Skp2的特点及与肿瘤的关系

细胞周期调控机制的紊乱是肿瘤发生、发展中的重要分子事件.细胞周期调控是由复杂的闭合网络完成,其中细胞周期素(cyclin)-细胞周期蛋白依赖性激酶(cyclindependent kinase,CDK)-细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂(cyclin-dependent kinase inhibitors,CDKI)在细胞周期调控中发挥重要作用.

靛玉红对喉癌Hep-2细胞增殖的影响及机制

目的:探讨靛玉红甲肟(IRO)对人喉癌Hep-2细胞增殖的影响及机制.方法:MTT法检测不同浓度、不同作用时间IRO对Hep-2细胞增殖活性的影响.流式细胞仪检测IRO对Hep-2细胞周期的影响.Western法检测IRO对Hep-2细胞CDK4和cyclin D1蛋白表达的影响.结果:MTT结果发现IRO对Hep-2细胞具有明显的增殖抑制作用,且表现为剂量依赖性(P＜0 01).流式检测发现,以10μmol/L的IRO处理Hep-2细胞后,细胞阻滞于G0/G1期,不同浓度组间差异存在显著性(P＜0 01).Western结果发现IRO对Hep-2细胞CDK4和cyclin D蛋白的表达有抑制作用(P＜0 01).结论:IRO具有抑制人喉癌Hep-2细胞增殖的作用,其机制与阻滞细胞于G0/G1期有关.

利用原位杂交分析几种cyclin和CDK基因在人乳腺癌中的异常表达

目的探讨细胞周期调控基因cyclin和CDK的异常与乳腺癌发生的相关性. 方法采集20例乳腺癌外科手术样品,用原位杂交技术分析了cyclinD1、D3、E、CDK2 和CDK4 mRNA的表达. 结果在大多数乳腺癌样品中,这些基因有一种或几种出现高表达.cyclinD1高表达的样品17例(85%),cyclinD3有12例(60%),cyclinE有7例(35%),CDK2有6例(30%),CKD4有16例(80%).cyclinD1和CDK4显色强,其次是cyclinD3,cyclinE和CDK2显色较弱,正常乳腺组织为阴性显色. 结论推测cyclin和CDK基因,特别是cyclinD1和CDK4的异常表达与乳腺癌的发生有密切关系.

白血病HL-60、HL-60A细胞Cyclin D1、hTERT表达和端粒酶活性及意义

本研究旨在现察cyclin D1、hTERT和端粒酶在正常人单个核细胞(MNC)、HL-60和HL-60A中的表达及活性,并探讨它们与白血病发生及耐药的关系.实验用正常人外周血MNC、耐药白血病细胞株HL-60和HL-60A,采用流式细胞仪检测细胞周期,Annexin V-FITC+ PI染色法检测细胞凋亡,real-time PCR和Western blot检测细胞cyclin D1、hTERT mRNA及蛋白表达,TRAP-ELISA法检测细胞端粒酶活性.结果表明:MNC、HL-60、HL-60A的S期细胞比例分别为(10.21±2.11)%、(44.93±3.00)%、(51.38±1.10)%;凋亡细胞比例分别为(16.14±2.13)%、(7.53±0.92)%、(4.15±0.96)%;cyclin D1、hTERT的mRNA和蛋白水平依次增高;HL-60、HL-60A端粒酶活性较正常MNC增强(p=0.000),HL-60与HL-60A之间无明显差别(p=0.232);cyclin D1、hTERT与端粒酶活性呈正相关(p<0.01).结论:与正常人MNC相比,HL-6O、HL-6OA的S期细胞增多,凋亡细胞减少,且以HL-60A更为明显,这可能与cyclin D1、hTERT、端粒酶活性上调有关.

套细胞淋巴瘤免疫表型的变异

套细胞淋巴瘤根据形态特征可分为经典型和变异型.经典型主要表现为中小淋巴细胞单一性增生、不规则核和核仁不明显;变异型主要包括母细胞性套细胞淋巴瘤和多形性套细胞淋巴瘤,临床表现通常具有更强的侵袭性.套细胞淋巴瘤的免疫表型为表达全B细胞抗原和细胞周期蛋白D1(cyclin D1),通常CD5+、CD10-、CD23-和FMC7+.

STAT5信号转导通路及其靶基因产物与结直肠癌恶性潜能的关系

目的:分析STAT5及其靶基因产物Cyclin D1与Caspase-3在结直肠癌组织中的表达情况,探讨STAT5及其靶基因产物在结直肠癌发病机制中的作用.方法:收集北京海淀医院外科2003-12/2005-12经手术切除的结直肠癌标本60例,应用Western blot检测60例结直肠癌组织、正常黏膜中STAT5及其靶基因产物Cyclin D1与Caspase-3表达.结果:p-STAT5,Cyclin D1及Caspase-3表达水平在结直肠癌组织中明显高于正常黏膜(P=0.028,0.035,0.046);p-STAT5表达水平与分期相关(P=0.026);Caspase-3与分期相关(P=0.041).p-STAT5与Caspase-3在结直肠癌组织中表达情况呈线性相关(r=0.412,P＜0.05).结论:STAT5信号转导通路可能在结直肠癌发生过程中起重要作用,检测结直肠癌中STAT5及其靶基因产物的表达可以反映肿瘤的恶性潜能.

细胞周期素D1(cyclin D1)和Ki67蛋白在食管鳞癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨细胞周期素D1(cyclin D1)、Ki67蛋白在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)中的表达及其临床意义. 方法 应用免疫组化方法检测28例ESCC组织和33例食管炎组织中cyclin D1蛋白、Ki67蛋白的表达. 结果 在ESCC与食管炎组织中cyclin D1阳性表达率分别为60.7%(17/28)和33.3%(11/33)(χ2=4.573,P=0.032),Ki67标记指数(Ki67 LI)分别为(49.21±25.15)%和(11.62±9.87)%(t=7.908,P=0.000).ESCC组TNM分期中Ⅰ期cyclin D1阳性表达率为14.3%(1/7),Ⅱ期为55.6%(5/9),Ⅲ期为85.7%(6/7),Ⅳ期为100%(5/5),Ⅲ期与Ⅰ期、Ⅳ期与Ⅰ期相比,差异有显著性(P值分别为0.029,0.015).有淋巴结转移者cyclin D1阳性表达率为90.9%(10/11),无淋巴结转移者为41.2%(7/17)(P=0.016).28例ESCC随访6～34个月,(25.0±4.2)月,死亡4例(3例为原发病进展,1例脑血管意外),生存19例,失访5例. 结论 cyclin D1的表达与进展期肿瘤、淋巴结转移有关.Ki67在肿瘤中高表达,表达强弱与肿瘤分化程度及肿瘤分期无关.

细胞S期激酶相关蛋白与妇科肿瘤关系的研究进展

细胞的生长、分裂必须经过间期和有丝分裂期.细胞周期得以运行的核心机制是在一系列细胞周期素(cyclin)相起伏的调控下,相应的周期素依赖性蛋白激酶(cyclin-dependent-kinase,CDK)依次激活,驱动细胞由G1,S,G2到M期.细胞周期调控机制的紊乱,将造成细胞失控性生长,终导致肿瘤发生.细胞S期激酶相关蛋白2(S-phase kinase-associated protein 2,Skp2)是泛素连接酶复合物SCF(Skpl-Cullin-F-box)的底物识别序列,对细胞周期的调控起重要作用,并在肿瘤研究中日益受到关注.本文就细胞S期激酶相关蛋白与妇科肿瘤关系的研究进展综述如下.

Objective: This study was designed to investigate differential pattern of G1-cyclins (D1 and E) in transitional cell carcinoma (TCC) of human urinary bladder with or without human papillomavirus-18 (HPV-18) infection. Methods: Immunohistochemistry method was used in the detection of the expression of G1-cyclins in 57 cases of TCC (7 normal bladders as control), and HPV-18 DNA was found in 29 cases by polymerases chain reaction (PCR). Results: Cyclin D1 expression was found in 41 of 57 (71.93%) TCCs and it was reverse associated with HPV (x2=8.21, P<0.05). And cyclin D1 expression was found in 16 of 29 (55.17%) in HPV-18 infection group and 25 of 28 (89.29%) in non-HPV infection group. Cyclin E expression was detected in 36 of 57 (63.16%) and the association between the cyclin E expression and HPV infection was not found (x2=0.52, P>0.05). Cyclin E expression was found in 17 of 29 (56.82%) in HPV-18 infection group and 19 of 28 (67.86%) in non-HPV infection group. There was obvious difference in the cyclin D1 and cyclin E expression between the TCC and normal tissue (x2=7.46, P<0.05; x2=7.45, P<0.05, respectively). Conclusion: These data demonstrated that HPV infection altered the control of G1 cell cycle. And changes of G1 cell cycle regulatory proteins, either by interaction of cellular protein with viral oncoproteins or by changes in the cellular proteins themselves, may be critical for carcinogenesis of TCC of urinary bladder.

肿瘤检验cyclin D1表达DNA含量与肝癌的关系

探讨研究cyclin D1表达DNA含量及细胞凋亡与肝临床发展关系.方法通过检测cyelin D1表达、细胞调亡发生和细胞DNA含量进行分析.结果研究王示:正常肝组织DNA含量度值为0.36±0.07,肝癌中/高分化组和低分化组DNA分别是正常水平人的1.78倍和2.2倍.结论 Cyelin D1的过度表达可反应肝的侵袭力.它与肝癌的发生发展密切相关.

Cyclin G2调节细胞增殖周期的研究进展

细胞周期素G2(CyclinG2)是一个较新发现的细胞周期素,其基因定位于染色体5q32-34,其cDNA长约8.60kb.其与CyclinG1、CyclinI同属于CyclinG亚类.CyclinG2可能不同于其它周期素,其表达可被DNA损伤和抑癌基因VHL诱导,对细胞增殖可能起负性调节作用.实验表明CyclinG2可通过与PP2A形成复合物、影响细胞骨架等途径来调节细胞周期.本文将针对CyclinG2调节细胞周期的研究进展作一综述.

消痹方对兔膝骨性关节炎软骨下骨CycIin D1 mRNA的影响

目的：探讨消痹方对兔膝骨性关节炎软骨下骨CyclinD1mRNA的影响。方法将新西兰大白兔分为试验组和对照组，术后1周开始分组灌胃治疗。采用X线摄片、光镜对软骨下骨进行组织形态学观察，RT-PCR法检测软骨下骨CyclinD1的表达。结果试验组软骨下骨退变表现、骨质增生和软骨下骨结构紊乱现象明显较对照组轻，试验组骨转换指标CyclinD1mRNA表达量较低(P＜0.05）。结论消痹方通过下调CyclinD1mRNA的表达，降低软骨下骨重塑速率。

抗Cyclin D1胞内抗体AD5N对宫颈癌HeLa细胞的影响

目的:抗Cyclin D1胞内抗体AD5N对宫颈癌细胞增殖的抑制效应分析.方法:将携带抗Cyclin D1胞内抗体AD5N的真核表达载体pcDNA3.1-AD5N,利用脂质体介导法稳定转染宫颈癌HeLa细胞,G418筛选阳性细胞株,进一步通过Westem blot、MTT法及流式细胞术分析该胞内抗体的细胞内表达和抗肿瘤效应.结果:ADSN在稳定筛选的细胞株中有效表达,与空细胞和空质粒转染的细胞株相比,明显抑制HeLa细胞增殖,并诱导细胞凋亡(P＜0.01).细胞周期G0-G1期指数增高10.35%,S期指数下降15.77%,凋亡细胞指数上升6.38%.结论:抗Cyclin D1胞内抗体AD5N基因的表达,抑制宫颈癌细胞的增殖,阻滞细胞周期进展,并诱导细胞凋亡.

Cyclin D1与P27在口腔鳞癌的表达及意义

目的:探讨Cyclin D1与P27在口腔鳞癌的表达及意义.方法:收集64例经病理证实均为口腔鳞状细胞癌,并且临床病理资料完整的病例.用免疫组化方法检测其与正常黏膜的Cyclin D1与P27的表达差异.结果:Cyclin D1在鳞状细胞癌中的表达明显高于正常黏膜组织,差异有显著性(P＜0.01).P27在鳞状细胞癌中的表达明显低于正常黏膜组织,差异有显著性(P＜0.01).结论:Cyclin D1过表达可能是口腔鳞状细胞癌发生的早期因素,Cyclin D1通过促进细胞增殖、抑制P27等途径促进肿瘤生成.

皮肤鳞状细胞癌中p16、Cyclin D1、pRb蛋白表达与临床病理特征的关系

目的:分析皮肤鳞状细胞癌中p16、Cyclin D1、pRb蛋白表达与临床病理特征的关系为临床诊断提供依据.方法:采集45例皮肤鳞状细胞癌标本及10例正常皮肤标本,采用免疫组化法测定其中的p16、Cyclin D1、pRb蛋白表达情况.结果:皮肤鳞状细胞癌的p16蛋白阳性表达率明显低于正常皮肤,Cyclin D1、pRb蛋白明显高于正常皮肤,差异有统计学意义(P<0.05).Broders分级为 Ⅲ~Ⅳ 级 、有淋巴结转移者p16蛋白阳性表达率明显低于 Ⅰ~Ⅱ 级者(P<0.05),Cyclin D1、pRb蛋白阳性表达明显高于 Ⅰ~Ⅱ 级 、无淋巴结转移者(P<0.05).直线相关分析显示,p16蛋白阳性表达与Cyclin D1、pRb蛋白呈负相关;cyclin D1蛋白阳性表达与pRb蛋白呈正相关.结论:皮肤鳞状细胞癌的发生和进展可能是p16蛋白 、Cyclin D1、pRb蛋白异常表达的结果.故认为可通过对三种指标进行检测来评估皮肤鳞状细胞癌的恶性程度及预后.

幽门螺杆菌对胃上皮细胞凋亡及p27kipl表达的影响

凋亡是一种基因调控的程序性细胞死亡,正常情况下它与增殖一起维持人体细胞总数的相对恒定.细胞周期调控点是将细胞增殖和凋亡连在一起的枢纽,是控制细胞增殖与凋亡的双向开关.p27kipl(p27-kinase inhibition protein 1)基因是Polyka等[1]于1994年发现的新的CKI基因,具有限制性调节细胞周期进程的作用,这一作用主要通过抑制Cyclin E-CDK2和Cyclin D-CDK4等G1期激酶复合物,调控G1/S期的转换,使突变细胞不能通过G1期来实现的.当p27kipl表达下降或缺失时,G1/S期的转换出现紊乱,导致细胞异常增殖.本研究通过选用幽门螺杆菌(Hp)Ⅰ型菌株感染人胃腺癌上皮细胞株SGC-7901建立体外Hp感染细胞模型,检测感染细胞的凋亡率和细胞周期抑制因子p27kipl及其mRNA的表达,探讨不同浓度Hp对感染细胞凋亡及p27kipl表达的影响,为深入了解Hp相关性胃癌的发生发展提供实验依据.

细胞周期素 E p27 在日光角化病和高分化鳞癌中的表达及意义

近年来研究表明细胞周期素E(Cyclin E)与p27的表达与肿瘤的发生、分化、转移及预后等有密切关系,为研究Cyclin E、p27在日光角化病和皮肤鳞癌的发生发展过程中所起的作用和两指标之间的相关性,我们采用免疫组织化学法检测了Cyclin E、p27 在日光角化病和皮肤鳞癌中的表达情况.

他克莫司在体外对HepG2.2.15细胞增殖及乙型肝炎病毒复制的影响

背景:肝癌复发与乙肝病毒再感染两者关系尚不明确,有人认为与肝移植后免疫抑制剂应用有关.目的:观察他克莫司在体外对肝癌HepG2.2.15细胞增殖及对细胞内乙肝病毒复制的影响.方法:选择肝癌HepG2.2.15细胞进行体外培养,第3代细胞培养24 h后加他克莫司进行干预,0 g/L他克莫司作为对照组,50 g/L 他克莫司为低浓度组,100,500 g/L他克莫司为中浓度组,1 000,3 000 g/L他克莫司为高浓度组.结果与结论:①中、高浓度的他克莫司对HepG2.2.15细胞有增殖抑制作用,低浓度无抑制作用,且有相关性.②高浓度他克莫司作用时使HepG2.2.15细胞停止在G0/G1期.③他克莫司可以使HepG2.2.15细胞中CyclinA表达降低,且呈浓度依赖性,他克莫司浓度越高,CyclinA表达越少.④他克莫司作用HepG2.2.15细胞,对HBV的复制无影响.结果说明他克莫司在体外对HepG2.2.15增殖有抑制作用,其中CyclinA可能发挥一定的作用,而对乙肝病毒复制没有影响.

间歇性高糖对胰岛β细胞生长及细胞周期进程的影响

背景:间歇性高糖可阻滞胰岛β细胞生长,增加β细胞的凋亡,但具体作用机制尚不清.目的:观察间歇性高糖对大鼠胰岛素细胞增殖、凋亡及对细胞周期进程的影响.方法:实验对大鼠胰岛素细胞进行培养,分为正常糖对照组,恒定性高糖组和间歇性高糖组,分别含葡萄糖5.5,30,30和5.5 mmol/L间歇换液.采用细胞计数试剂盒检测细胞增殖活性,流式细胞仪测定细胞周期,Annexin-V/PI双标流式细胞术检测细胞凋亡,应用Western blot检测细胞周期调控蛋白Cyclin D1的表达水平.结果与结论:与正常糖对照组相比,恒定性高糖组及间歇性高糖组均明显抑制大鼠胰岛素细胞细胞的生长(P < 0.01),增加大鼠胰岛素细胞的凋亡(P < 0.01),明显抑制细胞周期进程,使大鼠胰岛素细胞的细胞周期更多滞留在G0/G1期(P < 0.01),能显著减弱细胞周期调控蛋白Cyclin D1的表达(P < 0.01).与恒定性高糖组相比,间歇性高糖以上各指标作用均更显著(P < 0.01).结果证实,间歇性高糖能够抑制大鼠胰岛素细胞的生长,增殖和诱导凋亡,其机制可能是通过降低Cyclin D1的活性,使细胞阻滞在G0/G1期,抑制细胞周期进程,从而减弱细胞的增殖活性.

β-淀粉样肽(25-35)对PC12细胞Cyclin D1、CDK4、pRb、E2F1基因表达的影响

目的 观察β-淀粉样肽(25-35)[β-amyloid peptide (25-35),Aβ25-35]对体外血清饥饿培养PC12细胞的Cyclin D1、CDK4、pRb、E2F1基因表达的影响.方法 用终浓度为25 μmol/L Aβ25-35处理PC12细胞,流式细胞仪检测分析细胞周期的改变,通过RT-PCR检测Cyclin D1、CDK4、E2F1基因mRNA表达变化,Western印迹检测Cyclin D1、CDK4、pRb蛋白表达的变化.结果 流式细胞仪分析表明血清饥饿培养24 h可使约90%PC12细胞停滞于G0/G1期,25 μmol/L Aβ25-35诱导组8、16、24 h与对照组比较,S期百分率明显增加(P＜0.01),16 h后细胞凋亡率明显增加(P＜0.01),可见明显的亚二倍体峰(Ap峰);Aβ25-35浓度诱导血清饥饿培养的PC12细胞0～20 h,Cyclin D1、CDK4、pRb 、E2F1 mRNA和蛋白表达增高.结论 Aβ25-35诱导同步化于G0/G1的PC12细胞重新进入细胞周期,并阻滞于S期,同时出现凋亡,可能与增加Cyclin D1、CDK4、pRb 、E2F1 mRNA和蛋白的表达有关.