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使用兔进行创面愈合实验研究的体会
近3年来,我们先后使用成年大耳白兔进行了多种外用药物促进兔背部皮肤烫伤或全层皮肤缺损创面愈合的实验研究,共使用兔64只,实验效果满意.由于动物实验的步骤多,其中任何一个环节出现问题,都可能造成实验失败.为大限度地使实验顺利开展,提高工作效率,我们总结了一些实验实施体会,以期对同行们有所裨益.
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Bax和Bcl-2在实验性兔梗阻性黄疸肝损伤中的表达及意义
梗阻性黄疸是外科的常见病症,肝脏是先受损并损伤重的器官.目前对细胞凋亡在梗阻性黄疸肝损害中的作用报道甚少.我们采用免疫组化法检测梗阻性黄疸大耳白兔肝组织Bax、Bcl-2蛋白在不同时期的表达情况,旨在探讨梗阻性黄疸时细胞凋亡在肝损伤中的作用及其调控机制.
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水牛角胎移植骨再生修复骨缺损实验研究
我们对水牛角胎的组织相容性和成骨作用等进行研究,为临床异种骨移植应用提供依据.1.材料和方法:角胎为水牛宰杀后约6 h左右从角鞘中取出,剥去内外"角胎膜"洗净,置常温下晾干备用.A组材料:将备用角胎制成直径1.5 mm,长12 mm圆柱体,用氯仿-甲醇(1:1)脱脂10 h,移入30%过氧化氢脱蛋白48 h 后用蒸馏水洗净,再放入0.6 mmol/L盐酸中部分脱钙2 min,蒸馏水洗净,80℃,4 h 烘干备用.B组材料:除不用盐酸脱钙外均与A组相同.采用日本大耳白兔48只,A、B组各20只,对照组8只.常规方法局部脱毛、消毒、局麻,于左前肢中段连同骨膜截除桡骨10 mm,将备好的A组、B组角胎(煮沸10 min置凉),分别植入骨缺损处,两端插入髓腔1 mm.右侧作对照.对照组左前肢用同法截除桡骨10 mm后缝合切口.术后每日肌注庆大霉素4 U/只,连用3 d.术后2、4、8、16、24周分别处死,HE染色行光镜、扫描电镜检查;同期行手术肢体X线摄片(45 kV、8 mA、2 s)观察桡骨动态变化.
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一种新的脑血管痉挛动物模型制作
一、材料与方法大耳白兔30只,体重3.0~4.0qg,雌雄不限.首先在静脉麻醉下结扎动物双侧颈总动脉,喂养10天,去除死亡及留有严重神经损害症状的动物4只.剩余动物取右侧锁骨下缘切口,暴露并分离右侧锁骨下动脉至腋动脉段.小心分离右侧锁骨下动脉的四个分支,确认并保留椎动脉,其余三个分支全部结扎.腋动脉结扎,在结扎部位的近心端2~3mm处向锁骨下动脉插入直径1mm导管,达右侧椎动脉分出处远端3mm处,在导管插入处近心端约5mm处结扎锁骨下动脉,导管远端经动物背侧皮肤穿出固定后,接微量泵(2ml/h),泵内注入生理盐水.喂养4天,去除手术失败2只,导管故障2只,尚余22只.颈总动脉结扎后两周将动物在非麻醉状态下行第一次脑血管造影,然后将22只动物随机分成两组:SAH组14只,对照组8只.于造影当日(SAH 0天),隔日(即SAH 2天),SAH组行枕大池"二次”注血,对照组枕大池内注入等量生理盐水.喂养至SAH 5天,此间,SAH组动物死亡2只,对照组无死亡及明显神经功能损害表现.在SAH 5天,行第二次脑血管造影.
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椎动脉内灌注罂粟硷治疗症状性脑血管痉挛的实验研究
一、材料与方法:选用健康雄性大耳白兔30只,体重2.5~3.0kg.应用改良的Endo的方法制备症状性脑血管痉挛(SCVS)模型,去除死亡和有严重神经功能缺失症状的动物,剩余20只动物随机分为3组:A组6只,经椎动脉造影,观察蛛网膜下腔出血(SAH)前基底动脉直径,作正常对照;B组7只,SAH后4天组;C组7只,SAH后7天组.B、C组应用椎动脉内灌注罂粟硷(IAP)进行治疗.治疗方法:经锁骨下动脉将Tracker-18导管尖端逆行插入椎动脉起始部,分别于SAH后第4天和第7天经容量输液泵缓慢灌注罂粟硷(PPV).PPV浓度为0.3%,灌注剂量为10~12mg/kg,灌注时间为30~40分钟,灌注过程中,监测动物血压和呼吸变化.
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汉防己甲素抑制兔人工晶状体前膜形成的研究
人工晶状体前膜形成是囊外白内障摘除人工晶状体植入术后影响术眼复明效果的主要并发症之一。本研究采用动物实验方法,动态观察汉防己甲素对人工晶状体前膜形成的影响。 一、材料和方法 1.材料:选择兔龄4~6个月、平均体重(2.76±0.43) kg的大耳白兔36只(72只眼),制成双眼外伤性白内障模型,3 d后行囊外白内障摘除及后房型人工晶状体植入术。 2.方法:手术后将36只兔随机分为3个组,第1组:结膜下注射生理盐水0.5 ml,作为空白对照组;第2组:结膜下注射地塞米松2.5 mg;第3组:结膜下注射汉防己甲素注射液(河南医科大学药理教研室提供) 5 mg;均注射7 d。分别于术后3、7、14、28 d在裂隙灯显微镜下观察人工晶状体前膜形成情况;于7、28 d每组分别取2枚人工晶状体,在T-300型扫描电镜下进行观察,余人工晶状体行HE染色后在光镜下进行观察。
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髁突软骨的细胞分层及其功能研究
我们通过对髁突软骨细胞进行PCNA、FGFR3、Ⅱ型胶原和蛋白多糖聚合体基因表达等研究,探讨髁突软骨的分层及其功能.1.材料和方法:成年日本大耳白兔共6只,雌雄各半.处死动物后,取TMJ标本, HE染色和免疫组化标本用多聚甲醛固定,EDTA脱钙,石蜡包埋.免疫组化采用超敏SP法.抗FGFR3多克隆抗体购自Santa Cruz 公司(美国), 抗PCNA单克隆抗体、SP免疫组化试剂盒(购自福州迈新公司).基因序列、引物设计、RNA探针制备和原位杂交方法同以前的研究[1].
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兔下颌骨牵引成骨过程中组织学变化研究
我们通过观察日本大耳白兔下颌骨牵引成骨过程中组织学变化,探讨牵引骨形成基本过程.材料和方法:①牵引系统:由2个口外固定牵引固定器和4根1.5 mm医用克氏针组成.②手术方法:实验动物选用30只雄性、重3.0~3.5 kg、骨骼发育成熟的健康日本大耳白兔.
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军用固体运动饮料对兔热环境下心肌酶活性的影响
军用固体运动饮料是主要由人参、黄芪、红景天、多抗甲素等组成的中西药复方制剂.本实验观察日本大耳白兔在高温环境下喂饲该饮料后,其心肌酶(AST、LDH、CK、α-HBD)活性的变化,以期为部队在热环境下施工、训练及劳动时战士饮用该饮料提供具有参考价值的实验依据.
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屏障系统大耳白、新西兰兔血液学指标测定分析
目的 了解在屏障环境繁育的不同品系实验兔的生理指标特性.方法 采用SPF级大耳白和新西兰兔各10只,通过心脏采血获得检测样本.用血细胞分析仅、血液生化仪及凝血仪检测其生理指标.结果 大耳白实验兔部分指标有差异(P<0.05),而新西兰实验兔部分指标也存在差异(P<0.05).结论 不同品系的SPF兔生理指标有着明显的差异,这对选择生理指标稳定的实验动物、保证动物实验顺利进行有着非常重要的意义.
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戊巴比妥钠在家兔手术中的麻醉效果分析
目的 探讨戊巴比妥钠在不同剂量下对家兔的麻醉时间与效果,分析其作用特点.方法 53只日本大耳白兔,采用不同的麻醉剂量标准(3%水溶液,1.1、1.3、1.4、1.6 mL/kgBW)静脉注射麻醉后,行心脏外科手术,手术完成后记录麻醉药品使用总量以及手术时长等数据,对麻醉剂量与麻醉时间的量效关系进行分析.结果 随着初始麻醉剂量的增加,兔麻醉时间也呈上升趋势,但在一定剂量时即可发挥满意麻醉效果.手术时间越长,追加麻醉剂次数亦增加,麻醉事故发生率同步增加.结论 时长在1h内的实验兔手术操作,使用3%戊巴比妥钠溶液以静脉注射方式麻醉,剂量以1.3 ~ 1.4 mg/kgBW左右为佳.手术时长较长者,应配合使用局麻药或镇痛药以减少戊巴比妥钠用量,避免麻醉意外事故的出现.
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科学饲养,提高家兔使用率
静脉注射药物的重要检验项目之一是热原检查.热原检查的方法主要采用家兔法和细菌内毒素检查法.虽然在国外常常采用后者,但仍有许多品种,尤其是国产药品多采用家兔法进行热原检测.为保证药品检验结果的准确性和可靠性,首先必须确保实验动物的质量符合试验要求,我所检验用的实验家兔是中国兽药监察所繁殖生产的一级大耳白兔.
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兔遗传性角膜混浊伴角膜缘干细胞缺陷两例报告
人类角膜营养不良是一类侵犯双眼的遗传性疾病,严重损害视功能.目前病因不明,治疗亦缺乏良策.近我们观察到2只先天性虹膜基质发育不全合并角膜混浊的大耳白兔,都存在有角膜缘干细胞缺陷,很受启发,特报告如下.
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充血性心肌病动物模型的实验研究
1材料和方法大耳白兔20只,体重2.0~2.5 kg,雌雄各半,6月龄,由军事医学科学院实验动物中心提供,合格证号:医动字第01-3008;重酒石酸去甲肾上腺素注射液(以下称去甲肾上腺素)为上海天丰药厂产品.
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高脂饮食下兔耳外周微血管内皮细胞的改变及抗氧化维生素的保护作用△(论著摘要)
本实验旨在探讨高脂饮食下动脉粥样硬化微血管一特别是内皮细胞的病理改变及抗氧化维生素E、维生素C和β-胡萝卜素伍用的保护作用.用19只成年日本大耳白兔(雄性,体重2.5~3.0 kg,中国农科院实验动物中心提供),制备透明活体微血管及微循环耳窗模型.动物分为3组:正常对照组5只,喂正常饮食,不给任何药物;高脂饮食组5只,喂高脂饮食(每只每日1.5g胆固醇,购自广州化学试剂玻璃仪器批发部;2.5克猪油,余正常饮食);高脂抗氧化维生素组9只,喂高脂饮食(同上)和抗氧化维生素(每只每日维生素E 100 mg,维生素C 200 mg,均购自北京制药厂;β-胡萝卜素5 mg,瑞士罗氏药品化学有限公司提供).通过耳窗,借助显微电视录相系统(Olympus-A型显微镜,Sony彩色摄像机,Sharp-789型录像机,Sony显示器)观察、记录上述各组动物实验前及实验后每周、连续12周的外周微血管内皮细胞的情况.
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癫狂梦醒汤对兔动脉粥样硬化血管基质金属蛋白酶9表达的影响
目的:观察癫狂梦醒汤对兔动脉粥样硬化(AS)血管基质金属蛋白酶9(MMP 9)表达的影响,以期为癫狂梦醒汤抗 AS提供理论依据。方法将32只日本大耳白兔随机分成空白对照组、模型组、癫狂梦醒汤组。采用高脂喂饲制作 AS模型。第12周末观察动脉血管内膜厚度,免疫组化法观察MMP 9蛋白表达。结果以高脂喂养成功建立 AS模型,模型组血管内膜增厚,MMP 9蛋白表达明显增强;癫狂梦醒汤组血管内膜变薄,MMP 9蛋白表达明显下降(P<0.01)。结论癫狂梦醒汤可抑制 MMP 9蛋白表达,明显抑制 AS发生发展。
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复方芦荟乳膏皮肤毒性试验研究
1 实验材料 复方芦荟乳膏,由本院药剂部实验室提供,批号031017;复方芦荟乳膏基质:本院制剂室.2,4-二硝基氯代苯:用前配制成1%的致敏浓度和0.1%激发浓度.大耳白兔,体重2.5kg左右,雌雄各半;豚鼠,体重250~300g;Wistar大鼠,体重150~180g,雌雄各半,均由哈尔滨医科大学动物实验中心提供.
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穿心莲内酯亚硫酸氢钠加成物解热镇痛作用的实验研究
1 材料1.1 实验动物昆明种小白鼠,体重18~22g,雌雄兼用,合格证号:10-1015.Wistar大鼠,体重150~190g,雄性,合格证号10-1016.日本大耳白兔,体重2.0~2.5kg,合格证号:10-5115.以上动物均购于长春高新医学动物实验研究中心.
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脂平宁胶囊对高脂血症家兔血脂影响的实验研究
1材料与方法1.1实验动物日本大耳白兔60只,体重1.5~2.5kg,雌雄兼用,由河北省动物实验中心提供.
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鲜地龙外敷抑制瘢痕形成的实验研究
1 实验材料 动物:日本大耳白兔24只,4月龄,雌雄各半,体重2.0~2.5kg左右,由佳木斯大学实验动物中心提供.药品:积雪草甙霜软膏由上海现代制药股份有限公司生产,批号061004.鲜地龙原液制备:取鲜地龙,吐泥,洗净泥沙,匀浆致细胞破碎(显微镜下判断),放置24小时,离心,取上清液即为鲜地龙原液.