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人参总皂苷提取工艺研究
以人参总皂苷的含量为检测指标,乙醇为提取溶剂,通过紫外可见分光光度法测定人参总皂苷的含量,考察了超声波法提取人参总皂苷的工艺.超声波提取法主要以料液比、超声温度、超声时间、乙醇浓度、超声功率为考察因素,并采用正交试验法探讨了超声波提取法的佳工艺条件.结果表明:超声波法的佳工艺为料液比1:35,提取温度70℃,超声时间45 min,乙醇浓度60％.
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大孔吸附树脂纯化人参总皂苷的工艺研究
目的 应用大孔吸附树脂纯化人参提取物中人参皂苷,并对其工艺进行优化.方法以人参总皂苷的含量为指标,比较不同型号树脂和不同工艺条件对人参皂苷的分离纯化能力.结果 X-5树脂具有较好的吸附和解吸附性能,其佳工艺条件为上样液质量浓度为5.99 mg/ml,上样体积为2倍柱体积,吸附流速为1.1 ml/min,用70%乙醇洗脱,用量5倍柱体积,洗脱流速为1.0 ml/min,人参总皂苷纯度可达60%以上.结论 该工艺简便,适宜于人参总皂苷的工业化分离纯化.
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人参总皂苷抗皮质酮诱导的海马星形胶质细胞可塑性损伤的作用研究
目的:观察人参总皂苷(GTS)对皮质酮(CORT)诱导的小鼠抑郁样行为以及海马星型胶质细胞(AS)可塑性损伤的影响,探讨GTS抗抑郁的作用机理.方法:60只C57BL/6N小鼠随机分成6组,即Control、CORT、阳性药、低剂量GTS、中剂量GTS以及高剂量GTS.CORT组连续5周皮下注射CORT制备小鼠抑郁模型,各给药组在模型复制的后3周灌胃给予低剂量GTS(GTSL,每日12.5 mg·kg-1)、中剂量GTS(GTSM,每日25 mg· kg-1)、高剂量GTS(GTSH,每日50 mg·kg-1)和氟西汀(Flu,每日10 mg· kg-1).在用药处理3周之后,进行行为学试验和血清CORT测定,并采用Western-blot法检测海马胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)蛋白的表达水平,采用免疫组化染色和体视学方法定量海马(GFAP)阳性细胞的数目.结果:与对照组相比,CORT组在行为学检测中,静止不动时间明显增加,GDNF、GFAP蛋白表达水平及海马GFAP阳性细胞数目显著下调.GTS各组均能改善模型小鼠的抑郁样行为,上调GDNF、GFAP蛋白水平,增加海马GFAP阳性细胞的数目.结论:GTS对CORT诱导的小鼠抑郁样行为及海马AS可塑性损伤均有改善作用.
关键词： 星形胶质细胞 可塑性 人参总皂苷 胶质纤维酸性蛋白 胶质细胞源性神经营养因子 -
人参抗抑郁作用及机制的研究进展
人参作为常用补气中药,其抗抑郁作用成为近年关注的热点.临床研究发现,人参提取物可改善女性抑郁患者的抑郁症状;动物实验发现,人参提取物、人参总皂苷以及人参皂苷单体或苷元在小鼠“行为绝望”模型和慢性应激导致的大鼠抑郁模型中,均表现出抗抑郁的作用.人参抗抑郁作用机制、模式、靶点以及药效物质基础的深入研究对揭示抑郁症发病机制、研发抗抑郁新药、提高其诊治水平均具有参考价值.
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人参总皂苷对野百合碱诱导的大鼠右室肥厚及 ERK 通路的影响
目的：观察人参总皂苷（Total Ginsenosides，TG）对野百合碱（Monocrotaline，MCT）所致大鼠右心室肥厚的影响并探讨其与细胞外信号调节激酶（ERK）信号通路的关系。方法：雄性 SD 大鼠随机分为正常对照组，MCT 模型组，TG 20 mg／（kg·d）、40 mg／（kg·d）、60 mg／（kg·d）剂量组，各组动物均给药18 d。测定各组大鼠的右室肥厚指数（RVHI）、右心重／体重（RVW／BW）；透射电镜观察心肌细胞超微结构的改变；Real time RT －PCR 检测心肌组织 ERK1mRNA 的表达，West-ern blotting 检测心肌组 MKP －1蛋白质的表达。结果：TG 预防给药均使 RVHI、RV ／BW 表达明显降低，改善超微结构损伤，降低心肌组织 ERK1mRNA 和提高 MKP －1蛋白质的表达。结论：TG 能明显改善 MCT 诱导的大鼠右心室肥厚，其抗心肌肥厚作用至少与抑制 ERK1信号转导通路有关。
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人参与当归配伍对人参总皂苷溶出率的影响
目的:研究药对人参-当归中不同比例配伍后醇提液中人参总皂苷溶出率的变化,探讨两药配伍使用的作用机制,体现中药复方用药整体性理论.方法:采用紫外分光光度法对人参与当归不同比例配伍后醇提液中人参总皂苷含量进行测定.结果:人参与当归配伍后人参总皂苷的溶出率降低,不同配伍比例降低程度有所不同,1∶1配伍时人参总皂苷的降低率高.结论:人参、当归配伍后人参总皂苷溶出率变化的研究,为药对人参-当归的配伍使用提供科学依据.
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W/O/W型人参总皂苷复乳的制备与表征
目的:制备与表征W/O/W型人参总皂苷复乳.方法:采用两步法制备W/O/W人参总皂苷复乳,以离心保留率为综合评价标准,通过正交试验考察乳化剂Ⅰ用量、明胶溶液的质量分数、乳化剂Ⅱ用量及反应温度对复乳处方工艺的影响,同时结合复乳的粒子形态、粒径和粒度分布,筛选佳处方并对其进行表征.结果:佳处方工艺为乳化剂Ⅰ用量8％,明胶溶液的质量分数0.25％,乳化剂Ⅱ用量8％,反应温度70℃.人参总皂苷包裹率71.8％,表面张力32.2 mN·m-1,电导率453μs·cm-1.结论:W/O/W型人参总皂苷复乳性质稳定、质量合格,为提高人参总皂苷的口服生物利用度提供参考.
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红参中人参总皂苷的大孔树脂纯化工艺
目的:优选佳的分离纯化红参中人参总皂苷的工艺条件.方法:以人参总皂苷的量为指标,比较不同型号树脂和不同工艺条件对人参总皂苷的分离纯化能力.结果:确定HPD-400大孔树脂为人参总皂苷的纯化材料,其佳工艺条件是药液质量浓度1.7 g·L(-1),药液pH 4.68,吸附速度7.5 BV·h(-1),用4 BV80%乙醇以7.5 BV·h(-1)的速度洗脱人参总皂苷.结论;本工艺条件可以用于含有人参总皂苷的中药制剂的制备提供依据.
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人参总皂苷提取物指纹图谱研究
目的:采用高效液相色谱法建立人参总皂苷提取物的指纹图谱.方法:色谱柱Hypersil C18(4.6 mm×250mm,5μm),流动相:A为乙腈,B为0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱0～30 min 19%A,30～35 min 19%～24%A,35～60 min 24%～40%A.柱温:35℃,检测波长:203 nm,流速:1.3 mL·min-1.结果:人参总皂苷提取物指纹图谱共检出10个峰,峰面积之和大于总峰面积的90%,其精密度、稳定性、重复性均良好.结论:该方法可作为控制人参总皂苷提取物内在质量的标准.
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红参、三七在参参康心滴丸中的提取工艺研究
目的:建立参参康心滴丸原料药中红参、三七的佳提取方法.方法:采用k(34)正交试验,以皂苷总含量和人参皂苷 Re 为评价指标.结果:佳提取工艺以加水量 8 倍,煎煮时间 1.5 h,煎煮次数 2 次为佳提取条件,符合工厂生产条件,切实可行.结论:通过实验验证,此工艺符合工厂生产条件,方法简便,结果准确,制剂质量稳定,符合中国药典的要求.
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星点设计-效应面法优选人参叶酶法提取工艺
目的:通过星点设计-效应面法优选人参叶酶法提取工艺.方法:用纤维素酶法从人参叶中提取人参总皂苷,并用星点设计-效应曲面分析方法进行多元线性回归和二项式拟合以分析酶反应参数(包括pH值,加水量,酶底比)对人参总皂苷得率的影响,从中选择佳工艺,进行预测分析,得出预测值并与实际值比较.结果:二项式拟合复合相关系数较高,r为0.940,佳提取工艺:pH为4.8,加水量为24倍,酶底比为40U/g,人参皂苷提取率实际值为6.29%,预测值为6.37%.结论:实际值和预测值吻合度高,星点设计-效应面法优选人参总皂苷酶法提取工艺是成功的.
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人参总皂苷对DC2.4细胞增殖、抗原吞噬和表面分子表达的影响
目的:观察人参总皂苷对树突状细胞系DC2.4细胞增殖、抗原吞噬和表面分子表达的影响.方法:体外培养DC2.4细胞,加入不同剂量人参总皂苷后,MTT法检测不同时点细胞增殖；流式细胞仪检测细胞表面分子C D40、CD86和MHCⅡ的表达,以及对卵清蛋白抗原的吞噬作用.结果:单纯加入脂多糖(LPS)经培养48h后DC2.4细胞增殖明显(P＜0.05),人参总皂苷可明显抑制LPS诱导的DC2.4细胞增殖(P＜0.05)；此外,人参总皂苷可促进DC2.4细胞吞噬抗原的能力,并协同LPS上调CD40、CD86和MHCⅡ分子表达.结论:人参总皂苷可以维持DC2.4细胞数量的稳态,促进DC2.4细胞吞噬抗原,并与LPS协同促进DC2.4细胞成熟,并具有促进抗原提呈的作用.
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生脉超微颗粒与其散剂的体外溶出度研究
目的:对生脉超微颗粒与其散剂中人参总皂苷、五味子醇甲、总多糖的体外溶出度及溶出动力学进行考察.方法:采用浆法,以自制生脉散为参比制剂,采用分光光度法测定了人参总皂苷、总多糖的体外累计溶出度;采用HPLC法测定了五味子醇甲的体外累计溶出度,并以Weibull方程进行溶出动力学模拟.结果:生脉超微颗粒中人参总皂苷、五味子醇甲、总多糖的的Td和T50均明显小于生脉散.结论:生脉超微颗粒的溶出度和溶出速率均优于生脉散.
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多指标综合加权评分法优选人参五味子水提工艺
目的 通过多指标综合加权评分法优选人参五味子水提工艺,确定佳提取工艺参数.方法 采用L9(34) 正-交试验设计,以人参总皂苷、五味子醇甲含量及干膏量为指标,以加水量、水煎时间及水煎次数为考察因素,采用分光光度法测定总皂苷含量,HPLC法测定五味子醇甲含量.并以人参总皂苷、五味子醇甲得率和出膏率为指标,采用加权评分法进行综合评判.结果 佳工艺条件为8倍量水提取3次,每次2h.结论 该法简单、易行、重复性好,适用于工业化生产.
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人参总皂苷合黄连小檗碱对慢性心衰大鼠血浆BNP、心肌细胞内钙离子浓度的影响
目的:研究人参总皂苷(ginseng total saponins,GS)合黄连小檗碱(berberine,Ber)对慢性心衰大鼠血流动力学、血浆脑钠肽(BNP)、心肌细胞内钙离子浓度[Ca~(2+)]_i的影响.方法:连续12 d皮下注射较大量异丙肾上腺素(ISO)制备慢性心衰大鼠模型,ISO总量80mg·kg~(-1),随机分为4组:模型组,每天蒸馏水灌胃;GS+Ber组(各20mg·kg~(-1))、卡托普利组(45 mg·kg~(-1)),每天灌胃1次;参麦注射液组(5 mL·kg~(-1)),每天腹腔注射1次.另设正常组,每天蒸馏水灌胃.连续给药4周,测定各组大鼠血流动力学变化、血浆BNP含量,流式细胞仪测定心肌细胞内[Ca~(2+)]_i.结果:与正常组相比,模型组左心室内压峰值(LVSP)、左心室等容收缩期压力上升大速率(+dp/dt_(max))、左心室舒张期压力下降大速率(-dp/dt_(max))明显下降,左心室舒张末压(LVEDP)、血浆BNP、心肌细胞内[Ca~(2+)]_i显著升高,均有显著性差异(P＜0.01);与模型组相比,GS+Ber组LVSP,±dp/dt_(max)明显升高,LVEDP、血浆BNP、心肌细胞内[Ca~(2+)]_i显著降低,均有显著性差异(P＜0.01,P＜0.05),治疗效果接近卡托普利组,优于参麦注射液组.结论:GS+Ber对慢性心衰大鼠血流动力学异常、血浆BNP、心肌细胞内钙超载有良好改善作用.
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人参总皂苷对人胚胎神经干细胞增殖及定向诱导为多巴胺能神经元的影响
目的:探讨人参总皂苷(TSPG)对人胚胎神经干细胞(NSC)增殖和分化为多巴胺(DA)能神经元的影响.方法:从7～12周人工流产胚胎脑组织中分离培养人胚胎NSC,免疫细胞化学鉴定NSC特异性nestin抗原表达,在NSC的培养体系中加入TSPG,采用流式细胞术和MTT法检测不同浓度TSPG以及TSPG与EGF,bFGF联合应用对人胚胎NSC增殖的影响;经免疫细胞化学检测培养细胞酪氨酸羟化酶(TH)表达,分析不同浓度TSPG以及TSPG与IL-1联合应用对NSC定向诱导为DA能神经元的影响.结果:TSPG对NSC的增殖有促进作用,TSPG与EGF、bFGF联合应用的促增殖作用是EGF和bFGF联合应用时的2倍;TSPG能促进神经干细胞定向分化为DA能神经元,TSPG与IL-1联合诱导的效果是单用IL-1的5倍.结论:TSPG能促进人胚胎NSC的增殖,并能诱导NSC向DA能神经元分化.
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同仁堂红参与高丽红参品质的初步比较研究——人参皂苷和人参多糖的含量测定
目的:测定人参总皂苷,人参皂苷Rg1,Re,Rb1和人参多糖含量,比较同仁堂红参与高丽红参的质量.方法:建立大孔吸附树脂比色法测定人参总皂苷含量;采用二元梯度洗脱程序的高效液相色谱法测定人参皂苷Rg1,Re,Rb1的含量;优化试验条件,采用苯酚-硫酸显色方法测定人参多糖含量.结果:同仁堂红参中人参总皂苷含量不低于高丽红参中总皂苷的含量;人参皂苷Rg1,Rb1的含量与高丽红参中的含量相近,人参皂苷Re含量略低于高丽红参中的含量,而人参多糖含量则高于高丽红参中的含量.结论:同仁堂红参中人参皂苷含量不低于高丽红参中的含量且人参多糖含量高于高丽红参.建立的测定人参总皂苷、人参皂苷Rg1,Re,Rb1以及人参多糖含量的方法准确、快速、重复性好,可以作为人参质量定量评价的方法,初步比较不同来源的人参品质.
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一氧化氮途径介导人参总皂苷对大鼠右室肥厚的抑制作用
目的:观察人参总皂苷(TG)对野百合碱(MCT)所致大鼠右心室肥厚的影响并探讨其与一氧化氮途径的关系.方法:雄性SD大鼠随机分为:正常对照组、模型组、TG低、中、高剂量组(20,40,60 mg·kg-1·d-1)以及L-精氨酸组(L-arg,200 mg·kg-1·d-1,L-a组);另外,为探讨TG的作用与NO释放的关系,另设TG+ L-N(NOS合酶抑制剂NG-硝基-L-精氨酸-甲酯,L-NAME)组和L-a+ L-N组.在腹腔注射TG 40 mg·kg-1·d-1或L-arg 200 mg·kg-1·d-1的同时分别灌胃NOS抑制剂L-N 20 mg·kg-1·d-1,各组动物均给药18 d.测定各组大鼠的右心室收缩压(RVSP)、右室肥厚指数(RVHI)、右心重/体重(RVW/BW);透射电镜观察心肌细胞超微结构的改变;硝酸还原法检测心肌组织NO2-/NO3-的含量;Real time RT-PCR检测心肌组织心房利钠因子(ANF)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS) mRNA的表达.结果:TG低、中、高剂量和L-arg预防给药均使RVSP,RVSP,RVHI,RV/BW及ANF mRNA表达明显降低(P＜0.05),改善细胞线粒体肿胀、变性,L-N能阻止L-arg对上述指标的影响,而同样剂量的L-N并不能影响TG 40 mg·kg-1对上述指标的降低作用;TG 20,40 mg·kg-1不影响eNOS mRNA的表达,但60 mg·kg-1可提高eNOS mRNA的表达.结论:TG能明显改善MCT诱导的大鼠右心室肥厚,其抗心肌肥厚作用部分是通过NO途径实现的.
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人参总皂苷对γ射线照射后大鼠肝P450酶调节作用研究
该研究用5.5Gy的γ射线照射大鼠,用Cocktail探针法结合液质联用、qPCR和Western blot法检测P450各个同工酶的酶活性、mRNA和蛋白表达来评价人参总皂苷对γ射线照射后大鼠肝P450酶调节作用.结果发现,辐射组CYP1 A2,2B1,2E1,3A4与空白组相比,表达增加;人参总皂苷组CYP1 A2,2B1,2E1,3A4与辐射组相比,表达下降.表明人参总皂苷对辐射诱导大鼠P450酶上调起到反向干预作用.
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人参总皂苷对粘虫体内蛋白质含量及消化酶活性的影响
目的:测定人参总皂苷对粘虫Mythimna separata体内蛋白质总含量及消化酶(纤维素酶和α-淀粉酶)活性的影响,探讨人参总皂苷的生态学作用.方法:在室内模拟粘虫的自然生长条件,采用载毒叶碟法饲喂4龄粘虫,通过Folin-酚试剂盒法测定粘虫体内蛋白质总含量,二硝基水杨酸法测定α-淀粉酶活性,滤纸法测定纤维素酶活性.结果:人参总皂苷能够显著降低粘虫体内蛋白质总含量,对粘虫体内消化酶(纤维素酶和α-淀粉酶)活性具有抑制作用,并且差异性显著.处理组蛋白质总含量、纤维素酶和α-淀粉酶活性显著低于对照组,且参总皂苷对α-淀粉酶和纤维素酶活性的抑制率与人参总皂苷浓度呈正相关,即20 g·L-1组＞l0g· L-1组＞5 g·L-1组.结论:人参总皂苷对粘虫体内蛋白质含量和消化酶活性的抑制,可能是引起粘虫表现拒食和生长发育不良的重要原因之一.
