中国医药生物技术杂志
Chinese Medicinal Biotechnology 중국의약생물기술
- 主管单位: 中华人民共和国卫生部
- 主办单位: 中国医药生物技术协会
- 影响因子: 0.36
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 1673-713X
- 国内刊号: 11-5512/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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FABP-5基因沉默对肝癌Bel-7402细胞生物学特性及人参川穹嗪敏感性的影响
目的 探讨通过siRNA干扰技术沉默表皮脂肪酸结合蛋白-5(FABP-5)基因表达对人肝癌Bel-7402细胞生物学特性及人参川穹嗪敏感性的影响.方法 以人肝癌Bel-7402细胞为研究对象,根据FABP-5mRNA 编码序列设计并合成干扰 siRNA 序列,瞬时转染Bel-7402 细胞.将人肝癌 Bel-7402 细胞分为 FABP-5 siRNA 组、阴性对照组、空白对照组.用 RT-PCR 和Western blot 法分别从 mRNA 水平和蛋白水平检测FABP-5 基因的表达;CCK8 法测定细胞体外增殖能力;流式细胞技术检测各组细胞周期和凋亡的变化情况;细胞侵袭小室法检测各组细胞的体外侵袭力;MTT 法观察 FABP-5基因沉默后 Bel-7402 细胞对人参川穹嗪的敏感性.结果 RT-PCR 和 Western blot 显示,FABP-5 siRNA 组较阴性对照组和空白对照组的 FABP-5 mRNA 和蛋白表达都明显下降;FABP-5 siRNA 组细胞的生长速度明显减慢,细胞周期阻滞在 G0/G1期,S 期细胞数减少;与阴性对照组和空白对照组相比,FABP-5 siRNA 组细胞的凋亡率明显升高(P < 0.01),增殖、侵袭能力显著下降(P < 0.05);FABP-5 siRNA组细胞对人参川穹嗪的敏感性显著增强(P < 0.05).结论 特异性沉默 FABP-5 基因表达能够降低肝癌细胞的侵袭能力,抑制细胞的增殖,将细胞周期阻滞于 G0/G1期,使其凋亡显著增加.
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PCT、hs-CRP、IL-6对肺结核合并感染的老年患者诊断和预后评估的价值
目的 研究探讨血清降钙素原(PCT)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、白细胞介素6(IL-6)在检测肺结核合并感染的老年患者中的诊断价值以及通过动态检测评判治疗及预后效果.方法 选取我院2015年9月至2017年1月期间收诊的60例肺结核合并感染的老年患者为实验组(同时根据肺感染严重程度分成重症组 37 例与非重症组 23 例),30 例单纯肺结核老年患者为肺结核组,另选择 30 例健康者为对照组.检测所有实验对象 PCT、hs-CRP、IL-6 浓度,对比分析 PCT、hs-CRP、IL-6 检测的灵敏度及特异度,诊断并评估患者病症相关性等.结果 实验组 PCT、hs-CRP、IL-6 含量显著高于单纯肺结核组,肺结核组又显著高于健康对照组,重症组患者 PCT、hs-CRP、IL-6 含量显著高于非重症组,差异均具有统计学意义.PCT 检测的特异度高于 hs-CRP、IL-6,而 hs-CRP 检测的灵敏度高于 PCT、IL-6.PCT、hs-CRP、IL-6 含量与病症严重程度成正相关关系.结论 PCT、hs-CRP、IL-6 检测可为肺结核合并感染的老年患者的诊断及判断病症严重程度提供较为准确的信息,另外三者的联合检测可提高检测灵敏度及特异度.
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新型孔雀石绿衍生物的合成及其生物活性研究
目的 以孔雀石绿(MG)为先导化合物,对其C环进行结构改造及修饰,系统评价合成的MG类似物的抗致病菌ESKAPE活性及细胞毒性.方法 以芳香醛为原料,经过缩合、氧化反应得到13个MG类似物,其结构均经1H-NMR、13C-NMR和HRMS确证.采用肉汤微量稀释法测定目标化合物抗致病菌ESKAPE 的小抑菌浓度(MIC),用细胞增殖法(MTS)测试目标化合物的毒性.结果 孔雀石绿及其 C 环改造类似物普遍对革兰阳性菌有抑制作用,而对革兰阴性菌无作用.其中 3b 对枯草芽孢杆菌的抗菌活性(MIC = 0.39 μmol/L)是 MG(MIC =1.56 μmol/L)的 4 倍;3f 比 MG 的细胞毒性降低 10 倍以上.结论 设计、合成了13种新型孔雀石绿衍生物,并对其进行生物活性评价,从中筛选出了抑菌活性高于孔雀石绿的化合物,为研制新型抗致病菌 ESKAPE 的药物提供了基础.
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白细胞介素12对耐药结核大鼠模型的影响
目的 观察、评价白细胞介素12(IL-12)对耐药结核大鼠模型的脏器菌落变化和细胞因子水平的影响.方法 将60只SD雌性大鼠经尾静脉感染结核分枝杆菌耐利福平株,每只106CFU,制成耐药结核大鼠模型,随机分为对照组和IL-12组,每组 30 只.给予 PBS 或 IL-12治疗 7 d,ELISA 法检测血清 IFN-γ 水平、流式细胞术行 T细胞亚群检测和平板计数法测定器官菌落计数,观察治疗后生存率.结果 IL-12 组大鼠 1 只死亡,肺、肝、脾菌落数分别为(254 ± 98)× 105、(5 ± 2)× 105和(16 ± 4)× 105CFU/ml, IFN-γ(1125 ± 378)pg/ml;PBS 组 10 只死亡,肺、肝、脾菌落数分别为(682 ± 304)× 105、(28 ± 17)× 105和(108 ± 35)× 105CFU/ml,IFN-γ(532 ± 198)pg/ml,两组比较差异有显著性.淋巴细胞亚群测定显示 IL-12 促进 Th1 细胞反应,改变了 Th1/Th2 平衡,两组比较差异有显著性.结论 IL-12 诱导 IFN-γ 产生,促进 Th1 细胞反应,改变了 Th1/Th2 平衡,对结核分枝杆菌感染大鼠产生保护效应.
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胰酶激活的E型肉毒毒素及其类毒素免疫原性研究
目的 胰酶激活E型肉毒毒素,并研究其类毒素免疫原性.方法 胰酶激活E型肉毒毒素,脱毒后制备类毒素,免疫家兔,与常规方法制备的E型肉毒类毒素比较免疫原性.结果 胰酶激活E型肉毒毒素的佳条件为胰酶浓度0.5%、激活时间45 min、pH 6.0、温度 37 ℃,在此条件下可提高毒素毒力 1000 倍,但其类毒素免疫原性与常规方法无显著性差异.结论 胰酶激活 E 型肉毒毒素,可大幅度提高毒素毒力,但并未改变其免疫原性.
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HPLC-MS/MS法发现ssaX阻断菌株中两个尿苷肽类新化合物
目的 对ssaX基因阻断菌株次级代谢产物中的sansanmycin 类似物进行研究,发现新化合物.方法 对 Streptomyces sp. SS野生菌株及ssaX基因阻断株的发酵液分别进行固相萃取,收集60%甲醇水洗脱液进行 HPLC-MS/MS 分析.通过与文献报道的已知化合物数据相比较的方法,分析其中 sansanmycin 类化合物结构并利用 MS/MS 对其结构进行确证.结果 从 ssaX 基因阻断株的发酵液中发现了 8 个sansanmycin 类化合物,其中 SS-MX-7 和 SS-MX-8 为新结构化合物.SS-MX-7 化学结构中假四肽肽链上的第一位和第四位氨基酸残基均为酪氨酸取代,而 SS-MX-8 的这两个位置均为苯丙氨酸.结论 ssaX 基因阻断株产生的两个新 sansanmycin 类似物,进一步丰富了尿苷肽类化合物的结构多样性,同时也为利用 HPLC-MS/MS 方法在其他重组菌株中发现尿苷肽类新化合物奠定了基础.
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补肾调经方和逍遥丸对小鼠子宫HOXA10表达的比较研究
目的 观察补肾法、疏肝法对小鼠子宫HOXA10蛋白及mRNA表达的影响.方法 将90只雌性小鼠随机分为6组:补肾高、低剂量组,疏肝高、低剂量组,控制性超促排卵组(COH)和空白对照组,每组15只.各组每日腹腔注射生理盐水,连续8d,第 9 天除空白对照组外各组注射 PMSG,48 h 后注射 HCG,空白对照组均腹腔注射生理盐水.各组分别与雄鼠按 1:1 合笼,次晨观察妊娠情况后给药.补肾高、低剂量组分别给予补肾调经方口服液(5.4 和 2.7 g/ml),疏肝高、低剂量组分别给予逍遥丸混悬液(0.6 和 0.3 g/ml), COH 组和空白对照组给予生理盐水,连续 4 d.处死小鼠并取材,应用免疫组化和 RT-PCR 方法分别测定小鼠子宫同源框基因 10(HOXA10)的表达情况,并比较各组雌、孕激素表达水平.结果 各治疗组血清雌二醇和孕酮表达均显著高于空白对照组和 COH 组(P < 0.05),且高剂量组优于低剂量组(P< 0.05);高剂量组间比较无统计学意义(P > 0.05).与空白对照组比较,HOXA10 基因在 COH 组表达降低(P <0.05);与 COH 组比较,补肾高剂量组和疏肝高剂量组表达增加(P < 0.05);补肾高剂量组与疏肝高剂量组间比较无统计学意义(P > 0.05).结论 补肾调经方、逍遥丸可上调超促排卵小鼠血清雌孕激素水平,提高子宫 HOXA10 的表达,从而改善小鼠子宫内膜容受性,促进胚胎着床.
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Aβ42蛋白与胶质细胞吞噬相关受体相互作用的研究
目的 探讨寡聚形态Aβ42蛋白与胶质细胞吞噬相关受体SRB、CD36的体外结合情况,以及上述受体封闭状态下或内吞抑制剂存在条件下该细胞吞入Aβ42数量的变化规律.查明富寡聚物Aβ42(oAβ42)环境对小胶质细胞的吞噬相关受体 SRB、CD36、TNF-α、TNF-R 基因表达量的影响.方法 用酶联免疫法测定 oAβ42与胶质细胞 SRB、CD36受体的结合力.用 SRB、CD36 受体的功能性抗体,受体内吞(巨吞饮)抑制剂作用细胞,检测 BV2 细胞对 oAβ42吞噬能力的变化,反转录法测定 oAβ42影响下的 BV2 小胶质细胞吞噬相关基因表达量变化.结果 oAβ42与胶质细胞清道夫家族 SRB、CD36 受体在体外实验中特异性结合,SRB 受体的阻断使小胶质细胞内吞 oAβ42的能力显著下降,CD36 受体阻断剂对细胞内吞量无显著影响,受体内吞(巨吞饮)抑制剂增加细胞对 oAβ42摄取的量.oAβ42对人脑小胶质细胞吞噬相关受体的表达量有显著影响.结论 oAβ42与胶质细胞吞噬相关受体的相互作用可进一步影响细胞对病理蛋白的吞入和清除过程.该结论可为从分子水平调节胶质细胞与 Aβ42相互作用的受体激活剂,基因封闭剂等 AD免疫疗法提供参考依据.
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哇巴因对乳腺癌MCF7细胞能量代谢的影响研究
目的 检测哇巴因对人乳腺癌MCF7细胞能量代谢的影响,初步探索相关作用机制.方法 联合使用ATP检测系统及海马生化分析仪检测哇巴因作用后细胞内ATP水平及线粒体呼吸作用的变化;使用葡萄糖氧化酶法检测哇巴因对MCF7细胞葡萄糖吸收水平的影响;使用 AMPK 活性检测探针检测 AMPK 活性的变化;通过 Western blot 实验初步检测哇巴因对 MCF7细胞内相关激酶蛋白水平的影响.结果 哇巴因能够时间依赖性地降低 MCF7 细胞内 ATP水平,剂量依赖性地降低线粒体呼吸作用,同时 25 ~50 nmol/L 的哇巴因作用 24 h 后能够促进葡萄糖吸收.该化合物可激活 AMPK 活性,在 12 h 表现出佳活性.Western blot 实验结果证实哇巴因能够升高 AMPK 和底物蛋白乙酰辅酶 A 羧化酶(ACC)的磷酸化水平,抑制Na+/K+-ATP 酶 α1 亚型(NKAα1)的表达.结论 哇巴因可抑制人乳腺癌 MCF7 细胞的线粒体氧化呼吸作用,促进糖酵解.哇巴因对肿瘤代谢的影响可能与其调控 AMPK 活性有关.
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离心重力诱导脂肪间充质干细胞向软骨样细胞分化
目的 探讨离心重力对人脂肪来源间充质干细胞(hADSCs)向软骨样细胞分化以及对 Wnt/β-catenin信号通路的影响.方法 通过加载不同离心力(0、500、1000、2000、2500、3000 × g)和持续时间(0、15、30、45、60 min)刺激脂肪干细胞分化为软骨样细胞,并利用荧光定量 PCR 和Western blot 检测 Sox 9 基因的上调表达来筛选条件,将培养的 P3代 hADSCs 分 3 组,对照组(不干预处理)、离心重力组和 TGF-β3 组(加入 TGF-β3 成软骨诱导剂),持续培养 21 d 后,通过阿利辛蓝和苏木精-伊红染色进行软骨分化鉴定,DMMB 法测定胞外基质中 GAG 含量,荧光定量 PCR 测定 II 型胶原基因表达,Western blot 进一步检测对照组和离心重力组中 Sox 9、β-catenin、GSK3β 和p-GSK3β 蛋白的表达.结果 加载适的离心重力(2500 × g,30 min)刺激hADSCs 后,培养 24 h,Sox 9 的 mRNA 和蛋白表达显著上调.阿利辛蓝和苏木精-伊红染色显示,离心重力组和TGF-β3 组中软骨表达呈阳性.GAG 实验结果显示, TGF-β3 组促 GAG 分泌的能力优于离心重力组(P <0.05),荧光定量 PCR 结果表明 TGF-β3 组其 II 型胶原mRNA 表达的能力高于离心重力组(P < 0.05),Western blot结果显示,相比对照组,离心重力组中 β-catenin 和p-GSK3β 的蛋白表达水平降低,而 GSK3β 和 Sox 9 蛋白表达升高.结论 离心重力和 TGF-β3 诱导脂肪干细胞成软骨分化中的表达具有相似的能力,离心重力对 hADSCs 诱导成软骨作用与抑制 Wnt/β-catenin 信号通路有关.
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生物制品冻干保护方法研究进展
随着生物技术的发展,越来越多的生物制品以冻干粉针的剂型被不断研究出来并应用于临床.虽然冷冻干燥技术应用于生物制品具有许多优势,但同时生物制品在冷冻干燥的过程中也容易发生变性导致药物效价降低.在技术上为了降低冷冻干燥对生物制品的不良影响,往往采用添加辅料或者优化冻干工艺这两种方法.本文综述了可提高生物制品稳定性,应对或降低生物制品变性的冷冻干燥技术的新研究进展.
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GLUT1的结构和基因表达调控
葡萄糖是植物、动物、微生物等细胞所需要的重要代谢物质之一,它既是呼吸作用优先利用的底物,也是细胞主要代谢物质之间相互转化的中间产物[1].葡萄糖还是动物体内营养物质通过血液运输的主要形式[2].在血液中的葡萄糖主要来自肠道的营养物质吸收和肝细胞的糖原分解[3].无论是葡萄糖从消化道吸收或肝糖原分解进入血液,还是葡萄糖从血液进入需要葡萄糖的细胞,都需要细胞膜上的葡萄糖转运蛋白(glucose transporter,GLUT)介导[4].研究表明 GLUT基因表达和蛋白活性不仅影响动物的营养吸收[5]、分配,还与高血糖[6]、低血糖[7]、心脏病[8]及肿瘤的发生和转移后生长[9]等有关.GLUT 由一个多基因家族编码,在人体中有14 个成员[10],其中 GLUT1 是在不同动物的多种细胞中普遍存在的成员之一,得到更多的关注.本文主要介绍GLUT1 的结构、转运机制、编码基因的分布和表达调节方面的研究进展.
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egr-1在学习记忆中的作用及机制研究进展
学习和记忆是大脑对外界有关信息获取、处理、存储和提取的过程,其所依赖的生物学基础是神经元之间通过突触相互连接形成复杂的神经网络,启动一系列生化级联反应,导致突触可塑性变化,如长时程增强(long term potential, LTP)和长时程抑制(long term depression,LTD),其中, LTP 与学习记忆的关系尤为密切.突触可塑性的功能障碍常导致与记忆力减弱或丧失等相关的一系列临床常见疾病,如癫痫、亨廷顿病、阿尔茨海默症、精神发育迟滞及进行性慢性疼痛等[1],利用合适的模型研究突触可塑性功能障碍的具体机制有望为相关疾病的诊疗提供基础.
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柱前衍生HPLC法研究亮菌口服溶液中游离氨基酸和总氨基酸含量
亮菌口服溶液是由真菌——假蜜环菌发酵提取而制得的一种多组分药物,其成分复杂,内含亮菌素、多糖、氨基酸、蛋白质等多种成分,具有解痉、镇痛、消炎、退黄疸以及降低谷丙转氨酶、γ-谷氨酰转肽酶和胆红素等作用,主要用于治疗慢性肝炎,迁延性肝炎,慢性胆管炎,胆囊炎以及慢性、浅表性、萎缩性胃炎,还可用于放疗、化疗引起的白细胞减少的辅助治疗.亮菌口服溶液富含游离氨基酸和蛋白,建立和考察亮菌口服溶液中游离氨基酸及蛋白质,有助于提升和完善该品种的质量标准,揭示其药效成分.
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基因多态性与慢性乙肝患者对α干扰素应答的相关性分析
乙型肝炎(hepatitis B)是由乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)引起的传播广、治愈难、危害性大的流行性肝病之一.每年都有约 50 万人死于 HBV 长期感染所导致的肝硬化和肝癌.α 干扰素(interferon alpha,IFN-α)是治疗慢性乙型肝炎的一线用药,过往研究表明,乙肝患者对IFN-α 治疗应答存在差异,乙肝病毒基因型、谷丙转氨酶(ALT)水平等都会影响 IFN-α 的治疗效果.随着精准医学的进步,科学研究者们率先发现了 IL28B(interferon lambda 3,IFN-λ3,干扰素 λ3)基因多态性与丙型肝炎患者对 IFN-α 应答之间的相关性,中华医学会肝病学分会和感染病学分会已将 IL28B 基因多态性纳入《中国丙型肝炎防治指南(2015 版)》[1],作为 IFN-α 治疗丙肝效果的预测指标.而美国《PEG-IFN-α 治疗丙型肝炎临床药物基因组学治疗指南》也提出,IL28B 基因在 rs12979860 位点上的 CC 型为 PEG-IFN-α 治疗优势应答基因型[2].
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iPS细胞领域中、美、日典型科研机构对比研究
干细胞是一类具有自我复制能力的多潜能细胞,在一定条件下,可分化为多种功能细胞.干细胞领域已成为 21 世纪衡量一个国家生命科学发展水平的重要指标之一,并引起了各国政府、科技界和公众的高度关注.目前,干细胞主要分为胚胎干细胞、成体干细胞、诱导多能干细胞三大类型.其中,诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cell,iPS)成为干细胞领域的热点研究方向.iPS 细胞是日本京都大学山中伸弥教授于 2006 年首次提出,因其在技术上和伦理上的优势,迅速在干细胞、表观遗传学以及生物医学等领域引起了强烈的反响,并且得到了美国、欧盟、日本、中国、韩国等各个国家的广泛关注与支持,使得 iPS 细胞技术迅猛发展.
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2017年中国医药生物技术十大进展评选揭晓
2018年1月13日,由中国医药生物技术协会和《中国医药生物技术》杂志共同主办,桐庐县人民政府承办,桐庐富春山健康城管委会、浙江金时代生物科技有限公司、杭州爱唯生命科技有限公司协办的"2017年中国医药生物技术十大进展评选"揭晓活动在浙江桐庐举办.出席本次活动的嘉宾有评选专家团代表魏于全院士、程京院士,主办和承办单位的领导、投资人和企业家、中央及地方十余家媒体记者.
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新年寄语
2017年诺贝尔化学奖颁给了三位欧美的物理学家,表彰他们在冷冻电镜技术领域的突出贡献.冷冻电镜技术是继NMR和X射线晶体成像技术之后的又一个探索生物大分子结构的新技术,其突出的优点是能够研究生物分子在运动状态下的构型,真实反映生物分子的自然状态,有可能为未来的药物设计提供有用的信息.
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