中国医药生物技术杂志
Chinese Medicinal Biotechnology 중국의약생물기술
- 主管单位: 中华人民共和国卫生部
- 主办单位: 中国医药生物技术协会
- 影响因子: 0.36
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 1673-713X
- 国内刊号: 11-5512/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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产毒型O1群霍乱弧菌特异性基因序列实时荧光双重TaqMan PCR快速检测体系的建立
目的 建立针对O1 群霍乱弧菌的高敏感、高特异的实时荧光双重TaqMan 聚合酶链式反应快速检测体系.方法 根据O1 群霍乱弧菌主基因组O 抗原编码基因rfb-O1 和霍乱肠毒素的A 亚基编码基因ctxA 的特异性序列设计引物及TaqMan 探针,利用便携式Smartcycler II实时荧光PCR 检测平台探讨该检测体系的敏感性,用19种其他肠道致病菌及院内感染常见致病菌评价该检测体系的特异性.结果 实时荧光双重TaqMan 聚合酶链式反应快速检测体系对O1 群霍乱弧菌的检测敏感度为1.0 × 102 拷贝每反应体系;对O1 群霍乱弧菌基因组DNA 的检测敏感度为1.0 × 10-1 pg 每反应体系;该检测体系在检测19 种其他肠道致病菌或院内感染中的常见致病菌时不存在非特异性扩增;整个反应在2 h 内完成.结论本研究建立的实时荧光双重TaqMan 聚合酶链式反应检测体系可作为产毒型O1 群霍乱弧菌特异、敏感、快速的检测手段,也可同时检测O1 群霍乱弧菌产生霍乱肠毒素的能力.
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间充质干细胞通过CCL5/CCR5信号途径促进骨肉瘤Saos-2细胞迁移和生长
目的 研究人间充质干细胞(hMSC)对骨肉瘤Saos-2 细胞迁移与增殖的影响及其机制.方法 取传代培养的hMSC 和Saos-2 细胞,分别制备hMSC 条件培养基(MSC-CM)和Saos-2 细胞条件培养基(Saos-2-CM).采用免疫荧光细胞化学方法 和双抗体夹心ELISA 方法 分别检测hMSC CCL5 趋化因子的表达及其表达水平,蛋白质免疫印迹方法 检测Saos-2 细胞CCR5 因子的表达.按条件培养基的不同将Saos-2 细胞分为4 组:含10% 胎牛血清的α-MEM 培养基(阴性对照)、Saos-2-CM(阳性对照)、MSC-CM、含24 ng/ml 兔抗人CCL5 抗体的MSC-CM(MSC-CM/anti-CCL5 Ab),应用Transwell实验和噻唑蓝(MTT)法分别检测hMSC 对Saos-2 细胞迁移与增殖能力的影响.实验均重复3 次.结果 免疫荧光细胞化学方法 和双抗体夹心ELISA 检测显示,hMSC CCL5 因子表达阳性且其表达水平为3.68 pg/ml.蛋白质免疫印迹检测显示,Saos-2 细胞CCR5因子表达阳性.Transwell 实验和MTT 检测结果 显示,MSC-CM 能明显促进Saos-2 细胞的迁移与增殖,而MSC-CM/anti- CCL5 Ab 组Saos-2 细胞的迁移与增殖能力均明显下降,2 组间差异均有统计学意义(分别为P < 0.01,P < 0.05).结论CCL5/CCR5 信号途径在hMSC 促进Saos-2 细胞迁移与增殖过程中发挥关键作用,抑制CCL5 趋化因子的表达可明显降低Saos-2 细胞的迁移与增殖能力.
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应用四唑鎓盐法快速检测卡介苗活菌含量
目的 通过四唑鎓盐(XTT)方法 快速检测卡介苗样品中的活菌含量,结果 与传统培养法菌落形成单位计数结果 进行相关性分析,探讨应用XTT 方法 快速检测卡介苗(BCG)制品中的活菌含量的可行性.方法 活菌含量是BCG 疫苗重要的质控指标,它决定疫苗的效力.传统活菌含量的检测采用固体培养法计数菌落形成单位,但耗时长,重复性差.因此快速检测卡介苗活菌含量的方法 急需建立和应用.四唑鎓盐(XTT)由于其水溶性的显色反应能够反映细胞的活力,同样也能应用于细菌的活力检测.其原理是细菌在代谢过程中,通过氧化-还原反应将XTT 还原为可溶性的高色产物甲臢(formazan),甲臢含量反应了细菌的活菌数量.将该方法 应用于卡介苗活菌含量的快速检测中,通过已知活菌含量BCG 参考品制备活菌含量和XTT 有色产物吸光度值的参比曲线,根据未知样品的吸光度值,在此参比曲线上读出未知样品的活菌含量.同时将该快速检测方法 得到的结果 和传统培养法活菌含量结果 进行相关性分析.结果 XTT 法能反应BCG 制品中活菌的含量差异,在一定的浓度范围内,活菌含量和有色产物吸光度值间有线性关系,相关系数R2 达到0.99 以上,应用该方法 对10 批BCG 样品活菌含量进行快速检测,结果 和培养法菌落形成单位(CFU)结果 的相关系数r = 0.834,实验可在24 h 左右完成.结论XTT 法能够快速检测BCG 制品中的活菌含量,结果 与培养法菌落形成单位计数结果 有较好的相关性,实验耗时由4 周减少到24 h,该法可以用于BCG 活菌含量快速检测.
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重组鼠疫组分疫苗毒理学研究
目的 研究重组鼠疫组分疫苗的毒理学作用以评价其安全性,为进一步临床研究提供实验依据.方法 对重组鼠疫组分疫苗进行急性毒性试验,将疫苗1次给予小鼠后,观察所产生的毒性反应和死亡情况,及小鼠对该药物的大耐受量.分别进行小鼠和豚鼠的异常毒性试验,观察动物有无异常反应,7 d 后每只动物体重变化.进行家兔的局部刺激试验,注射给药后对动物和注射部位进行肉眼观察,取注射局部皮肤组织进行病理检查.进行豚鼠的全身过敏试验,将致敏的动物静脉快速注射攻击,观察豚鼠有无过敏症状.结果 2 种浓度疫苗经腹腔和皮下2 种途径注射小鼠,均未引起小鼠的异常症状和死亡,小鼠对重组鼠疫组分疫苗的大耐受量大于10 000 μg/kg.小鼠和豚鼠的异常毒性试验表明,注射后7 d 每组动物均全部健存、无异常反应,且7 d 后每只动物体重均有增加,均符合2005 年版<中华人民共和国药典>三部要求.局部刺激试验中疫苗对家兔注射局部皮肤未引起明显的组织病理学改变.全身过敏试验未出现任何异常反应.结论重组鼠疫组分疫苗的急性毒性试验、异常毒性试验、局部刺激试验和全身过敏试验毒理学实验结果 显示,重组鼠疫组分疫苗用皮下注射的途径进行免疫是安全的.
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产毒型O1群霍乱弧菌实时荧光双重TaqMan PCR的临床应用前研究
目的 探讨产毒型O1 群霍乱弧菌实时荧光双重TaqManPCR 法对临床模拟标本检测的意义,为该法的临床应用提供可靠的技术依据.方法 将O1 群霍乱弧菌灭活菌株悬液[1.0 × 1011 CFU(菌落形成单位)/ml]连续10 倍稀释后与健康成人新鲜粪便混匀,制备成5.0 × 101~5.0 × 109 CFU/g 梯度浓度的模拟带菌者粪便标本并提取DNA,用以评价产毒型O1 群霍乱弧菌实时荧光双重TaqMan PCR 法对临床模拟标本检测的灵敏度、特异性和稳定性.结果 实时荧光双重TaqMan PCR 法对O1 群霍乱弧菌的模拟带菌者粪便标本的检测灵敏度为1.0 × 103 CFU(5.0 × 104 CFU/g)每反应体系,其检测线性范围为1.0 ×103~1.0 × 108 CFU 每反应体系;在稳定性评价中,对含菌量1.0 × 103~1.0 × 108 CFU 每反应体系模拟带菌者粪便标本DNA 进行3 次重复检测的结果 显示,ctxA 基因扩增反应Ct 值的变异系数为0.54%~1.36%,rfb-O1 基因扩增反应Ct 值的变异系数为1.65%~3.75%;在特异性评价中,3 名健康成人新鲜粪便标本的阴性对照均未见特异性扩增曲线.结论产毒型O1 群霍乱弧菌实时荧光双重TaqMan PCR法可用于O1 群霍乱弧菌临床粪便标本的检测.
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自微乳释药系统提高药物生物利用度的机理与应用
全球大概有40%~70% 的新的化学实体由于水溶性差而导致生物利用度低[1].
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新疆出血热的研究进展
克里米亚-刚果出血热(Crimean Congo hemorrhagicfever,CCHF)于1944 年发现于俄国的克里米亚,它是由克里米亚-刚果出血热病毒(Crimean Congo hemorrhagicfever virus,CCHFV)引起的,是一种流行于中国新疆南部、俄国北部、中东、南部欧亚大陆及非洲撒哈拉地区的烈性传染性疾病,其平均病死率在10%~50% 之间[1].中国的CCHF 于1965 年首次诊断于南部新疆,后在北疆地区亦查出抗体,故称新疆出血热(XHF)[2].本文就新疆出血热的生物学性状、临床特征、流行病学、实验室检测技术、诊断标准、治疗与预防、生物安全要求等方面做一简单综述.
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microRNA及其在心血管疾病中的作用研究进展
microRNA 是一类长22 个核苷酸左右的进化保守的内源性非编码单链RNA 小分子.自1993 年Lee 等[1]发现第一个被称为lin-4 的microRNA 以来,研究者对microRNA 的生物合成、功能及作用机制进行了大量研究.目前,人们已经鉴别出500 多个人类microRNA,它与RNA干扰(RNAi)一起被认为是RNA 研究的又一次革命[2].microRNA 可参与细胞的分化、增殖、凋亡以及多种生物组织的发育调节过程[3-6],但在哺乳动物心血管系统中的生物学功能自2005 年才得以阐释[7].目前,已证实microRNA在血管生成和心血管疾病中均具有重要作用[8-9].在心血管疾病发生发展过程中,血管内皮损伤及其功能紊乱对疾病进程具有重要作用,而诸如内皮型一氧化氮合酶(eNOS)等内皮特异性基因的表达将直接影响这些疾病的发生发展过程.因此,探讨microRNA 在心血管疾病中的调节作用及其机制具有理论与临床上的双重价值.
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精子特异性乳酸脱氢酶研究进展
特异性乳酸脱氢酶( sperm-specific lactatedehydrogenase,LDH-C4)特异地存在于鸟类和哺乳类动物的睾丸和精子中,与体细胞乳酸脱氢酶A4(LDH-A4)和B4(LDH-B4)同属于乳酸脱氢酶家族,它们都以烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)为辅酶催化丙酮酸和乳酸的转化,在能量代谢中发挥重要作用,但LDH-C4 与体细胞LDH 相比又具有一些独特性质.近来,在研制新型避孕药的过程中,免疫避孕疫苗逐渐引起人们的重视[1],免疫法控制生育具有无药物的毒副作用、管理使用方便、低价、作用相对持久且可逆等优势,但找到理想的精子特异性抗原是制备免疫避孕疫苗的关键[2].用不育患者血清中提取的抗精子抗体(AsAb)来寻找睾丸cDNA 文库表达的抗原候选对象,结果发现特征性强且免疫效果可靠的免疫原为LDH-C4[3].本文主要针对近年来LDH-C4 的研究进展及其应用做一综述.
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CD4+CD25+Treg细胞对肿瘤免疫影响的研究进展
系统可以保护机体遭受生物的侵袭,但也可以导致反应过度或错误反应,对自身正常组织发生攻击,从而引起自身免疫性疾病或攻击移植的组织器官,引发排斥反应,因此研究免疫耐受机制具有重大的理论意义和应用价值.早期研究认为免疫耐受机制主要包括自身反应性胸腺细胞及前B 细胞在中枢免疫器官的克隆清除和免疫忽视两种机制.近年来随着研究的逐步深入,人们发现除了以往的"被动"机制外,还存在着"主动"机制.这一机制主要通过调节性T 细胞的选择抑制性作用维持免疫耐受.
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《中国医药生物技术》杂志在京编委会会议纪要
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抗流感病毒特异性转移因子的制备及性质
转移因子(transfer factor,TF)是一种能转移和调节免疫反应的小分子物质[1-3].目前,多种动物源性的非特异性TF 已大量应用于人的临床上,并取得了良好的疗效[1-3].而特异性TF 的研究的开发也在世界范围内蓬勃开展,因为特异性TF 比非特异性TF 有着更高效的应用前景,它能够将特异性的细胞免疫功能从供者转移给受者.流感病毒感染是当前发病较广泛的一种疾病,而防治流感又是摆在广大科学工作者面前的一项重要而紧迫的课题.采用特异性转移因子调节机体免疫功能,以抵抗流感病毒的侵染,是对付流感病毒感染的理论和实践的尝试.也是抗感染免疫研究的课题之一.该论文阐述了从免疫的动物脏器中提取具有特异性免疫活性的转移因子的方法以及性质检测[3-4],为下一步生产或临床应用抗流感病毒转移因子奠定理论基础.
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检测禽流感病毒抗原的双抗体夹心ELISA方法的建立
禽流行性感冒(avian influenza,AI)简称禽流感,是由正粘病毒科流感病毒属A 型流感病毒引起的禽类传染病.高致病性禽流感(highly pathogenic avian influenza,HPAI)被世界动物卫生组织(world organization for animalhealth,OIE)列为A 类传染病.我国也把禽流感列为一类动物疫病.禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)可感染几乎所有野生禽及家禽,AI 的暴发和流行,给养禽业造成了巨大的经济损失[1],且和其他动物流感有紧密联系,并威胁着人类的健康[1-2].1997 年在香港[2]、2003 年在荷兰[3]、2004 年以来每年在东南亚都有人感染AI 而死亡的报道,因此防控禽流感已成为全世界的一项重要任务.
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如何用SAS软件正确分析生物医学科研资料I.用SAS实现单组设计定量资料的统计分析
编者按生物统计学是生物学领域科学研究和实际工作中必不可少的工具,在分子生物学迅速发展的今天,生物统计学更显示出了它的重要性.
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浅谈医药生物领域的知识产权战略
随着知识经济的到来,知识产权已经成为当今时代重要的生产要素和财富资源,成为许多国家发展和竞争的主要手段,知识产权的内容也在不断增加和扩大,知识产权保护已经成为国际贸易与技术交流的通用规则.加强我国知识产权制度建设,大力提高知识产权创造、管理、运用、保护的能力,是增强我国自主创新能力、建设创新型国家的迫切需要,是完善社会主义市场经济体制、规范市场秩序和建立诚信社会的迫切需要,是增强我国企业市场竞争力、提高国家核心竞争力的迫切需要,也是扩大对外开放、实现互利共赢的迫切需要.2007 年10 月15 日,胡锦涛总书记在党的十七大报告中,首次明确提出了"实施知识产权战略"的伟大任务.2008 年6 月5 日,国务院正式颁布了<国家知识产权战略纲要>.
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浅谈《科学》杂志评选出——2008年十大科学突破的部分内容
近日,世界权威美国<科学>杂志评选出2008 年十大科学突破.基因重组细胞系被评为十大科学突破之首,而其他有关生命科学的重大突破有:癌症基因;观察蛋白质的运动;视频观察胚胎;决定胖痩的"脂肪开关";更快、更经济的基因组测序.
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兰州民海投产加强型小牛血清
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中药的不良反应探讨
鉴于西药的不良反应(ADR)较大,轻者胃肠反应、过敏,患者感觉不舒服,重者休克危及生命,人们对西药的使用十分谨慎.而人们常以"纯中药制剂,无毒副作用"、"纯天然无不良反应"、"有病治病,无病健身"来形容中药,很多人认为中药没有毒副作用,可以随意服用.近年来,随着经济条件的改善,健康意识的提高,人们对药品的毒副作用有了重新认识,有关中药ADR 的病例报道不断增多.一些患者认为中药的毒副作用更大,"是药三分毒"这句中医药术语,更是让部分人对中药望而却步,甚至有些人认为中药的毒副作用普遍较大.笔者认为这两种对中药ADR的认识都走了极端,本文就中药的不良反应及其临床对策,谈谈自己的看法.
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我们在路上
历史拍打着惊人的翅膀,快速掠过了2008年.2008 年是奥运年,同时也是改革开放30 周年的纪念年.30 年来,中国生物技术药物从仿制到创新,已开发数种具有知识产权的重大创新生物药,也有许多问鼎
、 、 的科学论文,一个创新的医药生物时代已经来临.本刊诞生于这个伟大的时代,和中国的医药生物技术一起成长,可谓是像<滕王阁序>里所说的"躬逢其时". | -
GMP修订带来洁净厂房的变革
我国自1982 年起试行药品生产管理规范,至1988 年公布了"药品生产质量管理规范"即GMP 通过GMP 的执行对提高药品质量起到了良好作用,同时又积累了大量的经验,1992 年国家又发布了GMP 1992 修订版.