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中枢内存在谷氨酸型神经元
谷氨酸是哺乳动物中枢神经系统中重要的兴奋性神经递质,然而 对其转运蛋白的研究至今还不十分清楚。Reinhard Jahn等在纯化谷氨酸转运蛋白BNPI(依赖 Na+的磷酸转运囊泡结合蛋白)后,发现它的底物选择性和能量依赖性与突触囊泡对谷氨 酸的摄取非 常相似。他们首先确定BNPI定位于脑中含有谷氨酸的囊泡中,并且,在非洲蟾蜍的卵母细胞 中,BNPI的确是作为一种囊泡谷氨酸转运物而发挥其功能的。在表达BNPI的神经细胞内,谷 氨酸的释放是量子式的,其能量来源为质子型ATP酶产生的电化学质子浓度梯度。 另外,一些含有GABA的神经元也表达BNPI。当刺激这些神经元时,可导致突触后电流的出现 。当加入AMPA受体(谷氨酸受体亚型之一)拮抗剂NBQX时,这种突触后电流被大幅度地抑制; 而加入GABAA受体拮 抗剂荷包牡丹碱时,则不会改变这种电流。由此说明,这种突触后电流是由谷氨酸介导的。 当刺激外源性表达BNPI的GABA神经元时,可导致兴奋性神经递质谷氨酸和抑制性神经递质GA BA的同时释放。 以上结果提示,BNPI是作为囊泡谷氨酸转运物而存在的,它的表达足以表明该神经元为谷氨 酸型神经元。而且,BNPI代表了一类有功能的囊泡谷氨酸转运蛋白家族。
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浓度不同的乙醇梯度脱水对小白鼠肝、肾组织制片的影响
小白鼠的肝、肾组织非常柔软脆弱.为了制作成功的肝、肾组织切片,我们采用不同浓度的乙醇脱水方法对300只小白鼠的肝、肾组织HE制片进行比较,摸索出一些经验.1 材料与方法湘雅医院肾内科实验用小白鼠300只,8~11周龄,体重17~20g.
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趋化因子受体CXCR7在结直肠肿瘤中的表达及其临床意义
结直肠癌的发病率和病死率逐年上升,且有年轻化趋势,早期症状隐匿,而且临床上超过一半患者手术前就已有了微小转移.侵袭和转移是恶性肿瘤的重要生物学特征,是肿瘤患者致死的主要原因.许多生理、病理过程中,趋化因子引导细胞定向运动,趋化因子形成浓度梯度调控细胞的运动路径.肿瘤细胞能分泌趋化因子受体,并与趋化因子浓度梯度相应答,这种现象可能与肿瘤的生长和扩散有关[1-2].
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聚合酶链反应-单链构象多态性检测淋病奈瑟菌gyrA基因突变的研究
国外研究表明,DNA旋转酶是淋病奈瑟菌(淋菌)中氟喹诺酮类药物的首要作用靶位,淋菌对氟喹诺酮类药物耐药主要与编码该酶的gyrA基因喹诺酮耐药决定区(QRDR)突变有关[1].为建立一种简便、快速、可靠的淋菌gyrA基因突变的检测方法,并进一步探讨该突变与我国临床分离淋菌对氟喹诺酮类药物耐药的关系,本课题以浓度梯度(Etest)法检测了42株临床分离淋菌对环丙沙星敏感性,采用聚合酶链反应-单链构象多态性分析(PCR-SSCP)结合DNA测序技术,对淋菌gyrA基因QRDR突变进行了研究,报告如下.
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何谓Etest法?它用于分枝杆菌药敏试验有哪些优点?
答:Etest法是根据琼脂扩散法原理,将不同浓度的药条贴于种有细菌的培养基表面,药物扩散形成浓度梯度,作用细菌后产生抑菌环,其他缘于药条的切点即为该药对该菌的低抑菌浓度.Etest法是定量检测,结果准确,快速;操作简便,不需特殊仪器设备;可用于联合药敏试验;易于标准化操作和质量控制等.
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丹参抑制大鼠肝纤维化线粒体脂质过氧化
目的:研究活血化瘀中药的主药丹参不同浓度提取物对离体线粒体脂质过氧化的抑制作用.方法:提取肝纤维化模型鼠肝组织线粒体,配制不同浓度梯度丹参提取物反应液,以丙二醛(MDA)和过氧化物岐化酶(SOD)为指标,测定丹参对线粒体脂质过氧化抑制作用的量-效、时-效关系.结果:随丹参浓度增加,同一时刻内线粒体反应液MDA产生逐渐减少(反应20 min时F=53.867,P=0.000;S-N-KP<0.05);SOD活性则逐渐升高(F=3.463,P=0.051;S-N-K P<0.05).随反应时间延长,相同浓度丹参的线粒体反应液中MDA增高同时SOD也逐渐增高(F=20.207,P=0.000;S-N-K P<0.05).反应的强点发生在丹参浓度为2 g/L或5 g/L以及反应时间在15 min或20 min以后.结论:丹参对肝纤维化鼠肝脏线粒体脂质过氧化反应存在着一定的量-效与时-效关系.
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高胆固醇血症兔Oddi括约肌张力的变化机制
目的:观察高胆固醇血症(hypercholesterolemia,HC)兔离体Oddi括约肌(sphincter of oddi,SO)张力的变化,探讨其作用机制.方法:新西兰雌兔24只随机分成两组:对照组和HC模型组各12只,分别取两组SO制备成离体肌环,观察SO的自主收缩运动及其对KCl和Ca2+的收缩反应,以及对硝普钠(sodium nitroprusside,SNP)和硝苯吡啶(nifedipine,Nif)的舒张反应.结果:HC组的自主收缩频率高于对照组(P<0.05,t=2.86),自主收缩波幅较对照组降低(P<0.05,t=2.48).以10 mmoL/L为浓度梯度累积加入KCl至90 mmoL/L,HC组对中低浓度KCl(10-40 mmoL/L)收缩反应高于对照组(P<0.01,t=4.01);两组大收缩力无显著差异,且均可被3 μmoL/LNif完全缓解.用60 mmoL/L KCl预收缩SO肌环不后加入SNP(0.1 nmoL/L-1 mmoL/L),在各个浓度点HC组的舒张反应均明显低于对照组(P<0.01,f=5.12).SO肌环在无钙Krebs液中温育5 min后复钙引起两组明显收缩反应所需的Ca2+浓度分别为0.1和1.0 mnmoL/L,HC组显著低于对照组(P<0.01,t=4.91);复钙2.5 mmoL/L诱发两组肌环的收缩反应均可被3 μmoL/LNif完全缓解.用60mmoL/LKCl预收缩SO 肌环后加入Nif,两组对Nif(0.1 nmoL/L-3 μmoL/L)的舒张反应在各个浓度点均无明显差别.在Krebs液中先加入3μmoL/L Nif,再加入KCl,CaCl2,两组肌环均未发生收缩反应.结论:在离体条件下,HC可导致SO张力异常,SO处于易激惹状态,其机制与SO细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)过载有关,而该过载状态与L型电压依赖性钙通道(L-typeVoltage-dependent calcium channels,L-VDCs)无关.
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趋化因子CX3CL1及其受体在肝脏炎症和纤维化中的作用
趋化因子(chemokine)是使细胞发生趋化运动的小分子细胞因子,其对不同靶细胞具有一定趋化效应.近年来研究表明趋化因子在急、慢性肝病起重要作用,其通过浓度梯度趋化免疫细胞(如T细胞、NK细胞)渗入受损的肝脏.不仅如此,随着炎症及纤维化反应,趋化因子还可直接影响肝内细胞,如肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)、肝细胞.
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微流控浓度梯度芯片在肺癌耐药性研究中的应用
微流控芯片系统是20世纪末开发的一种高效的微分析系统,可将样品制备、液体分离、生物与化学反应检测、细胞培养及蛋白分析等研究手段集成,具有高通量检测的特点,近年来已逐渐应用于化学、药物筛选及环境检测等多个领域,但在医学及分子生物学研究中的应用较少.本研究中利用该微流控芯片系统对人肺鳞状细胞癌细胞内葡萄糖调节蛋白78(GRP78)在肺癌对化疗耐药中的作用进行分析.
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MK-801对耐苯妥英钠和卡马西平癫(癎)大鼠模型脑表达P-糖蛋白的影响
癫(癎)是神经科仅次于脑血管意外的常见疾病,其中大约有30%的患者对多种抗癫(癎)药物表现耐药,癫(癎)发作得不到有效控制,被称之为难治性癫(癎).难治性癫(癎)患者对药物产生耐药的机制还不明确.研究表明癫(癎)病灶内高度表达P-糖蛋白(P-glycoprotein,PGP)[1],PGP是一种多药转运蛋白,能够分解ATP获能从而逆浓度梯度将抗癫(癎)药物转运出脑组织,减少了癫(癎)病灶内的药物浓度,降低了药物的疗效,上述机制可能参与了难治性癫(癎)患者对多种抗癫(癎)药物产生耐药.
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人神经胶质瘤耐阿霉素细胞株的建立及其耐药机制的初步研究
神经胶质瘤是颅内常见的恶性肿瘤,其化疗耐药现象的发生严重影响神经胶质瘤的治疗及患者预后生存和牛活质量.因此,探讨神经胶质瘤耐药产生原因及其机制对神经胶质瘤的治疗具有重要意义[1].本实验选用常用的化疗药物阿霉素(ADM)和人恶性胶质母细胞瘤细胞株SHG44为研究对象,用ADM浓度梯度递增结合间歇诱导法建立多药耐药的神经胶质瘤细胞株SHG,44/ADM,并对SHC:44/ADM的耐药特性及机制进行初步研究.
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肿瘤侵袭、浸润和转移对血脑屏障通透性的影响
1913年Goldman正式提出了血脑屏障的概念,血脑屏障是一个可扩散屏障,位于血液与中枢神经系统神经组织之间,它只允许水和小分子的脂溶性物质凭借浓度梯度自由扩散[1],是由脑毛细血管内皮细胞及细胞间紧密连接、基膜、周细胞、星形胶质细胞脚板和极狭小的细胞外隙共同组成的一个细胞复合体[2].正常血脑屏障具有高度选择性,能防止毒素及其他有害物质进入脑实质内,对维持中枢神经系统内环境的稳态起着重要的作用.
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清燥救肺汤治疗咽炎的临床观察
自动化尿液分析仪是利用其氧化还原的原理使色原物质变色来检测葡萄糖、隐血。可见一些较强的氧化剂或还原剂可能会干扰。UristestR优利特200不仅能检测葡萄糖、隐血等,且同时检测维生素C。患者服用或注射维生素C经人体分解吸收,多余的绝大部分随尿排出[1],而维生素C是一种较强的还原剂,为探讨尿液分析中维生素C对葡葡糖、隐血的影响程度,我们进行了一些实验研究,现报道如下。1 材料与方法1.1 材料1.1.1 仪器与试剂UristestR优利特200尿液11项自动分析仪与专用试剂条均由桂林市医疗电子仪器厂生产,试剂条批号:20000706。1.1.2 标本为含不同浓度的葡萄糖、血红蛋白、维生素C的尿液取经尿液分析仪检测糖、隐血、维生素C均为阴性的正常人混合尿,加入不同量的葡葡糖、维生素C,得四个浓度梯度共28种仅含糖、维生素C的尿液,同样在正常人混合尿中加入不同量的血红蛋白、维生素C,得四种浓度梯度28种仅含血红蛋白、维生素C的尿液,具体含量,见表1,表2。1.2 方法在同一尿液分析仪上严格按照仪器提供的说明书操作。
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杀虫剂在土壤动态与白蚁防治
白蚁是土木两栖害虫.因之,土壤杀虫剂处理城镇土壤防治白蚁或其它地下害虫是综合防治的一个重要手段,在保护城镇土壤生态平衡基础上,施药应根据不同土壤杀虫剂特性及其在土壤降解动态,来提高和发挥土壤杀虫剂的防效.
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结肠透析治疗在肾脏病领域的应用
结肠透析(colon dialysis)是利用结肠黏膜作为半透膜,向结肠腔内注入透析液,借助于由结肠黏膜分开的毛细血管内血液及透析液中的溶质浓度梯度和渗透压梯度,通过弥散和渗透原理清除体内潴留的水分及代谢产物,并将这些物质随透析液排出体外,同时由透析液中补充必要的物质,不断地更换透析液反复透析,借以达到清除毒素、脱水、纠正水电解质酸碱平衡紊乱的治疗目的.此方法自加世纪70年代应用于临床以来,便以其操作简单、价格便宜、副作用小、无创等特点,而广泛用于肝病和肾脏病等相关领域的治疗.特别是近年来随着结肠途径治疗机的出现,结肠透析方法更是不断改进和完善.本文就结肠透析治疗在肾脏病领域的应用作一综述.
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荔枝草对小鼠小肠运动研究
目的:采用炭末测定法观察中药荔枝草对小鼠小肠运动的影响.方法:将70只实验小鼠随机分为阳性对照组(枳壳水煎剂组)、荔枝草水煎剂组(10、15、20、25、30 g/kg)和生理盐水组,灌胃3d(均为0.2 mL/10 g)后采用炭末测定法对小鼠的小肠运动情况进行观察分析.结果:荔枝草水煎剂组对小鼠小肠推进率比生理盐水组的推进率明显提高(P<0.05);荔枝草水煎剂浓度在10~20 g/kg范围内对小肠的推进率逐渐增强,在20~30 g/kg范围内其效果逐渐减弱.结论:荔枝草水煎剂有一定的促小肠运动作用,并呈现一定的量效关系,其中以20 g/kg浓度的荔枝草水煎剂对小鼠小肠的推动作用为显著.
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中性粒细胞趋化的细胞内信号传导机制的研究进展
中性粒细胞能够感受细胞趋化物2%浓度水平的差距,并将其转化为胞内信号分子较陡的梯度,沿着此浓度梯度细胞进行定向迁徙运动,通常称之为中性粒细胞的趋化性.参与细胞这种定向移动的机制被形象地称为中性粒细胞的"罗盘"(compass)机制[1].依靠细胞内信号放大机制,中性粒细胞形成了控制感受趋化物浓度梯度的信号传导通路,并沿着趋化物的浓度持续而精确地移动,从而到达炎症局灶[2,3].
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疾病状态下血脑屏障对大分子物质的转运途径
血脑屏障是一个弥散屏障,大多数化合物难以透过此屏障从血液流向大脑,它的血管内皮细胞与机体其它部位不同,是无窗孔的血管内皮细胞,细胞间有更广泛的紧密连接,其胞饮小泡转运活性弱.内皮细胞间的紧密连接限制亲水分子从胞间空隙穿过血脑屏障流入.然而,小的脂溶性分子如O2和CO2却能顺着浓度梯度自由穿过内皮细胞膜.较大分子量的营养物质包括葡萄糖和氨基酸通过载体转运入脑,而包括胰岛素、肝素和转铁蛋白在内的大分子的摄取通过受体介导的入胞作用调节[1,2].以前的研究者大多认为肽类和蛋白等亲水性大分子物质难以透过血脑屏障,近年的研究却发现,许多疾病状态下,血脑屏障对这些大分子物质是开放的,也就是说,许多治疗性的大分子物质(如多肽类生长因子)有可能透过血脑屏障发挥其治疗中枢神经系统(CNS)疾病的作用.
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鹅血对肝癌细胞株抑瘤作用的实验研究
1 实验资料供血鹅:武汉市商品白鹅(品种为太湖鹅)10只,26周龄,体重3~5kg,用5~10ml一次性消毒注射器抽取鹅翅翼内静脉新鲜血.实验时用细胞培养液制备成5种浓度梯度的鹅血稀释液,浓度分别为20%、10%、5%、2.5%、1.25%.瘤株:肝癌细胞株MHCC97由我院中心实验室提供.主要试剂及仪器:甲基噻基四唑MTT(美国Sisma)、二甲基亚砜DMSO(美国Sigma)、RPMI1640细胞培养液(Gibco)、胎牛血清(美国sism)、0.25%胰酶、分析纯.Napco5410型CO2培养箱(美国BIO-RAD公司)、MicrolateReader 450酶标仪、96孔细胞培养板等.
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液体酶法高密度脂蛋白胆固醇试剂盒的研制和临床应用
高密脂蛋白胆固醇(HDL)具有抗动脉硬化的作用,特别是HDL-C能清除外围组织的胆固醇.HDL中的胆固醇浓度比其它脂蛋白都低,这就形成胆固醇向HDL分子流动的浓度梯度,HDL-C还能抑制动脉壁平滑肌细胞摄取LHDL,防止胆固醇在细胞内过多堆集.由此可见,血清HDL-C测定是动脉粥样硬化性冠心病的重要指标之一.