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糖友运动的六大好处
运动和饮食控制是糖尿病防治的两大基石,不论是行走还是剧烈运动,均能降低糖尿病风险,并且运动强度越大,发生糖尿病的相对危险就越低.总的来说,运动对糖尿病患者有以下六大好处.1.改善胰岛素敏感性.在整体水平上,运动可以通过增加能量消耗,减少脂质在体内堆积,增加骨骼肌细胞摄取葡萄糖和胰腺细胞分泌胰岛素的能力,来改善糖尿病患者的胰岛素敏感性.
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马钱子碱固体脂质纳米粒的细胞毒性及细胞摄取试验
目的:研究马钱子碱固体脂质纳米粒(brucine-loaded solid lipid nanoparticles,B-SLN)对HepG2的细胞毒性和细胞摄取情况.方法:采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测B-SLN对HepG2细胞的毒性,利用荧光显微镜定性观察细胞摄取情况,运用流式细胞仪定量检测不同条件下的细胞摄取情况.结果:马钱子碱组和B-SLN组对HepG2细胞增殖具有抑制作用,且抑制率随时间延长和药物质量浓度增加而上升.马钱子碱组48,72 h的半抑制浓度(IC50)分别为208.5,78.5 mg·L-1,B-SLN组48,72 h的IC50分别为563.3,114.9 mg·L-1;药物质量浓度在125～500 mg·L-1时,随药物质量浓度的增加,细胞摄取量由50.2％增加到71.2％;温度在4℃和37℃条件下,细胞摄取量由43％增加到55.2％;摄取时间在30～240 min时,随孵育时间的增加,细胞摄取量由9.7％增加到56.4％.结论:SLN给药系统能显著提高马钱子碱对抗癌细胞的活性,且B-SLN具有增加药物被细胞摄取的能力.
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LC-ESI-MS/MS测定苦参碱及其在HepG2细胞模型中的摄取特性
目的:建立灵敏、快速和高效的LC-ESI-MS/MS法测定HepG2细胞中苦参碱浓度,研究苦参碱在HepG2细胞上的摄取转运特性.方法:Hanbon Megres C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相10 mmol·L-1乙酸铵溶液(含0.1％甲酸)-甲醇(35∶65);质谱采用正离子气动辅助电喷雾离子化(ESI),选择性反应监测(SRM)测定药物.以HepG2细胞作为体外模型,考察温度、药物浓度和多特异性有机阳离子转运系统的经典抑制剂对苦参碱在HepG2上摄取的影响.结果:HepG2细胞裂解液中苦参碱在0.05 ～ 50.0 nmol·L-1线性关系良好,低定量限为0.05 nmol·L-.与37℃相比,苦参碱在4℃时的HepG2细胞摄取量显著下降(P ＜0.001).孵育液中药物浓度由0.5μmol·L-增加到400 μmol·L-1时,苦参碱的摄取率显著下降(P＜0.01).与抑制剂吡拉明、维拉帕米、奎尼丁和苯海拉明共孵育时,苦参碱的细胞摄取均显著下降(P ＜0.001).结论:该法简便、快速、灵敏,可用于研究苦参碱在HepG2细胞中的摄取特性.苦参碱进入肝细胞以主动转运为主,其中多特异性有机阳离子转运系统介导的摄取转运是主要途径.
关键词： 苦参碱 HepG2细胞 液相色谱-电喷雾串联质谱法 细胞摄取 -
血清HA测定的临床意义
透明质酸(HA)是一种高分子氨基多糖, 由体内各组织间质细胞合成, 其小分子可经肾小球滤过, 大分子经肝脏内皮细胞摄取降解[1].肝病时, 肝间质细胞合成HA增加, 肝细胞分解HA受阻, 因而血清HA水平升高, 这对疾病的诊断和预后判断有一定的临床价值.本文对肝脏、肾脏等疾病患者HA含量的变化进行了探讨, 现将其结果报道如下.
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肿瘤显像剂S-11C-甲基-L-半胱氨酸的细胞摄取机制研究
目的 探讨肿瘤细胞摄取S-11C-甲基-L-半胱氨酸(11C-MCYS)的机制.方法 将Hepa1-6肝癌细胞分为Na+依赖组(NaCl组)及非Na+依赖组(氯化胆碱组)进行氨基酸转运实验.每组又分为对照组、L-氨基酸转运载体抑制剂2-氨基二环-2,2,1-庚烷-2-羧酸(BCH)组、转运系统A和ASC的抑制剂α-甲基-氨基异丁酸(MeAIB)组、MeAIB+丝氨酸组,分别加入11C-MCYS(400μ1 0.925 MBq/ml)、11C-MCYS(200μl 1.85 MBq/ml)+阻滞剂BCH(200μl 15 mmol/L)、11C-MCYS(200μl 1.85 MBq/ml)+阻滞剂MeAIB(200μl 15 mmol/L)以及11C-MCYS (200μl 1.85 MBq/ml)+阻滞剂MeAIB+丝氨酸(200μl15 mmol/L).作用4 min后终止培养应用γ计数仪测量细胞放射性活度.将Hepal-6肝癌细胞分为5组,各组均加入200 μl11C-MCYS( 1.85 MBq/ml)后分别加入50、100、200、300、350μmol/L浓度不等的MCYS进行竞争抑制实验.培养4 min后终止培养应用γ计数仪测量细胞放射性活度.结果 无论是否有Na+存在,对照组、BCH组、MeAlB及MeAIB+丝氨酸组对11C-MCYS摄取的差异均无统计学意义(均P＞0.05).MeAIB组和MeAIB+丝氨酸组中的NaC1组细胞放射性活性与氯化胆碱组相比差异均无统计学意义(18 958.18±97.32比20 582.27±196.32,18 385.24±122.96比21 620.54±131.41,均P＞0.05),两者均不能抑制Na+非依赖性氨基酸转运载体的转运.而BCH组中的NaC1组细胞放射性活性高于氯化胆碱组(2587.21±30.25比2340.61±21.09,P＜0.05),可见BCH能明显抑制Na+非依赖性氨基酸转运体对11C-MCYS的转运.不同浓度MCYS(50 ～ 350 μmol/L)作用下肿瘤细胞对11C-MCYS摄取差异无统计学意义(均P＞0.05).结论 肿瘤细胞摄取11C-MCYS是通过非Na+依赖的L-氨基酸转运系统进行转运的,极少涉及氨基酸转运系统A和ASC.
关键词： S-11C-甲基-L-半胱氨酸 氨基酸转运系统 中性 正电子发射断层显像术 肝肿瘤 实验性 细胞摄取 -
激光扫描共聚焦显微镜观察反义核酸探针的细胞摄取及分布
目的 采用激光共聚焦显微镜,观察荧光标记的反义寡核苷酸探针在细胞的摄取和细胞内分布.并评价阳离子脂质体载体对提高细胞摄取的作用.方法 合成针对人端粒酶逆转录酶基因(hTERT)第1723-1741密码子的18个碱基的反义寡核苷酸探针,在3末端连接荧光素-5-异硫氰酸盐(FITC).转hTERT的胎儿神经前体细胞hNPCs-G3作为实验细胞.阳离子脂质体作为反义探针载体.激光扫描共聚焦显微镜观察细胞荧光分布并测定荧光强度.结果 无脂质体介导的对照组细胞荧光强度很低,荧光主要分布在细胞膜,细胞浆和细胞核荧光强度低于细胞膜.脂质体介导的实验组细胞荧光强度显著增加,细胞核荧光强度显著高于细胞膜,两者的荧光强度差异有显著意义(P＜0.01).结论 无载体的反义探针细胞摄取率较低,细胞膜探针结合较多.脂质体载体可显著提高细胞对探针的摄取,且大部分探针进入细胞核.激光扫描共聚焦显微镜可以清晰显示细胞对探针的摄取及细胞分布,是一种直观有效的研究工具.
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一种新型分子探针——荷瘤裸鼠体内实验显像
目的 通过荷瘤裸鼠体内实验研究验证hTERT反义分子探针(99m Tc-hTERT ASON)作为新型分子显像剂的可行性,探讨其在整体动物水平上的应用价值.方法 以双功能螯合剂法制备放射性核素99m Tc标记的反义分子探针(99m Tc-hTERT ASON).建立荷MCF-7乳腺癌动物模型,进行体内生物分布与显像实验.所有结果通过统计学软件SPSS12.0进行分析.结果 99m Te-hTERT ASON标记率达到76%±5%(n=5),放射性化学纯度达到96%以上,比活度为1850 kBq/μg.99m Tc-hTERT ASON主要分布在肾脏与肝脏组织;99m Tc-hTERT ASON的肿瘤摄取率与肿瘤/非肿瘤比值(T/NT)均高于对照组(P<0.05);6 h时99m Tc-hTERT ASON的肿瘤/血液比值(T/B)与肿瘤/肌肉比值(T/M)分别为2.02与8.85.在注射99m Te-hTERT ASON后4～8 h,荷瘤裸鼠肿瘤部位出现明显放射性浓聚.结论 99m Tc-hTERT ASON能特异性地聚集于肿瘤组织中,且T/NT比值较高,有望应用于肿瘤的基因显像研究.
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糖友夏季解暑工作注意事项
糖友夏季别贪凉
气温一上升到30℃，不少人家就早早打开了空调，享受着冷气，但糖尿病患者好少吹空调。
夏季屋里开着空调，一方面室内空气不易流通，另一方面寒冷刺激会使体内交感神经处于兴奋状态，肾上腺素分泌增加，促进肝糖元分解，在胰岛素分泌正常的情况下促肌肉细胞摄取葡萄糖以产热，而糖尿病患者胰岛素不足，肌肉摄取葡萄糖能力减弱，就会造成血糖升高。高血糖又有利于细菌和病毒的繁殖，对外来刺激反应能力下降，容易招致各种感染。 -
OATP1B1/BCRP/MRP2转运体基因多态性对瑞舒伐他汀人体药代动力学的影响
目的：瑞舒伐他汀是一种新型他汀类降脂药，体外细胞试验结果表明， OATP1B1和BCRP/MRP2转运体分别介导该药的肝细胞摄取和胆汁外排。由于他汀类药物是长期连续用药，在多剂量连续给药条件下观察肝胆转运体基因型对药物体内过程的影响更有意义。目前转运体基因型对瑞舒伐他汀多剂量给药体内过程的影响未见报道。因此，本文旨在研究OATP1B1/BCRP/MRP2基因多态性对瑞舒伐他汀单剂量和多剂量给药后人体药代动力学的影响。
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巨噬细胞摄取结核分支杆菌相关的受体
结核分支杆菌是典型的胞内致病菌,它在机体内的主要宿主细胞是巨噬细胞[1].结核分支杆菌与巨噬细胞膜表面受体结合后,经膜内陷形成吞噬小体进入细胞,除了被细胞消化清除外,它有一系列的措施,如抑制巨噬细胞的激活,消除氧化基团,抑制细胞溶酶体与吞噬体的融合并抵抗溶酶体酶的作用,从而在细胞内存活下来.文中综述了与巨噬细胞摄取结核分支杆菌相关的受体,以及结核分支杆菌利用膜受体进入巨噬细胞的机制.
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非酒精性脂肪性肝病合并糖尿病的治疗
非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD)是与胰岛素抵抗（IR）和遗传易感性密切相关的代谢应激性肝脏损害[1]，病理学改变以肝细胞脂肪变性为主，其疾病谱包括非酒精性单纯性脂肪肝（nonalcoholic fatty liver，NAFL）、非酒精性脂肪性肝炎（nonalcoholic steatohepatitis，NASH）、NASH相关性肝硬化及肝细胞癌。IR是NAFLD的核心病理生理基础，表现为机体胰岛素反应性葡萄糖转运能力降低，继而胰腺为满足细胞摄取和利用葡萄糖的需要超量分泌胰岛素代偿维持糖代谢稳态[2]。随着IR进展，不仅促使胰岛β细胞超负荷分泌胰岛素使得分泌功能受损，引起2型糖尿病(T2DM)发生，还可加重肝脏炎症和纤维化，后者又进一步损伤肝脏加剧IR，形成恶性循环[3]。NAFLD与T2DM共患，肝脏脂肪变更易向终末期肝病进展[4]，肝癌发生风险倍增[5]，同时患者的糖脂紊乱更难被纠正[6]，显著增加T2DM相关心血管并发症的死亡率[1,7]。因此，如何选择合理的治疗策略，采取个体化的综合治疗控制血糖并延缓肝病恶化，降低心血管发病风险，对于改善NAFLD合并T2DM患者的预后具有重要意义。
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转铁蛋白受体与血液系统肿瘤
铁是生命细胞生长增殖及机能活动所必需的元素之一.绝大多数细胞包括肿瘤细胞摄取铁主要通过转铁蛋白受体(transferrin receptor,TfR)介导.近年来TfR与肿瘤的关系已受到广泛关注.研究发现,肿瘤细胞TfR高表达,且TfR表达的调节对肿瘤细胞的增殖分化及对肿瘤诊治有重要影响.现就TfR与血液系统肿瘤关系研究现状作一综述.
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吡柔比星膀胱灌注预防表浅性膀胱肿瘤术后复发疗效观察
膀胱灌注化疗药物是预防表浅性膀胱肿瘤术后复发的一种重要手段.研究证明,吡柔比星(THP)比临床常用的同类药物疗效好,毒副作用小,可迅速被肿瘤细胞摄取而渗入黏膜下层.我院1999～2003年间收治表浅性膀胱肿瘤术后患者37例,对其进行预防性治疗,现报告如下.
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葡萄糖转运体基因Glut-1和Glut-3在头颈部鳞状细胞癌组织中的表达
恶性肿瘤组织比正常组织葡萄糖代谢显著增加,组织细胞摄取葡萄糖与葡萄糖转运体(glucose transporter,Glut)有关,众多研究发现GIut-1、GIut-3在肺癌、结直肠癌、胰腺癌、乳腺癌等肿瘤中均有过度表达,且表达水平与这些肿瘤的临床分期、转移等有密切关系[1-3].
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流感泰得小分子化合物修饰前后细胞摄取的比较
目的 在反义寡核苷酸流感泰得(Flutide, FT)上偶联神经氨酸酶抑制剂奥司他韦,以期通过特定小分子化合物的修饰提高细胞对流感泰得的摄取,进而提高其抗流感的作用.方法 采用3′荧光标记控孔玻璃珠(3′FAM CPG)合成全硫代修饰的流感泰得,并对其5′端进行巯基修饰,与结构改造后的奥司他韦分子进行连接得到流感泰得与奥司他韦偶联物(FTO);修饰前后的反义药物直接转染流感病毒感染的人肺癌上皮A549细胞,通过荧光显微镜观察及流式细胞技术检测FTO与FT的胞内荧光强度来进行反义药物偶联小分子化合物前后胞内摄取量的比较;采用CCK8细胞增殖检测技术进行FT与FTO体外抗流感病毒活性评价.结果 得到一种新的寡核苷酸偶联物FTO;荧光显微镜观察结果显示,细胞给予FTO后荧光强度强于FT;流式细胞检测结果表明,修饰后的FTO胞内平均荧光值明显高于修饰前的FT,其中给药12 h时,病毒感染细胞+FTO(BFTO)组的平均荧光值比病毒感染细胞+FT(BFT)组增加了(102.3±56.0)%,正常细胞+FTO(ZFTO)组的平均荧光值比正常细胞+FT(ZFT)组增加了(89.4±44.7)%;给药24 h后BFTO组的平均荧光值比BFT组增加了(115.2±28.4)%,ZFTO组的平均荧光值比ZFT组增加了(102.9±12.1)%,(P＜0.05);体外抗流感病毒活性评价显示,FTO与FT的IC50值分别为(1.57±0.08)μmol/L与(4.44±0.11)μmol/L.结论 流感泰得采用奥司他韦修饰后有助于提高其在细胞内的摄取量以及抗流感病毒活性.
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Ⅱ型组蛋白去乙酰化酶可能参与收缩骨骼肌葡萄糖转运蛋白4基因表达的转录调节
促进骨骼肌细胞葡萄糖转运是提高人体运动能力的重要环节.在骨骼肌细胞糖代谢过程中,将细胞外的葡萄糖跨膜转运入细胞内是骨骼肌细胞摄取葡萄糖的关键限速步骤[1].此步骤由葡萄糖转运蛋白家族负责完成,其中葡萄糖转运蛋白4(Glucose transporter 4,GLUT4)是一个为关键的转运蛋白.
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A549细胞对单硬脂酸甘油酯固体脂质纳米粒的摄取作用
目的考察单硬脂酸甘油酯固体脂质纳米粒(monostearin solidlipid nanoparticles,MSLN)经PEG2000修饰后,对A549细胞摄取MSLN及J774A1细胞吞噬MSLN的影响.方法采用溶剂扩散法制备MSLN,测定其粒径和zeta电位;以罗丹明B(Rhodamine B)为荧光标记物,研究A549细胞对MSLN的摄取作用和J774A1细胞对MSLN的吞噬作用.结果 MSLN的细胞毒性较低,A549细胞对MSLN的摄取可快速接近饱和,其摄取百分率与MSLN在细胞外的浓度呈负相关.结论 MSLN经PEG2000修饰,可显著抑制J774A1细胞对MSLN的吞噬,但可增加A549细胞对MSLN的摄取.
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反义寡核苷酸阳离子脂质体的制备和体外细胞摄取研究
目的制备高效促进细胞摄取反义寡核苷酸(ASON)和保护ASON的脂质体.方法以3β[N-(N′,N′-二甲氨基乙基)氨甲酰基-胆固醇(DC-Chol)为类脂成分制备阳离子脂质体(以下简称DC-Chol脂质体),与ASON混合得到载药脂质体,测定载药率.用琼脂糖凝胶电泳分析载药脂质体的结构特点;流式细胞仪检测不同条件下细胞摄取荧光标记ASON的情况;变性聚丙烯酰胺电泳考察DC-Chol脂质体对ASON的保护作用.结果载药率与DC-Chol脂质体和药物的+/-电荷比有关,当+/-电荷比大于2时,载药率达90%以上;琼脂糖凝胶电泳显示ASON同时存在于DC-Chol脂质体的周围和包裹于其内部的两种形式;流式细胞仪测定结果表明,DC-Chol脂质体可明显增加细胞对ASON的摄取,阳性细胞染色率和胞内平均荧光强度均较对照组有明显增加,增加程度主要取决于+/-电荷比例,血清可降低细胞的摄取;变性聚丙烯酰胺电泳证实DC-Chol脂质体具有保护ASON的作用.结论 DC-Chol脂质体具有显著增加细胞摄取ASON和保护ASON的作用,有望成为反义类药物的高效传递系统.
关键词： DC-Chol脂质体 反义寡核苷酸 细胞摄取 电泳 -
反义寡核苷酸脂质体复合物性质对细胞摄入行为的影响
目的研究影响反义寡核苷酸脂质体复合物的性质和细胞摄取的因素.方法逆相蒸发法制备3种不同的空白脂质体,与反义寡核苷酸混合得到复合物,显微镜观察其形态,琼脂糖电泳分析载药量,流式细胞仪测定阳性细胞百分率和平均荧光强度.结果高电荷密度的脂质体和低离子强度介质可使复合物发生凝聚,载药量和细胞摄入量依赖于空白脂质体和药物的比例以及脂质体膜表面的电荷密度.结论阳离子脂质体可以提高载药量和细胞的摄入,其程度与复合物比例、脂质体膜表面电荷密度等有关.
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A549细胞对壳寡糖及其纳米粒的摄取作用
目的研究壳寡糖及其纳米粒的A549肺上皮细胞摄取作用,探讨壳寡糖纳米粒作为药物载体的可能性.方法溶剂扩散法制备壳寡糖纳米粒,以A549肺上皮细胞评价壳寡糖及其纳米粒的细胞毒性,由荧光倒置显微镜、流式细胞仪研究A549细胞对壳寡糖及其纳米粒的摄取作用.结果壳寡糖及其纳米粒的细胞毒性均较低,IC50分别为944.36和643.16 mg·L-1.壳寡糖及其纳米粒的细胞摄取作用与其浓度及细胞孵育时间相关;在同一孵育时间壳寡糖纳米粒的摄取量比等浓度的壳寡糖增加0.49～13.9倍.结论壳寡糖及其纳米粒的细胞毒性较低.壳寡糖形成纳米粒后,可显著增加A549细胞的摄取作用.
