首页 > 文献资料
-
单核苷酸多态性检测与疾病遗传风险评估
国内外分子流行病学发展迅速,取得了跨越性的研究成果.基因检测与疾病遗传风险的关系,已经越来越引起人们的关注,虽然基因检测尚未得到社会的普遍接受,但是早期、及时发现疾病的遗传风险,其实际的社会意义重大.本文从具体案例的分析提出如何实施个性化健康管理,对基因检测与疾病遗传风险的关系进行综述.
-
聚合酶链反应-单链构象多态性检测淋病奈瑟菌gyrA基因突变的研究
国外研究表明,DNA旋转酶是淋病奈瑟菌(淋菌)中氟喹诺酮类药物的首要作用靶位,淋菌对氟喹诺酮类药物耐药主要与编码该酶的gyrA基因喹诺酮耐药决定区(QRDR)突变有关[1].为建立一种简便、快速、可靠的淋菌gyrA基因突变的检测方法,并进一步探讨该突变与我国临床分离淋菌对氟喹诺酮类药物耐药的关系,本课题以浓度梯度(Etest)法检测了42株临床分离淋菌对环丙沙星敏感性,采用聚合酶链反应-单链构象多态性分析(PCR-SSCP)结合DNA测序技术,对淋菌gyrA基因QRDR突变进行了研究,报告如下.
-
IgE低亲和力受体基因G/A多态性与支气管哮喘易感性
支气管哮喘(简称哮喘)是一种常见病,全世界约有1亿多患者.在我国哮喘的发病率约1%~4%,全世界范围内哮喘发病呈逐年增加趋势[1].由于发病机制尚未完全阐明,对哮喘的防治存在很大困难.大量研究表明,哮喘发病与遗传因素和环境因素密切相关.近年来有关哮喘研究的一个重要进展是发现IgE低亲和力受体(CD23,FcεRⅡ).FcεRⅡ存在于B细胞、激活的单核细胞、嗜酸粒细胞、血小板中.部分T细胞上,为一条单链,具有调节IgE生成和B细胞分化、抗原递呈等功能.其在哮喘发病中的作用使人们自然地把目光转到其编码基因上.为此,我们对湛江地区哮喘人群和正常人群中该基因外显子9进行了多态性检测.
-
基因芯片技术及其在结核分支杆菌研究中的应用
一、基因芯片技术概述基因芯片(又称DNA芯片)始创于90年代初,首先由美国Affymetrix公司的Fodor博士提出并开始基因芯片技术的研究.它是目前分子生物学前沿的方法,是物理学、微电子学与生命科学交叉综合的高新技术,是近年来发展起来的进行大规模遗传多态性检测的新方法[1].基因芯片以其基片的不同分为无机基片和有机合成物基片,前者包括半导体硅片和玻璃片,其上的探针主要以原位聚合的方法合成;而后者的探针是预先合成后通过特殊的微量点样装置或仅器滴加到基片上去[2].基因芯片的基本原理是将多种探针固定在玻璃等基片上,然后与待测样本的DNA或RNA进行杂交,通过检测每个探针分子的杂交信号强度进而获取样品分子的数量和序列信息.由于该法同时将大量探针固定于支持物上,所以一次可以对样品大量序列进行检测和分析,从而解决了传统核酸印迹技术的操作繁杂、自动化程度低、操作序列数量少、检测效率低等不足[3].
-
短串联重复序列多态性检测非清髓造血干细胞移植造血嵌合体的研究
近来,随着非清髓异基因造血干细胞移植(NST)的开展,造血嵌合体的研究已成为异基因造血干细胞移植(Allo-SCT)的热点课题.
-
聚合酶链反应-单链构象多态性检测利福平结核分子杆菌rpoB基因突变
结核病耐药趋势严峻,传统的检测结核分子杆菌耐药方法均操作繁杂、费时.聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)方法是一种快速检测基因突变与缺失的方法[1].我们采用该方法分析80株结核分支杆菌rpoB基因突变情况,研究rpoB基因与耐利福平(RFP)之间的关系,报告如下.
-
微流控芯片与基因诊断关系的研究进展
微流控芯片( MC )也称为芯片实验室,其已经广泛于医学、生物、电子、流体、化学等领域〔1,2〕,且MC可把样品制备、反应、分离、检测、扩增、分析等集成到一块几微米至几百微米尺度的芯片上并自动完成所有基本过程. 目前, MC 已经广泛地应用到医学基因诊断( GD)方面,例如基因多态性检测〔3〕、基因高效性测序〔4〕、基因快速性扩增〔5,6〕等,为此,本文主要对MC与GD关系进行综述.
-
DNA芯片技术的研究进展
随着后基因组时代(postgenome era)的到来,研究的工作重心已从基因结构方面转向基因功能方面[1].传统的建立在电泳基础上的基因表达、序列测定、突变和多态性检测等研究方法,费时、耗资,且不利于自动化;而DNA芯片(DNA Chip)技术结合人类基因组计划(HGP)提供的大量信息,使得我们能够在全部基因组水平上对上述问题进行研究,因此有人说今后基因组研究的大部分工作将在芯片上的实验室(lab-on-a chip)完成.
-
乙型肝炎病毒基因多态性检测芯片的临床应用
在乙型肝炎病毒(HBV)持续感染的过程中,其基因组可自然地或在治疗诱导下出现各种变异而呈多态性,给乙型肝炎的诊断、治疗及判断预后带来许多临床问题.DNA芯片技术是近几年发展起来的进行大规模遗传多态性检测的新方法,我们根据HBV基因多态性位点及突变热点的几种可能突变情况,设计了多条寡核苷酸探针,与聚合酶链反应(PCR)扩增的HBV基因相应区段杂交,根据特定位置上杂交信号的有无和与之相应的探针序列来判定基因突变的类型.同时,测定了99例临床样本和40例献血员样本,取得了较满意的结果,现初步报告如下.
-
原发性高血压候选基因多态性的分子流行病学研究进展
原发性高血压(EH)是遗传物质与环境因素共同作用的多基因遗传性疾病,发病机制尚不明确.遗传流行病学研究表明:人群中个体血压水平的差异30%~70%归因于遗传因素,遗传背景是EH发病的重要原因.随着人类基因组单核苷酸多态性检测和分型技术的不断完善,近年来人们广泛开展EH候选基因多态性研究,以阐明EH的关键基因,从分子水平来认识其发病机制.本文主要针对近几年来研究的一些热点基因及多态性成果予以综述.
-
PCR-RFLP技术及其在隐孢子虫基因分析上的应用
自1974年Grodjicker等提出限制性片段长度多态性(Restriction Fragment Length Polymorphism,RFLP)技术以来,它作为第一代DNA遗传标记极大地推动了人类DNA多态性的研究,现已广泛应用于人类遗传疾病的诊断及寄生虫的鉴定上.1985年Mulis等发明了聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)技术,此后该技术即在生命科学中掀起了一场革命,它几乎渗透到生命科学的各个领域,使DNA多态性检测更为直接,快速.PCR-RFLP技术在隐孢子虫基因分析上的应用也逐渐增多,下面就其这方面的研究和应用作一综述.
-
临床分子生物学检验实习的带教体会
随着医学科学的进步,临床对疾病的诊断和鉴别诊断越来越离不开检验医学,而传统的检验医学技术已不能满足临床的需要,分子生物学检验已成为检验医学重要的组成部分,并发挥着越来越重要的作用。分子生物学检验以聚合酶链反应(polymerase chain reaction ,PCR)技术为核心,广泛地运用于临床,如感染性疾病的诊断、白血病融合基因检测、单核苷酸多态性检测、遗传突变以及胎儿血型检测等[1-2]。PCR技术具有高敏感性和高特异性的优点,但其操作步骤较为繁琐,任何一个环节的疏忽都可能对结果造成严重的影响,因此,检验专业实习生应接受系统、严格的训练,并能对实验过程中出现的各种结果进行分析。这对检验专业学生的理论知识及实践技能提出了更高的要求。笔者通过近年来对临床分子生物学检验实习生的带教工作,总结了以下几点带教体会。