73%、96.17%.诱导14 d后两组pMSCs均出现明显的成脂、成软骨、成骨细胞特性.结论 采用程控降温法或二步法冻存pMSCs均能很好地维持细胞活力及生物特性,在条件允许情况下宜采用程控降温法,以获得增殖能力更好的种子细胞.
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检测乙型肝炎病毒e抗体的影响因素
目的 探讨当乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)和乙型肝炎病毒e抗体(抗-HBe)同时阳性,用改进的酶免疫竞争(EIA)二步法复查抗-HBe的必要性.方法 使用EIA二步法检测HBeAg和抗-HBe同时阳性的标本,结果同一步法进行比较.结果 用EIA一步法与二步法检测抗-HBe的吸光度(A)值,二者差异有非常显著性(P<0.001).结论 用EIA一步法检测抗-HBe易出现前带现象而导致假阳性,建议用改进二步法检测.
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乙肝表面抗原假阴性结果的分析
乙肝标志物(HBV-M)五项指标[乙肝表面抗原(HbsAg)、乙肝表面抗体(抗-HBs)、乙肝e抗原(HbeAg)、乙肝e抗体(抗-Hbe)、乙肝核心抗体(抗-HBc)]是临床常用的检测项目,我们在实际工作中用酶联免疫吸附(ELISA)一步法发现HBeAg及抗-HBc阳性血清而HBsAg呈阴性反应;用传统的反向间接血凝二步法(R-PHA)检测呈不同滴度的阳性反应,对此我们分析了2004年~2005年1 015份血清,现报告如下.
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检测乙型肝炎表面抗原的一步法试剂的钩状效应分析
卫生部下发的<血站管理办法(暂行)>中规定,对献血者血液乙型肝炎病毒(HBV)检测的质量标准是"HBV表面抗原(HBsAg)酶免疫吸附法(ELISA):阴性",但未要求用一步法还是二步法检测.目前,国内检测HBsAg绝大多数采用ELISA中的双抗体夹心双位点一步法.用该方法检测HBsAg,当标本中的HBsAg浓度过高时,会因钩状效应(Hook)现象出现假阴性,而造成漏检,增加输血传播HBV的风险度,严重威胁输血安全.HBVe抗原(HBeAg)和HBV核心抗体(HBcAb)两项阳性时,大多数HBsAg都为阳性,但HBsAg阴性也可能存在漏检问题.为此,我们将对HBeAg和HBcAb两项阳性的血清标本进行不同比例稀释后,再用一步法和二步法进行分别检测及比较,以探讨一步法试剂的HOOK在HBsAg检测的漏检情况和二步法的临床应用意义及价值.
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酶免疫竞争一步法检测抗乙型肝炎病毒核心抗体的影响因素探讨
乙型肝炎病毒(HBV)e抗体(抗-HBe)是观察乙型肝炎大三阳疗效和传染性强弱的指标之一.以往我们使用酶免疫竞争(EIA)二步法检测抗-HBe[1],反应时间相对较长.而近几年普遍使用EIA一步法检测抗-HBe,操作简便,反应时间仅需30 min,但易出现HBVe抗原(HBeAg)、抗-HBe同时阳性或同时阴性,对此我们进行了研究.
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胰腺癌组织中COX-2和Bcl-2蛋白的表达及其意义
目的:通过检测环氧化酶-2(COX-2)和Bcl-2蛋白在不同胰腺组织中的表达,探讨COX-2和Bcl-2蛋白在胰腺癌发生发展过程中的作用及其意义.方法:应用免疫组织化学方法PicTureTM通用型二步法检测47例胰腺癌、12例胰腺导管上皮内肿瘤(PIN)和10例正常胰腺组织中COX-2和Bcl-2蛋白的表达.结果:在10例正常胰腺组织中COX-2阳性表达2例,Bcl-2蛋白阳性表达9例;COX-2在PIN和胰腺癌中均呈高表达,分别为75%和68%,明显高于正常胰腺组织(P<0.05).Bcl-2蛋白在PIN组织中阳性表达者占83%,与正常胰腺组织相近(P>0.05),明显高于在胰腺癌组织中47%的阳性表达(P<0.05).胰腺癌组织中COX-2和Bcl-2蛋白的表达呈明显负相关(r=-0.4552,P=0.005).结论:COX-2在PIN和胰腺癌组织中高表达与胰腺癌的发生密切相关,Bcl-2蛋白在胰腺癌发生早期起作用,二者在胰腺癌组织中的表达呈明显负相关.
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人胰腺癌组织中Th2类细胞因子的优势表达及其临床意义
目的:观察Th1/Th2类细胞因子在胰腺癌组织中的表达模式及临床意义.方法:以IFN-γ和IL-2代表Th1类细胞因子,IL-4和IL-10代表Th2类细胞因子.收集45例胰腺癌患者的手术切除组织蜡块,以免疫组织化学PV-9000通用型二步法染色,DAB显色试剂盒显色,检测胰腺癌组织中Th1/Th2类细胞因子的表达.结果:IFN-γ和IL-2在胰腺癌和正常胰腺组织中的表达无明显差异(P>0.05),说明Th1类细胞因子在胰腺癌和正常胰腺组织中的表达无明显差异;IL-4和IL-10在胰腺癌组织中的表达明显高于正常胰腺组织(P=0.022<0.05;P=0.023<0.05),说明Th2类细胞因子在胰腺癌组织中的表达明显高于正常胰腺组织.结论:胰腺癌组织中Th2类细胞因子呈优势表达状态,这可能是肿瘤免疫逃逸的机制.
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β-catenin,cyclin D1和c-myc在大肠癌组织中的表达
目的:探讨β-catenin(p连环素)在大肠癌的表达及其与癌基因eyelinDl和C-myc的关系.方法:应用免疫组化PowervisionTM二步法,检测25名正常人大肠黏膜,42例大肠腺瘤和58例大肠癌组织β-catenin,cyclinDl和C-myc的表达情况.结果:正常大肠黏膜β-catenin胞膜阳性表达,cyclinDl和C-myc阴性.大肠腺瘤和大肠癌组织β-catenin呈胞质和/或胞核异位表达,大肠癌异位表达率为65.5%,显著高于大肠腺瘤(42.9%,P<0.05).大肠癌cycbnDl和C-myc阳性率分别为74.1%、70.7%,均显著高于大肠腺瘤(45.2%,33.3%;P均<0.01).大肠癌中pcatenin与cycunDl和C-myc表达呈明显正相关(r=0.32,O.57;P<O.05,P<0.01).结论:β-catenin异位表达可能是原癌基因cyclinDl和C-myc激活的原因之一,并在大肠癌发生过程中可能起重要作用.
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胰腺癌组织中nm23和PCNA的表达及临床意义
胰腺癌发病隐匿,恶性程度高,早期诊断困难,并且对各种辅助治疗敏感性不高[1],生存率低,是预后差的恶性肿瘤之一[2].为探讨胰腺癌生物学行为与nm23和PCNA表达的关系,本实验应用免疫组织化学PV-9000通用型二步法检测41例胰腺癌组织中nm23和PCNA的表达情况,并探讨二者的表达与病理学分级、临床分期之间的关系.
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层粘连蛋白及其受体在卵巢癌组织中的表达及其临床意义
肿瘤转移扩散是卵巢癌患者死亡常见的原因.层粘连蛋白(LN)作为细胞外基质和基底膜的重要组织成分,与肿瘤细胞表面的层粘连蛋白受体(LNR)结合,在肿瘤浸润、转移中发挥重要作用[1].本研究采用免疫组织化学(组化)EnVision二步法检测了正常卵巢、良性卵巢肿瘤和卵巢癌组织中LN及其相对分子质量为67 000的受体(67LNR)的表达,探讨其与卵巢癌病理分化程度、临床分期、腹水形成和转移的关系.
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检测乙型肝炎表面抗原一步法试剂的钩状效应分析
目的:探讨一步法试剂的钩状效应(HOOK)在乙肝病毒表面抗原(HBsAg)检测的漏检情况和二步法的临床应用价值.方法:对乙肝病毒e抗原(HBeAg)和乙肝病毒核心抗体(HbcAb)两项阳性,而HB8Ag阴性的血清标本进行不同比例稀释,分别用一步法和二步法进行检测和比较.结果:在10份HBeAg和HBcAb两项阳性的血清样品中,二步法检测8份HBsAg阳性,而一步法在不同稀释度时,则检出不同的结果.结论:用一步法检测会因HOOK出现假阴性导致漏检,建议检测乙肝表面抗原用二步法替代一步法.
关键词: 双抗体夹心双位点一步法 钩状效应 二步法 乙肝病毒表面抗原 -
二步法检测生活饮用水总大肠菌群的方法评价
目的 通过生活饮用水中总大肠菌群检测结果的比较,确定二步法代替三步法的可行性.方法 参照GB5750.12-2006(生活饮用水标准检验方法微生物指标)2.1多管发酵法.结果 二步法与三步法阳性符合率为94.52%,两组阳性率比较结果差异无统计学意义(P>0.05).结论 笔者认为对于初发酵产酸、产气,平板分离菌落典型(非紫黑色),革兰染色阴性,不经复发酵直接报出结果,适用于大量水质检样的处理,可提高检测效率,同时满足水质监督检测的需要.
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HBsAg测定ELISA一步法与两步法的结果比较
乙型肝炎表面抗原(HBsAg)检测是临床诊断乙型肝炎病毒感染的诊断指标,也是输血前检查的重要指标之一,国内主要采用酶联免疫吸附试验(ELISA)一步法,《中华人民共和国药典》2010版三部(生物制品)2010年7月1日正式实施,HBsAg诊断试剂盒(酶联免疫法)由一步法改为两步法,我们使用某国产试剂对两种方法的灵敏度、低检出量进行试验比较,现报告如下.
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半碳酸二步法精制糖生产工艺职业病危害识别与分析
目的 分析广西地区以甘蔗为原料利用半碳酸二步法生产精制白糖工艺中的职业病危害情况,提出合理、可行的防护对策,为行政部门对甘蔗制糖生产企业的职业卫生监管提供科学依据.方法 对作业现场进行职业卫生学调查,对工作场所职业病危害因素浓度(强度)检测结果及接触职业病危害因素作业人员的职业健康检查结果进行分析.结果 与传统的碳酸法工艺相比,半碳酸二步法精制糖生产工艺较为先进,作业人员接触化学有害因素浓度基本符合职业接触限值要求,压榨、分蜜和筛分等环节噪声超标较为严重,超标率为40%.接触噪声作业人员听力损失43人,占40%.结论 噪声和高温是该工艺中需关键控制的职业病危害因素,企业应加强职业卫生管理,特别应加强对该工艺中噪声的控制.
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成人双颌前突一步法与二步法关闭间隙的比较
目的 探讨一步法和二步法滑动法关闭间隙治疗成人双颌前突的临床疗效.方法 使用X线头影测量方法对两种疗法的结果进行分析.结果 一步法与二步法治疗结果差异无统计学意义.采用一步法关闭间隙稍快于二步法,支抗丧失差异无统计学意义,牙齿松动度差异无统计学意义.结论 一步法二步法治疗结果兰异无统计学意义.对支抗的要求不需要因为一步法二步法而异.对成人正畸患者更需要考虑的问题是牙周状况.在治疗前评估牙用情况以及正畸治疗中定期进行牙用维护显得更为重要.
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ELISA检测HBsAg"后带现象"的探讨
近年来,免疫方法的不断更新,检测HBsAg已普遍采用ELISA法替代反问间接血凝法(RPHA).随之又由一步法替代二步法.无疑给操作者带来省时、简捷、快速等方便.然而被检抗原过剩,导致显色反应过淡或不显色的假阴性结果不可避免.本文对HBsAg中出现的"后带现象"做一些探讨,仅供参考.
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SP法与MaxVision法免疫组织化学染色的对比观察
免疫组织化学技术在我国开展已有二十多年,随着这项技术的不断改进和完善,已被病理学工作者广泛应用,目前已成为病理学科的常规行业技术,为病理诊断提供可靠的诊断依据.免疫组化染色方法 有多种,如SP法、ABC法、PAP法、SABC法、二步法等,我们对常用的SP三步法和MaxVision二步法进行比较,探讨其特异性和敏感性,为免疫组化染色提供更好的选择方法 .
关键词: 免疫组织化学 二步法 Max.Vision三步法 生物素 -
小肠黏膜炎性肌纤维母细胞瘤一例
患者女性,37岁,4d前无明显诱因出现腹痛,以左上腹部疼痛为主,呈持续性胀痛,疼痛不向他处放射,伴恶心、呕吐,肛门停止排便、排气,无发热,无反酸.CT示小肠占位伴肠梗阻.行部分小肠切除.标本经4%甲醛固定、常规脱水、石蜡包埋、苏木素-伊红(HE)染色,光镜观察,免疫组织化学染色采用EnVision二步法.