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复方鹿茸多糖增强小鼠免疫力的实验研究
目的：探讨复方鹿茸多糖（鹿茸多糖、人参多糖、猴头菇多糖）对小鼠免疫功能的影响。方法：经口投予小鼠低、中、高剂量（0.1、0.2、0.6g/kg体重）的复方鹿茸多糖30天后，进行各项免疫指标的检测。结果：复方鹿茸多糖可明显提高中、高剂量组小鼠的半数溶血值，能增强中、高剂量组小鼠的迟发型变态反应并且能增强高剂量组小鼠的碳廓清功能及腹腔巨噬细胞的吞噬功能，但对小鼠NK细胞活性，体重及免疫器官重量均无显著影响。结论：复方鹿茸多糖对小鼠免疫功能有增强作用。
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人参多糖防治去卵巢大鼠骨丢失的骨形态计量学观察
目的:探讨人参多糖对去卵巢大鼠骨丢失的骨形态计量学改变及其预防作用.方法:4.5月龄SD雌性大鼠,按体重随机分为基础组、假手术组、去卵巢组、已烯雌酚阳性用药组、人参多糖用药组,共给药10周,取胫骨上段骨组织包埋,不脱钙骨切片,用全自动图像分析仪及松质骨形态计量学软件进行测量和分析,观察人参多糖对骨形态计量学参数的影响.结果:去卵巢10周后骨量丢失和破骨细胞活性、骨形成及骨转换率增加,存在显著性差异(P＜0.01).人参多糖能使骨量增加34.70%(P＜0.05),骨小梁数量增加(P＜0.05),骨小梁分离度下降(P＜0.05).并能使大鼠的骨吸收参数和骨转换率均下降,差异有显著性(P＜0.01),不抑制藕联的骨形成.结论:去卵巢大鼠骨量丢失,骨转换率增高,出现明显的骨质疏松;己烯雌酚(10μ g@kg1@d1)能抑制骨吸收,也抑制骨形成.人参多糖能使骨形成和骨吸收下降,改善骨结构,增加骨量,同时对子宫无刺激作用,具有预防去卵巢大鼠骨丢失的作用.
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多糖类药物在体外对LAK细胞增殖功能的影响和抗肿瘤作用的实验研究
目的:探讨多糖类药物在体外对LAK细胞增殖功能的影响和抗肿瘤作用.方法:建立B16黑色素瘤小鼠模型,取小鼠脾细胞培养,1组加IL-2,2组加IL-2和人参多糖,3组加人参多糖,分别培养,用台盼蓝染色,观察多糖类药物对LAK细胞增殖功能的影响.同时Ⅰ组瘤体周围皮下注射1组培养细胞,Ⅱ组注射2组培养细胞,Ⅲ组注射3组培养细胞,取肿瘤交界部位皮肤组织,光镜和电镜观察肿瘤浸润淋巴细胞(tumor infiltrating lymphocyte,TIL)的形态和分布特征.结果:人参多糖与IL-2联合体外培养表明,人参多糖能促进LAK细胞的增殖能力(P＜0.05).实验组肿瘤交界区可见不同程度的淋巴细胞浸润,其中以Ⅱ组为多.结论:人参多糖与IL-2联合体外培养能促进LAK细胞的增殖能力,且培养的细胞体内应用淋巴细胞浸润明显增多.
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人参多糖药理活性研究进展
文章综述了人参多糖在免疫调节、抗肿瘤、抗氧化、抗辐射等药理学研究及其可能机制的研究进展.
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人参多糖治疗慢性乙型病毒性肝炎的临床疗效观察
目的:观察人参多糖治疗慢性乙型肝炎的临床疗效.方法:选择年龄在20～60岁的慢性乙型肝炎患者70例,随机分为人参多糖治疗组和还原型谷胱甘肽对照组,分别于用药前后观察临床症状的变化及肝功能指标ALT、AST、SB等的改善情况.结果:人参多糖治疗组临床症状在治疗前后明显改善,血ALT、AST、SB下降程度及临床总有效率与对照组比较有显著性差异.结论:注射用人参多糖可有效改善慢性乙型肝炎患者的临床症状和肝功能指标,近期疗效确切.
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湿法粉碎提取人参中有效成分的研究
目的 观察湿法粉碎提取人参中人参皂苷及人参多糖的提取率.方法 采用对湿法粉碎提取法、回流提取法和超声提取法提取人参饮片中人参皂苷及人参多糖,并对提取结果进行比较.结果 湿法粉碎提取法可充分提取出人参中的人参皂苷Re、Rg1、Rb1和人参多糖,与超声提取法和回流提取法相比具有效率高和消耗能源少的优点.结论 湿法粉碎提取法操作简便,可用于人参中人参皂苷和人参多糖的提取.
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参麦注射液致过敏反应病例分析
参麦注射液源于《症因脉治》，由等量红参、麦冬提纯制备而成，有效成分包括人参皂苷、麦冬皂苷、麦冬黄酮及微量人参多糖、麦冬多糖，具有强心、增加心脏供血、减少氧耗量、清除氧自由基等作用。其不良反应主要为过敏反应，以I型变态反应(速发型变态反应)为主，用药5 min内多发，好发于中老年患者。例举2015年6－11月2例静滴参麦注射液发生过敏反应的案例进行分析。
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089 人参多糖的化学与药理学研究进展
从人参多糖的化学以及人参多糖抗肿瘤活性、免疫调节功能、降血糖和造血调控的药理学研究及其可能的机制等方面,介绍了近年来对人参多糖的研究情况.
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正交试验优选人参多糖除蛋白工艺
目的:优选人参多糖的佳除蛋白工艺.方法:以蛋白清除率、多糖保留率和糖醛酸保留率为指标,比较了两种不同除蛋白方法(Sevag法和TCA法)的效果,并采用正交试验优选佳除蛋白工艺.结果:Sevag法的除蛋白效果优于TCA法,人参多糖的佳除蛋白工艺为5％人参多糖溶液中加入1/3倍体积的Sevag试剂,V氯仿∶V正丁醇为4∶1,共除6次.结论:该工艺除蛋白效率较高,可用于人参多糖的分离精制.
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人参多糖的分级及其免疫活性初探
目的:采用柱分离对人参多糖进行分级,并考察各级分对脾淋巴细胞增殖的刺激作用,找出活性部位.方法:用快流速Q-琼脂糖凝胶( Q-Sepharose FF)色谱将人参多糖进行分级,先用水和0.4 mol·L - 1 NaCl溶液洗脱,将人参多糖分成中性多糖和酸性多糖,再将酸性糖依次用0 ～0.4 mol·L-1NaCl溶液洗脱,得到不同的级分.取小鼠脾脏制备脾淋巴细胞,调整小鼠脾淋巴细胞密度至3.0×106/mL,加样品混合均匀,孵育48 h,考察每个级分不同浓度(25,50,100,200,400 mg·L -1)对脾淋巴细胞增殖的刺激作用.结果:从GP中分级得到GPN和GPA,GPA分级后得到GPA-1,GPA-2,GPA-3和GPA-4.GP,GPA,GPN,GPA-2,GPA-3和GPA-4对脾淋巴细胞增殖都具有促进作用,其大刺激指数分别为1.073,1.082,1.119,1.101,1.102和1.296.GPA,GPA-2,GPA-3和GPA-4的刺激作用均随着浓度的增加而增强；GPN随着浓度的增加促进作用减弱,在大于100 mg·L-1时呈现抑制作用,且浓度越大抑制作用越强.GPA-1对脾淋巴细胞的增殖具有抑制作用,且浓度越大抑制作用越强.结论:Q-Sepharose FF色谱可将酸性不同的人参多糖逐级分离.人参多糖各级分对脾淋巴细胞增殖有不同程度的促进作用,以GPA-4的刺激作用强.
关键词： 人参多糖 快流速Q-琼脂糖凝胶 脾淋巴细胞 -
人参多糖对LPS诱导小鼠巨噬细胞炎症因子生成的抑制作用及其机制
目的:研究人参多糖对脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7炎症反应的抑制作用及机制.方法:细胞以2×104个/mL的密度接种于6孔培养板,将细胞分为空白组,LPS组,LPS+地塞米松组,LPS加人参多糖组(质量浓度分别为31.25,62.6,125,250,500 mg·L-1).用LPS(1 mg·L-1)刺激生长良好的RAW264.7细胞24 h建立体外细胞炎症模型,Griess试剂法检测—氧化氮(NO)含量,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测细胞上清液中肿瘤坏死因子-α(TN F-α)和白细胞介素-6(IL-6)含量,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测—氧化氮(NO),TNF-α和IL-6 mRNA的表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞K基因结合核因子抗体核转录因子-κB(NF-κB) p65蛋白的表达.结果:与空白组比较,LPS模型组细胞因子NO,TNF-α,IL-6表达量显著升高(P＜0.01),炎症模型建立成功.给予人参多糖干预后,与LPS组比较,31.25 ～500 mg·L-1的人参多糖可以明显降低LPS诱导的RAW264.7细胞释放炎症因子NO,TNF-α和IL-6水平(P＜0.05,P＜0.01),抑制iNOS,TNF-α和IL-6 mRNA的转录(P＜0.05,P＜0.01),与LPS组比较,125 ～ 500μmol·L-可以显著抑制细胞核内NF-KB p65的表达(P ＜0.05,P＜0.01).结论:人参多糖能明显抑制巨噬细胞炎症因子NO,TNF-α和IL-6过度表达,从而抑制炎症反应,其机制可能与抑制相关炎症因子和mRNA的表达和抑制NF-κB信号通路相关.
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人参多糖中糖醛酸含量测定方法的建立
目的:建立人参多糖中糖醛酸的含量测定方法.方法:将葡萄糖和半乳糖醛酸配成一系列混合糖,考察中性糖在咔唑法和间羟基联苯法中对糖醛酸测定的干扰,选择干扰较小的方法作为人参多糖中糖醛酸的含量测定方法,并对该方法的测定条件进行优选,对方法学进行考察.结果:选择间羟基连本法作为人参多糖中糖醛酸的含量测定方法,佳测定条件为:四硼酸钠-硫酸溶液用量为6.0 mL,加热时间为12 min,间羟基联苯加入量为80μL,显色时间为40 min,测定波长为525nm.人参多糖中糖醛酸的平均含量为29.34％.结论:该方法简便、准确,为人参多糖的的质量控制提供可借鉴的分析方法.
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鼓泡式生物反应器培养人参不定根的研究
目的:研究鼓泡式生物反应器对人参不定根培养的影响.方法:利用组织培养技术结合高效液相色谱法和紫外分光光度法,考察不同角度的鼓泡式生物反应器对人参不定根生长及人参不定根有效成分皂苷和多糖合成的影响.结果:不同生物反应器培养人参不定根中,适合培养人参不定根生长的佳反应器类型为120°圆锥型鼓泡式生物反应器.测定120°圆锥型反应器内的人参不定根生长呈典型的“S”型曲线.人参不定根在第40天得到大的生物量,并且鲜重、干重、干重增殖倍数都达到了大值,分别为113.15 g,9.62 g,63.13倍.人参不定根总皂苷和多糖质量分数为2.25 mg·g-1和2.73％.结论:适合培养人参不定根的佳反应器为120°圆锥型鼓泡式生物反应器.该实验为工业化生产人参有效活性成分奠定基础.
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同仁堂红参与高丽红参品质的初步比较研究——人参皂苷和人参多糖的含量测定
目的:测定人参总皂苷,人参皂苷Rg1,Re,Rb1和人参多糖含量,比较同仁堂红参与高丽红参的质量.方法:建立大孔吸附树脂比色法测定人参总皂苷含量;采用二元梯度洗脱程序的高效液相色谱法测定人参皂苷Rg1,Re,Rb1的含量;优化试验条件,采用苯酚-硫酸显色方法测定人参多糖含量.结果:同仁堂红参中人参总皂苷含量不低于高丽红参中总皂苷的含量;人参皂苷Rg1,Rb1的含量与高丽红参中的含量相近,人参皂苷Re含量略低于高丽红参中的含量,而人参多糖含量则高于高丽红参中的含量.结论:同仁堂红参中人参皂苷含量不低于高丽红参中的含量且人参多糖含量高于高丽红参.建立的测定人参总皂苷、人参皂苷Rg1,Re,Rb1以及人参多糖含量的方法准确、快速、重复性好,可以作为人参质量定量评价的方法,初步比较不同来源的人参品质.
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人参主要成分对大鼠免疫功能的比较研究
人参及其有效成分因具有卓越的增强免疫、调节内分泌及抗氧化应激等作用而著称,然而各成分功效之间的差别并不明确.该文以实验大鼠为对象,研究人参主要有效成分——人参总皂苷、三醇皂苷、二醇皂苷以及人参多糖对机体的影响.结果显示人参二醇皂苷和多糖在提升动物免疫器官质量、血浆白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素6(IL-6)、血浆γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)方面的作用优于其他组.总皂苷和三醇皂苷可有效增加脾脏天然杀伤细胞(NKC)的含量.二醇皂苷和多糖可以显著增加大鼠血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质酮(CORT)和促甲状腺激素(TSH)含量.人参总皂苷在增加大鼠脑组织一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)方面优于其他各组.研究表明,人参各成分在增强免疫、调节内分泌及抗氧化应激方面有不同程度的功效,人参二醇皂苷和人参多糖在增强免疫方面体现优势,人参总皂苷在抗氧化应激方面体现优势.
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人参多糖介导Wnt/β-catenin信号转导诱导人鼻咽癌细胞CNE-2的凋亡
目的:观察人参多糖(ginseng polysaccharide,GPS)对人鼻咽癌细胞CNE-2的增殖和凋亡的影响以及可能的机制探讨.方法:CCK8法观察人参多糖对人鼻咽癌CNE-2细胞生长的影响.取对数生长期的CNE-2细胞,用不同质量浓度人参多糖(GPS)0,0.1,0.2,0.3,0.4g·L-1分别作用48 h后,流式细胞术检测其对CNE-2细胞凋亡的诱导作用;Hoechst-33258染色和电镜观察细胞的形态改变.Real-time PCR检测细胞β-catenin mRNA的表达.采用免疫荧光染色检测细胞中β-catenin,TCF4蛋白定位及表达量的变化.Western blot检测细胞中β-catenin,Bcl-2,Bax蛋白的变化.结果:CCK8法测得人参多糖能明显抑制CNE-2细胞的增殖,其抑制作用呈剂量、时间依赖性,GPS处理细胞48 h的IC50为0.39 g· L-1;质量浓度分别为0.1,0.2,0.3,0.4g·L-1的GPS作用人鼻咽癌CNE-2细胞48 h后细胞凋亡率分别为(5.69 ±0.29)％,(10.3±0.63)％,(15.4±0.74)％,(35.7±1.86)％,与对照组(2.08 ±0.11)％比较均有显著性差异(P＜0.05);Hoechst-33258染色结果显示细胞凋亡特征.电镜下可见0.4 g·L-1GPS诱导48 h后可使CNE-2细胞出现凋亡小体.Real-time PCR显示β-cateninmRNA表达明显降低.激光共聚焦结果显示人参多糖作用48 h后-catenin和TCF4在胞核中表达明显减少,β-catenin表达区域由胞核向胞膜转移.Western blot结果显示经浓度梯度增加的人参多糖作用CNE-2细胞48 h后,β-catenin和抗凋亡蛋白Bcl-2表达明显减弱;而促凋亡蛋白Bax表达上调(P＜0.05).结论:人参多糖可明显抑制CNE-2细胞增殖促进细胞凋亡.Wnt/β-catenin信号通路的受阻可能是GPS诱导人鼻咽癌细胞CNE-2凋亡的一个重要机制.
关键词： 人参多糖 CNE-2细胞 细胞增殖 凋亡 Wnt/β-catenin -
离体培养条件对人参不定根生长及其活性成分合成的影响
目的:对人参不定根的摇瓶培养条件进行系统的优化.方法:利用组织培养技术结合高效液相色谱法和紫外分光光度法,考察了接种量、蔗糖浓度以及无机盐浓度对人参不定根的生长、人参皂苷以及人参多糖合成的影响.结果:每1 L培养基接种的不定根鲜重为20 g时人参不定根的干重增殖倍数达到大值;随着蔗糖浓度的升高,人参不定根干重增殖倍数呈先升高后降低的趋势,人参多糖含量增长趋势不明显,不同蔗糖浓度时各单体皂苷含量有显著区别,人参总皂苷含量随蔗糖浓度的升高而降低,单位体积培养基中的多糖和皂苷产量均在40g·L~(-1)蔗糖质量浓度下达到大值;培养基中的无机盐浓度对不定根的生长以及多糖和皂苷的合成与积累都有较大影响,3/4MS有利于不定根的生长以及皂苷的合成,而不定根中的多精含量则随着盐浓度的升高而降低.结论:接种量、蔗糖浓度、无机盐浓度都会显著影响人参不定根的生长以及其活性成分的合成和积累.
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人参多糖和当归多糖诱导人内皮细胞表达造血生长因子的实验研究
目的:研究和论证人参和当归促进血细胞生成及"补气生血"的现代生物学机理.方法:采用造血生长因子生物活性检测与免疫细胞化学等技术,研究经人参多糖(GPS)和当归多糖(APS)诱导的人脐静脉内皮细胞株(Ecv304)上清液(HEcCM)中造血生长因子的活性及粒单系集落刺激因子(GM-CSF)、IL-3和IL-6在内皮细胞的表达.结果:GPS和APS体外诱导制备的HEcCM能显著促进粒单系造血祖细胞(CFU-GM)和多向性造血祖细胞(CFU-Mix)的增殖;同时,GPS和APS能不同程度地促进内皮细胞GM-CSF、IL-3和IL-6蛋白表达.结论:GPS和APS能上调造血微环境中的内皮细胞分泌造血生长因子来调节血细胞的生成.
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人参多糖对粒单系造血祖细胞增殖分化的影响
本文采用造血祖细胞体外培养、造血生长因子生物活性检测、免疫细胞化学等实验血液学技术检测人参多糖(GPS)体外作用对人粒单系造血祖细胞(CFU-GM)增殖分化的影响及GPS刺激制备的胸腺细胞培养上清液(HTCM)、脾细胞培养上清液(HSCM)、骨髓基质细胞条件培养液(HBMSCM)中GM-CSF的生物活性.结果发现:①在有外源性粒单系集落刺激因子(GM-CSF)存在的情况下,GPS能显著促进CFU-GM的增殖与分化.②经GPS体外诱导制备的胸腺细胞、脾细胞、骨髓基质细胞的条件培养液能明显提高人CFU-GM的产率.③经GPS体外刺激后,胸腺细胞、脾细胞、骨髓基质细胞GM-CSF蛋白表达水平较对照组明显提高.结果表明GPS可能通过直接和/或间接途径促进胸腺细胞、脾细胞和造血诱导微环境中的基质细胞合成和分泌GM-CSF或GM-CSF样活性,进而促进CFU-GM的增殖和分化.
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人参多糖及IL-2对小鼠黑色素瘤细胞体内的抑制效应
目的探讨依赖人参多糖及IL-2的肿瘤浸润淋巴细胞(tumor infiltrating lymphocyte,TIL)在体内抗肿瘤作用. 方法建立B16黑色素瘤小鼠模型,将30只C57小鼠随机分为4组,1组瘤体周围皮下注射IL-2,2组注射IL-2和人参多糖,3组注射人参多糖,4组仅注射生理盐水作为对照组,通过测量瘤重、瘤体积和抑瘤率观察其抗肿瘤作用.同时取瘤周部位皮肤组织,光镜和电镜观察TIL细胞的形态和分布特征. 结果人参多糖与IL-2联合体内应用抗肿瘤作用显著强于对照组(P <0.05).实验组瘤周区可见不同程度的淋巴细胞浸润,其中以2组为多,且可见TIL细胞与肿瘤细胞有膜接触. 结论人参多糖与IL-2联合体内应用抗肿瘤作用显著强于对照组,且T IL细胞前者明显增多.
