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多糖类药物在体外对LAK细胞增殖功能的影响和抗肿瘤作用的实验研究
目的:探讨多糖类药物在体外对LAK细胞增殖功能的影响和抗肿瘤作用.方法:建立B16黑色素瘤小鼠模型,取小鼠脾细胞培养,1组加IL-2,2组加IL-2和人参多糖,3组加人参多糖,分别培养,用台盼蓝染色,观察多糖类药物对LAK细胞增殖功能的影响.同时Ⅰ组瘤体周围皮下注射1组培养细胞,Ⅱ组注射2组培养细胞,Ⅲ组注射3组培养细胞,取肿瘤交界部位皮肤组织,光镜和电镜观察肿瘤浸润淋巴细胞(tumor infiltrating lymphocyte,TIL)的形态和分布特征.结果:人参多糖与IL-2联合体外培养表明,人参多糖能促进LAK细胞的增殖能力(P＜0.05).实验组肿瘤交界区可见不同程度的淋巴细胞浸润,其中以Ⅱ组为多.结论:人参多糖与IL-2联合体外培养能促进LAK细胞的增殖能力,且培养的细胞体内应用淋巴细胞浸润明显增多.
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金黄扶正茶对免疫抑制小鼠细胞免疫功能的影响
目的:探讨金黄扶正茶对免疫抑制小鼠脾脏T、B淋巴细胞增殖及腹腔巨噬细胞免疫功能的影响.方法:金黄扶正茶高、中、低剂量组分别连续给昆明种小鼠ig 10 d,同时隔日sc注射环磷酰胺(30 mg·kg-1)造成免疫抑制模型.采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定刀豆蛋白A(Con A)诱导脾脏T淋巴细胞增殖和脂多糖(IPS)诱导B淋巴细胞增殖的影响及自然杀伤细胞(NK细胞)和淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK细胞)活性,酶法检测腹腔巨噬细胞分泌一氧化氮合酶(NOS)的活性,用全自动酶标仪检测巨噬细胞吞噬中性红能力.结果:金黄扶正茶低、中、高剂量组均能显著提高免疫抑制小鼠的T,B淋巴细胞的吸光度(A,P＜0.01)；而中、高剂量组能显著提高免疫抑制小鼠NK细胞、LAK细胞活性、腹腔巨噬细胞吞噬活性及诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)活力(P＜0.01或P＜0.05).结论:金黄扶正茶能促进免疫抑制小鼠脾淋巴细胞增殖,增强NK细胞、LAK细胞活性,提高免疫抑制小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活性,从而增强免疫抑制小鼠的细胞免疫功能.
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中药海参猴桃液诱生的LAK细胞回输家兔的实验研究
目的:观察海参猴桃液(SSAP)辅以rIL-2诱生的LAK细胞回输家兔后其淋巴结、胸腺等器官的形态变化,为药物临床应用提供理论依据.方法:采取健康家兔下肢静脉血分离淋巴细胞作待培养细胞,分3组培养,第6d起回收LAK细胞分别回输给3组家兔,回输6次后1周处死动物剥取淋巴结、脾脏、胸腺及其他内脏进行病理切片,光镜观察.结果:实验组与阳性对照组具有相似变化;①淋巴结体积增大,大部分淋巴小结生发中心变宽,部分副皮质区淋巴细胞密度增大,窦内组织细胞大量增生;②胸腺皮质区淋巴细胞密度稍大.结论:中药(SSAP)辅以rI L-2诱生的LAK细胞与单独rIL-2诱生的LAK细胞回输家兔后淋巴结及胸腺病理形态变化相似,说明SSAP液能剌激机体免疫系统,促使T及B淋巴细胞增殖转化和成熟,提高机体免疫力.
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脐带血来源的树突细胞增强LAK细胞的增殖和杀伤活性
目的探讨脐带血来源的树突细胞(CBDC)在体外对LAK(lymphokine activated killer)细胞增殖活性和杀伤活性的影响.方法采用GM-CSF和IL-4联合刺激诱导脐带血单个核细胞分化为CBDC,再将CBDC与同源LAK细胞混合培养,用MTT法测定不同细胞密度的CBDC刺激LAK细胞增殖和杀伤的能力.结果体外诱导出形态典型的CBDC,其具有明显刺激LAK细胞增殖的能力.LAK细胞的增殖和杀伤活性在2种细胞混合比为1:10时强.结论CBDC能增强LAK的增殖活性和杀伤活性.
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补中益气汤中黄芪对脾虚小鼠免疫调节的君药地位
目的:补中益气汤具有调补脾胃的功效,临床应用广泛,本试验目的是通过黄芪与缺黄芪组方对脾虚小鼠的免疫调节作用,了解方中的君药黄芪在全方中对脾虚小鼠的免疫调节作用中的地位.方法:选取健康小鼠60只,随机分为5组,进行试验,以正常小鼠为正常对照组,以利血平制备脾虚小鼠后不经治疗而自然恢复为阴性对照,采用黄芪,缺黄芪组方,全方对脾虚小鼠的免疫功能的调节作用进行研究.所有各组均检测Hb,NK细胞活性,LAK细胞活性,Mφ吞噬活性,TNF值,T细胞增殖活性,T细胞产生IL-2活性及CD4+/CD8+比值.结果:IR组Hb值(0.74±.19 g/L)明显低于NC(1.26±0.21g/L,t=5.84,P＜0.01)IR组Mφ细胞活性(0.641±0.087)明显低于NC(0.64仕0.087,t=6.77,P＜0.01),IR组NK细胞活性(6.8±2.7)明显低于NC组(15.3±6.8,t=3.5,P＜0.01),IR组LAK活性(8.9±2.6)均明显低于NC(18.2±4.8,t=5.24,P＜0.01),IR组TNF值(39.6±11.8)明显高于NC(15.5±6.2,t=6.08,P＜0.01),IR组的T细胞增殖活性(0.106±0.028)明显低于NC(0.175±0.032,t=5.15,P＜0.01),IR组IL2活性(0.177±0.030)明显低于NC(0.247±0.033,t=5.00,P＜0.01),IR组CD4+/CD8+比值(1.3±0.1)明显低于NC(1.6±0.2,t=4.11,P＜0.01).黄芪组Hb值(1.12±.14g/L)明显高于IR组(0.74±0.19 g/L,t=5.15,P＜0.01),黄芪组LAK细胞活性(14.1±4.1%)明显高于IR组(8.9±2.6%,t=3.30,P＜0.01),黄芪组IL-2活性(0.243±0.037),明显高于IR组(0.177±0.030,t=4.31,P＜0.01),黄芪组CD4+/CD8+细胞比值为(1.5±0.2)明显高于IR组(1.3±0.1,t=2.73,P＜0.05).全方能明显提高机体免疫功能.结论:黄芪是全方中主要升高Hb,IL-2活性LAK和CD4+/CD8+比值的组分.表明补中益气汤中君药黄芪在对脾虚小鼠的免疫调节中并非在所有方面都起主导作用,他需要和其他药物合用才能发挥全面的调节作用,促使我们进一步探索中药组方的奥秘.
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如何看待脾脏的抗肿瘤功能
脾脏具有多种重要的生理功能,参与并调节血液、免疫、内分泌系统的运转,绝非可有可无.脾脏是人体大在的外周免疫器官,在机体防御系统中,尤其在抗肿瘤免疫方面占有十分重要的地位,脾脏拥有大量重要的免疫细胞及免疫因子参与肿瘤免疫,如T细胞、B细胞、K细胞、巨噬单核细胞、自然杀伤细胞、杀伤细胞、淋巴因子活化杀伤细胞(LAK细胞)、树突状细胞;免疫因子包括促吞噬素(tuftsin)、备解素即P因子、纤维结合蛋白、免疫核糖核酸、环磷酸鸟苷、内源性细胞毒因子、调理素和补体等.
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低剂量电离辐射后LAK细胞对动物骨肉瘤治疗作用的研究
目的:探索低剂量电离辐射对LAK细胞治疗动物骨肉瘤的影响.方法:培养的UMR-106细胞接种在月龄大鼠的前胸壁皮下,建立动物骨肉瘤模型.将LAK细胞分别经不同剂量X线辐照后,分别于3、6、9、12、15、18和21d进行细胞计数.采用3H-TdR释放法测定LAK细胞的杀伤活性.winn氏测定法测定LAK细胞对皮下肿瘤细胞生长的影响.结果:大鼠肿瘤发生率达到100％,动物模型建立成功.LAK细胞在第6～9天时,3.25 mGy受照组细胞扩增量明显大于对照组.经0.65、3.25 mGy辐照及未辐照的LAK细胞输入荷瘤小鼠后,其生存期以3.25 mGy组为长.将骨肉瘤细胞与LAK细胞一并注入小鼠右后肢皮下,30 d后发现,3.25 mGy辐射的LAK细胞小鼠未见肿瘤生长,而0及0.65 mGy辐照的LAK细胞小鼠,可见质量2.0g肿瘤生长,对照组为6.25g.结论:低剂量电离辐射可以使LAK细胞扩增,低剂量电离辐射后LAK细胞的杀伤活性及对骨肉瘤的抗瘤作用均明显增强.
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多糖类药物对LAK细胞增殖功能的影响和抑瘤作用的实验研究
目的探讨多糖类药物对LAK细胞增殖功能的影响和抑瘤作用.方法建立B16黑色素瘤小鼠模型,Ⅰ组瘤体周围皮下注射IL-2,Ⅱ组注射IL-2和人参多糖,Ⅲ组注射人参多糖,通过测量瘤重、瘤体积和抑瘤率观察其抑瘤作用;同时取小鼠脾细胞培养,1组加IL-2,2组加IL-2和人参多糖,3组加人参多糖,用台盼蓝染色,观察多糖类药物对LAK细胞增殖功能的影响.结果人参多糖与IL-2联合体内应用抗肿瘤作用显著强于LAK细胞(P<0.05);人参多糖与IL-2联合体外培养表明,人参多糖能促进LAK细胞的增殖能力(P<0.05).结论人参多糖与IL-2联合应用在体内抗肿瘤作用显著强于LAK细胞,在体外培养能促进LAK细胞的增殖能力.
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关键词：
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初发和复发生殖器疱疹患者NK、LAK细胞活性和T细胞亚群的比较
目的 比较初发和复发生殖器疱疹患者NK、LAK细胞活性和T细胞亚群的变化,探讨免疫功能与生殖器疱疹初发及复发之间的关系.方法 对复发组、初发组的患者及正常对照组人群,检测NK和LAK细胞活性和T细胞亚群.结果 初发组和复发组的NK活性比正常组分别降低了28.2%和27.6%,经统计学处理有显著性或极显著性差异(P<0.05或P<0.01);与初发组比较,复发组的NK活性降低了31.3% (P<0.05).LAK细胞活性,初发组和复发组比正常组分别降低了50.7%和45.9%,具显著或极显著统计学差异(P<0.05或P<0.01);与初发组比较,复发组降低了25.3%(P<0.05).初发组和复发组的CD+4、CD+8及CD+4/CD+8均与正常组有显著性或极显著性差异(P<0.05或P<0.01),但3组间CD+3无显著性差异(P>0.05).与初发组与复发组之间的CD+4、CD+8及CD+4/CD+8有显著性差异(P<0.05).结论 生殖器疱疹患者免疫功能与生殖器疱疹初作及复发之间有明确的关系, 可为临床病情判断及治疗提供一个监测指标.
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LAK细胞和IL-2联合应用膀胱灌注预防肿瘤复发的临床观察
目的探讨膀胱癌术后复发的有效预防方法.方法手术治疗的21例膀胱癌患者,术后用LAK细胞联合IL-2(白细胞介素-2)膀胱灌注治疗,并做随访和疗效观察.结果所有患者均获6～24个月的随访,复发率为9.52%(2/21),优于其他药物灌注的预防效果,并发症和副作用极轻.IL-2和NKACF(天然杀伤细胞激活因子)灌注前分别为(0.21±0.04)A值,(19.84±5.62)%,灌注6周后分别为(0.31±0.05)A值,(27.79±6.64)%,前后比较差异有显著性(P＜0.05).结论LAK细胞联合IL-2膀胱灌注预防膀胱癌术后复发有较好的疗效,且毒副作用少.
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过继免疫疗法对子宫内膜异位症模型鼠疗效机制的研究
目的:探讨过继免疫疗法治疗子宫内膜异位症的疗效机制.方法:38只SD大鼠随机分为空白对照、模型对照、LAK细胞注射、生理盐水注射四组.观察异位病灶变化,并分别测定各组大鼠脾脏T淋巴细胞亚群(CD3、CD4、CD8、CD4/CD8);血清IgG、IgA、IgM含量;及血清性激素(E2、P、PRL)水平.结果:LAK细胞治疗组异位的内膜萎缩;脾脏CD3、CD4、CD8及CD4/CD8比值提高;血清IgG、IgA、IgM水平降低;血清性激素水平无明显变化.结论:过继免疫疗法能通过调整内异症紊乱的免疫功能,但不影响其内分泌机制对子宫内膜异位症产生疗效.
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肺癌的细胞免疫治疗
免疫治疗是肺癌综合治疗的主要手段之一,细胞免疫治疗通过给荷瘤机体输注抗肿瘤免疫效应细胞的方法来达到治疗肿瘤的目的.本文就目前用于肺癌临床研究的细胞免疫治疗的主要抗肿瘤效应细胞的临床应用情况作一简要概述,主要有LAK细胞、TIL细胞、AKM细胞和CIK细胞.
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CD3AK与LAK细胞体外培养增殖及细胞毒活性的比较
我院1 993～1 998年应用CD3AK细胞、LAK细胞治疗癌症过程中,在细胞培养期间进行了两种细胞增殖力及杀伤力的比较.近年来对于LAK细胞的抗肿瘤作用及临床已有J广泛深入的研究.对CD3AK也有了初步探讨.但对两种效应细胞的体外增殖及抗肿瘤作用同时进行比较则未见报道.本文对CD3AK、LAK细胞的体外扩增、杀伤作用进行了比较,以期为选择合适的抗癌效应细胞用于临床治疗提供依据.
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CD3AK、LAK与CIK细胞生物学特性的研究
①目的探讨CD3AK、LAK及CIK细胞的诱导、增殖能力及杀伤活性的变化.②方法采用CD3单抗和IL-2刺激诱生扩增CD3AK细胞,用IL-2刺激诱生LAK细胞,采用第0天加入IFN-γ,第1天加入IL-1,CD3单抗,IL-2诱生CIK细胞,观察它们的扩增情况;用MTT法以K562和H7402细胞为靶细胞,测定CD3AK、LAK及CIK细胞的杀伤活性.③结果CD3AK和CIK细胞的扩增能力远大于LAK细胞(P＜0.05).CIK细胞和CD3AK相比,在前期无明显差异,至第19、22天时CIK细胞的扩增能力显著高于CD3AK的扩增倍数(P＜0.05).CD3AK和CIK细胞对K562和H7402细胞的杀伤活性均显著高于LAK细胞(P＜0.05).④结论CIK细胞具有更高的扩增能力和更强的杀伤活性,是肿瘤过继免疫治疗中更为有效的杀瘤效应细胞.
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香烟提取物对人体NK细胞和LAK细胞活性影响
目的了解烟雾对人类自然杀伤细胞(NK)和杀伤细胞(LAK)活性的影响.方法抽取40名不吸烟的健康自愿者外周血分离单个核细胞(PBMC),将每名自愿者的PBMC分为A、B、C、D4份,A、B用于检测NK细胞,C、D用于检测LAK细胞,其中B、D不加香烟提取物作为正常对照,A、C加入香烟提取物一起培养,以K562(NK敏感细胞)为靶细胞经噻唑蓝(MTT)法检测NK细胞活性,以HL-60为靶细胞(NK耐受细胞)检测LAK细胞活性.观察香烟提取物对NK细胞和LAK细胞的影响.结果A组NK细胞平均活性为(43.95±5.57)%,B组为(45.84±5.61)%,二者差异无统计学意义(P＞0.05),两组NK细胞活性段位分布比较差异有统计学意义(P＜0.05),C组LAK细胞平均活性为(20.07±1.78)%,D组为(24.50±2.17)%,二者差异有统计学意义(P＜0.05).结论香烟提取物可影响LAK细胞活性和少数个体NK细胞活性.降低机体免疫监视功能和对癌变细胞清除的能力,可能是吸烟者癌症高发的主要原因之一.
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低剂量辐射对脐血LAK细胞体外抗肿瘤活性的影响
目的探讨低剂量辐射对脐血LAK细胞体外杀伤肿瘤靶细胞活性的影响.方法新鲜分离的脐血单个核细胞用重组白细胞介素2培养72 h获取LAK效应细胞,在培养48h时给予1次不同剂量(分别为62mGy,124 mGy,186mGy,248 mGy)的γ射线照射,应用3H-TdR释放实验测定LAK体外杀伤肿瘤靶细胞(K562,HL-60)活性.结果脐血LAK细胞对K562和HL-60的杀伤活性与成人外周血相比差异无显著性(P＞0.05).接受低剂量辐射的脐血LAK细胞对K562和HL-60的细胞毒性显著高于非照射对照组(P＜0.01).结论脐血可作为LAK细胞的一个良好来源.低剂量辐射可增强脐血LAK杀伤肿瘤靶细胞的细胞毒活性,从而可能用于清除微小残留病变及在脐血移植时增强移植物抗白血病效应.
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妇痛宁联合免疫法对子宫内膜异位症免疫功能的影响
目的:探讨中药妇痛宁煎剂联合过继免疫疗法(Adoptive immunotherapy AIT)对子宫内膜异位症免疫功能的影响.方法:50只S-D大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、妇痛宁煎剂灌胃组、LAK细胞注射组、妇痛宁煎剂灌胃联合LAK细胞注射共5组.分别测定各组大鼠腹腔中自然杀伤细胞(NK细胞)活性,血清中白细胞介素-1(IL-1)、及血清E2、P、PRL的水平.结果:3个治疗组腹腔液中NK细胞活性均有不同程度提高,血清IL-1水平均有所降低,且都以联合治疗组数值变化显著;血清E2、P水平妇痛宁组及联合组显著下降,LAK细胞组无明显改变.结论:妇痛宁联合过继免疫法治疗子宫内膜异位症较单独应用妇痛宁或过继免疫疗法更有效地调节内异症紊乱的免疫机制.提示中西医结合治疗子宫内膜异位症具有诱人前景.
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NK-92细胞的研究和应用进展
恶性肿瘤是危害人类生命与健康的较为严重的常见病、多发病.针对肿瘤的治疗方法有多种,其中,肿瘤生物治疗中较成熟的是免疫细胞治疗,尤以树突状细胞(DC细胞)和过继性细胞(CIK细胞、LAK细胞、ANK细胞)治疗效果为好[1].
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rhIL-15和rhIL-2诱生的LAK细胞特性比较
目的:研究rhIL-15激活的IAK细胞的增殖、细胞毒作用及相关表型的变化.方法:通过用不同浓度的rhIL-15和rhIL-2分别诱生LAK细胞,研究二者诱生的LAK细胞的增殖状况;当rhIL-2和rhIL-15为1 500U/ml时,MIT法检测LAK细胞的细胞毒作用,利用流式细胞仪检测细胞表面CD分子表达情况.结果-LAK细胞的增殖对rhIL-2和rhIL-15均具有时间和剂量依赖性,且无明显差异;终浓度为1 500 U/ml时,rhIL-15诱生的IAK细胞杀伤K562细胞的能力强于rhIL-2诱生的LAK细胞,而对Raji细胞的杀伤活性,rhIL-2诱生的LAK细胞却明显高于rhIL-15诱生的LAK细胞,且二者杀伤活性均具有时间依赖性;同时rhIL-15诱生的LAK细胞的CD3-CD56+细胞、CD94+细胞百分率均高于rhIL-2诱生的LAK细胞.结论:rhIL-15在体内对NK细胞功能可能具有较强的调节作用.
