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磷酸组胺质量标准的总结及提高
目的:提高磷酸组胺质量标准.方法:增加红外鉴别及薄层色谱法检查组氨酸杂质.结果:样品与对照品的红外图谱一致;薄层色谱图中,磷酸组胺与组氨酸斑点清晰、分离度好.结论:增加的红外鉴别及组氨酸杂质检查项的方法简便、准确、稳定、专属性强,提高了磷酸组胺的质量标准.
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梭曼脱烷基的机制及化合物对其的延缓作用
梭曼脱烷基的分子机制有六十年代形成的碳离子形成机制及近年来提出的推拉(push-pull)机制,碳离子形成机制是组氨酸咪唑基上的质子化基团与烷氧基上的氢氧键结合,使C-0极化形成碳离子,然后C-0断裂脱下烷基.推拉(push-pull)机制认为甲基转移的动力来自AChE活性中心阴离子结合部位的氨基酸残基E199、W84的静电及空间相互作用,伴随甲基Cβ至Cα的转移,C-O键断裂.H440H+及氧阴离子洞对C-O断裂及随后负电荷形成起拉(pull)作用.
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1-12 盐酸西替利嗪对鼠伤寒沙门氏菌诱变性试验
目的检测盐酸西替利嗪对鼠伤寒沙门氏菌的诱变性.方法用鼠伤寒沙门氏菌诱变性试验标准平皿掺入法,采用TA97、TA98、TA100和TA102组氨酸缺陷型鼠伤寒沙门氏菌,菌株经鉴定合格,在±S9mix条件下测试.盐酸西替利嗪5 000.0μg/皿浓度抑菌,因此,高浓度为1 000.0μg/皿.结果阳性对照敌克松在-S9mix,二氨基芴、1,8-二羟蒽醌在+S9mix条件下,能明显增加测试菌株的回变菌落数,均高于阴性对照的2倍以上,说明测试系统可靠.盐酸西替利嗪0.1、1.0、10.0、100.0和1 000.0μg/皿各浓度对4株测试菌株回变菌落数均未超过阴性对照组2倍.结论盐酸西替利嗪在0.1~1 000.0μg/皿浓度范围内对鼠伤寒沙门氏菌无诱变性.
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寒凝血瘀证大鼠的肠道菌群变化与粪便代谢特征分析
目的:探讨寒凝血瘀状态下大鼠肠道菌群多样性及粪便中内源性代谢物的变化,并考察与寒凝血瘀证密切相关的肠道菌群、代谢物、代谢通路.方法:采用冰水浴诱导的大鼠寒凝血瘀证模型,利用16S rRNA基因测序技术联合UPLC-TOF-MS的粪便代谢组学技术,将扰动的肠道菌群与内源性生物标记物进行关联分析.结果:基于Illumina MiSeq平台,发现与空白组大鼠相比,寒凝血瘀证模型组大鼠中Firmicutes显著上调(P<0.05),Bacteroidetes显著下调(P<0.01),显著差异的属有23个.确定了7个与寒凝血瘀证相关的粪便代谢物,涉及到的3个相关性强的代谢通路,分别为缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸生物合成,泛酸和辅酶A生物合成,组氨酸代谢.另外,肠道菌群的属与粪便代谢物有强相关性.结论:16S rRNA的高通量基因测序技术与代谢组学技术的联用可用于评价寒凝血瘀证的病理机制.
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肌肽对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用
肌肽(carnosine)即β-丙氨酰-L-组氨酸,近几年发现其具有抗氧化,抗自由基作用.因而提出肌肽是继SOD、VitE之后的又一内源性自由基清除剂和抗氧化剂[1].缺血性脑中风是我国及发达国家老年人群中的第三大死亡原因,也是中老年人致残和痴呆的重要原因之一.尽管治疗缺血性脑中风的药物不断问世,但缺血性中风的预后仍然令人失望.因此,寻找治疗脑缺血损伤更有效的神经保护剂已成为临床医学领域的重要研究课题.本研究制作大鼠全脑不完全缺血模型,借以观察肌肽是否具神经保护作用.
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组氨酸修饰聚酰胺-胺型树状高分子提高血清中基因转染效率的研究
组氨酸的咪唑环由于其独特的质子化机理而受到了广泛的关注.研究表明,组氨酸修饰的基因载体可对抗血清对基因转染的影响,提高载体在血清中的基因转染效率.本研究利用氨解反应将组氨酸接枝到聚酰胺-胺树枝状高分子(PAMAM)的表面,制备了一种新型的PAMAM衍生物-组氨酸修饰的聚酰胺-胺树枝状高分子(His-PAMAM G4).利用~1H NMR对His-PAMAM G4进行表征,证明一个PAMAM G4分子上接枝37个组氨酸分子.对His-PAMAM G4/DNA复合物进行结合DNA能力、粒径、表面电位、粒子形态等理化性能的表征,证明该新型聚合物对DNA分子具有良好的压缩能力.细胞活性检测结果表明,His-PAMAM G4对Bel 7402和Hela细胞的毒性均显著低于未经修饰的PAMAM G4.His-PAMAM G4在血清中的转染效率与PAMAM G4相比大幅度提高,也显著高于阳离子聚合物PEI 25k和市售商品阳离子脂质体Lipofectamine.因此,His-PAMAM G4有望成为一种高效、安全、可在体内应用的非病毒基因载体.
关键词: 聚酰胺-胺树枝状高分子 组氨酸 血清 基因转染 基因载体 -
蛋白质磷酸化检测方法及原理
蛋白质是生命活动的物质基础,是机体细胞的重要组成部分.新生蛋白质多肽需要经过翻译后修饰才能转变为成熟蛋白质.翻译后修饰包括:甲基化、羟基化、羧基化、糖基化、脂酰化、异戊烯基化等共价修饰[1].蛋白质磷酸化是重要的蛋白质翻译后修饰之一,在蛋白激酶催化作用下,磷酸基团由供体分子转移到蛋白质的含有羟基的氨基酸侧链上,具有可逆性[2].蛋白质磷酸化和去磷酸化几乎调节着生命活动的全部过程,文献显示在任何时间内真核细胞蛋白分子中约有1/3的数量在发生磷酸化[3],主要发生在丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸上,较少见的磷酸化氨基酸还有精氨酸、组氨酸、赖氨酸以及天冬氨酸和谷氨酸等.蛋白质磷酸化氨基酸有4种类型:①氧-磷酸盐,通过羟氨基酸的磷酸化形成;②氮-磷酸盐,通过精氨酸、赖氨酸或组氨酸的磷酸化形成;③酰基磷酸盐,通过天冬氨酸或谷氨酸的磷酸化形成;④硫-磷酸盐,通过半胱氨酸磷酸化形成[4].
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FHIT基因研究进展
早在1979年,Cohen等就发现一家族性早发、双侧、多灶的肾透明细胞癌与t(3:8)染色体易位有关.此后,人们在肺癌、食管癌、胃癌、乳腺癌等多种肿瘤组织中观察到3号染色体短臂的高频率缺失,提示在3p上可能存在抑癌基因.1996年,Ohta等[1]用差异显示分析探针和外显子捕获法在3p14.2上确定了一个新的基因,由该基因cDNA推算的蛋白质与具有3价组氨酸结构域的HIT蛋白质家族高度同源,又因为此基因跨越脆性位点(fragile site),故将之命名为FHIT(fragile histidine triad)基因.FHIT基因全长超过1 Mb,为一高度保守的基因序列,其mRNA全长约1.1 kb,包含10个外显子,由第5~9外显子编码一个相对分子质量约为16 800的蛋白.Barnes等[2]通过蛋白质活性分析证实,人类FHIT蛋白是一典型的二腺苷酸三磷酸水解酶(Ap3A),催化Ap3A水解为ADP和AMP,FHIT蛋白质水解酶活性丧失将导致Ap3A水平升高.
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组胺对肥大细胞激活的研究
组胺是肥大细胞和嗜碱性粒细胞内组氨酸脱羧基后产生的一种胺类物质,是肥大细胞和嗜碱性粒细胞脱颗粒的标志物,本研究通过组胺对人大肠肥大细胞进行体外干预,探讨组胺对人肥大细胞类胰蛋白酶释放的调节和可能的机制.
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静脉氨基酸营养液是否不平衡?
众所周知,基于氨基酸的营养支持有利于促进氮平衡.不过,尚不清楚为消耗性疾病患者提供营养支持时氨基酸的佳成分是什么.我们已经阐述过为危重消耗性疾病患者提供支持时氨基酸的佳组分和比例.本文将讨论条件性必需氨基酸的概念,并综述人体对组氨酸、丝氨酸、精氨酸、牛磺酸、半胱氨酸、酪氨酸和谷氨酸的需求.同时,我们也回顾了如何使用二肽对危重患者提供胃肠外支持,并提出如何改善供消耗性疾病患者使用的氨基酸成分.
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肽转运载体的分子特征
动物体内的肽转运载体主要有两种,PepT1和PepT2.PepT1主要是肠肽转运载体,PepT2主要是肾脏肽转运载体.肽载体的分子结构特征主要有:(1)有12个假想的穿膜区,在9区和10区之间有一大的胞外环,且所有穿膜区内的序列都高度保留,胞外环上的序列保留的很少;(2)被编码的蛋白上有多个N-糖基化和蛋白激酶的识别位点,他们可能参与肽转运的调控;(3)PepT1上的His-57和PepT2上的His-87是关键的组氨酸残基,他们可能是转运蛋白发挥吸收功能时关键的结合位点;(4)不同动物肽转运蛋白的氨基酸范围在707到729之间,且不同动物相同器官肽转运载体的同源性高(大约80%),同种动物不同器官肽转运载体的同源性低(大约50%).了解肽载体的分子特征和组织分布,可以更好地理解肽吸收的分子机制并有利于今后肽类药物的研发.
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WT 1在儿童白血病中应用的研究进展
1 WT 1基因的作用WT 1基因(Wilms'tumor gene)位于11p13,编码是一种半胱氨酸-组氨酸锌指转录因子,分子量约为52-54 kD,在具有肾母细胞瘤遗传倾向和散在发病的儿童中被灭活.特异的杂合子显性失活突变时WT 1存在活性,此时与严重的肾脏和性分化异常有关[1].WT 1种系突变或缺失导致一系列泌尿生殖系的异常发育,两性畸形和儿童肾母细胞瘤的易感性增加[1].初认为它编码一种转录抑制因子,如今发现WT 1相关的功能更偏向于一种参与肾脏发育和性决定的基因的转录激活因子.
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前列腺癌组织FHIT和PSA表达的初步研究
目的:探讨脆性组氨酸三联体(fragile histidine triad, FHIT)与前列腺特异性抗原(prostate specific antigen, PSA)在前列腺癌组织中的表达及意义.方法:选取不同分级的前列腺癌组织(64例)和前列腺增生组织(32例),采用免疫组织化学SP法染色,检测FHIT及PSA的表达情况.结果:64例前列腺癌组织中病理分级(按Gleason分级系统)分化良好癌、中等分化癌和分化不良癌组织中FHIT的蛋白表达率分别为84.2%(16/19)、45.4%(10/22)和17.4%(4/23).随着Gleason评分增加,FHIT蛋白表达率显著下降,P<0.05.病理分级中分化良好癌、中等分化癌和分化不良癌PSA的蛋白表达率分别为100%(19/19)、68.2%(15/22)和34.8%(8/23),随着Gleason评分增加,PSA蛋白表达率显著下降,P<0.05.结论:FHIT的表达与前列腺癌的Gleason评分负相关;PSA的表达与Gleason评分负相关;FHIT和PSA的表达呈正相关.
关键词: 前列腺肿瘤/病理学 组氨酸 前列腺特异抗原/分析 免疫组织化学 -
075 神经肽在鼻粘膜超敏反应中的作用
鼻粘膜除了受自主神经系统支配,还受非肾上腺素能非胆碱能神经(nonadrenergic noncholinergicherve,NANC)的影响。这些NANC神经释放多种神经肽,如P物质(AP)、神经激肽A(NKA)、神经激肽B(NKB)、降钙素基因相关肽(CGRP)、胃分泌素释放肽(GRP)、血管活性肠肽(VIP)、氨基端为组氨酸、羧基端为蛋氨酸的肽(PHM)和氨基端为组氨酸、羧基端为异亮氨酸的肽(PHI)、神经肽Y(NPY)等,它们与经典的神经递质共存共释,在鼻粘膜超敏反应中起重要作用。
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骨骼肌肌球蛋白分子重链异形体的运动适应
肌球蛋白是一个六聚体的生物大分子,由两条分子量约为19.4-21.2万道尔顿的重链(Myosin Heavy Chain, MHC)和两对分子量约2.0万道尔顿左右的轻链(Myosin Light Chain, MLC)组成。重链由大约1800个氨基酸组成并含有特殊的3-甲基组氨酸肽链;轻链有3种类型:LC1、LC2 和LC3,其中LC1和LC2在碱性条件下容易从肌球蛋白分子上解离下来,故称碱性轻链(AIKaLi Light Chain),而LC2易受巯基试剂作用而解离,故称巯解轻链(TDNB Light Chain)。
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精氨酸和组氨酸对妊娠中后期及分娩前期小鼠离体子宫收缩的影响
目的 研究精氨酸和组氨酸对妊娠中后期及分娩前期小鼠离体子宫收缩的影响.方法 用HPLC - MS/MS法测定妊娠中后期(15.5 dPc)及产前期(18.5 dpc)小鼠血清中精氨酸(Arg)和组氨酸(His)含量;2种氨基酸浓度分别在0.1,0.5,1,2,5,10 mmol· L-1时,测定对上述2个时期孕鼠子宫平滑肌条收缩的影响.结果 15.5dpc孕鼠血清中,2种氨基酸含量明显高于18.5 dpc的孕鼠(P<0.05),该时期子宫对氨基酸的抑收缩作用更敏感.结论 生理浓度下,Arg和His对妊娠中后期孕鼠子宫平滑肌收缩有明显抑制作用,可在小鼠妊娠中后期起维持作用.
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组氨酸修饰pH敏感PAMAM-His/DOX复合物的制备及体外评价
目的:构建组氨酸(His)修饰pH敏感响应的载抗肿瘤药物阿霉素(DOX)复合物PAMAM-His/DOX,并对其进行表征及初步评价.方法:通过控制His和PAMAM的投料比,合成3种不同His修饰程度的PAMAM-His载体;采用物理包埋的方式将DOX包载在PAMAM的疏水空腔内制备系列载药复合物.对各载药复合物的粒径、电位、包封率、载药量、体外释放行为等进行考察,并采用MTT法评价各复合物对乳腺癌细胞MCF-7的细胞毒性作用.结果:PAMAM-His/DOX复合物的粒径均在10 nm左右;随着His修饰程度的增加,其Zeta电位降低,且对抗MCF-7的细胞毒性增加;体外释放实验结果表明复合物具有明显的pH酸敏感特性,并且在酸性条件下(pH 5.0),药物累积释放量与His修饰程度成正比.结论:本实验成功制备并初步评价了3种His修饰程度的PAMAM-His/DOX,为下一步的体内外抗肿瘤研究奠定了理论基础.
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大孔纤维素亲和膜在生化制剂纯化中的应用
目的:采用膜亲和色谱这一新型纯化分离手段,结合膜分离过程的高速度和亲和吸附的高灵敏度进行水系溶液中内毒素的吸附去除工作,以求建立一种方便实用的内毒素去除方法.方法:选取优质滤纸为原料,交联后制成纤维素膜,分别用静态和动态两种方法制备出含有组氨酸和粘多菌素的亲和膜.结果:以组氨酸为配基的亲和膜,其吸附效果可使滤液中的内毒素水平低至0.5EU*ml-1以下,可满足一般医药卫生方面的要求;以粘多菌素B为配基的亲和膜,其吸附能力好于组氨酸亲和膜,对自来水和药物中天然内毒素的去除率在95%以上.结论:亲和膜堆对内毒素的去除效果与文献报道的柱亲和色谱法相当.但在成本、效率、处理量及使用寿命方面更具有优越性和实用性.
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延年防病有茯苓
茯苓是常用中药,也是一种具有补益作用的食品.中医认为,茯苓有渗湿利水,健脾补中,宁心安神功效.现代研究表明,茯苓含茯苓多糖、三萜类及麦角甾醇、卵磷酸、胆碱、组氨酸、多种酶以锌、硒、镁、铁等物质,其内含营养成分及活性因子对人体健康十分有益,不愧是延年、益智、抗衰老之佳品.如今,利用茯苓制作的各类保健食品越来越多.以下就介绍几种茯苓食疗简效方.
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食鱼须当心
吃鱼要新鲜,防组胺危害鲤鱼、金枪鱼、秋刀鱼、沙丁鱼等含有丰富的组氨酸.组氨酸是人体必需的氨基酸之一,然而,当鱼发生腐败或不新鲜时,由于细菌的生长繁殖,可使组氨酸脱去羧基变成组胺.