首页 > 文献资料
-
Ca2+介导的信号通路对LIMK1的调控研究
LIM Kinase(LIMK)是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶.人类LIMK家族共发现2个亚系,LIMK1和LIMK2.它们都是由两个N-末端的LIM结构域、一个间隔区和一个C-末端的激酶结构域组成[1].LIMK1 穿梭于细胞质与细胞核之间,细胞质中的LIMK1主要是在含肌动蛋白的细胞骨架的组装中起作用,可直接磷酸化Cofilin蛋白的3丝氨酸残基使其失活,从而逆转cofilin诱导的肌动蛋白解聚[2].Rho 等蛋白可通过激活磷酸酶 ROCK 或是 PAK等,进一步使其下游作用子LIMK1活化,从而失活Cofilin[3,4].有研究证明Rho,Rac通路激活后通过调控靶蛋白Actin重排、诱导肿瘤细胞侵袭及转移;阻断Rho,Rac通路,则抑制肿瘤细胞侵袭及转移[5,6].本研究着重探讨LIM Kinase 1(LIMK1)在Ca2+介导的信号通路中的活性变化及作用.
-
人Kunitz型蛋白酶抑制剂的研究进展
牛胰蛋白酶抑制剂(Bovine pancreatic trypsin in-hibitor,BFFI)是Kunitz家族的丝氨酸蛋白酶抑制剂,并已广泛应用于临床.淀粉样β蛋白前体(amyloidbeta-protein precursor,脚)包含一段Kunitz型蛋白酶抑制剂结构域(Kunitz protease inhibitor domain,KPI),是较理想的BFFI替代品.本文复习近年来有关人Kunitz型蛋白酶抑制剂研究进展的国内外文献作如下综述.
-
哺乳动物雷帕霉素靶蛋白与肾脏疾病的关系
雷帕霉素(rapamycin)是一类早在1975年从土壤细菌中提取出来的物质,起初将其用作抗真菌治疗,随后又发现其有免疫抑制作用而广泛应用于器官移植后的抗排斥反应当中[1].正是由于雷帕霉素的发现,在1994年研究人员又克隆出了哺乳动物的雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)-一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,而雷帕霉素正是mTOR的特异性抑制剂.当雷帕霉素进入细胞后可以与FK-506结合蛋白12 (FKBP-12)形成复合体,该复合体可以与mTOR特异性结合并抑制后者的功能[2].mTOR是由两部分组成,分别称为mTOR信号复合物1和mTOR信号复合物2(mTORC1, mTORC2),mTORC1和 mTORC2分别行使不同的功能,mTORC1主要功能是刺激细胞的生长和增殖,而mTORC2则主要调控细胞的极性和细胞骨架.
-
人Kunitz型蛋白酶抑制剂-KD/APP的研究进展
牛胰蛋白酶抑制剂(Bovine pancreatic trypsin inhibitor,BPTI)具用广泛的蛋白酶抑制活性.但BPTI是一种异源性蛋白质,具有抗原性.淀粉样β蛋白前体(amyloid beta- protein precursor,APP)中的Kunitz型蛋白酶抑制剂结构域(Kunitz protease inhibitor domain of amyloid protein precursor,KD/APP)是人Kunitz型蛋白酶抑制剂(Kunitz protease inhibitor,KPI),具用强烈抑制丝氨酸蛋白酶的活性,是较理想的BPTI替代品.本文复习有关对其研究进展的国内外文献作如下综述.
-
LKB1在肺癌中的研究进展
LKB1在肺癌中的突变率约为30%,是仅次于p53和Ras突变的抑癌基因。LKB1的胚系突变则会导致肠道息肉为临床特征的杰格斯综合征(Peu-tz-Jeghers syndrome,PJS)[1,2]。LKB1是一种细胞内的丝氨酸/苏氨酸激酶,在AMPK和mTOR等信号通路中参与肿瘤细胞的增殖、分化和凋亡,并与肿瘤的发生、发展及其转移密切相关[3]。
-
CaMKⅡ在细胞代谢中作用的研究进展
CaMKⅡ(钙调蛋白激酶Ⅱ)是一种功能多样的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,在体内广泛存在,可以介导多种具有重要生理功能蛋白质的磷酸化。CaMKⅡ具有五种亚型,分别为CaMKⅡα,CaMKⅡβ,CaMKⅡγ,CaMKⅡδ,其中 CaMKⅡγ和δ是存在于心肌细胞中的主要亚型[1]。现有研究表明, CaMKⅡ在拮抗 Fas/FasL(Fas/Fas 配体)介导的细胞凋亡通路及影响肌细胞兴奋收缩偶联等生理过程中发挥重要作用。改变靶细胞内 CaMKⅡ的表达或活性可能达到抑制心肌重塑过程,抑制肿瘤生长,增强记忆等作用。
-
纤溶酶原激活物及其抑制物与肝脏疾病
纤溶酶原激活物(plasminogen activator,PA)主要有组织型(t-PA)和尿激酶型(u-PA)二类,由血管内皮细胞和组织细胞分泌,是一种有丝氨酸蛋白水解酶作用的单链糖蛋白,主要参与纤溶过程、细胞迁移和组织重建.纤溶酶原激活物抑制物(plasminogenactivator inhibitor,PAI)大部分来源于血管内皮细胞和肝细胞,其主要功能是与PA按1:1比例形成复合物,从而使PA失去活性.PA和PAI均由肝脏清除.
-
从猪血中提取纯化凝血酶方法的改进
凝血酶(Thrombin)是在血液凝固系统中起重要作用的丝氨酸蛋白水解酶,具有较高的专一性,是近几年来国内开发的一种新型速效局部止血药.国内外对牛和人的凝血酶制备作了大量研究,但对猪凝血酶的研究报道较少,而且其制备工艺复杂,技术要求高,不利于工业化生产.我国生猪产量位居世界第一,年产猪血约10万吨.这些猪血除少量以简单的血粉形式被利用外,绝大部分以污水的形式被排放掉,造成了极大的资源浪费和环境污染.从猪血中提取凝血酶既可以充分利用猪血资源,又可以减少因排放而造成的环境污染.因而具有重大的社会意义.
-
复能剂在治疗有机磷中毒中的应用
急性有机磷中毒的治疗除消除毒物外,解毒包括2个方面,一是治标(抗乙酰胆碱),二是治本(应用胆碱酯酶复活剂),有机磷农药属于有机磷酸酯类化合物,大量进入人体后与胆碱酯酶溶解部位的丝氨酸以共价建结合,形成中毒酶一磷酸化胆碱酯酶,不易水解,临床出现中毒症状.
-
应用聚偏氟乙烯-丝氨酸吸附膜血液灌流治疗猪脓毒血症的实验研究
目的 研究聚偏氟乙烯(polyvinylidene difluoride,PVDF)-丝氨酸吸附膜血液灌流的清除血液中内毒素的能力和对脓毒血症预后的影响.方法 雄性家猪16头,给予内毒素1 μg/(kg·h)静脉泵入2 h复制脓毒血症模型.随机分为:实验组(8头),应用PVDF-丝氨酸吸附膜进行血液灌流2 h;对照组(8头),仅复制脓毒血症模型,不进行血液灌流.于基础期和开始内毒素注射后第1、2、3、4、5小时分别测定血浆内毒素浓度、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素-6(interleukin-6, IL-6)水平;并观察72 h死亡率.结果 实验组内毒素水平显著低于对照组[(0.031±0.016)EU/mL vs. (0.141±0.027)EU/mL,P=0.009];组间TNF-α、IL-6比较,差异有统计学意义(P<0.05);肺、肠、肝的组织病理学检查亦显示实验组损伤程度较对照组明显减轻;实验组死亡率25%,对照组87.5%(P=0.003).结论 应用 PVDF-丝氨酸吸附膜进行血液灌流,可以有效清除内毒素,降低TNF-α和IL-6,减轻炎症反应,降低脓毒血症的死亡率.
-
cMyc 调节肿瘤细胞代谢新机制
研究人员发现在营养缺乏状态下, cMyc能够激活丝氨酸合成途径维持癌细胞存活促进细胞增殖,这表明在肿瘤细胞代谢转换过程中cMyc发挥了重要作用。
-
PKC的酶学特征及在结肠癌中的研究进展
蛋白激酶C(PKC)是丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶的家族成员,对细胞的生长、分化、凋亡等信号转导均起重要作用,因而在肿瘤的发生、发展及转移的过程中具有重要的意义.迄今为止,在哺乳动物体内已经发现12种以上PKC亚型,而各亚型在不同类型的肿瘤中有不同的表达.近年来的研究发现,PKC各亚型在正常结肠粘膜上皮细胞的生长调控和结肠癌变中都起着较为重要的作用.
-
登革病毒NS3蛋白酶研究进展
登革病毒的非结构蛋白NS3是一个三功能蛋白,其N端1/3具有丝氨酸样蛋白酶活性。该蛋白酶对聚蛋白前体的切割至关重要,故该蛋白已成为研制登革类疾病治疗试剂的重要靶标。本文对NS3蛋白酶的结构、功能、辅助因子和蛋白酶抑制剂等进行了综述。
-
丝/精氨酸蛋白特异性激酶生理功能及其在肿瘤中的研究进展
丝氨酸/精氨酸(serine/arginine,SR或RS)蛋白激酶是一类能与SR或RS二肽模体特异性结合的酶,而SR蛋白是细胞生长发育过程中的关键因子.目前,在人类、鼠、酵母菌、果蝇、线虫类及植物基因组中发现了至少9种不同编码的SR蛋白激酶基因.其中,SR蛋白特异性激酶(serine/arginine-rich specific kinase,SRPK)家族是一类能特异性磷酸化RNA剪接子内RS结构域的蛋白激酶,人体内主要含有SRPK1和SRPK2,分布于不同的组织和器官中,通过调节SR蛋白磷酸化反应,调节SR蛋白与mRNA前体的特异序列结合,从而帮助拼接因子识别正确的拼接点,同时,在细胞周期中SRPK也具有调节RNA剪接因子在细胞核中分布的功能[1].可见,SRPK在人体正常组织和异常病变中起着某些重要作用,因此,现对SRPK基本生理功能和其在肿瘤中相关研究进行综述.
-
周期素依赖性蛋白激酶5及其激动剂在神经系统发育中的作用
周期素依赖性蛋白激酶5(cyclin dependent kinase 5, CDK5)是CDKs家族的成员之一,属于丝氨酸/苏氨酸激酶家族,具有与其他的CDKs成员同源的序列~[1].CDK5早是从Hela细胞中分离并克隆,并且发现是一种PSSALRE激酶与cdc2和CDK2的基因序列有57%的同源性~[2],故又称为cdc2相关的蛋白激酶.
-
双皮质核素钙调素依赖性激酶1的生物学特点及功能的研究进展
双皮质核素钙调素依赖性激酶-1(DCAMKL-1),属丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,早在神经系统发育中发现其表达在神经元有丝分裂后期,故又名为微管相关蛋白激酶。近年来的研究表明,DCAMKL-1不仅是胃肠道干细胞的标记物,还是胰干细胞的标记物,并广泛参与了胃肠道肿瘤、组织再生及胰肿瘤等多种生理及病理过程的调控。本文对近几年来有关 DCAMKL-1的生物学特点及功能现状进行综述。
-
替加环素和其他广谱抗菌药物对产丝氨酸碳青霉烯酶和金属β内酰胺酶的肠杆菌科细菌的抗菌活性:SENTRY监测网络的报告
肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素的耐药性可以由过量产生AmpC酶且同时外膜孔道蛋白大量缺失和(或)外排泵过量表达,或产生能水解碳青霉烯类的β内酰胺酶引起.这些碳青霉烯酶可以分为金属β内酰胺酶(MβL)和丝氨酸碳青霉烯酶两类.替加环素是一类半合成的甘氨酰环素类抗菌药物,对其他类抗生素耐药的细菌通常对替加环素无交叉耐药.
-
丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶基因真核表达载体的构建及抑瘤功能研究
PJ综合征(Peutz-Jeghers syndrome)是一种常染色体显性遗传疾病.临床表现以唇、颊黏膜、指(趾)黑色囊性斑、多发性胃肠息肉以及肿瘤易患性增加为特征.其疾病基因丝氨酸/苏氨酸激酶(STKⅡ/LKBⅠ)基因于1998年被克隆[1,2],基因所编码的STKⅡ/LKBⅠ蛋白在细胞内广泛表达,行使多种重要复杂的生理功能,参与细胞生命活动的调节.
-
突变雄激素受体第651位丝氨酸磷酸化对致病蛋白功能的影响
目的 定点改变突变雄激素受体(AR)的第651位丝氨酸,建立脊髓延髓肌肉萎缩症细胞模型,探究该位点不同磷酸化状况对致病AR蛋白核转位的影响.方法 体外培养小鼠神经母细胞瘤Neuro 2a细胞系,以AR-65Q质粒作为模板,将AR-65Q第651位丝氨酸分别定点突变为丙氨酸和天冬氨酸,构建AR-65Q的去磷酸化S651A质粒和拟磷酸化S651D质粒,以及带绿色荧光蛋白的重组质粒EGFP AR-65Q、EGFP AR S651A和EGFP AR S651D.将上述质粒测序鉴定后转入细胞系,应用激光共聚焦显微镜观察不同磷酸化状况致病AR蛋白在胞内的分布,采用实时定量PCR验证磷酸化对致病AR mRNA水平的影响,用Western blot分析验证致病AR蛋白的胞质胞核分布情况以及稳定性.结果 ①以AR-65Q质粒构建的致病AR蛋白第651位丝氨酸拟磷酸化AR S651D质粒和去磷酸化AR S651A质粒,相应的EGFP AR-65Q、EGFP AR S651D和EGFP AR S651A质粒测序正确;②第651位丝氨酸磷酸化可使致病AR蛋白在细胞核的聚集减少(P<0.05);③致病AR蛋白第651位丝氨酸磷酸化不影响致病AR mRNA表达水平(P>0.05)和蛋白表达水平(P>0.05).结论 致病AR蛋白第651位丝氨酸的磷酸化可以减少致病AR蛋白在细胞核内聚集,调控该位点磷酸化有望成为治疗脊髓延髓肌肉萎缩症的药物新靶点.
-
氯胺酮拮抗脑缺血诱导大鼠海马脑区c-Src磷酸化及其与Pyk2的结合
目的:研究脑缺血损伤诱导非受体酪氨酸蛋白激酶Src之丝、苏、酪氨酸残基磷酸化及其与Pyk2结合的变化并探讨其可能的调节机制.方法:四动脉结扎模型诱导大鼠前脑缺血损伤,免疫沉淀和免疫印迹法观察Src氨基酸残基磷酸化及其与Pyk2结合的变化.结果:缺血15 min后复灌,Src的Tyr-416和Ser而不是Thr的磷酸化有明显增加,且复灌6h Tyr416磷酸化升至高,而Ser磷酸化1 h升至顶峰,它们分别是正常组的2.8和2.3倍;此外,缺血/复灌明显诱导Src与Pyk2的结合,相似于Tyr-416磷酸化变化,复灌6 h升至高.50mg/kg的氯胺酮能明显抑制缺血/复灌诱导的Src Tyr-416磷酸化及其与Pyk2结合增加,与对照组比有显著性差异(P<0.05).结论:脑缺血诱导了Src蛋白激酶Ser和Tyr-416磷酸化及其与Pyk2结合,它们参与了Src的激活和NMDA受体功能的自调.