首页 > 文献资料
-
木瓜蛋白酶致大鼠肺气肿中碱性成纤维细胞生长因子mRNA的表达
碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)是一种具有促进细胞生长增殖作用的多肽类生长因子,在维持机体的生长发育及促进多种组织的损伤修复中起着十分重要的作用。我们通过对木瓜蛋白酶(Papain)致大鼠肺气肿模型肺组织和肺泡巨噬细胞bFGF mRNA表达的研究,来探讨其在肺气肿形成过程中与肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原增长的关系。 材料与方法(1)肺气肿动物模型的制备与分组:健康Wistar大鼠42只,体重200~250 g,雌雄不拘(由同济医科大学实验动物中心提供),随机分为肺气肿模型1,3,5,7,15,30天组和正常对照组,每组6只。以2%戊巴比妥钠(50 mg/kg)腹腔注射麻醉动物后,实验组气管内注射8%木瓜蛋白酶(美国Sigma公司)0.05 ml/100 g,对照组以同样方法注入相应量的生理盐水。(2)组织细胞标本制作:以2%戊巴比妥钠(50 mg/kg)腹腔注射麻醉大鼠后,行气管插管,向肺内灌注生理盐水,每次5~10 ml,共8次,回收支气管肺泡灌洗液,离心,弃上清,同法用RPMI1640(美国Gibco产品)培养液洗涤细胞1次,用含10%新生小牛血清(Gibco产品)的RPMI1640调细胞浓度至1×106/ml,加入铺有盖玻片的6孔培养板中,置37℃,5% CO2培养箱(Hera Cell德国产)培养24 h后,肺泡巨噬细胞贴壁,取出长有细胞的盖玻片,用4%多聚甲醛固定20~30 min,再用酒精梯度脱水后,置-70℃冰箱保存备用。灌洗肺后取下双肺,向肺内注入4%多聚甲醛,直至肺膨胀边缘变锐、胸膜展平,结扎气管,浸泡于4%多聚甲醛中固定10 h。取左下肺叶常规石蜡包埋、切片、HE染色。(3)免疫组织化学染色:用即用型链酶亲和素-生物素-过氧化物酶复合物(Strept Avidin-Biotin-enzyme Complex,SABC)免疫组织化学染色试剂盒和兔抗鼠collagen Ⅰ及collagen Ⅲ多克隆抗体及DAB显色试剂盒(武汉博士德生物工程有限公司)进行免疫组织化学染色。(4)bFGFmRNA原位杂交:用bFGF寡核苷酸探针和敏感加强型原位杂交检测试剂盒(武汉博士德生物工程有限公司)对组织细胞标本原位杂交。
-
PlncRNA-1与激素抵抗性前列腺癌
前列腺癌( prostae cancer , PCa )是男性泌尿生殖系统常见的恶性肿瘤之一,2010年美国肿瘤协会( American Cancer Society )报道新诊断前列腺癌217730例,占男性肿瘤的25%,位于男性肿瘤发病率第一位。死亡32050例,位于癌症死亡率第二位[1]。在我国,近年来随着生活水平的提高、饮食结构的改变和预期寿命的延长,目前前列腺癌的发病率也呈逐年增长趋势。早期前列腺癌具有独特的雄激素依赖特性,阻断了雄激素-雄激素受体的信号途径就可以诱导肿瘤细胞的凋亡和消退。目前,激素治疗仍然是前列腺癌的主要治疗方法之一,经激素治疗(去除雄激素或者应用雄激素受体的拮抗剂)后大部分患者可获得病情好转,然而,在经过中位时间为18~24个月后,原来对激素治疗敏感的前列腺癌患者,几乎都可能会转变为激素抵抗性前列腺癌( hormone refractory prostate cancer, HRPC)[2]。一般情况下,HRPC患者的生存期很少超过12个月,因此如何针对这部分患者进行有效的治疗成为了泌尿外科医师面临的棘手问题。目前,前列腺癌由激素依赖向非依赖转化的机制尚不完全清楚,归纳起来看主要通过两种途径实现:①雄激素受体(androgen receptor, AR)途径,包括AR配体结合区突变或AR基因扩增,增加肿瘤对肾上腺源性的低水平雄激素的敏感性;突变的AR能对其他类固醇,甚至抗雄药物产生应答;通过改变AR与共激活分子之间的相互作用,使突变或非突变的AR被肾上腺雄激素活化,或通过改变某些肽类生长因子或细胞因子的基因表达与功能,使AR非正常活化;②非AR途径,包括肿瘤细胞神经内分泌化、凋亡基因异常等[3,4]。以上这些途径并非相互排斥,任何单一途径均不能完全解释HRPC的发生机制。美国国家癌症研究所( NCI)曾于2004年邀请26名国际知名学者共同讨论雄激素与PCa的关系,探讨雄激素对PCa的病理生理的影响,期望找到更为有效的防治PCa的对策,与会学者一致认为:雄激素受体AR增多,转录功能增强,并非失去了对雄激素的依赖,而是对雄激素更加敏感,除雄激素外,雄激素受体AR尚能接受其他信号的刺激,如IL-6、MAPK ( mito-gen activated protein kinase )、抗凋亡蛋白( AKT)等进行转录。因此治疗PCa的关键是如何减少雄激素受体AR,降低AR功能,雄激素受体AR仍是治疗前列腺癌(PCa)的唯一致命靶标[5]。与此同时,自然医学( Nature Medicine )杂志也发表专家述评,再次强调了雄激素受体AR在HRPC研究中的重要性[6]。科学(Science)杂志也报道第二代雄激素受体AR拮抗剂RD162和MDV3100是治疗晚期前列腺癌非常有前景的药物[7],提示雄激素受体靶向治疗对雄激素抵抗性前列腺癌仍然有效。
-
子宫肌瘤的药物治疗现状
子宫肌瘤是女性生殖系统常见的良性肿瘤,发病机制仍不十分清楚,其发生与雌激素和孕激素以及各肽类生长因子密切相关[1~3].
-
H2O2及PTEN在肽类生长因子活化Akt激酶中的作用
目的 研究H2O2、PTEN与肽类生长因子(胰岛素等)在调控Akt激酶活性中的作用及其相互关系.方法 Western Blot检测对照小鼠胚胎成纤维细胞PTEN MEFs和PTEN基因敲除小鼠胚胎成纤维细胞PTEN MEFs中PTEN蛋白表达的差异.用胰岛素及NADPH氧化酶(NOX)抑制剂--DPI作用PTEN MEFs和PTEN MEFs细胞,Western Blot检测Akt激酶蛋白磷酸化水平的变化.将细胞接种于96孔板,加入胰岛素及DPI,96h后MTT法检测细胞增殖的变化.结果 在对照PTEN MEFs细胞内,加入胰岛素(100mU/ml)15min后Akt激酶磷酸化水平明显上调,加入10μmol/L DPI处理30min后,Akt激酶磷酸化恢复到基础水平,在PTEN MEFs细胞中未观察到上述变化.经胰岛素作用后PTEN MEFs细胞增殖加快(P<0.05),加入DPI作用后可减缓细胞的增殖(P<0.05),胰岛素和DPI同时作用对其增殖无明显影响(P>0.05);各种处理因素对PTEN MEFs细胞增殖均无明显影响(P均>0.05).结论 肽类生长因子可以通过磷酸化激活Akt激酶,这一过程依赖于H2O2的产生和抑癌基因PTEN的存在.
-
碱性成纤维细胞生长因子对辐射诱导的小鼠胸腺细胞凋亡的抑制作用
碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)作为一种多肽类生长因子,有着广泛的生理功能.对中胚层和神经外胚层来源的细胞具有促有丝分裂的作用,在胚胎发育和组织分化中,是形态形成、促细胞分裂和诱导细胞分化不可缺少的因子[1].近年来,许多实验结果表明体外许多因素,如化学药物、细胞因子、辐射等都可诱导细胞凋亡[2].本研究bFGF对辐射诱导的免疫系统胸腺细胞凋亡的调节作用,旨在从一个侧面探讨bFGF作用于免疫系统的机理及其在辐射防护中的意义.
-
IGF-I对ISP致大鼠心肌损伤氧化与抗氧化系统的实验研究
胰岛素样生长因子-I(Insulin-Like Growth Factor-I, IGF-I)是属于细胞因子中多肽类生长因子与分化因子的一种.据报道IGF-I在一些缺血性改变,如:肾缺血,兔缺血性神经元损伤的研究中,IGF-I对较小的组织损伤有明显的保护作用.本实验通过IGF-I对异丙肾上腺素(Isoproterenol,ISP)致大鼠心肌损伤时丙二醛(MDA)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的变化,探讨IGF-I是否对ISP致心肌损伤具有保护作用,为缺血性心脏病的防治探索新的途径.
-
黄体酮对妊娠绒毛表达肝素结合性表皮生长因子的影响
早孕期流产是产科并发症之一,影响者很多女性的生殖健康。其中自然流产率为10%到15%,且80%为早期流产,40%-60%为不明原因的流产。流产有着较为复杂的病因,如环境饮食因素、血型不合、生殖道的解剖畸形、胚胎染色体异常、免疫因素、感染性疾病、内分泌失调等。HB-EGF 是近年来发现的一种肽类生长因子,该因子与早期妊娠及女性生殖等关系密切。据研究 HB-EGF 与妊娠着床相关,导致妊娠子宫内膜容受性差,从而引起胚胎种植失败,使临床妊娠率降低[1]。据报道肝素结合性表皮生长因子为着床窗期必须的重要参与因子,该因子在着床期可直接进行调控胚胎着床[2]。Stavreus-Evers 等[3]研究了人类胚胎种植窗期子宫内膜中 HB-EGF 和胞饮突的关系,证实肝素结合性表皮生长因子参与者人类胚泡着床时受精卵的黏附和穿透,并为重要参与因子之一。另有报道,肝素结合性表皮生长因子增进间质细胞及子宫内膜细胞增殖,促进分泌中期的高表达及介导胚泡着床,促使滋养层细胞的生长、分化,进而侵入子宫内膜,维持胎盘的形成和成功妊娠[4]。综合上述,可见在妊娠早期,肝素结合性表皮生长因子扮演者十分重要的角色。本研究是采用免疫组化技术方法检测黄体酮保胎治疗后妊娠绒毛中 HB-EGF 表达水平,探讨黄体酮是否可对体内 HB-EGF表达有影响。
-
疾病状态下血脑屏障对大分子物质的转运途径
血脑屏障是一个弥散屏障,大多数化合物难以透过此屏障从血液流向大脑,它的血管内皮细胞与机体其它部位不同,是无窗孔的血管内皮细胞,细胞间有更广泛的紧密连接,其胞饮小泡转运活性弱.内皮细胞间的紧密连接限制亲水分子从胞间空隙穿过血脑屏障流入.然而,小的脂溶性分子如O2和CO2却能顺着浓度梯度自由穿过内皮细胞膜.较大分子量的营养物质包括葡萄糖和氨基酸通过载体转运入脑,而包括胰岛素、肝素和转铁蛋白在内的大分子的摄取通过受体介导的入胞作用调节[1,2].以前的研究者大多认为肽类和蛋白等亲水性大分子物质难以透过血脑屏障,近年的研究却发现,许多疾病状态下,血脑屏障对这些大分子物质是开放的,也就是说,许多治疗性的大分子物质(如多肽类生长因子)有可能透过血脑屏障发挥其治疗中枢神经系统(CNS)疾病的作用.
-
转化生长因子β1的c-jun氨基端激酶和p38蛋白激酶通路及其抑制剂与纤维化
转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β-)是一个多功能肽类生长因子,对生长、分化、细胞外基质(extracellular matrix,ECM)沉积和免疫应答有广泛的潜在作用.TGF-β1是体内有力的促纤维化因子之一,已表明其是多种组织纤维化发生的关键介导者.
-
肠黏膜免疫
肠道在接触大量食物和消除病原微生物的过程中,其黏膜防御体系起了重大的作用.肠黏膜防御体系包括:①表层屏障:黏液糖蛋白、三叶肽、防御素、肽类生长因子(表皮生长因子、转化生长因子2α、胰岛素样生长因子)、肠细胞间的紧密连接、肠道菌群、谷氨酰胺等是肠黏膜表层屏障的重要组成部分.②天然免疫和获得性免疫.肠道是人体重要的外周免疫器官.肠黏膜的天然免疫作用迅速,通过许多途径和机制来保护其免受微生物和有害物质的侵袭.获得性免疫起效慢,但具有免疫记忆性、特异性等特点,因而具有扩大天然免疫和增强其功能的作用.
-
卵巢癌患者血清TGF-α、TGF-β1和CA125联检的临床意义
转化生长因子包括α、β两大类型,是一类多肽类生长因子,在恶性肿瘤的发生和发展过程中起着十分重要的作用[1].CA125为卵巢癌的一种重要的肿瘤标记物,本文对33例卵巢癌病人,35名正常妇女,31名各卵巢良性肿瘤病人进行血清转化因子和CA125联合检测,以探讨其在临床上的实用价值,现报告如下.
-
原发性肝癌患者手术治疗前血清TGF-α,TGF-β1和CA19-9联检的临床意义
转化生长因子包括α,β两大类型,是一类多肽类生长因子,在恶性肿瘤的发生和发展中起着十分重要的作用[1].CA19-9为诊断肝胆胰疾病中的一种重要的肿瘤标志物[2].本文对37例原发性肝癌患者进行血清TGF-α、TGF-β和CA19-9联合检测,旨在探讨其在临床上的实用价值,现将结果报告如下.
-
卵巢癌患者手术治疗前后血清CA125、IGF-Ⅰ和IL-8检测的临床意义
文献证实[1],检测CA125 水平为卵巢癌公认的标志物,对卵巢癌的病情检测有重要的临床价值.血清IGF-Ⅰ是由多种肿瘤细胞产生和分泌的调控因子,是一种多肽类生长因子, 在恶性肿瘤的发生和发展中具有重要的作用[2].IL-8是第1个被发现具有趋化作用的细胞因子,近年发现,IL-8在许多恶性肿瘤组织中检测到IL-8,且与肿瘤血管的生成、生长、转移、复发等密切相关[3].本文对卵巢癌患者手术治疗前后进行血清CA125、IGF-Ⅰ和IL-8检测,现将结果报告如下.
-
胰岛素样生长因子及其研究进展(文献综述)
胰岛素样生长因子(insulin-like growthfactor,IGF)是一类多功能细胞增殖调控因子,因其化学结构与胰岛素原类似而得名.IGF系统由2个多肽类生长因子,2类受体和至少6种结合蛋白构成[1]主要包括两种相关多肽,IGF-Ⅰ与胰岛素原60%同源,IGF-Ⅱ与胰岛素原40%同源[2].胰岛素主要调节代谢平衡,而IGF-Ⅰ和IGF-Ⅱ的生物学功能通过自分泌和旁分泌对细胞正常生长和发育、骨再建、胚胎发育、神经生长、肿瘤免疫等方面起着十分重要的作用.本文主要从IGF的新研究进展及其主要生物学功能作一文献回顾.
-
尖锐湿疣患者循环血小板源生长因子和粒细胞集落刺激因子的变化
尖锐湿疣是由人乳头瘤病毒 ( HPV) 引起的外生殖器部位的增生性病变 . 血小板源生长因子 ( platelet derived growth factor, PDGF) 是一种具有促细胞分裂增殖及细胞趋化等生物效 应的肽类生长因子 , 在创伤修复和某些增生性皮肤病中可能起重要作用 [1].
-
鼻内镜术后局部应用肽类生长因子的临床观察
目的观察鼻内镜术后局部应用肽类生长因子(bFGF)的疗效.方法 100例慢性鼻窦炎、鼻息肉患者随机分为两组,观察组术后局部应用bFGF+常规用药;对照组常规用药.观察术腔黏膜上皮化情况.结果 上皮化时间观察组48.3±8.8天;对照组77.2±12.2天.两组间差异有显著性意义(t=2.72,P<0.01);总有效率观察组92.0%;对照组82.0%.两组间差异无显著性意义(χ2=2.85,P>0.05).结论鼻内镜术后局部应用bFGF,能促进术腔上皮化,缩短上皮化时间.
-
Smad2/3/4和TGF-β1在先天性巨结肠症组织中的表达
转化生长因子-β(TGF-β)是许多具有共同生物学特性的信号分子组成的大家族,称为TGF-β超家族(transforming growth factor-beta superfamily),TGF-β1是其中一员.TGF-β1是一类具有多种功能的多肽类生长因子[1-2],主要功能是抑制细胞生长,促进基质形成,与多种疾病的发生发展密切相关.TGF-β1主要作用包括调节细胞增殖和分化,参与胚胎发育调节,促进细胞外基质形成和抑制免疫反应等[3].此外,参与细胞周期、细胞生长、骨骼发育和蛋白氨基酸磷酸化,在疾病发生发展中起到免疫抑制的作用.[4].
-
骨形态发生蛋白-2在骨形成过程中的作用机制
骨和软骨组织中含有多种参与调节骨骼发育及生长的多肽类生长因子.此类因子通过自分泌、旁分泌或者内分泌的方式,在细胞与细胞之间,细胞与细胞外基质之间传递信息,参与复杂的骨形成调节过程.在诸多因子中,骨形态发生蛋白(bone morphogenetic proteins,BMPs)是唯一能够单独诱导骨组织形成的局部生长因子.由于BMPs与转化因子在C端都含有7个保留的半胱氨酸残基,所以属于转化生长因子-B超家族(transforming growth factor-bate superfamily, TGF-βs)成员.本文仅对骨形态发生蛋白-2(BMP-2)在骨形成过程中分子生物学作用机制综述如下.
-
胰高血糖素样肽2与肠道保护
严重创(烧)伤、失血性休克、广泛肠切除、小肠移植、长期全肠外营养以及肿瘤的放化疗等均可引起不同程度的肠黏膜上皮细胞损伤,造成其功能的可逆或不可逆丧失.临床上从代谢支持和调理的角度出发,应用多种特殊营养物、生长激素和多肽类生长因子等,在维护肠道结构和功能的完整性方面发挥了积极的作用,但这些物质的作用都缺乏肠道特异性.近期研究发现一种新的多肽类胃肠激素能够促进损伤肠黏膜生长修复,即胰高血糖素样肽- 2( glucagon- like peptide 2,GLP- 2),其作用具有高度肠道特异性.
-
肽类生长因子与雌激素受体之间的信息联系
肽类生长因子一方面可通过雌激素受体产生雌激素样效应,某些方面又与雌激素有协同作用.本文探讨了肽类生长因子与雌激素受体之间信息联系的可能机制.