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蛇床子素体外抗乳腺癌活性研究
目的:探索蛇床子素对具有HER-2/neu高表达的人乳腺癌SK-BR-3和MDA-MB-231细胞系中的促血管生成因子的表达影响,并阐述其可能的活性机制.方法:以蛇床子素与表皮生长因子(EGF)对具有HER-2/neu高表达的人乳腺癌SK-BR-3和MDA-MB-231细胞系进行单独或联合处理,用酶联免疫吸附测定法(ELISA)定量测定肿瘤细胞促血管生成因子(VEGF、MMP-9)的表达,Western blot检测HER-2/neu及MAPK信号通路关键蛋白ERK1/2的磷酸化水平改变,QRT-PCR检测VEGF、MMP-9在mRNA水平的变化.结果:蛇床子素对HER-2/neu高表达的人乳腺癌SK-BR-3和MDA-MB-231细胞系均具有显著的增殖抑制作用.EGF能显著促进HER-2/neu高表达的人乳腺癌SK-BR-3和MDA-MB-231细胞系表达肿瘤促血管生成因子,蛇床子素能显著能显著抑制ERK1/2蛋白的磷酸化,下调经EGF处理后肿瘤促血管生成因子(VEGF、MMP-9)的表达,并在mRNA水平显著抑制促血管生成因子的表达.结论:蛇床子素可能通过抑制HER-2/neu活性而阻断其下游的MAPK信号通路,通过抑制了ERK的磷酸化减少了MMP-9的表达,从而抑制乳腺癌细胞分泌VEGF,实现其对促血管生成因子表达水平的抑制作用.
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Her-2/neu、DPC4和P16在胰腺癌中的表达及其意义
目的 观察Her-2/neu、P16和DPC4基因在胰腺癌中的表达,并探讨其与胰腺癌发生、发展的关系.方法 应用免疫组织化学法检测Her-2/neu、P16和DPC4基因在34例胰腺癌和12例胰腺良性病变和正常组织中的表达水平,将结果与患者的临床病理学资料进行统计.结果 胰腺癌Her-2/neu表达水平和P16表达缺失水平显著高于胰腺良性病变和正常组织(P＜0.05);胰腺癌DPCA表达水平低于胰腺良性病变和正常组织.高、中度分化胰腺癌DPC4表达水平显著高于低分化胰腺癌(P＜0.05);有淋巴结转移的胰腺癌Her-2/neu和P16表达水平显著低于无淋巴结转移的胰腺癌(P＜0.05);随TNM分期增高,Her-2/neu表达阳性率显著降低(Ⅰ期85.7%;Ⅱ期54.5%,Ⅲ期36.4%,Ⅳ期0.0%)(P＜0.05);P16表达阳性率亦显著降低(Ⅰ期100.0%;Ⅱ期72.7%,Ⅲ期54.5%,Ⅳ期20.0%)(P＜0.05).Her-2/neu与P16和DPC4与Her-2/neu的表达密切相关(P＜0.05);P16与DPCA的表达极密切相关(P＜0.01).结论 Her-2/neu、P16和DPC4的表达对估计胰腺癌的生物学行为和判断预后有较大帮助.P16和DPCA的表达对胰腺癌的进展可能有协同作用.
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乳腺癌Her-2/neu不同的评分标准与ER、PR及Ki-67的关系
目的 观察Dako Hercept test免疫组化试剂盒在乳腺癌中不同的评分标准对Her-2/neu阳性率的影响及与ER、PR及Ki-67的关系.方法 49例浸润性乳腺癌用Hercept test试剂盒分析,按美国食物和药物管理局(FDA)推荐的评分标准进行评分,(++)或(+++)被认为是阳性;修改法评分则肿瘤性上皮染色减去肿瘤周围正常上皮染色后仍为(++)或(+++)被认为是阳性.结果 49例浸润性乳癌中Her-2/neu的阳性率为42.9%,与激素受体及淋巴结转移无明显相关性;但在记分系统中考虑到非肿瘤性上皮染色后阳性率下降为32.7%,且与激素受体及淋巴结转移有明显的相关性(P＜0.05);与PI值无明显相关性(P＞0.05).死亡患者ER/PR阴性、Her-2/neu阳性多见、PI值较高.结论 修改法评分判别Her-2/neu与ER、PR及Ki-67表达对预后的相关性比FDA推荐的评分法更好.
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Ⅰ期非小细胞肺癌预后因素的探讨
目的探讨脂肪酸合成酶(FASE)、HER-2/neu、bcl-2和 p53在Ⅰ期非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其预后意义.方法采用免疫组织化学法,对84例Ⅰ期肺癌手术标本进行FASE、HER-2/neu、bcl-2和p53蛋白的检测,分析各标志物与多种临床因素及预后的关系.结果FASE、HER-2/neu、bcl-2和p53在Ⅰ期NSCLC中的阳性表达率分别为29.8%、40.5%、33.3%和39.3%.FASE阳性和阴性患者的术后局部复发率分别为28.0%和10.2%,差异有显著性(P=0.050);骨转移率分别为61.5%和23.9%,差异有极显著性(P=0.007).HER-2/neu阳性和阴性患者的5年生存率分别为37.7%和67.7%(P=0.008),FASE阳性和阴性患者的5年生存率分别为35.1%和66.1%,差异均有极显著性(P均=0.008),表明HER-2/neu和FASE的表达与预后明显相关. HER-2/neu和FASE均为阴性的患者5年生存率为78.2%,均为阳性的患者5年生存率为36.3%,差异有极显著性(P=0.002).然而,bcl-2和p53未发现有临床预后意义.结论 HER-2/neu和FASE是Ⅰ期非小细胞肺癌的独立预后因素,HER-2/neu和FASE阳性患者的预后差.
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复方苦参注射液辅助治疗Her-2/neu过表达乳腺癌的疗效观察
目的 观察并探讨复方苦参注射液辅助多西紫杉醇治疗Her-2/neu过表达乳腺癌的治疗效果。方法选择Her-2/neu过表达、改良根治术后乳腺癌患者，前期完成AC方案化疗，共38例，行随机、对照、双盲法试验。患者随机分为两组，A组17例，给予多西紫杉醇化疗，B组21例，行复方苦参注射液辅助多西紫杉醇化疗。所有患者检测血清Her-2/neu胞外配体域(ECD)水平，观察化疗不良反应。结果A、B两组患者化疗后Her-2/neu ECD水平分别为(3.74±2.26)和(2.73±2.18) ng/ml，化疗前分别为( 4.33±2.98)和(3.92±2.59) ng/ml，化疗前后差异均无统计学意义(t=0.65，P＞ 0.05;t= 1.61，P＞ 0.05)。B组患者骨髓抑制和消化系统反应较A组轻，差异有统计学意义(x2= 8.610，P＜ 0.01；x 2= 5.828，P＜0.05)。结论复方苦参注射液辅助多西紫杉醇化疗能增强对Her-2/neu过表达乳腺癌的抗肿瘤效应，减轻患者化疗不良反应。
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EGFR、HER-2/neu蛋白在胃癌中的表达及其预后价值研究
目的 研究胃癌组织中表皮生长因子受体(EGFR)、HER-2/neu蛋白的表达与临床病理特征及生存时间的关系,探讨其作为胃癌预后指标的可行性.方法 应用免疫组织化学法检测103例胃癌标本中EGFR、HER-2/neu蛋白的表达,并将检测结果与患者临床病理特征进行综合分析.结果 在103例胃癌组织中,EGFR、HER-2/neu蛋白的阳性表达率分别为42.7%(44/103)、31.1%(32/103),而胃正常组织中均无表达.EGFR、HER-2/neu蛋白表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小、部位、分化程度均无相关性(P＞0.05),而与肿瘤的浸润深度、病理分期、淋巴结转移、远处转移相关(P＜0.05).EGFR、HER-2/neu蛋白表达阳性患者的中位生存时间分别为11.0和10.1个月,表达阴性患者的中位生存时间分别为65.2和64.5个月,表达阳性与阴性患者的生存时间有显著性差异(P＜0.05).EGFR与HER-2/neu蛋白联合表达与生存时间相关(PEGFR＝0.027,PHER-2/neu＝0.000,rEGFR＝1.965,rHER-2/neu＝3.153),二者阳性表达时有减少胃癌患者生存时间的危险,HER-2/neu阳性表达的危险度相对较大.结论 测定胃癌组织中EGFR、HER-2/neu蛋白的表达,有助于判断患者预后,也为分子靶向治疗药物在胃癌的应用提供了理论依据.
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HER-2/neu配体结合区蛋白的表达、纯化及复性研究
目的:将HER-2/neu配体结合区(RLD)基因重组,并在大肠杆菌中表达,对以包涵体形式表达的融合蛋白进行变性和复性的研究.方法:采用PCR技术将HER-2/neu RLD的两段基因分别扩增,并利用基因片段末端的共同酶切位点将两段基因相连接,连接产物插入原核表达载体,在大肠杆菌中实现融合蛋白的表达.表达产物经SDS-PAGE和Western印迹检测后,进行蛋白质的变性、纯化和复性等处理.结果与结论:在大肠杆菌中实现了融合蛋白的高效表达,表达产物可被特异性抗体识别.经SDS-PAGE分析,表达产物以包涵体形式存在,通过变性、纯化和复性等处理,获得了含两个RLD的融合蛋白,从而为HER-2/neu肿瘤疫苗的研究打下了基础.
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胃癌组织中HER-2/neu、PTEN及CD44V6的表达与预后
目的 探讨胃癌组织中HER-2/neu、PTEN及CD44V6的表达与预后的关系.方法 应用免疫组织化学法检测65例胃癌标本和30例正常组织中HER-2/neu、PTEN及CD44V6的表达情况.结果 HER-2/neu、PTEN及CD44V6在胃癌组织中阳性率分别为21.5%、36.9%及58.5%;在正常胃粘膜组织中的阳性率分别为10.0%、90.O%及10.0%;二者差异有统计学意义(P<0.05);在胃癌组织中的表达与肿瘤分化程度、侵袭深度以及淋巴结是否转移相关(P<0.05).CD44V6与HER-2/neu表达阳性及阴性的5年生存率分别为7.14%和22.2%.Cox回归生存分析显示HER-2/neu和CD44V6同时阳性表达是强危险因素.结论 胃癌组织中HER-2/neu及CD44V6的阳性表达提示患者预后差,可作为评价预后的指标.
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两种不同方法在检测IHC2+的乳腺癌中HER-2/neu基因表达差异的比较研究
目的 探讨免疫组化(immunohistochemistry,IHC)与荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)两种技术在检测乳腺浸润性导管癌HER-2/neu为2+时的一致性.方法 收集乳腺浸润性导管癌并经IHC证实为2+的标本66例,同时进行FISH检测,比较两者结果的相关性.结果 FISH检测发现在66例IHC为2+的病例中,HER-2/neu基因的阳性率为28.8％ (19/66)；ER-PR-乳腺癌HER-2/neu基因的阳性率(47.4％)明显高于ER+ PR+乳腺癌HER-2/neu基因的阳性率(17.5％),两者具有显著性差异(P＜0.05).结论 IHC证实HER-2/neu为2+时必须进行FISH检测.
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Her-2/neu小分子干扰RNA对肺腺癌细胞周期和凋亡机制的影响
目的研究人类表皮生长因子受体-2(Her-2/neu)小分子干扰RNA(siRNA)对Her-2/neu过表达的肺腺癌细胞的细胞周期和凋亡机制的影响.方法用化学合成的靶向Her-2/neu siRNA转染肺腺癌calu-3细胞,转染前后通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定细胞中Her-2/neu、细胞周期蛋白(Cyclin)D1 mRNA水平;流式细胞术检测Her-2/neu蛋白水平和细胞周期的变化;AnnexinⅤ异硫氢酸荧光素(FITC)试剂盒检测肺癌细胞的凋亡情况;荧光分光光度法测定Caspase-3活性;酶联免疫吸附试验(ELISA)技术检测培养液上清中血管内皮生长因子(VEGF)水平.结果 Her-2/neu siRNA能在mRNA和蛋白水平下调肺癌细胞株calu-3中Her-2/neu基因的表达.calu-3细胞转染Her-2/neu siRNA 48 h后处于G0/G1期的细胞增多,同时S期的细胞比例减少,与未转染对照组、空载体组和非特异性siRNA组比较差异有统计学意义(F=6.1,P<0.01).转染Her-2/neu siRNA后Cyclin D1 mRNA水平下降,同时培养上清液中的VEGF含量为176 pg/ml±6 pg/ml(F=24.7,P<0.01),Caspase-3活性为135%±4%(F=8.9,P<0.01),细胞凋亡率为25.1%±1.2%(F=10.3,P<0.01). 结论化学合成的靶向Her-2/neu siRNA能够下调Her-2/neu基因表达,继而降低Cyclin D1和VEGF水平,激活Caspase-3途径,从而阻滞细胞周期于G0/G1期和诱导凋亡.
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人源性抗乳腺癌Her-2/neu噬菌体单链抗体库构建
目的 构建乳腺癌患者抗Her-2/neu全人源性噬菌体单链抗体可变区(ScFv)文库,筛选抗Her-2/neu单链抗体.方法 收集40例乳腺癌患者前哨淋巴结(SLN),提取总RNA,反转录为cDNA作模板,在目前常用的引物基础上重新设计可变区的引物,用PCR扩增全套抗体可变区,构建T载体库.并改造pCANTAB-5E构建了pCANTAB-Linker.将T载体库酶切连接人pCANTAB-Linker构建出scFv文库.后构建噬菌体单链抗体库并进行初级筛选.结果 成功改良ScFv文库的构建方法.初步得到12株对人乳腺癌组织有高亲和力的Her-2/neu单链抗体.结论 改良了ScFv文库的构建方法,可以获得较大库容量的单链抗体库,并从中筛选到人源性抗Her-2/neu单链抗体.
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HER-2/neuCOX-2PGE2P450arom在子宫内膜癌组织的表达及其相关性研究
目的:探讨子宫内膜腺癌组织中HER-2/neu、COX-2、PGE2、P450arom4种生物学指标的表达,分析这4种生物学指标表达强度之间相关性及与临床病理因素的相关性.方法:应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术及酶联免疫吸附试验(ELI.SA)检测HER-2/neu、COX-2、P450arom及PGE2在正常子宫内膜、子宫内膜不典型增生和子宫内膜腺癌组织中的表达情况.结果:HER-2/neu、COX-2、P450arom及PGE2在癌组织中表达高于非癌组织,有显著性差异(P<0.01).癌组织中HER-2/neu与COX-2、P450arom表达强度呈正相关(r值分别为0.931,0.934,P<0.05),COX-2与P450arom表达强度亦呈正相关(r=0.908,P<0.05 ).COX-2mRNA和PGE2表达强度变化呈正相关(r=0.552,P<0.05).结论:HER-2/neu、COX-2、P450arom及PGE2可能存在协同作用,共同促进子宫内膜腺癌的发生发展.
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HER-2/neu基因与肿瘤治疗研究进展
实验研究发现许多癌基因编码的产物具有酪氨酸蛋白激酶活性,并与恶性肿瘤的发生关系密切,原癌基因HER-2即是其中之一.研究证实HER-2/neu基因的改变与人类肿瘤发生、发展密切相关.
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曲妥珠单抗联合奥沙利铂、5-氟尿嘧啶治疗HER-2/neu高表达晚期胃癌的临床疗效观察
目的 观察曲妥珠单抗联合奥沙利铂、5-氟尿嘧啶治疗HER-2/neu高表达晚期胃癌的临床疗效与安全性.方法 选择2009年10月-2011年4月收治的晚期胃癌患者84例为研究对象,随机分为观察组(44例)与对照组(40例),对照组给予奥沙利铂联合5-氟尿嘧啶化疗方案,观察组在此基础上加用曲妥珠单抗,2组均化疗4个周期,并进行24个月随访观察,对比2组化疗结束后临床疗效、化疗期间药物毒性反应及24个月内存活情况.结果 (1)2组化疗结束后1个月,观察组总体有效率为63.6%,KPS评分为(79.6±6.4)分,均高于对照组的42.5%和(75.8±5.7)分,HER-2细胞外定量(28.4±6.6)μg/L低于对照组的(31.5±7.2)μg/L,差异均有统计学意义(P＜0.05).(2)观察组心脏毒性、发热或寒战、皮疹发生率显著高于对照组(分别为15.9% vs 2.5%、25.0% vs 10.0%、29.5% vs 7.5%),差异均有统计学意义(P＜0.05).(3)观察组化疗结束后24个月平均生存率为(43.5±7.1)%,平均存活时间为(16.9±3.1)个月,均高于对照组的(39.7±5.8)%和(14.6±2.8)个月,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 对HER-2/neu高表达晚期胃癌患者在行奥沙利铂联合5-氟尿嘧啶化疗基础上使用曲妥珠单抗,能明显提高临床疗效,延长患者存活时间;同时需密切监测曲妥珠单抗的药物毒性尤其是心脏毒性.
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HER-2/neu和PIM-1在雄激素非依赖性前列腺癌中的表达及意义
目的 探讨HER-2/neu和PIM-1在雄激素非依赖性前列腺癌(AIPC)中的表达及意义.方法 选取江西省人民医院2012年6月-2016年6月收治的52例前列腺肿瘤患者的病理组织,根据疾病的不同分为良性前列腺增生组18例、雄激素依赖组20例、AIPC组14例.采用免疫组织化学检测比较3组患者HER-2/neu和PIM-1基因表达及血清总前列腺特异抗原(tPSA)、游离前列腺特异抗原(fPSA),并计算F/T,并对AIPC组患者Gleason分级和临床病理分期与HER-2/neu、PIM-1基因表达的相关性进行分析.结果 AIPC组患者HER-2/neu阳性率高于良性前列腺增生组、雄激素依赖组(P<0.05);雄激素依赖组患者HER-2/neu阳性率高于良性前列腺增生组(P<0.05).AIPC组患者PIM-1阳性率高于良性前列腺增生组、雄激素依赖组(P<0.05);良性前列腺增生组和雄激素依赖组患者PIM-1阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05).经Spearman相关性分析结果显示,AIPC组患者Gleason分级与Her-2/neu阳性、PIM-1阳性无相关性(r=0.233,0.465,P>0.05).临床病理分期与Her-2/neu阳性、PIM-1阳性呈正相关(r=0.683,0.793,P<0.05).雄激素依赖组和AIPC组患者tPSA、fPSA高于良性前列腺增生组,F/T低于良性前列腺增生组(P<0.05);AIPC组患者F/T低于雄激素依赖组(P<0.05),但雄激素依赖组和AIPC组患者血清fPSA比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 原癌基因HER-2/neu、PIM-1在AIPC组织中呈高表达,并与前列腺癌细胞病理分期密切相关.
关键词： 雄激素非依赖性前列腺癌 HER-2/neu Pim-1 -
ER、PR、Her-2/neu在甲状腺乳头状癌中的表达及意义
目的:探讨雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、人类表皮生长因子受体2(Her - 2/neu)在甲状腺乳头状癌中的表达及意义.方法:收集甲状腺乳头状癌共43例,结节性甲状腺肿8例,癌旁正常甲状腺组织4例.用免疫组化SP法检测ER、PR、Her - 2/neu在甲状腺组织中的表达,并分析这些蛋白表达与甲状腺肿瘤生物学特征的关系.结果:5例男性标本ER、PR、Her - 2/neu阳性表达率分别为40％ (2/5)、40％(2/5)、60％(3/5),39例女性阳性表达率分别为56.41％ (22/39)、48.71％ (19/39)、61.53％ (24/39).年龄＞45岁的标本19例,阳性表达率分别为57.89％ (11/19)、57.89％ (11/19)、68.42％(11/19),年龄＜45岁标本24例,阳性表达率分别为54.16％(13/24)、41.66％ (10/24)、58.33％(14/24).有淋巴结转移16例标本,阳性表述率分别为68.75％ (11/16)、75％ (12/16)、81.25％ (13/16),无淋巴结转移27例标本,阳性表达率分别为48.14％(13/27)、33.33％ (9/27)、1.85％ (14/27).结论:ER、PR、Her - 2/neu在甲状腺乳头状癌中有较高的阳性表达,三者的阳性表达与年龄、性别无关,与是否发生淋巴结转移有关,这为甲状腺乳头状癌的诊断、治疗和判断预后提供了一条新的途径.
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免疫组化三阴乳腺癌患者的临床病理特征及预后分析
三阴乳腺癌(triple-negative byeast carcinoma,TNBC)指雌激素受体(estrogen receptor,ER)、孕激素受体(pvogesterone receptor,PR)和HER-2/neu 均无表达的乳腺癌,被认为是一种独立的临床类型,以侵袭性强预后差为主要特征.本文对三阴乳腺癌的临床病理特征、复发及生存情况进行文献复习及分析,旨在提高对三阴乳腺癌的预后预测和治疗效果.基因标记(gene signature)在乳腺癌研究中的应用成为该领域发展的又一个里程碑,根据基因标记的差异将乳腺癌分为不同的分子亚型,包括basal 型、luminal型和HER-2 /neu阳性型,不同亚型乳腺癌对治疗的反应和预后存在明显差异[1-3].Basal-like型乳腺癌显著的特征就是缺乏雌激素受体(estrogen receptor,ER)、孕激素受体(progesteronereceptor, PR)和HER-2 /neu的表达.三阴乳腺癌指ER、PR和HER-2 /neu均无表达的乳腺癌,80%~90%的三阴乳腺癌属于Basal-like型乳腺癌[4].
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乳腺癌雌孕激素受体状态与Her-2/neu相关性的研究
近年乳腺癌发病率不断上升,已逐渐成为人们关注的焦点之一.HR与乳腺癌的关系密切.Her-2/neu原癌基因的过度表达,导致在细胞膜表面过度表达Her-2/neu受体而容易促进细胞增殖.一般认为,Her-2/neu的表达与肿瘤体积、淋巴结转移、临床分期、组织学分级和核分裂相记数呈正相关,表明Her-2/neu表达与肿瘤生长、分化和转移密切相关.本研究旨在探讨HR状态与Her-2/neu的关系.
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HER-2/neu胞外区基因疫苗的免疫避孕作用
目的:研究HER-2/neu胞外区基因疫苗在免疫避孕中的作用.方法:构建含人HER-2/neu胞外区的重组质粒pcDNA3-hECD,以该质粒转染真核细胞C2C12或注射小鼠股四头肌,检测其在体内外表达情况;以该质粒基因免疫雌性BALB/C小鼠,部分小鼠于第12周以重组蛋白hECDu加强免疫,以ELISA方法检测抗HER-2/neu抗体应答,3H-TdR掺入法检测细胞免疫应答,并观察其诱导免疫避孕的情况.结果:C2C12转染上清及小鼠股四头肌注射局部均可检测到hECD蛋白的表达.小鼠经基因免疫后可产生较高水平抗体应答,抗体水平至少维持28周,同时可检测到较高水平细胞免疫应答(pcDNA3-hECD与对照组SI值分别为9.55和1.25);基因免疫后小鼠平均产仔数(3.8±2.9,对照组为9.7±1.6)明显降低,以蛋白加强免疫后产生特异性回忆反应,平均产仔数进一步降低(2.0±1.7).而且,免疫小鼠产后4天子宫及卵巢与正常产后鼠相比均无明显区别.结论:基于HER-2/neu胞外区的基因疫苗免疫小鼠可诱导有效的免疫应答并产生一定免疫避孕效果,并且这种避孕作用经特异性蛋白加强免疫可进一步得以提高.
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Her-2/neu和CD138在乳腺癌中表达及意义
目的 检测乳腺癌组织中Her-2/neu和CD138的表达情况,探讨二者在乳腺癌中表达的意义和相互关系.方法 应用免疫组化方法(S-P法)观察102例乳腺癌,30例乳腺良性病变组织(15例乳腺良性肿瘤与15例正常乳腺组织)Her-2/neu和CD138的表达.结果 ①102例乳腺癌组织和30例乳腺良性病变组织中Her-2/neu阳性表达率分别为58％和0％,CD138阳性表达率分别为41％-42％和100％.乳腺癌组织中Her-2/neu阳性表达率显著高于其在良性病变组织的阳性表达率(P＜0.01),良性病变组织中CD138阳性表达率显著高于乳腺癌组织(P＜0.015).②Her-2/neu的表达与乳腺癌的淋巴结转移、临床分期密切相关(P＜0.05).③CD138表达与乳腺癌的淋巴结转移、临床分期呈负相关(P＜0.05).结论 乳腺癌组织中Her-2/neu阳性表达与CD138的阴性表达显著相关(P＜0.01).
