中国医药生物技术杂志
Chinese Medicinal Biotechnology 중국의약생물기술
- 主管单位: 中华人民共和国卫生部
- 主办单位: 中国医药生物技术协会
- 影响因子: 0.36
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 1673-713X
- 国内刊号: 11-5512/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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BCG-CpG-DNA对A群脑膜炎球菌多糖疫苗的免疫佐剂作用
目的 探讨免疫佐剂BCG-CpG-DNA对A群脑膜炎球菌多糖疫苗的作用.方法 将不同剂量(5、10、100 μg)的免疫佐剂BCG-CpG-DNA与A群脑膜炎球菌多糖疫苗直接混合后,皮下免疫小鼠,与未添加佐剂疫苗比较,ELISA法检测抗原特异性IgG抗体水平,并分析抗体亚类IgG1和IgG2a的水平.结果 BCG-CpG-DNA能提高A群脑膜炎球菌多糖疫苗特异性抗体IgG水平,并能促进抗原特异性抗体亚类的产生,其中佐剂中、高剂量(10、100μg)实验组IgG1、IgG2a水平与未加入免疫佐剂疫苗之间差异有统计学意义.结论 BCG-CpG-DNA对A群脑膜炎球菌多糖疫苗有免疫佐剂作用.
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慢病毒靶向携带survivin-siRNA抗肺腺癌裸鼠体内研究
目的 探讨慢病毒载体介导survivin-siRNA对人肺腺癌裸鼠移植瘤的体内抑瘤活性.方法 参考siRNA的设计策略,构建表达survivin-siRNA 的慢病毒载体;于各BALB/C裸鼠右侧腋窝皮下接种人肺腺癌A549细胞悬液,构建人肺腺癌A549细胞裸鼠移植瘤模型,肿瘤组织局部注射survivin-siRNA的慢病毒载体,观察肿瘤的体积及随时间变化的生长曲线: 通过碘化丙啶(propidium iodide,PI)染色检测细胞凋亡情况;流式细胞术检测肿瘤细胞周期变化.结果 慢病毒载体介导survivin-siRNA对裸鼠人肺腺癌A549的抑瘤率为46.07%:经过PI和Annexin-V染色区分凋亡早晚期的细胞为30%~35%,荧光显微镜下观察肿瘤细胞凋亡;G1期细胞比例明显增加,S期细胞比例则明显减少.结论 慢病毒载体介导的siRNA能有效抑制裸鼠移植人肺腺癌A549的survivin基因的表达,有效激发细胞凋亡.
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γ-聚谷氨酸天冬氨酸-顺铂复合物的制备及其生物活性
目的 研究一种低毒性的顺铂复合物:γ-聚谷氨酸天冬氨酸-顺铂复合物(γ-PGAasp-CDDP),考察其体外性质和体内毒性,并探讨可能的作用机制.方法 γ-聚谷氨酸与天冬氨酸发生酰胺化反应制备γ-聚谷氨酸.天冬氨酸复合物,核磁共振对其结构进行表征;化学法制备γ-聚谷氨酸天冬氨酸-顺铂复合物;常规方法检测该复合物稳定性;透析法研究药物缓释效果;MTT法检测复合物体外抗肿瘤细胞活性;流式细胞仪检测其对细胞凋亡的作用;小鼠体内实验检测其体内毒性.结果 成功制备γ-聚谷氨酸天冬氨酸-顺铂复合物,顺铂的有效结合率达30%该复合物在常温中性环境下稳定;30 h时顺铂的累计释放率达到30%;细胞实验表明复合物对Bcap-37(人乳腺癌细胞)和BEL7404(人肝癌细胞)具有显著的杀伤作用,小鼠体内实验表明该复合物的毒性比游离顺铂低.结论 γ-聚谷氨酸天冬氨酸-顺铂复合物仍然保留了游离顺铂的生物活性,在杀伤肿瘤细胞、引起细胞凋亡的同时,大大降低了体内毒副作用,其作用机制可能与实体瘤组织的高通透性、滞留效应(EPR效应)以及药物缓释作用有关,因此该复合物具有潜在的临床应用价值.
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MAP30全长基因的克隆及在巴斯德毕赤酵母中的高效表达研究
目的 研究毕赤酵母中高效表达全长MAP30蛋白及其生物活性.方法 根据GeneBank公布的MAP30全序列设计特异性引物,以苦瓜基因组为模板,PCR扩增MAP30全长基因,将该基因插入pPIC9k载体中,经Sac I酶切线性化后,电转化至GS115细胞,再通过G418筛选,终获得了高拷贝重组GS115菌株.重组菌株在甲醇诱导下,SDS-PAGE分析表达的特异性条带,运用Pharmacia VDS图像分析软件进行条带密度扫描,得到各条带的扫描曲线图,计算出同一泳道目的 蛋白条带峰面积相对于整个曲线所占的百分比,即蛋白纯度,并根据蛋白纯度和上清蛋白总量(Lowry法)计算出发酵上清液中目标蛋白含量.纯化时首先用75%的饱和硫酸铵盐析,然后用Phenyl Sepharose 6 FF疏水层析,再用CM-sepharose FF阳离子层析.采用MTT法检测MAP30蛋白对人胃癌细胞株SGC7901的抑制作用.为验证重组MAP30蛋白结构的正确性,采用EDMAN降解法分析Ⅳ末端8个氨基酸.结果 重组菌株在甲醇诱导下,SDS-PAGE分析可见相对分子质量32 000的特异性条带,重组蛋白占上清液总蛋白的67%;发酵液经硫酸铵沉淀、疏水和阳离子交换层析后,目的 蛋白总回收率为32.4%.MTI法检测结果表明,重组MAP30蛋白具有明显的抑制人胃癌细胞SGC7901的活性,IC_(50)为30μg/ml.N端的8个氨基酸测序进一步证实与理论一致.结论 重组.MAP30蛋白在毕赤酵母中正确表达,表达产物具有抑制肿瘤细胞的活性.
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植物中药IHA-01抑制人肺癌GLC细胞增殖和诱导凋亡的实验研究
目的 初步探讨植物中药IHA-01抑制人肺癌GLC细胞增殖及诱导其早期凋亡的作用.方法 人肺癌GLC细胞经不同浓度(O.01、0.1、1、10、100μg/ml)IHA.01作用24、48、72 h,以MTT法进行IHA-01有效作用浓度筛选并确定IHA-01工作浓度(1/2IC_(50));透射电镜观察IHA-01细胞超微结构:流式细胞术进行DNA倍体分析和TUNEL分析,检测IRA-01对肺癌GLC细胞周期及早期凋亡的影响.结果 IHA-01工作浓度(1/2 IC_(50))为0.7μg/ml,且不同浓度IHA-01作用不同时间对GLC细胞增殖的抑制作用呈时效和量效依赖关系;透射电镜发现IHA-01实验组部分细胞出现细胞连接消失,微绒毛消失,胞质密度增加,可见细胞早期凋亡改变,具有诱导细胞分化和早期凋亡的作用;流式细胞术显示肺癌GLC细胞出现明显的凋亡峰,细胞周期阻滞在G_0/G_1期,S期细胞减少;流式细胞术TUNEL法检测结果显示,细胞凋亡和坏死同时存在.结论 IHA-01具有抑制肺癌GLC细胞增殖,诱导凋亡的作用,具有深入研究的价值.
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温度和pH对重组人血管内皮抑制素脱酰胺的影响
目的 利用液质联用技术研究温度和pH对重组人血管内皮抑制素中天冬酰胺(Asn)脱酰胺过程的影响.方法 在不同的温度和pH值条件下,对重组人血管内皮抑制素样品溶液进行孵化,酶解处理后利用液质联用技术识别发生脱酰胺的多肽并测定其含量随样品放置温度和pH条件的变化.结果 质谱分析结果表明酶解产物中多肽SVWHGSDPNGR序列中的Asn发生了脱酰胺化,Asn残基生成了天冬氨酸和异天冬氨酸残基,其他位置的Asn均未检测出明显的脱酰胺化;实验获得了不同温度和pH条件下重组人血管内皮抑制素中Ash脱酰胺化的速率及动力学常数;Asn脱酰胺过程随着温度和溶液pH值的升高,Asn脱酰胺速率上升.结论 重组人血管内皮抑制素中天冬酰胺的脱酰胺过程受储存温度和pH值影响,研究药用蛋白质在不同条件下的脱酰胺过程对于筛选合适的储存条件、减少活性损失具有重要意义.
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PCR引物浓度对寡核苷酸液相杂交的影响
目的 考察PCR引物浓度配比对液相微珠杂交效率的影响,寻求具有较强杂交信号和较好稳定性的PCR引物浓度配比.方法 建立HLA-DRBl等位基因的相关数据库,选择在HLA-DRBI位点的第二外显子上设计探针,并且选择其保守序列作为阳性对照探针(DPC2),DPC2探针中间位点T突变成A作为阴性对照探针(DNC).分别针对标本C2-008、C2-024、C2-025的等位基因序列设计出6条约21bp的寡核苷酸探针,各探针5'端用氨基(NH2)修饰.通过引物浓度梯度配比(1:100、1:50、1:20、1:8、1:4、1:2、1:1),对型别已知的细胞株DNA进行PCR扩增并得到目的 片段(1:100配比除外),在相同条件下将PCR产物与寡核苷酸探针进行液相杂交检测.结果 浓度配比为1:1的对称式扩增产物杂交结果不理想,而浓度配比分别为1:20、1:8、1:4、1:2的不对称扩增均得到了待检单链、双链DNA混合物,其中1:4浓度配比具有好的扩增效率和稳定性.根据阳性信号与阳性标本是否相符表明:引物浓度配比为1:100的不对称PCR和1:1的对称PCR检测效果差,易出现假阴性;1:2、1:4、1:8、1:20配比检测效果较好,比较稳定.结论 PCR引物浓度配比影响液相微珠杂交效率,不对称PCR产物有利于提高杂交效率,为快速成功配制PCR试剂奠定了基础,有利于寡核苷酸液相芯片的应用.
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人偏肺病毒研究进展
人偏肺病毒(human metapneumovirus,hMPV)是新近发现的一种呼吸道致病病毒,2001年首次在荷兰一婴儿的鼻咽部抽吸物中被分离得到,根据它的形态学、生物化学以及基因学特点,hMPV-开始被分类为禽偏肺病毒,禽偏肺病毒可以引起火鸡和其他鸟类的上呼吸道感染,现在普遍认为hMPV属于肺病毒亚科的副黏病毒.副黏病毒除了hMPV,还包括禽流感病毒以及人合胞病毒.
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Gamma射线在骨科植入材料消毒灭菌中的应用进展
近年来,骨科移植材料广泛应用于脊柱四肢骨折或缺损、人工关节返修、骨质疏松(可注射骨移植材料)乃至运动伤等方面的治疗.移植材料的应用避免了与自体组织移植相关的一系列缺陷,如供区的疼痛及可能的并发症、移植组织质量或数量的不确定性、形状或大小的限制等.
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HIF-1α的非氧依赖调控通路及其在肿瘤中的作用
低氧诱导因子-1(hypoxia-inducible factor-1,HIF-1)是1992年由Semenza和Wang~([1])发现的一种氧依赖转录激活因子,其调控的下游基冈涉及血管生成、红细胞生成、能量代谢、细胞凋亡和增殖等多方面,在机体的生理、病理反应中至关重要.
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微生物法制备单唾液酸四己糖神经节苷脂的机制和方法
单唾液酸四己糖神经节苷脂(GM_1)是含有单个唾液酸的酸性鞘糖脂,被认为是除脑源性神经生长因子和层粘蛋白外,对神经系统损伤具有显著临床疗效的生物药物.GM_1主要来源于哺乳动物含丰富神经的脑组织,经有机溶剂提取和柱层析分离精制获得.
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中国医药生物技术协会向刘谦副部长汇报工作会议纪要
中国医药生物技术协会曾于2008年1月24日就协会的工作向刘谦副部长做过汇报,并听取了刘谦副部长的八点指示.两年过去了,协会在各级领导的关注下,在协会会员和业内专家的支持下,自身建设和工作开展都有了较大的进步.
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10-羟基喜树碱的提取方法及工艺优化研究
10-羟基喜树碱是从我国特有植物喜树(Camptotheca acuminala Decne)中分离得到的20多个单体中抗肿瘤作用强的生物碱,它不仅是临床效果较好的抗肿瘤药物,而且还是制备其他喜树碱类衍生物药品的重要中间体.由于喜树中10-羟基喜树碱含量甚微,其制备方法的研究已成为当前热点,其中利用现代生物工程技术的方法尤为引人注目.
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如何用SAS软件正确分析生物医学科研资料Ⅷ.用SAS软件实现拉丁方设计定量资料的统计分析
编者按生物统计学是生物学领域科学研究和实际工作中必不可少的工具,在分子生物学迅速发展的今天,生物统计学更显示出了它的重要性.实验设计与数据统计分析是现代生物学的基石,是生物学研究者检验假说、寻找模式、建立生物学理论的有利工具,也是生物学研究者探索微观和宏观生物世界的必备基础知识.
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T细胞免疫识别研究进展
免疫识别是疫苗设计的基础.T细胞免疫识别是预防性疫苗、治疗性疫苗(含负调疫苗)发展的基础.通过T细胞受体(T-cell antigen-receptor,TCR)的信号转导的特征是依赖于对表位多肽的限制性识别.
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现代动物细胞培养反应器概述
动物细胞在很多方面是不同于原核细胞和真菌的,例如较低的生长率、较高的剪切敏感性以及较低的气泡耐受性,这些特性会对动物细胞生物反应器的设计产生一定的影响.特别是搅拌与通气系统的构造需要满足细胞生长于尽可能优化的罐内环境中.
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关于创新性生物技术药物研发及立题合理性的思考
生物技术作为生命科学的主要手段,己成为现代科学技术研究、应用和发展的重点领域.目前该领域超过60%的研究成果用于医药,给制药产业带来了革命性的变化.与传统的生物制备方式相比,采用现代生物技术可生产出质量高、安全性好且易获得的各种生物药物,代表了生物制药未来的发展方向.