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PlncRNA-1与激素抵抗性前列腺癌
前列腺癌( prostae cancer , PCa )是男性泌尿生殖系统常见的恶性肿瘤之一,2010年美国肿瘤协会( American Cancer Society )报道新诊断前列腺癌217730例,占男性肿瘤的25%,位于男性肿瘤发病率第一位。死亡32050例,位于癌症死亡率第二位[1]。在我国,近年来随着生活水平的提高、饮食结构的改变和预期寿命的延长,目前前列腺癌的发病率也呈逐年增长趋势。早期前列腺癌具有独特的雄激素依赖特性,阻断了雄激素-雄激素受体的信号途径就可以诱导肿瘤细胞的凋亡和消退。目前,激素治疗仍然是前列腺癌的主要治疗方法之一,经激素治疗(去除雄激素或者应用雄激素受体的拮抗剂)后大部分患者可获得病情好转,然而,在经过中位时间为18~24个月后,原来对激素治疗敏感的前列腺癌患者,几乎都可能会转变为激素抵抗性前列腺癌( hormone refractory prostate cancer, HRPC)[2]。一般情况下,HRPC患者的生存期很少超过12个月,因此如何针对这部分患者进行有效的治疗成为了泌尿外科医师面临的棘手问题。目前,前列腺癌由激素依赖向非依赖转化的机制尚不完全清楚,归纳起来看主要通过两种途径实现:①雄激素受体(androgen receptor, AR)途径,包括AR配体结合区突变或AR基因扩增,增加肿瘤对肾上腺源性的低水平雄激素的敏感性;突变的AR能对其他类固醇,甚至抗雄药物产生应答;通过改变AR与共激活分子之间的相互作用,使突变或非突变的AR被肾上腺雄激素活化,或通过改变某些肽类生长因子或细胞因子的基因表达与功能,使AR非正常活化;②非AR途径,包括肿瘤细胞神经内分泌化、凋亡基因异常等[3,4]。以上这些途径并非相互排斥,任何单一途径均不能完全解释HRPC的发生机制。美国国家癌症研究所( NCI)曾于2004年邀请26名国际知名学者共同讨论雄激素与PCa的关系,探讨雄激素对PCa的病理生理的影响,期望找到更为有效的防治PCa的对策,与会学者一致认为:雄激素受体AR增多,转录功能增强,并非失去了对雄激素的依赖,而是对雄激素更加敏感,除雄激素外,雄激素受体AR尚能接受其他信号的刺激,如IL-6、MAPK ( mito-gen activated protein kinase )、抗凋亡蛋白( AKT)等进行转录。因此治疗PCa的关键是如何减少雄激素受体AR,降低AR功能,雄激素受体AR仍是治疗前列腺癌(PCa)的唯一致命靶标[5]。与此同时,自然医学( Nature Medicine )杂志也发表专家述评,再次强调了雄激素受体AR在HRPC研究中的重要性[6]。科学(Science)杂志也报道第二代雄激素受体AR拮抗剂RD162和MDV3100是治疗晚期前列腺癌非常有前景的药物[7],提示雄激素受体靶向治疗对雄激素抵抗性前列腺癌仍然有效。
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HER-2/neu配体结合区蛋白的表达、纯化及复性研究
目的:将HER-2/neu配体结合区(RLD)基因重组,并在大肠杆菌中表达,对以包涵体形式表达的融合蛋白进行变性和复性的研究.方法:采用PCR技术将HER-2/neu RLD的两段基因分别扩增,并利用基因片段末端的共同酶切位点将两段基因相连接,连接产物插入原核表达载体,在大肠杆菌中实现融合蛋白的表达.表达产物经SDS-PAGE和Western印迹检测后,进行蛋白质的变性、纯化和复性等处理.结果与结论:在大肠杆菌中实现了融合蛋白的高效表达,表达产物可被特异性抗体识别.经SDS-PAGE分析,表达产物以包涵体形式存在,通过变性、纯化和复性等处理,获得了含两个RLD的融合蛋白,从而为HER-2/neu肿瘤疫苗的研究打下了基础.
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表皮生长因子受体与非小细胞肺癌放射敏感性相关的研究进展
表皮生长因子受体(EGFR)是一种相对分子质量为170000的跨细胞膜糖蛋白受体,是HER1家族中的一员,由原癌基因c-erbB1编码[1].EGFR由膜外配体结合区、单链跨膜区和胞内络氨酸激酶区组成,其配体包括表皮生长因子(EGF)、肿瘤坏死因子-α(TGF-α)等.EGFR在肿瘤细胞增殖、迁移、生存及肿瘤的血管生成等方面均发挥着重要作用,当配体与EGFR的胞外配体结合区结合,2个EGFR或EGFR与HER家族中的另一种受体发生二聚体化,导致其胞内段络氨酸激酶域自身磷酸化,磷酸化的EGFR进一步诱发胞内一系列信号传导通路的激活,如ras/MAPK通路,P13K/AKT通路,JAK/STAT通路等,分别传递细胞增殖,抗凋亡,细胞迁移及血管生成等信号.EGFR在大多数非小细胞肺癌中存在高表达,且与肿瘤的放疗效果密切相关.目前,针对EGFR的靶向治疗与放化疗联合成为非小细胞肺癌治疗的研究热点.本文就近几年EGFR与非小细胞肺癌放射敏感性相关的基础与临床研究进展进行综述.
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法尼酯衍生物X受体与肝纤维化
法尼酯衍生物X受体(FXR)是一种在肝肠系统等组织器官表达的胆汁酸受体,属于激素核受体超家族的一员,在胆汁酸代谢及胆固醇代谢中发挥重要作用.当FXR配体与FXR羧基末端配体结合区(LBD)直接结合后,核受体空间构象发生改变并与视黄醛衍生物受体(RXR)形成异源二聚体,后与靶基因特定FXR DNA反应元件结合从而调节靶基因的转录.初级胆汁酸鹅脱氧胆酸是FXR有效的配体,次级胆汁酸石胆酸和脱氧胆酸也可以激活FXR.目前还有合成FXR配体(如6-ECDCA、GW4064等),其与FXR结合力比天然配体强数倍.FXR的主要靶基因包括胆盐输出泵(BSEP)、小异源二聚体伴侣受体(SHP)等,FXR通过和这些基因启动子上的FXR反应元件(FXRE)结合从而调控这些基因的表达.但如胆固醇7α羟化酶(CYP7α1)等主要FXR调控基因的启动子序列中没有典型FXR结合反应序列,FXR则是间接通过诱导转录抑制因子SHP表达,然后SHP与CYP7α1启动子肝受体同源物1(LRH-1)形成抑制性复合物,从而阻断CYP7α1和其它LRH-1靶基因转录.由于FXR在胆汁酸及胆固醇代谢中的重要作用,这将使其和肝脏相关疾病关系日益受到关注[1,2].
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用于治疗癌症的抗EGFR人单克隆抗体Panitumumab
表皮生长因子受体(EGFR)是一种跨膜糖蛋白,它包括一个胞外配体结合区和一个具有酪氨酸激酶活性及信号传导功能的胞内区,EGF和转化生长因子-α(TGF-α)是其重要的配体.其配体的结合可激活受体及其信号传导途径,并由此激活或调节细胞生长进程.该受体存在于源自所有3个胚细胞层(尤其是上皮层)的健康细胞及恶性组织中,已证实在多种恶性细胞中均出现该受体的过度表达,且受体水平上调导致临床预后不良.
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LDLR基因配体结合区多态性与丙型肝炎病毒易感性的相关研究
目的探讨低密度脂蛋白受体(LDLR)基因是否存在与丙型肝炎病毒(HCV)感染有关的单核苷酸多态性(SNP).方法利用PCR结合DNA自动测序对HCV感染者和正常人的LDLR基因的配体结合区进行分析.结果没有发现与HCV感染相关的多态性位点.结论 LDLR基因的配体结合区与(HCV)感染的易感性无关.
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西妥昔单抗联合化疗治疗晚期结直肠癌20例护理体会
西妥昔单抗是人和嵌合体鼠的单克隆的重组体,它通过与表皮生长因子受体(EGFR)的配体结合区结合,干扰了EGFR以及下游信号激活,从而抑制了细胞分化、血管生成、转移以及促进了凋亡.此外,西妥昔单抗TGG1结构还有抗体依赖型细胞介导的细胞毒作用.Saltz等与Cunnin-gham等[1,2]的研究确立了西妥昔单抗联合伊立替康在化疗耐药的晚期结直肠癌患者的治疗地位.我科2006年2月到2008年6月,对28例转移性结直肠癌患者进行西妥昔单抗联合伊立替康化疗,现将护理体会介绍如下.
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雌激素受体β基因多态性与血脂水平的研究
雌激素受体(Estrogen Receptor,ER)是配体依赖转录活性因子超家族成员之一,该家族中还包括类固醇激素受体、甲状腺激素受体、维生素D3受体及维甲酸受体等等[1].研究发现,ER可分为两种亚型,即ERα和ERβ.人ERβ基因在5号外显子的配体结合区(1 082号核苷酸)可发生G→A点突变,8号外显子的3'非编码区(1 730号核苷酸)可发生A→G点突变,当这两处点突变发生后则分别出现限制性内切酶RsaI和AluI的识别位点,因此酶切ERβ基因的扩增片段便可区分出ERβ的不同基因型.ERβ基因的这种多态性可能会影响不同个体ERβ的表达水平或功能上的差异,进而影响体内雌激素生物学作用的发挥,例如雌激素预防动脉粥样硬化的作用.故ERβ基因多态性可能与心血管疾病的发生存在一定的联系[2].
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化学小分子对前列腺癌等肿瘤 EGFR 受体靶向治疗的进一步认识
一、肿瘤 EGFR 靶标及靶向治疗的基本理解
表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR)是一种跨膜糖蛋白,包括细胞外活化配体结合区、单跨膜亲脂区和细胞内酪氨酸激酶(tyrosinekinase,TK)活性区,当配体如表皮生长因子、肿瘤生长因子毩(转化生长因子毩)等与之结合后,受体发生二聚化,使细胞内区结构发生改变,活化 TK 区,将三磷酸腺苷的毭磷酸基转移到酪氨酸残基上,发生自体磷酸化,进而活化下游信号蛋白底物及各种效应蛋白,发出有丝分裂信号,启动细胞分裂周期,终导致DNA 合成增加和细胞增殖。 -
肝细胞癌相关信号通路及靶向治疗研究进展
肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是我国原发性肝癌中常见的一种类型,也是全球癌性死亡中重要的一个因素.目前治疗方法有多种,包括药物对症治疗、手术治疗、放射治疗、生物免疫治疗等.随着相关信号转导机制研究的发展,靶向疗法逐渐引起专家学者的重视.本文总结了涉及HCC主要相关信号传导通路及对应靶向治疗药物作用机制及研究进展,并述及其局限性,以期促进其临床应用.1 EGF/EGFR信号通路表皮生长因子受体(EGFR),又称ErbB-1,是ERB受体酪氨酸激酶(receptor tyrosine kinases,RTKs)家族,有胞外配体结合区、跨膜区及胞内区,其中胞内区具酪氨酸激酶活性.与配体结合后,EGFR形成同二聚体或异二聚体,磷酸化并激活下游多种信号如PI3K/Akt/mTOR、Ras/RM/MEK/ERK.EGFR的配体包括表皮生长因子(EGF),TGF-α,双向调节素(AREG),肝素结合的EGF(HB-EGF)等[1].HCC发病中EGFR研究相对较多:(1)EGFR在HCC中高表达,且这种高表达与晚期阶段并发症,细胞增殖水平及肿瘤分化水平有关[2];(2)EGFR通路的激活可作为HCC患者生存预后的预测因素[3];(3)EGFR在HCC的发展中作用重要.研究证实肝硬化患者血、组织中EGFR水平较高时,更易发展为HCC,且发展速度加快[4].其中,EGFR高水平与EGF基因单核苷酸多聚化,5'端非翻译区核苷酸转化有关.这种单核苷酸多态性可能导致转录子半衰期延长,进而使肝EGF水平升高[5].因此,EGFR信号通路可成为HCC治疗的潜在靶标.
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HER-2/neu胞外配体结合区基因的克隆及原核表达
目的克隆HER-2/neu胞外配体结合区基因,并在大肠杆菌中获得高效表达.方法用PCR技术扩增HER-2/neu胞外配体结合区的cDNA片段,并将该片段插入pET-28a(+)原核表达载体中,实现插入基因的融合表达;用SDS-PAGE和蛋白免疫印迹法分别测定表达产物的相对分子质量及特异性.结果构建的重组质粒在大肠杆菌中获得高效稳定的表达,表达产物的相对分子质量与预期值一致,且所表达蛋白可被抗HER-2/neu的特异性抗体识别.结论获得了HER-2/neu胞外配体结合区基因在原核系统中的表达,为HER-2/neu高表达肿瘤的疫苗研究奠定了基础.
关键词: HER-2/neu原癌基因 配体结合区 基因克隆 原核表达 -
PPAR-γ细胞生长调节的分子生物学研究进展
1 PPAR-γ愕慕峁1人类PPAR-γ基因位于第3号染色体p25区.根据启动子和拼接方式的不同分为PPAR-、PPAR-、PPAR-、PPAR-种亚型,其中PPAR-、PPAR-和PPAR-由475个氨基酸组成相似蛋白,PPAR-由505个氨基酸组成.PPAR-惆ˋ或B、C、E和F四个功能区,A或B区对PPAR-慊钚怨δ芊⒒拥鹘谧饔茫珻区编码DNA结合区,E区为配体结合区,F区为配体依赖活性区[1].
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HER-2/neu配体结合区2蛋白的甘露糖化修饰
目的:建立一种蛋白质甘露糖化修饰的方法. 方法:用离子交换层析和钴亲和层析法, 纯化重组HER-2/neu配体结合区2(LBD2)蛋白, 并将纯化后的LBD2蛋白进行甘露糖化修饰.新合成的LBD2拟糖蛋白经质谱法检测后, 用间苯二酚-硫酸法进一步鉴定. 结果:纯化后LBD2蛋白的纯度可达90%.新合成的LBD2拟糖蛋白在质谱图上呈现相应于甘露糖修饰后蛋白质分子量的预期峰形.经间苯二酚-硫酸法检测, 结合于LBD2蛋白上的化学基团为糖分子. 结论:获得了LBD2拟糖蛋白, 为开展甘露糖受体介导的抗原提呈及肿瘤疫苗的实验研究打下了基础.