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即刻早期和晚期基因的转录产物在巨细胞病毒感染中的诊断作用
近年来对于巨细胞病毒(CMV)的即刻早期(IE)基因和晚期(L)基因的结构和功能有了较为深入的研究.应用核酸杂交技术和聚合酶链反应等先进技术检测IE-mRNA和L-mRNA能在早期特异性地诊断CMV活动性感染,对于临床治疗和预后监测有重要的指导意义.
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PCR与ELISA法检测300例乙型肝炎病毒标志物的比较
乙型肝炎临床上一般用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测乙型肝炎病毒感染标志物HBVIgM来确定HBV的感染状况,笔者结合聚合酶链反应(PCR)技术检测了300例,其结果进行比较分析.
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乙型肝炎血清标志物与乙型肝炎DNA含量的关系研究
我国是乙型肝炎病毒(HBV)感染的高发区域.本文采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术检测246例乙型肝炎患者血清HBV DNA,并与时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA)测定其HBV血清素标志物(HBV-M)的结果进行比较与分析,探讨HBV DNA含量与HBV-M之间的关系,现将结果报告如下.
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多重聚合酶链反应技术检测严重少精及无精子症患者无精子因子的研究
遗传缺陷引起男性精子发生障碍是男性无精子症、严重少精子症的原因之一。业已证明,位于Y染色体长臂的无精子因子(azoospermia factor, AZF)的基因缺失或突变引起精子发生异常,为调控精子发生的候选基因之一。本研究采用多重聚合酶链反应技术检测50名正常男性及36例严重少精及无精子症患者AZF因子。
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1-24 茶多酚、维生素C对石英致肺泡巨噬细胞DNA损伤的保护作用
目的探讨体外培养条件下石英粉尘对肺泡巨噬细胞DNA的损伤作用及茶多酚和维生素C的保护作用.方法将肺灌洗收获的肺泡巨噬细胞分别与石英粉尘悬液共同培养后,用单细胞凝胶电泳技术检测肺泡巨噬细胞DNA损伤的状况.结果大鼠肺泡巨噬细胞与不同浓度石英粉尘共同培养后,彗星出现率、DNA迁移长度增加,与阴性对照组比较,差异有显著性(P<0.05).随着石英粉尘与肺泡巨噬细胞作用时间的延长,彗星出现率及DNA损伤也呈增加的趋势.在培养液中加入茶多酚和维生素C能减轻石英粉尘所致肺泡巨噬细胞DNA的损伤.其中以40μg/ml的茶多酚及30μg/ml的维生素C保护效果较好.结论石英粉尘能诱导肺泡巨噬细胞DNA损伤.且随着粉尘浓度的增加以及作用时间的延长其DNA损伤程度有增加的趋势.茶多酚及维生素C对石英粉尘所致的DNA损伤有一定的保护作用.
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彗星试验琼脂糖凝胶片保存方法研究
单细胞凝胶电泳技术检测环境因素致DNA损伤具有很高的灵敏性,已在国内外广泛用于职业危险因素引起的人群健康效应研究[1].国内多数现场与实验室距离较远,不具备荧光显微镜和图像存储设备,因此极大地限制了该技术的应用和推广.湿片在保存和运输方面困难较大,并且储存时间越长,DNA扩散的可能性就越大,结果越不稳定.找到一种稳定可靠的凝胶片保存方法,是将该方法推广应用于现场工作的迫切需求.国内有文献报道使用冷冻法保存凝胶片,但只能保存2~3天.国外已有研究使用甲醇脱水干燥法和乙醇脱水干燥法保存凝胶片,但尚没有系统的研究这两种脱水干燥法对琼脂糖凝胶片保存的影响[2, 3].本研究比较了乙醇和甲醇两种脱水干燥法对凝胶片保存的影响.
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EasyLate电解质分析仪常见故障维修及日常保养
EasyLate电解质分析仪是美国Medica公司生产的电解质分析仪,是医院进行电解质检查的常用机型.该仪器使用离子选择性电极技术检测生物体液中的钠、钾、氯、锂离子浓度.该机的常见故障及电极保养如下.
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TS2002型微机胎儿监护仪原理及故障检修
本机采用了先进的超声多普勒技术检测胎心率.它的工作原理是由超声发射电路驱动电声换能器发出超声波,将超声探头紧贴腹壁正对胎儿心脏,换能器就能接受反射回来的超声波并把它转换成电信号即超声回波信号.根据多普勒效应,超声打在运动的物体上其回波信号必然产生频移δ,此回波信号经过高频放大后,输入解调电路把表示胎心音的频移δ解调出来,经过智能高速信号处理板卡处理后,由电脑控制在大屏幕上显示彩色胎心率曲线.它的特点是电脑控制监护全过程.大屏幕显示胎心率曲线、瞬时胎心率值、宫缩曲线、宫缩增益标记、胎动标记.在监护时,监护曲线和曲线所处的坐标线在屏幕中移动,用图像代替走纸功能.
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三瑞SRF-608型胎儿脐血流图仪的常见故障
三瑞SRF-608型胎儿脐血流图仪是集超声多普勒技术、计算机技术、频谱分析技术于一体的多功能检测仪器.它采用无创技术检测出胎儿脐动脉血流流速谱,经过计算及频谱分析,得到各种脐动脉血流的动力学状态指标,为判别胎儿发育是否正常提供依据,对产科早期胎儿监护提供了新的手段.特别适用于26周以上的围产期胎儿监护及高危妊娠、胎儿宫内生长迟缓、宫内窘迫等症状的监测.
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以结核分枝杆菌mRNA为靶点的检测方法与意义的评价
结核病是结核分枝杆菌引起的传染性疾病,目前仍然是全球范围严重感染性疾病之一.至今,人们对结核分枝杆菌及结核病的很多方面都还处在科研探索的过程中.现代科学技术的发展为研究结核分枝杆菌的生物学特性以及结核病的快速诊断和治疗都带来广阔的发展前景.自从20世纪80年代核酸体外扩增技术应用于结核分枝杆菌的检测以来,进入以PCR为代表的分子生物学技术检测结核分枝杆菌的新阶段,人们不断对其进行着研究和探索,近几年新出现的以结核分枝杆菌mRNA为靶点的体外扩增检测具有一定意义上的开发和应用价值.
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HAIN技术在结核病诊断及耐药检测中的应用
目的:评价HAIN技术在检测临床标本诊断结核病及利福平、异烟肼耐药检测中的应用价值[1].方法:对1372例初诊肺结核可疑患者痰标本进行涂片镜检,改良罗氏培养、药敏和HAIN技术检测,进行传统药敏方法和HAIN技术检测利福平、异烟肼耐药性的对比分析.结果:临床诊断结果作为终标准,涂片镜检的阳性率为26.6%、改良罗氏培养方法的阳性率为44.3%、HAIN技术的阳性率为45.9%;以传统药敏方法为标准,HAIN技术检测利福平、异烟肼耐药性的敏感度分别为90.8%、80.3%,特异性分别为97.4%、96.7%..结论:HAIN技术检测结核杆菌有较高的灵敏度,同时还可以检测结核杆菌对利福平、异烟肼的药敏结果,且药敏时间由传统方法的2-3个月缩短到2天,有较高的应用价值.
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超微血管成像技术检测非活动型大动脉炎颈动脉新生血管2例
多发性大动脉炎是一种原因不明的多发性、慢性、进行性、非特异性炎症性疾病,主要累及主动脉及其主要分支、肺动脉,导致管腔节段性狭窄甚至闭塞,并可继发血栓形成。好发于年轻女性。按受累血管部位不同,临床分为4型:头臂型、胸腹主动脉型、肾动脉型和混合型。临床分为活动期和非活动期。常规超声检查多着眼于对内中膜厚度及管腔狭窄情况的观察,而对病变部位新生血管的观察则受限,有研究用超声造影技术观察新生血管情况并进行分期,较少有报道使用超微血管成像技术(Superb micro-vascular imaging,SMI)观察病变部位的新生血管情况,本文报道两例应用SMI技术观察混合型大动脉炎非活动期的新生血管情况,同期行超声造影进行验证。
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恶性肿瘤患者外周血T淋巴细胞和NK细胞的检测及其临床意义
本文采用流式细胞技术检测患者外周血T细胞亚群指标改变的规律与肿瘤类型、性别、年龄的关系,并与健康对照组作对比,以探讨恶性肿瘤患者细胞免疫功能变化.
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149例淋病患者合并沙眼衣原体及解脲支原体感染的分析
为了解淋病患者合并沙眼衣原体(Ct)及解脲支原体(Uu)感染的情况,应用聚合酶链反应(PCR)技术检测149例经临床和实验室检验确诊的淋病患者泌尿生殖道分泌物中Ct及Uu的感染率,并分析淋病患者合并这两种病原体感染的可能原因.
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500名孕妇乙型肝炎病毒阳性母婴传播的研究
近10年来,具有高度敏感性和特异性的多聚酶链反应(PCR)技术已成为理想的检测乙型肝炎病毒(HBV)的新方法,广泛应用于临床研究.母婴传播是HBV感染的重要途径,为此,我们应用定量PCR技术检测500名HBsAg阳性孕妇产后初乳和新生儿脐血中的HBV DNA,进行母婴传播的研究.
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血管紧张素转移酶基因缺失型与妊娠高血压综合征的关系
对妊娠高血压综合征(PIH)孕妇的ACE基因分布进行初步研究,以探讨PIH遗传倾向的分子生物学基础.1.研究对象:PIH组60例,年龄24~33岁,平均27.8岁,其中重度18例,中度20例,轻度22例,按乐杰主编<妇产科学>第四版诊断标准分类.对照组110例,以随机原则,抽取健康孕妇,年龄23~30岁,平均25.7岁.两组孕妇均为单胎、初产,既往无高血压、心脏病和肾病史.2.方法:用新鲜全血(EDTA-2NA抗凝)3 ml,取富含白细胞层,蛋白酶消化白细胞,后用盐析法,冷乙醇提取絮状DNA.采用PCR技术检测血管紧张素转移酶基因的多态性,引物为5′- CTGGAGACCACTCCCATCCTTTCT -3′及5′- GATGTGGCCATCACACATTCGTCAGAT- 3′.扩增产物在含有0.5 μg/ml 溴乙锭的2% 琼脂糖凝胶中电泳,紫外灯下观察(图1).
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平行等位基因特异性序列分析技术检测HIV-1感染者体内微量耐药病毒
高效抗病毒治疗(HAART)是目前治疗HIV感染者的首选方法,然而病毒准种中耐药突变的聚集终会导致治疗的失败[1-3].在我国,由于大规模的抗病毒治疗也导致了耐药的发生,并存在较高的逆转录酶抑制剂交叉耐药现象[4],因此,检测耐药突变,尤其是检测微量或少数的耐药突变病毒,对于了解多重耐药的发生机制,制定佳的治疗方案以及预测治疗效果起着重要的作用[5].
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应用改进的聚合酶链反应快速检测水中的肠道病毒
近年来,聚合酶链式反应(PCR)技术由于特异性强、操作简便已广泛用于环境中肠道病毒的检测。常规PCR 1次只能检测1种病毒,而水中病毒有多种,因而不能满足实际应用的需要。Tsai等[1]用多重PCR1次检测脊髓灰质炎病毒、甲型肝炎病毒和轮状病毒3种病毒,这种方法需要引物较多,引物之间易相互干扰,检测3种以上病毒就比较困难。Zoll等[2]采用通用引物PCR技术检测肠道病毒,但是这种方法只能证明有无肠道病毒的存在,不能鉴别病毒种类。我们首次将通用引物PCR和多重PCR相结合用于肠道病毒检测,兼顾了两者的优点,克服了各自的不足。
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血绒毛膜促性腺激素与彩色多普勒血流显像在恶性滋养细胞肿瘤诊治中的应用
用彩色多普勒血流显像(CDFI)与放射免疫分析(RIA)技术检测绒毛膜促性腺激素(β-HCG)均为近年来应用于临床的检测手段.我院将两者联合应用于恶性滋养细胞肿瘤的诊断及化疗后的疗效观察,旨在探讨其在鉴别良、恶性滋养细胞肿瘤的价值以及化疗后的疗效评价.资料与方法1 一般情况选自1995年1月至1998年6月我院住院恶性滋养细胞肿瘤患者共32例作为观察组(以下简称观察组),其中侵蚀性葡萄胎20例,绒癌12例.年龄19~45岁.所有病例均在入院后及每次化疗后测血β-HCG并作CDFI检查.以同期住院的20例良性葡萄胎作为对照.
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核素碘及血清激素碘在亚急性甲状腺炎诊断中的意义
亚急性甲状腺炎是一种较少见的甲状腺疾病, 因常有轻度甲亢症状, 易被误诊. 测定甲状腺摄取无机碘的数量、速度以及应用放射免疫检测技术测定血清中甲状腺激素的水平, 可为临床诊断甲状腺疾病提供有力的佐证. 1983-1997年, 本院在3412例临床可疑甲亢病人中, 经临床治疗观察、核技术检测结果, 后有47例确诊为亚急性甲状腺炎.本文对47例亚急性甲状腺炎分析探讨如下.