首页 > 文献资料
-
引藻给春节带来新气息
引藻可以改善春节的干燥引藻是类似椭圆形的单细胞生物,和人类的红血球差不多大小,属引藻纲淡水产藻类一种,直径只有2微米,用600倍的显微镜才能看清楚.引藻体虽然微小,若以适当的培养条件,加以培养,增殖率很高,又含有多量的高蛋白质和全面的必需氨基酸.
-
Tat-Vp3融合蛋白在杆状病毒-昆虫细胞表达系统中的表达与纯化及其促凋亡功能的研究
目的：采用杆状病毒-昆虫细胞表达系统获取可溶性 His-Tat-Vp3融合蛋白,并观察其对细胞增殖和凋亡的影响。方法：构建重组质粒 pFastBacTM1-TAT-VP3,转化DH10Bac 感受态细胞,获得杆状病毒质粒,转染 Sf9昆虫细胞,得到重组杆状病毒,纯化并扩增该病毒。用适滴度的病毒刺激 Sf9细胞以诱导 His-Tat-Vp3蛋白表达,经 SDS-PAGE和 Western bolt鉴定,获得分子质量约21 kDa 的融合蛋白。采用 MTT 实验与流式细胞技术检测500、1000、2000 nmol/L的融合蛋白抑制肿瘤细胞(HeLa细胞)增殖及促凋亡的活性。结果：通过昆虫表达系统成功表达及纯化出Tat-Vp3融合蛋白,其中1000、2000 nmol/L融合蛋白组可显著抑制肿瘤细胞的增殖,并提高细胞的凋亡率。结论：成功构建 His-TAT-VP3融合蛋白昆虫系统表达载体,在昆虫表达系统中可诱导性可溶性高表达,所获融合蛋白能显著抑制 H eLa细胞的增殖,并促进其凋亡。
关键词： 细胞穿透肽 民凋亡素 杆状病毒-昆虫细胞表达系统 增殖率 凋亡 -
中药对小鼠前列腺细胞增殖及凋亡的影响
目的探讨中药方剂(生牡蛎30 g,地龙30 g,生黄芪30 g,皂刺9 g,丹参30 g,川牛膝9 g,海藻15 g,虎杖20 g,王不留行15 g,当归尾15 g,蒲公英15 g,穿山甲20 g)对小鼠前列腺细胞增殖及凋亡的影响.方法体重30～40 g雄性昆明种小鼠120只,随机分为5组:①正常对照组,②增生组,③阴性对照组,④中药方剂组,⑤非那雄胺(保列治)阳性对照组;每组24只.正常对照组小鼠直接处死取前列腺观察湿重,对其余小鼠采用尿生殖窦植入方法建立小鼠良性前列腺增生(BPH)模型,增生组小鼠于第61天处死取前列腺观察湿重;其他组小鼠分别于第61天开始喂生理盐水、中药方剂及保列治,于第91天处死取前列腺观察湿重,应用流式细胞术(FCM)检测3组前列腺细胞增殖率及凋亡率的变化.结果增生组前列腺重量为(149.30±8.64)mg,中药方剂组为(85.60±17.97)mg,两组相比差异有显著性意义(P<0.01).增生组前列腺细胞凋亡率为(3.66±0.73)%,增殖率为(26.05±3.02)%;中药方剂组凋亡率为(6.67±1.91)%,增殖率为(26.28±2.84)%;保列治组凋亡率为(6.26±2.42)%,增殖率为(26.29±4.07)%.中药方剂组前列腺细胞凋亡率较增生组明显升高(P<0.01),但增殖率变化不明显(P>0.05).结论中药对小鼠良性前列腺增生有明显治疗作用,其作用机理可能是通过调节前列腺细胞相关基因,促使前列腺细胞凋亡,从而使前列腺体积缩小、重量减轻.
-
苦参碱对人横纹肌肉瘤RD细胞增殖及凋亡的影响
目的 探讨苦参碱(Ma)对人横纹肌肉瘤(RMS)细胞RD增殖及凋亡的影响.方法 取对数生长期的细胞,分为对照组(无Ma);Ma组:Ma终浓度分别为0.5、1.0、1.5、2.0 mg/mL;U0126(MAPK抑制剂)组:U0126为10μmol/L;Ma联合U0126共同作用组:U0126均为10 μmol/L,Ma浓度同Ma组;每组设5个复孔.给予相应药物作用后,采用倒置显微镜观察细胞形态学变化;四甲基氮唑蓝(MTT)比色法检测RD细胞的增殖抑制率;流式细胞仪(FCM)检测凋亡率.结果 药物作用后显微镜下可见细胞数目减少,细胞变小、变圆,随着Ma作用浓度的增加,RD细胞凋亡细胞逐步增多;Ma与U0126联合作用后,凋亡细胞明显增多,MTT比色法检测其抑制率按分组顺序分别为(13.39±1.13)%、(23.49±0.39)%、(38.84±0.35)%、(48.05±0.82)%、(63.47±1.35)%、(13.91±0.63)%、(24.52±0.46)%、(39.82±0.58)%、(48.98±0.31)%和(65.09±0.85)%;流式细胞仪检测其凋亡率按分组顺序分别为(5.49±0.96)%、(14.23±0.70)%、(25.84±4.17)%、(36.08±3.68)%、(42.53±2.71)%、(6.72±1.52)%、(17.23±3.42)%、(27.83±1.29)%、(38.25±1.44)%和(47.79±1.35)%;除U0126组外,其余各组与对照组比较差异均有显著性(P<0.05).结论 苦参碱单独或与U0126共同作用RD细胞,可抑制该细胞的增殖,促进其凋亡,在本实验范围内浓度越高这种抑制增殖、诱导凋亡的作用越明显.
关键词： 苦参碱 人横纹肌肉瘤RD细胞 U0126 增殖率 凋亡率 -
Ki-67因子在肿瘤细胞放射治疗中的研究进展
Ki-67因子存在于增殖细胞核仁中,参与驱动细胞周期调控网络,表达强度随周期进程不断变化.Ki-67的标记指数能可靠而迅速地反映恶性肿瘤增殖率,与多种恶性肿瘤的发展、转移、预后相关,是判断肿瘤生物学行为的良好指标.Ki-67因子可用于癌变可能性预测、恶性肿瘤早期诊断、治疗方法选择和疗效评估,并可作为癌变人群高危个体的生物标志[1-3].近年来,Ki-67因子逐渐成为肿瘤放疗方面的有效评价工具.本文就Ki-67因子在肿瘤的诊断、预后及信号传导通路进行了综述,重点阐述了Ki-67在肿瘤放疗方面的研究进展.
-
Ki-67和高分子质量细胞角蛋白在前列腺癌鉴别诊断中的应用
Ki-67蛋白是反应细胞增殖状态的一种蛋白质,是可靠而迅速反映恶性肿瘤增殖率的指标[1],而高分子质量细胞角蛋白(CK34βE12)是前列腺基底细胞的一种特异性标记物,对前列腺的良、恶性肿瘤鉴别诊断有帮助[2].我们观察了前列腺癌(PC)和前列腺增生(BPH)标本中Ki-67和CK34βE12的表达情况,并探讨其对鉴别诊断的价值,报告如下.
-
原位检测细胞凋亡率及增殖率在骨髓增生异常综合征诊断中应用
细胞凋亡与增殖对机体的发育、存活及保持正常生理功能都有重要意义,并参予疾病的发生和发展.造血细胞凋亡与增殖紊乱在不同血液疾病中表现不一.因此测定有核细胞凋亡率及增殖率为骨髓增生异常综合征(MDS)等血液疾病的临床诊断、鉴别诊断提供了可能性.我们采用原位末端转酶标(TUNEL)法原位测定骨髓有核细胞凋亡率,采用免疫组化方法测定增殖率,并结合苏木精复染首次在骨髓涂片上区别粒、红两系有核细胞凋亡率和增殖率,具有简单、灵敏、经济、特异性高的特点.
-
CIK细胞不同培养时间的生物学活性
目的 探讨CIK细胞培养时间与细胞毒活性的关系.方法 抽取恶性肿瘤患者的外周血分离单个核细胞(PBMC),用细胞因子诱导培养CIK细胞,于培养第0、7、14、21、28、35、42天分别收取培养的CIK细胞.用流式细胞仪分析检测CIK细胞中CD3+、CD56+双阳性细胞的百分率及增值率,用MTT法测定其对肺癌细胞株A549杀伤活性.结果 培养第21天细胞扩增倍数为(372±1.87)倍,培养第28天细胞扩增倍数为(410±6.52)倍,两者比较差异有统计学意义(P ＜ 0.05);培养第35天CIK细胞扩增倍数为(414±5.16)倍,与培养第28天细胞扩增倍数比较差异无统计学意义(P﹥0.05).培养至第28天CIK细胞中CD3+、CD56+双阳性细胞的百分率为(35.6±2.30)%,达高峰,其后逐渐降低.用MTT法检验不同培养时间的CIK细胞对肺癌细胞株A549的杀伤活性,当效靶比为10∶1时,培养21 d的CIK细胞杀瘤率是95%,达高峰;当效靶比20∶1时培养21 d的CIK细胞杀瘤率已达100%;当效靶比40∶1时培养14 d的CIK细胞杀瘤率即可达到100%.结论 培养时间的延长有利于增强CIK细胞的细胞毒活性,CIK细胞的佳培养时间应为28 d左右.增加效应细胞的数量,会大大提升对肿瘤细胞的杀伤力.
-
周期性机械应力作用下肺腺癌A549细胞的增殖
本文应用Flexercell-4000柔性基底加载系统研究了不同波形及频率的机械拉伸对肺腺癌细胞增殖的影响.结果表明,在胶原-Ⅰ柔性基底膜应变为0～ 20％,频率30次/min、40次/min、50次/min及60次/min的拉伸刺激2h后,采用Image-pro图象分析软件测定,方波刺激下细胞的增殖率明显降低,且拉伸频率越高时间越长,抑制作用越强；心形波、正弦波及三角波刺激下细胞增殖率与对照组比较无明显差异.研究表明,方波与较高频率的组合刺激对肺腺癌细胞的生长增殖具有明显的抑制作用.
-
细胞凋亡与疾病
凋亡(apoptosis)一词来源于希腊文,意为树叶的凋落.细胞凋亡是一种受基因调控的程序性细胞死亡过程,此种死亡具有特殊的形态学和生化特征,不导致明显的炎症反应.细胞凋亡是细胞在其生长、发育、增殖中具有十分重要作用的生理现象;是多细胞器官控制自身增殖率和死亡率,以保持自身组织稳定的一种重要方式;常与器官的形状、组织的维持、生长与退化有关.在正常生理环境中,受损伤或衰老的细胞通过凋亡来进行自我更新.
-
肿瘤的预后指标
在大量有可能影响肿瘤患者预后的庞杂因素中，经现代医学手段检测、筛选、量化，统计学重复验证，被提炼证实有指导预测肿瘤患者预后作用的因素，统称为预后指标。现阶段临床常用的预后指标主要有：临床分期及病理资料、相关基因、肿瘤标志物检测、激素及激素受体、转化生长因子、肿瘤增殖率指标、肿瘤细胞生物周期等。1 临床分期及病理资料无论是比较粗糙的三期(早、中、晚期)、四期(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期)分期法，还是国际抗癌学会提出，并在临床专科和科研中广泛使用的TNM肿瘤分期法，都有很明确的预后指标，是重要的预后指标。在使用临床分期和相关病理资料作为预后指标时应注意。
-
CD3AK与LAK细胞体外培养增殖及细胞毒活性的比较
我院1 993～1 998年应用CD3AK细胞、LAK细胞治疗癌症过程中,在细胞培养期间进行了两种细胞增殖力及杀伤力的比较.近年来对于LAK细胞的抗肿瘤作用及临床已有J广泛深入的研究.对CD3AK也有了初步探讨.但对两种效应细胞的体外增殖及抗肿瘤作用同时进行比较则未见报道.本文对CD3AK、LAK细胞的体外扩增、杀伤作用进行了比较,以期为选择合适的抗癌效应细胞用于临床治疗提供依据.
-
基质金属蛋白酶-9和Ki-67在视网膜母细胞瘤中的表达和意义
视网膜母细胞瘤(RB)是婴幼儿常见的眼内恶性肿瘤之一,对视力和生命有严重的损害和威胁[1].大量研究表明,基质金属蛋白酶-9 (MMP-9)在多种恶性肿瘤中呈过表达,降解、破坏靠近肿瘤表面的细胞外基质,使肿瘤细胞能够沿着受损的基底膜向着周围组织浸润,终导致肿瘤的侵袭和转移[2].细胞增殖抗原标记物Ki-67核抗原是一种反映细胞增殖状态的蛋白质.近年来研究证实Ki-67能可靠而迅速地反映恶性肿瘤的增殖率,与多种肿瘤的发展、转移、预后有关[3].目前关于MMP-9和Ki-67在RB组织中的表达情况及其相互作用关系的研究较少,本研究采用免疫组织化学方法检测了两者在RB组织中的表达情况,并探讨了其与RB临床、病理因素的关系,为深入研究RB的发生发展的机制,诊断治疗及其预后判断提供理论依据.
-
基质金属蛋白酶-9和Ki-67在视网膜母细胞瘤中的表达和意义
视网膜母细胞瘤(RB)是婴幼儿常见的眼内恶性肿瘤之一,对视力和生命有严重的损害和威胁[1].大量研究表明,基质金属蛋白酶-9 (MMP-9)在多种恶性肿瘤中呈过表达,降解、破坏靠近肿瘤表面的细胞外基质,使肿瘤细胞能够沿着受损的基底膜向着周围组织浸润,终导致肿瘤的侵袭和转移[2].细胞增殖抗原标记物Ki-67核抗原是一种反映细胞增殖状态的蛋白质.近年来研究证实Ki-67能可靠而迅速地反映恶性肿瘤的增殖率,与多种肿瘤的发展、转移、预后有关[3].目前关于MMP-9和Ki-67在RB组织中的表达情况及其相互作用关系的研究较少,本研究采用免疫组织化学方法检测了两者在RB组织中的表达情况,并探讨了其与RB临床、病理因素的关系,为深入研究RB的发生发展的机制,诊断治疗及其预后判断提供理论依据.
-
氧等离子处理聚乳酸与生物活性玻璃引导骨再生膜的细胞相容性
背景：目前生物活性玻璃和聚乳酸被应用于口腔科和整形外科临床上，但是由于二者各自的材料特性在临床上应用仍有一定的局限性，治疗效果并不理想。目的：探究氧等离子处理聚乳酸与生物活性玻璃引导骨再生膜细胞相容性的影响。方法：采用生物活性玻璃和聚乳酸为基础制备聚乳酸膜、聚乳酸与生物活性玻璃复合膜、氧等离子处理的聚乳酸与生物活性玻璃复合膜，用以培养MG63细胞，观察3种膜上的MG63细胞的细胞黏附率、增殖率以及碱性磷酸酶活性的差异。结果与结论：随着时间的增长，3组膜的细胞黏附率和增殖率均明显增加，碱性磷酸酶活性均呈先增高后降低的趋势，在培养第7天达峰值。经氧等离子处理聚乳酸与生物活性玻璃组的细胞黏附率和增殖率明显高于其他2组，而聚乳酸组与聚乳酸与生物活性玻璃组细胞黏附和增殖率率接近；而培养第3天时聚乳酸与生物活性玻璃组和氧等离子处理聚乳酸与生物活性玻璃组细胞碱性磷酸酶活性明显高于聚乳酸组，而培养第7，14天时，3组细胞的碱性磷酸酶活性差异无显著性意义。说明经氧等离子处理的聚乳酸与生物活性玻璃复合膜具有良好的生物相容性，可以较好促进细胞黏附、增殖，促进成骨细胞分泌基质。
-
壳聚糖-丝素支架与真皮间充质干细胞的体外复合培养
背景:壳聚糖与丝素有各自的优点和不足,将两者共混,可取长补短,改善性能.进行壳聚糖-丝素支架与真皮间充质干细胞体外复合培养的研究,可进一步为工程化组织构建打下基础.目的:将壳聚糖-丝素支架与大鼠真皮间充质干细胞体外复合培养,探讨壳聚糖-丝素支架对真皮间充质干细胞吸附、生长及增殖的影响.方法:①壳聚糖和丝素以质量比为3:7充分搅拌混匀,冻干制作壳聚糖-丝素海绵状支架,并测其孔径、孔隙率等指标.②将该支架与大鼠真皮间充质干细胞复合进行体外培养,倒置相差显微镜观察细胞与支架复合生长、基质形成以及细胞与支架结合的情况.分别于培养6,12,24 h消化支架上的细胞,计算细胞吸附率.于培养2,4,6,8,10 d后,用MTT法检测细胞增殖率情况.以无支架的细胞培养作为对照组.结果与结论:①倒置相差显微镜及扫描电镜下观察发现该支架有分布较均匀且细密的小孔,孔与孔之间相互连通,孔径大小较均匀,孔径在100～150 μm之间,孔隙率为90.3%.②24 h内,真皮间充质干细胞对支架的黏附率随着时间的增加而逐渐增高,24 h时的黏附率为93%,表明真皮间充质干细胞可良好地黏附于壳聚糖-丝素支架上.③MTT法检测细胞增殖结果显示,于培养各检测时间点,实验组与对照组比较差异均无显著性意义.于培养早期(第2,4天),对照组增殖细胞数略高于实验组;于培养第10天,实验组的增殖细胞数略高于对照组.倒置相差显微镜观察细胞于支架上的形态和附着良好,并有较旺盛的细胞基质分泌.表明真皮间充质干细胞在该支架上能良好地生长、增殖.提示壳聚糖-丝素支架是真皮间充质干细胞体外培养的良好支架材料.
-
当归多糖与黄芪多糖配伍对骨髓造血干细胞增殖分化的影响
目的:观察当归多糖与黄芪多糖配伍对骨髓抑制小鼠造血干细胞增殖分化及细胞因子和转录因子表达的影响.方法:用致死量环磷酰胺每日腹腔注射380 mg·kg-1共3d,建立骨髓抑制小鼠模型,正常组小鼠等量生理盐水腹腔注射.分成6组,正常组、模型组、阳性药物组、当归多糖组、黄芪多糖组和配伍组,在各组加入相同的培养液,药物干预组中分别加入EPO 50U·mL-1+G-CSF 250 U·mL-1,当归多糖0.2g·L-1,黄芪多糖0.2g·L-1,当归多糖0.2g·L-1+黄芪多糖0.2g·L-1培养,4d后采用MTT法检测各组细胞的增殖情况,用ELISA法检测IL-3、SCF、INF-γ和TNF-α的表达情况,QPCR检测红系GATA-1和粒系PU.1的表达情况.结果:增殖率、细胞因子和转录因子的表达,各组均优于模型组P＜0.05,配伍组与阳性药物组无统计学差异P＞0.05,配伍组优于当归多糖组和黄芪多糖组P＜0.05,黄芪多糖组差.结论:当归多糖与黄芪多糖配伍促进骨髓抑制小鼠造血干细胞增殖分化及细胞因子分泌.
-
八珍汤对化疗后荷瘤小鼠脾T细胞及血清细胞因子的影响
目的:研究八珍汤对环磷酰胺(CTX)化疗后S180荷瘤小鼠脾T细胞增殖、T细胞亚群及血清细胞因子的影响.方法:建立荷瘤小鼠模型30只,随机分为模型组、CTX组、八珍汤+CTX组3组,每组10只.另取正常小鼠10只,作为正常对照组.CTX组和八珍汤+CTX组连续3天腹腔注射环磷酰胺(CTX),正常对照组和模型组连续3天腹腔注射生理盐水,自第4天始,八珍汤+CTX组连续10天用八珍汤灌胃,正常对照组、模型组和CTX组连续10天用生理盐水灌胃.以MTT法检测T细胞的增殖率;流式细胞术检测T细胞亚群;ELISA法检测荷瘤小鼠血清中IFN-γ、IL-2的含量.结果:八珍汤可以使化疗后荷瘤小鼠的T细胞的增殖率回升(P<0.01),基本达到化疗前水平(P>0.05);八珍汤可以提高化疗后荷瘤小鼠T细胞总数、CD4+T、CD8+T细胞的比例(P<0.01),但仍低于化疗前水平(P<0.05);八珍汤可以促进IFN-γ、IL-2的分泌,提高血清中IFN-γ、IL-2的含量(P<0.01),基本达到化疗前水平(P>0.05).结论:八珍汤能够改善化疗对荷瘤小鼠T细胞产生的抑制作用,提高机体抗肿瘤能力.
-
Exendin-4对2型糖尿病大鼠胰岛β细胞增殖的影响
目的 观察Exendin-4对链脲佐菌素(STZ)造模糖尿病(DM)大鼠的空腹血糖(FBG)、胰岛功能及胰岛β细胞增殖数目表达的影响.方法 SD大鼠高脂喂养结合小剂量腹腔注射STZ(35 mg/kg),制备2型糖尿病(T2DM)大鼠模型,随机分成DM组及Exendin-4治疗低、中、高剂量组,并设立正常对照组,Exendin-4给药6 w后处死大鼠,心脏取血测FBG、糖化血红蛋白(HbA1c)、胰岛素,取胰腺组织切片作HE 染色,胰岛素抗体免疫组化、增殖细胞核抗原染色(PCNA),计算胰岛β细胞增殖率.结果 Exendin-4各剂量组胰岛素表达阳性的β细胞增殖率较DM组增加(P<0.01);Exendin-4高剂量组与DM组比较,FBG和HbA1c水平明显降低(P<0.01).血清胰岛素增加,中、低剂量组之间无统计学差异但与DM组有统计学差异.结论 Exendin-4能够促进DM大鼠胰岛β细胞增殖,改善血糖代谢和胰岛素抵抗.
-
CD3AK与LAK培养过程中的增殖率及杀伤率的比较
自1995～2003年间,我院对CD3AK与LAK细胞进行培养并广泛用于肿瘤的治疗,在治疗过程中对其增殖率及杀伤率进行了比较,由于CD3AK细胞在抗肿瘤作用的显效性,已备受临床重视,现将其应用过程报告如下.
