中国医药生物技术杂志
Chinese Medicinal Biotechnology 중국의약생물기술
- 主管单位： 中华人民共和国卫生部
- 主办单位： 中国医药生物技术协会
- 影响因子： 0.36
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1673-713X
- 国内刊号： 11-5512/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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地榆鞣质的制备及其对环磷酰胺致小鼠白细胞减少症影响的初步研究
目的 制备地榆鞣质提取物,观察其对白细胞减少症的影响.方法 采用明胶沉淀丙酮解析法制备地榆鞣质提取物.选用KM小鼠,按体重和性别随机分成空白组、模型组、阳性组(rhG-CSF组)和地榆鞣质高、中、低剂量(20、10、5 mg/kg)组,用环磷酰胺复制小鼠白细胞减少症模型,并以白细胞数(WBC)、脾脏系数和骨髓DNA含量作为检测指标,研究地榆鞣质的升白作用.结果 所制地榆鞣质纯度达90％；药理研究显示,地榆鞣质高、中、低剂量组均能显著升高白细胞数量(P＜ 0.05),且地榆鞣质高、中剂量组升高骨髓DNA的作用优于阳性药(rhG-CSF)组.结论 采用明胶沉淀丙酮解析制备法可获得纯度较高的鞣质部位,鞣质具有显著的升高白细胞及保护骨髓DNA的作用.
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重组CYP2D26主要B细胞表位在Ⅱ型自身免疫性肝炎小鼠模型构建中的效应研究
目的 研究在大肠杆菌中以重组病毒样颗粒形式表达的人Ⅱ型自身免疫性肝炎标志蛋白 CYP2D6主要抗原表位aa262-270免疫小鼠后对构建小鼠自身免疫性肝炎模型的效应.方法 设计人Ⅱ型自身免疫性肝炎标志蛋白主要抗原表位aa262-270 (WDPAQPPRD)的下负链寡核苷酸片段,经退火后插入表达乙肝核心蛋白 HBcAg的质粒pNP中(pNP质粒由pThioHisA质粒插入HBcAg基因片段构建而成).构建成质粒pNP-AIH2;转染大肠杆菌DH5α感受态细胞；以IPTG诱导重组蛋白表达,经硫酸铵沉淀、洗涤,密度梯度离心纯化和脱盐后,肌肉注射免疫小鼠3次,以ELISA和western blot检测免疫后小鼠特异性抗体的产生和水平,通过转氨酶检测和肝脏石蜡切片HE染色观察炎症反应.结果 SDS-PAGE结果显示重组菌诱导表达的目的蛋白分子量为19kD,与预期相符;电镜证实其以可溶性的病毒样颗粒形式存在;ELISA显示,免疫小鼠血.清与包被的肝脏匀浆蛋白特异反应,检测到持续存在的特异抗体,滴度至少为1∶2000; western blot检测表明,抗血清在分子量约为55 kD的地方产生了一个特异的条带,与小鼠CYP2D6蛋白大小一致.与正常对照相比,实验组小鼠转氨酶水平未明显升高,肝切片HE染色没有观测到明显的病理特征.结论 携带人Ⅱ型自身免疫性肝炎标志蛋白 CYP2D26主要表位的病毒样颗粒免疫小鼠后,可刺激产生较强的特异抗体水平,但在观测时间内,未见诱导小鼠产生明显的肝脏炎症反应.
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人高密度脂蛋白受体基因3'UTR对其mRNA稳定性的影响
目的 考察人高密度脂蛋白受体SR-BI基因3'UTR对其mRNA稳定性的影响.方法 以人肝癌细胞株HepG2基因组DNA为模板,PCR扩增获得SR-BI基因mRNA 3'UTR全长序列,克隆至荧光素酶报告基因的下游,分别构建重组质粒pc-luc-3'UTR以及pGL3-CLAp-luc-3'UTR.利用脂质体转染HepG2细胞,进而检测转染后细胞的荧光素酶活性、荧光素酶报告基因mRNA的表达水平以及荧光素酶报告基因mRNA的半衰期.结果 通过PCR成功扩增获得人SR-BI基因3'UTR全长序列,分别构建重组荧光素酶报告质粒pc-luc-3'UTR以及pGL3-CLAp-luc-3'UTR,并以pGL3-CLAp-luc-3'UTR转染HepG2细胞建立稳定转染细胞株CLAp-luc-3'UTRHepG2.通过荧光素酶活性检测、实时荧光定量RT-PCR以及mRNA半衰期检测,结果证实SR-BI基因的3'UTR的存在可显著降低荧光素酶活性及其mRNA水平,mRNA半衰期也显著缩短.结论 SR-BI基因3'UTR对其mRNA的稳定性有显著的影响,是SR-BI基因转录后水平调控的关键,为SR-BI基因表达调控提供了一个新机制.
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五种药用石斛内生真菌抑制HIV-1整合酶活性研究
目的 评价5种药用石斛内生真菌发酵产物抑制HIV-1整合酶的活性.方法 将分离自石斛的202株内生真菌提取物共404个采用高通量ELISA法评价其抑制HIV-l整合酶活性；对抑制活性大于100％的样品进行量效关系考察并进行体外抑制肿瘤细胞活性筛选.结果 筛选得到19个对HIV-l整合酶抑制活性大于80％的样品,其中样品5119F、5297F、5097F、5140J和5211F的抑制率分别达到117.96％、113.53％、108.62％、103.74％和109.02％,其对应的IC50值分别为0.02024、0.003125、0.00862、0.01007 和 0.01192 mg/ml.结论石斛属药用植物内生真菌是一个潜在的、丰富的用于筛选HIV-1整合酶抑制剂的资源库,值得进一步研究和开发.
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染料木黄酮的抗巨噬细胞泡沫化效应及其分子机制研究
目的 研究染料木黄酮对动脉粥样硬化过程中巨噬细胞泡沫化的抑制作用,并探讨其抗泡沫化的分子作用机制.方法 采用体外ox-LDL诱导小鼠单核巨噬细胞RAW264.7产生泡沫化,通过油红O染色观察细胞内脂质聚集程度判定细胞的泡沫化程度以及药物效应；利用报告基因细胞检测方法评价染料木黄酮对代谢性核受体过氧化物酶体增殖物激活受体PPAR和肝X受体LXR的转录调控功能的激动作用；利用实时定量PCR检测染料木黄酮对巨噬细胞中ox-LDL摄取以及胆固醇逆转运相关基因的mRNA水平.结果 ox-LDL处理的空白组小鼠RAW264.7单核巨噬细胞内聚积大量的脂质,而经过10 ug/ml染料木黄酮处理后的RAW264.7细胞内脂滴量明显减少,细胞泡沫化程度被大幅度降低.瞬时转染的细胞报告基因的转录激活效应研究结果说明,染料木黄酮对核受体PPAR和LXR均有较高的转录激活效应,其EC50值分别为3.5～9.2 μg/ml和1.6 ～ 3.3 μg/ml.定量PCR研究结果显示,染料木黄酮可以有效地使巨噬细胞中的胆固醇逆转运基因LXRα、LXRβ、ABCA1、ABCGl、和SR-B1的表达上调,而作为主要摄取ox-LDL受体的CD36基因的表达无明显变化.结论 染料木黄酮可以有效抑制动脉粥样硬化过程中巨噬细胞的泡沫化,而该作用机制可能是通过激活PPAR和LXR通路,上调胆固醇逆转运蛋白的ABCA1、ABCG1、LXRα、LXRβ、SR-B1基因的表达,增强了巨噬细胞的胆固醇外排,从而防止动脉粥样硬化的发生和发展.
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靶向MR-1基因shRNA表达载体的构建及其对白血病K562细胞增殖的抑制作用
目的 构建一种靶向MR-1基因的shRNA稳定表达载体,并检验其对白血病K562细胞增殖能力的影响.方法 以带有H1启动子可稳定表达靶基因shRNA的pCD-shRNA为载体,采用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ酶切pCD-shRNA并回收线性空载体,采用T4 DNA连接酶将MR-1shRNA模板DNA双链与酶切后线性化的载体连接,从而建立稳定表达MR-1-shRNA的载体.将构建的pCD-shRNA-MR-1载体转染人白血病K562细胞,建立稳定沉默MR-1的细胞系,采用细胞计数法和westem blot对MR-1沉默后细胞的增殖能力和信号通路进行检测分析.结果 成功构建了可稳定表达MR-1-shRNA的载体pCD-shRNA-MR-1,经酶切鉴定及基因测序测定,结果表明载体中的MR-1-shRNA与设计序列完全相符,目的基因序列准确无误.将pCD-shRNA-MR-1转染白血病K562细胞,建立了两株稳定沉默MR-1的K562/MR-1细胞株.细胞增殖实验表明,MR-1稳定沉默细胞的增殖能力显著降低；细胞信号通路结果表明,MR-1稳定沉默细胞Jak2和Bcr-Abl的磷酸化水平降低.结论 利用pCD-shRNA质粒构建了一个可表达MR-1-shRNA的表达载体,该载体转染K562细胞后引起细胞增殖能力降低.研究表明MR-1基因在肿瘤细胞增殖过程具有促增殖作用,其机制是降低Jak2和Bcr-Abl的磷酸化水平.
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枸杞多糖的理化性质及其免疫调节研究进展
枸杞,茄科植物,果实可药食两用,具有滋补肝肾、益精明目的功效.枸杞多糖(lycium barbarum polysaccharide,LBP)已经被大多数研究认为是重要的有效成分.研究表明枸杞多糖具有抗老化、保护神经、抗疲劳、增强耐力、控制血糖、防治青光眼、抗氧化、抗肿瘤等作用[1],并且可以增强免疫力,对机体非特异性免疫功能及细胞免疫和体液免疫均具有显著的调节作用[2].
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钠离子通道基因SCN1A、SCN2A、SCN1B突变与癫痫
癫痫是一种常见神经系统慢性疾病,是由脑部神经元过度同步化放电所导致.目前发现多种编码电压门控性钠离子通道的基因突变与癫痫的发生有关.其中大多数突变是在编码钠离子通道α亚基的基因SCN1A、SCN2A和编码β亚基的基因SCN1B上发现的.不同的基因突变导致的癫痫综合征表型轻重不一.轻者表现为热性惊厥,预后良好,重者可表现为顽固性癫痫.钠离子通道基因突变引起的常见癫痫综合征有全面性癫痫伴热性惊厥附加症(generalized epilepsy with febrile seizure plus,GEFS+)、婴儿严重肌阵挛癫痫(severe myoclonic epilepsy of infancy,SMEI)、良性家族性新生儿-婴儿惊厥(benign familial neonatal-infantile seizure,BFNIS)等.本文就SCN1A、SCN2A和SCN1B基因突变导致的癫痫综合征的临床表型及其基因突变特点作一综述.
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蛋白质组学在肺癌研究中的应用进展
蛋白质组学(proteomics)指的是在大规模水平上研究细胞内动态变化的蛋白质的翻译后修饰、组成与表达水平,探究蛋白质之间的相互作用,揭示蛋白质功能与细胞活动规律的学科.蛋白质组学技术主要包括蛋白质的分离、质谱鉴定及生物信息学等技术.
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制备诱导多能干细胞的分子系统
诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs)在形态学特征、表面抗原、基因表达模式及表观遗传状态等方面与胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)类似[1-4],注射裸鼠后也同样可以在体内形成含有3个胚层的畸胎瘤[1,4],甚至能像ESCs一样通过四倍体补偿技术获得具有生殖能力的活体小鼠[5-6].在实际应用中,iPSCs可避免ESCs的诸多弊端,如伦理问题、胚胎来源的选择、安全性问题等,因此,越来越多的文献报道了iPSCs在再生医学、疾病模型的建立、细胞及基因治疗、药物的发现与评价等方面的研究和应用[7-10].
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肉桂酰胺类化合物抗癌活性研究进展
针对肉桂酰胺类化合物的药物研发已有几十年的历史,国内外文献对其药理活性有许多报道,其中大部分都集中在抗惊厥[1]、扩张血管[2]、杀虫[3]、抗诱变[4]、治疗糖尿病[5]、抗抑郁[6]以及消炎[7]等方面.近二十年,肉桂酰胺类化合物抗肿瘤活性的报道逐年增多,本文就此展开综述,希望能为肉桂酰胺类药物的研发提供参考.肉桂酰胺及其相关化合物在自然界中广泛存在,形成了一系列具有抗癌活性的物质[8],具体分为以下几类:
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中西医结合治疗妊娠期念珠菌性阴道炎88例临床观察
念珠菌性阴道炎是女性常见的感染性疾病之一,70％～75％的妇女一生中至少感染1次阴道念珠菌,40％～45％的妇女曾有阴道念珠菌病复发[1].念珠菌性阴道炎亦是妊娠期较常见疾病,考虑到妊娠期用药的安全性,笔者采用中药坐浴并阴道内放置克霉唑阴道片治疗妊娠期念珠菌性阴道炎取得了较好的临床疗效.
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如何用SAS软件正确分析生物医学科研资料ⅩⅪ.结果变量为二值变量的高维列联表资料的统计分析与SAS软件实现(一)
当观测结果是定性资料时,人们习惯将资料整理成列联表形式.比如"2×2列联表资料"、"R×C列联表资料"和"高维列联表资料"等.所谓高维列联表,也就是表中涉及到的定性变量的个数k≥3[1].对于高维列联表资料,根据结果变量的性质可分为以下三类:一是结果变量为二值变量的高维列联表;二是结果变量为多值有序变量的高维列联表;三是结果变量为多值名义变量的高维列联表[2].本文将详细介绍如何通过SAS软件用CMH x2检验和加权x2检验实现结果变量为二值变量的高维列联表的统计分析.
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细胞重编程及其在再生医学中的应用前景——写在2012年诺贝尔生理学或医学奖颁布之际
2012年10月8日,英国发育生物学家约翰·格登爵士(John B.Gurdon)和日本生物医学家山中伸弥(Shinya Yamanaka)因"发现成熟细胞可以被重编程(reprogrammed)为多能性(pluripotency)"而获奖,这次获奖是在短短五年时间内干细胞领域的第二次获奖,上一次获奖是在2007年,马丁·埃文斯因1981年成功分离出小鼠胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)而与另外两名从事"基因打靶"(gene targeting)的科学家马里奥·卡佩基、奥利弗·史密斯共享诺贝尔生理学或医学奖.
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主编寄语
2013年新年伊始,国务院《生物产业发展规划》悄然出台,我国政府发展生物产业的思路和目标更加清晰地呈现在世人眼前.规划的出台,必将为生物产业的发展注入新的动力,让我们对未来充满期待.
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生物样本质量的影响因素与评估
样本质量是整个样本库的核心,样本应该在尽可能严格的条件下进行采集、处理、保存、运输以及后期加工.样本库的工作就是尽可能地将对样本质量的影响降低到小,除了严格质量管理的制度外,新技术的不断研发、理论研究的不断丰富将有助于评估影响样本质量的因素,从而制定或改进有关样本的标准流程以尽量减少样本质量的变化,保持样本的原有性质.
