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硒对人脐静脉内皮细胞P38信号通路和环氧化酶-2表达的影响
环氧化酶-2 (COX-2)在动脉粥样硬化发生中起重要作用.P38信号通路(P38MAPK)是细胞信号传导的交汇点.硒做为一种抗氧化剂可延缓或消除动脉粥样硬化的形成,但其是否通过信号通路发挥作用还不清楚.我们在体外模拟糖尿病状态,探讨糖尿病时存在的各种应激如高葡萄糖(HG)、糖基化终末产物(AGE)、高胰岛素(HI)及过氧化氢(H2O2)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC) P38MAPK、COX-2蛋白表达的影响及二者的关系,从而探讨P38MAPK在糖尿病动脉粥样硬化形成中的作用及硒在抗糖尿病动脉粥样硬化中的作用机制.
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人参总皂苷调控中风后巢内细胞对神经干细胞的作用
目的::中风是一种严重危害人类健康的疾病,神经干细胞能够促进中枢神经系统功能的修复。神经干细胞的增殖、分化、迁移需要干细胞niche的调控,前期实验发现人参总皂苷可以显著增加中风后神经干细胞的数量。体外模拟神经干细胞niche内星形胶质细胞和脑微血管内皮细胞对神经干细胞的影响,以研究人参总皂苷是否能作用于星形胶质细胞和脑微血管内皮细胞而促进中风后神经干细胞的分化,修复脑损伤?将脑微血管内皮细胞、星形胶质细胞和神经干细胞共培养,观察模拟神经干细胞niche内复杂微环境条件下,人参总皂苷能否使脑微血管内皮细胞和星形胶质细胞分泌的VEGF增多,从而促进中风损伤的神经干细胞分化。方法:取1-3 d的新生SD大鼠,分离培养星形胶质细胞和脑微血管内皮细胞。取孕16 d SD大鼠,分离培养神经干细胞。利用Transwell装置,将神经干细胞、星形胶质细胞和脑微血管内皮细胞共培养。制备神经干细胞缺氧6h的脑中风模型。用含1μg/ml的人参总皂苷培养基作用1d,设置空白对照组。MAP-2标记成熟神经元,GFAP标记星形胶质细胞。用细胞免疫荧光化学染色检测缺氧6h神经干细胞分化后的MAP-2和GFAP阳性细胞比例,ELISA检测人参总皂苷对星形胶质细胞和脑微血管内皮细胞共培养上清中VEGF含量的影响。结果:与脑微血管内皮细胞、星形胶质细胞共培养条件下,与空白对照组比较,人参总皂苷可显著增加MAP-2阳性细胞比例( P<0.01);人参总皂苷作用于星形胶质细胞和脑微血管内皮细胞48 h可显著上调VEGF表达( P<0.01)。结论:人参总皂苷作用于脑微血管内皮细胞和星形胶质细胞可增加中风后神经干细胞向神经元定向分化并促进其成熟,可能与人参总皂苷调控脑微血管内皮细胞和星形胶质细胞VEGF分泌,改善神经干细胞niche微环境有关。
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双支架术式的体外模拟研究
目的:研究不同双支架术式(包括经典挤压支架术、双对吻挤压支架术和裙裤支架术)在不同分叉角度的分叉血管模型中的表现。方法基于不同分叉角度的硅树脂分叉血管模型,全程使用微聚焦相机照相,观察运用不同双支架术后的支架形态学以及分支开口间隙区的差异。结果基于“T”型分叉(远端分叉角度90°):运用经典挤压支架术,再次放置导丝从远端网眼进入分支,完成对吻扩张后,分支开口嵴侧无支架钢梁覆盖;无论是经典挤压支架术(再次放置导丝从近端网眼进入分支),还是双对吻挤压支架术(两次放置导丝都从近端网眼进入),分支开口嵴侧都留有间隙区,但双对吻挤压支架术后的间隙空间小于经典挤压支架术。基于“Y”型分叉(远端分叉角度﹤70°):双对吻挤压支架术和裙裤支架术后分支开口无间隙形成;裙裤支架术若两次放置导丝都从近端网眼进入分支,术后分支开口会形成新的金属嵴。结论远端分叉角度是决定双支架术后分支开口间隙形成的重要解剖学因素。对于“T”型分叉,运用挤压支架术在分支开口嵴侧都留有间隙,但双对吻挤压支架术后的间隙空间明显小于经典挤压支架术;双对吻挤压支架术两次放置导丝都应从近端网眼进入分支;裙裤支架术两次放置导丝都应从远端网眼进入分支。
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平衡超滤对于围术期抗生素浓度的影响观察
目的:在体外模拟实验中,探索平衡超滤技术对于围术期血浆抗生素浓度的影响。
方法:建立体外循环体外模拟环路,在平衡超滤期间定期取血浆和超滤液样本,采用高效液相色谱检测技术,对于两种类型的抗生素头孢替安和头孢美唑药物浓度分别进行动态监测。 -
钙敏感受体激活对缺血再灌注兔心脏电生理特性的影响
目的:钙敏感受体(CaSR)是G蛋白耦联受体,近期研究发现其参与了心肌缺血再灌注损伤过程,但是对于缺血再灌注心律失常的影响还不得而知。本研究旨在通过给予钙敏感受体激活剂R-568观察其对在体缺血再灌注及体外模拟兔心室肌的恶性心律失常诱发率、动作电位时程、跨壁复极离散度及兴奋恢复性质的影响。
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不同碳水化合物对正常人肠道菌群体外模拟效果的比较
目的 比较不同碳水化合物对正常人肠道菌群体外模拟效果的影响,找出适合肠道菌群体外模拟的条件,研究肠道微生物体外制备方法.方法 采集3名正常志愿者的粪便样品,利用以淀粉为主要碳源的培养基VI和以淀粉+多糖为主要碳源的培养基XP,在体外模拟发酵模型中对其菌群结构进行模拟培养.通过提取发酵液细菌基因组DNA,运用PCR-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)和16S rRNA基因高通量测序来评价模拟系统的稳定性和模拟效果,通过测定发酵液短链脂肪酸含量来推断细菌代谢情况.结果 体外发酵模型连续运行8d后,3名志愿者的发酵液细菌PCR-DGGE条带一致,不同培养基存在特异的细菌条带.细菌16S rRNA基因高通量测序结果表明,3名志愿者的粪便样品主要由4个细菌门组成,分别是拟杆菌门、厚壁菌门、变形菌门和放线菌门.在考虑细菌百分含量的情况下,VI培养基对3名志愿者肠道菌群的模拟相似性是0.847、0.825、0.968,XP培养基为0.927、0.926、0.836.当不考虑细菌百分含量,只考虑细菌种类时,VI培养基对3名志愿者肠道菌群的模拟相似性是0.553、0.580、0.623,XP培养基为0.617、0.520、0.574.VI和XP培养基模拟效果存在个体差异,VI培养基对志愿者3菌群的模拟效果更好,XP培养基对志愿者1、2菌群的模拟效果更好.VI和XP培养基均能较好地模拟拟杆菌和毛螺旋菌属细菌的生长,但VI和XP培养基中也存在各自特异生长的细菌.在发酵罐内检测到短链脂肪酸的含量是15~35 mmol/L,产生多的是丁酸和丙酸.结论 发酵系统可用于肠道细菌的模拟培养,不同碳水化合物对肠道细菌的体外模拟效果有不同影响,能体外模拟培养出相同的细菌,也有在各培养基中特异性生长的细菌,但对3名志愿者肠道细菌模拟相似性均在80%以上.
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梗死心肌组织裂解液对鼠脂肪间充质干细胞体外诱导分化作用的研究
本研究采用向脂肪间充质干细胞(ADMC)培养体系中加入梗死心肌组织裂解液的方法,体外模拟梗死心肌细胞微环境,观察梗死心肌微环境对ADMC向心肌细胞诱导分化的作用.
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利用食管静脉曲张直径测量尺对体外模拟曲张静脉测量的可行性研究
目前,国内外对食管胃静脉曲张直径的测量,主要采用目测法(visual estimate)、张钳法(open biopsy forceps)或器械尺等,而活检钳(biopsy forceps)等物理内标(substantial internal standards)对内镜下病灶大小的测量[1-5],其数据可信度亦不高[6-8].虽然新近文献报道有虚拟内标内镜测量法,但临床上并没有开展起来[9-10].究其原因,主要影响因素是内镜设备本身特殊要求.
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体外模拟二氧化碳气腹环境对卵巢癌细胞凋亡的影响
近年来,腹腔镜在妇科恶性肿瘤手术中的应用逐渐受到关注, 但有关腹腔镜手术安全性的问题,特别是腹腔镜手术是否可能促进肿瘤细胞的生长及转移,尚存在争议 [1-4] .目前,已有关于CO 2环境对结肠癌细胞生长作用的研究.本研究拟通过体外模拟的CO 2气腹,观察其对卵巢癌细胞系HO8910和SKOV3细胞凋亡的影响,初步评价腹腔镜应用于妇科恶性肿瘤的安全性,并提供相关的实验室证据.
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加速度环境人体循环系统体外模拟顺应性腔的实验研究
目的 通过研究一种膜式顺应性腔,改进加速度环境下人体循环系统的体外模拟.方法 在人体循环系统体外模拟装置中装备了一种膜式顺应腔,通过硅胶膜(厚度分别为0.2 mm和0.4 mm)来分隔气体和液体,防止加速度引起的气-液界面倾斜造成空气进入实验系统.对顺应性腔施加20~200 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)压力来模拟加速度环境下的生理状态,用高分辨率照相机记录气液界面的分隔和硅胶膜的变形,计算不同压力下的顺应性值.结果 ① 顺应性腔在加压过程中,未发现有空气进入闭合液体回路,0.2 mm厚硅胶膜的变形量大于0.4 mm厚硅胶膜.② 膜式顺应性腔在压力加载和卸载过程中均显示出粘弹性特征,当循环加载达到3次时,0.2 mm厚硅胶膜顺应性腔的加载曲线和卸载曲线接近重叠,0.4 mm厚硅胶膜顺应性腔的加载曲线和卸载曲线尚未接近重合.③ 在20~200 mmHg实验压力下,0.2 mm厚硅胶膜的模拟范围为0~1.4 ml/mmHg,0.4 mm厚硅胶膜为0~0.4 ml/mmHg.结论 膜式顺应性腔解决了加速环境下体外模拟存在的气液界面分离问题,顺应性模拟范围能够满足人体循环系统体外模拟的需求.
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Th1/Th2细胞失衡对重型再生障碍性贫血CD34+细胞的免疫抑制效应
再生障碍性贫血(再障)的发病与T细胞介导的造血抑制有密切联系[1,2].我们曾发现,重型再障患者骨髓的Th1样细胞因子干扰素(IFN)γ水平明显上调,而Th2样因子IL-4却大致正常,间接提示重型再障可能存在Th1/Th2细胞比例失衡[3].为探讨Th1/Th2细胞失衡对骨髓造血功能的效应,们利用CD34+细胞和Th细胞的混合培养体系,在体外模拟Th1/Th2细胞的交互调节过程,观察了对CD34+细胞扩增和集落形成的影响.
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膝关节单髁置换中聚乙烯垫片的损坏——体内植入和体外模拟的对比研究
改进的膝关节磨损模拟方法是使膝关节单髁置换(unicondylar knee replacements,UKR)与合成股骨(具有人体股骨相似的形态和材料特性)之间形成"解剖式连接".将体外标准模拟和改进模拟的UKR聚乙烯垫片与体内取出的UKR聚乙烯垫片进行损坏模式的对比,以此评估模拟改进的效果.共评价了3组UKR垫片:一组为患者体内取出的垫片(植入组,n=17);另一组是将股骨部件连接于标准金属块上进行膝关节磨损模拟之后的垫片(标准组,n=6);后一组是将股骨部件连接于合成股骨上进行膝关节磨损模拟之后的垫片(解剖组,n=6).所有UKR都具有相似的低匹配度的关节面.使用数字图像摄影测量法对关节的磨损(种类、频率和面积)进行量化.虽然这三组之间存在一些共同的磨损方式,但是标准组和解剖组垫片磨损的面积与植入组不同.三组垫片在金属股骨关节面和聚乙烯垫片接触的地方,都具有相对聚集的磨损.但只有植入组垫片存在(因磨蚀方式而产生的)相对分散的磨损.合成股骨的使用增加了磨损模拟的复杂性,但是并没产生充分接近于取出垫片的磨损模式.
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输液调节器巧排莫菲氏滴管下大段空气
在静脉输液过程中,由于各种原因未及时更换液体均可导致输液器莫菲氏滴管(以下简称滴管)内液体滴完,空气下滑至滴管下,引起患者紧张、恐慌,若不及时处理,有造成空气栓塞的危险.临床上常根据下滑空气段长短采取上排法(将<60 cm的空气段上排至滴管内[1])或下排法(分离输液管与头皮针衔接处将>60 cm的空气段从下排走).上排法密闭式操作符合无菌原则,无药液丢失,且对输液过程无干扰;下排法虽省时省力,但易污染接头,衔接时有微量空气进入血管内,同时还浪费了药液,易造成患者或家属不满.为了杜绝下排法弊端,我们运用输液调节器排除滴管下大段空气,经体外模拟输液和临床应用,效果满意,现报道如下.
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不同葡萄糖浓度对人牙龈成纤维细胞在钛表面附着和生长的影响
随着人们经济水平的大幅提高和糖尿病发病率的增长,在要求种植修复缺失牙齿的人群中糖尿病患者的比例不断提高,而糖尿病是影响种植修复成功的风险因素之一[1]。以往学者[2]研究糖尿病对种植修复的影响大多集中在骨整合方面,而糖尿病对牙龈组织在种植体表面黏附结合的影响的相关研究却鲜有报道。本研究在体外模拟高血糖环境,配制不同葡萄糖浓度细胞培养液培养人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts,HGFs)并接种于纯钛表面,观察不同培养时间HGFs的附着数量和生长形态的变化,以期指导口腔医师在临床实践中为糖尿病患者选择正确的种植修复时机提供理论参考。
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实时荧光定量聚合酶链反应系统质量管理相关问题探讨
实时荧光定量聚合酶链反应(real-time-polymerase chain reaction,RT-PCR)是体外模拟DNA的天然复制过程,定量或定性测定人类血清、血浆、分泌物等各种体液中的病毒含量及其复制活跃情况。目前,依靠RT-PCR对血液病原体进行筛查已在全国广泛开展[1],并且因以其高特异性、高灵敏度、低检测限等优势在分子生物学研究的各个领域得到广泛应用[2,3]。
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输液速度计算公式修改及输液泵治疗的必要性
作者通过对理论与实际输液时间严重不符1例分析并采用液体体外模拟滴落法观测滴速变化.认为:(1)即往输液速度计算公式应做修改;(2)重力输液中液面高度变化是影响输液速度的首要因素;(3)进行特殊液体治疗应用输液泵是必要的,现报告如下.
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血浆凝血酶原时间测定的报告方式与临床应用
血浆凝血酶原时间(Prothrombin time,PT)测定是在体外模拟外源性凝血的全部条件,测定血浆凝固所需的时间,用以反映外源凝血因子是否异常,是筛检机体止凝血功能基本、常用的试验之一.根据卫生部关于病人凝血酶原时间(PT)测定的有关规定,要把过去习惯的以时间(S)报告方式再结合国际标准化比值的报告方式更有利于临床应用.将2005年3月至2005年8月所采集的30份标本进行检测,对几种报告方式对比如下.
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骨髓CD34+造血干/祖细胞的分离、纯化及鉴定
造血干细胞(HSC)工程是利用HSC的生物学特征,通过细胞工程的技术,在体外模拟或部分模拟体内的造血过程,对分离纯化的造血干/祖细胞(HSC/HPC)进行体外扩增、定向诱导分化、功能激活与调控、目的基因转染等,终将造血细胞治疗更广泛有效地应用于干细胞移植、生物免疫治疗、造血支持治疗和基因治疗等领域.可见,从骨髓、脐血和外周血中分选纯化HSC/HPC对造血细胞增殖分化的基础研究及临床应用至关重要.CD34抗原是常用来分选纯化HSC/HPC的表面标志[1].我们采用免疫磁珠阴性分选策略,从骨髓细胞中纯化CD34+HSC/HPC,经流式细胞术与免疫组织化学检测CD34+细胞的富集程度,并对分选细胞进行造血祖细胞集落鉴定.本研究旨在为研究造血干/祖细胞增殖分化的调控奠定实验基础.
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人工心脏瓣膜体外加速疲劳试验
人工心瓣的疲劳寿命,与患者的生命紧密相关.体外加速试验可以大大缩短研究周期,因而受到重视.以往的试验表明,体外模拟实验与体内寿命有相关性,它们表现在这几方面:(1)在体外疲劳试验中发生故障的人工心瓣组件在体内也会发生故障;(2)在体外模拟疲劳试验中构件磨损和疲劳的部位也是临床常见的部位;(3)在体外疲劳试验中寿命较高的人工心瓣,在体内寿命也长.
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心脏辅助装置体外模拟实验的研究
心脏辅助装置的中心为心脏辅助泵,主要分为搏动式血泵和叶轮式血泵.搏动式血泵以固定频率产生搏动血流,具有单向瓣膜控制血流方向,并可与人体心率同步,按驱动方式可分为气动泵和电动泵.叶轮式血泵采用叶片高速旋转作为驱动力,产生连续的血流,并可根据心率实时改变频率,其体积小、结构简单、易于植入,包括轴流泵、离心泵和混流泵.此文介绍心脏辅助装置泵体特点、体外模拟试验循环平台的建立及参数测试等方面的研究进展.