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人参总皂苷调控中风后巢内细胞对神经干细胞的作用
目的：：中风是一种严重危害人类健康的疾病,神经干细胞能够促进中枢神经系统功能的修复。神经干细胞的增殖、分化、迁移需要干细胞niche的调控,前期实验发现人参总皂苷可以显著增加中风后神经干细胞的数量。体外模拟神经干细胞niche内星形胶质细胞和脑微血管内皮细胞对神经干细胞的影响,以研究人参总皂苷是否能作用于星形胶质细胞和脑微血管内皮细胞而促进中风后神经干细胞的分化,修复脑损伤？将脑微血管内皮细胞、星形胶质细胞和神经干细胞共培养,观察模拟神经干细胞niche内复杂微环境条件下,人参总皂苷能否使脑微血管内皮细胞和星形胶质细胞分泌的VEGF增多,从而促进中风损伤的神经干细胞分化。方法：取1-3 d的新生SD大鼠,分离培养星形胶质细胞和脑微血管内皮细胞。取孕16 d SD大鼠,分离培养神经干细胞。利用Transwell装置,将神经干细胞、星形胶质细胞和脑微血管内皮细胞共培养。制备神经干细胞缺氧6h的脑中风模型。用含1μg/ml的人参总皂苷培养基作用1d,设置空白对照组。MAP-2标记成熟神经元,GFAP标记星形胶质细胞。用细胞免疫荧光化学染色检测缺氧6h神经干细胞分化后的MAP-2和GFAP阳性细胞比例,ELISA检测人参总皂苷对星形胶质细胞和脑微血管内皮细胞共培养上清中VEGF含量的影响。结果：与脑微血管内皮细胞、星形胶质细胞共培养条件下,与空白对照组比较,人参总皂苷可显著增加MAP-2阳性细胞比例( P<0.01)；人参总皂苷作用于星形胶质细胞和脑微血管内皮细胞48 h可显著上调VEGF表达( P<0.01)。结论：人参总皂苷作用于脑微血管内皮细胞和星形胶质细胞可增加中风后神经干细胞向神经元定向分化并促进其成熟,可能与人参总皂苷调控脑微血管内皮细胞和星形胶质细胞VEGF分泌,改善神经干细胞niche微环境有关。
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mTOR通路通过 CD44促进神经元再生机制的研究
目的：：神经损伤类疾病的治疗一直是困扰医学界的难题,主要由于神经元损伤后难以再生,因此,阐明神经元内再生的机制是治疗神经损伤类疾病的关键。研究表明mTOR信号通路是提高神经元内在再生能力的重要因素,激活mTOR可有效促进神经纤维的再生,但其作用机制尚不清楚,我们利用生物信息技术检索到mTOR通路与神经再生相关的蛋白质阵列,发现细胞粘附分子CD44与轴突再生密切相关。本研究观察mTOR通路激活后,相关CD44分子表达是否上调及其与神经元突起生长的内部联系,探讨mTOR通路是否通过CD44分子促进神经元突起生长,进而提高神经元的再生能力。方法：(1)体外培养SH-SY5Y细胞,10μMol/L全反式维甲酸诱导SH-SY5 Y细胞分化,使其具有成熟神经元的特征。(2) RNAi技术对诱导分化的SH-SY5 Y细胞PTEN基因干扰。结果：24 h后RT-PCR结果显示PTEN基因的转录水平与对照组相比明显下调。36 h后Western blot结果显示干扰组细胞的mTOR与Ps6 K蛋白的表达水平与阴性对照组和空白对照组相比明显上调,说明PTEN 抑制激活了mTOR通路。干扰PTEN基因24h之后,RT-PCR结果发现实验组CD44转录水平上调,与阴性对照组和单纯诱导组相比差异显著。(3) image proplus 6.0分别对各实验组细胞进行轴突长度测量,并将各组数据分别进行统计学分析结果表明PTEN干扰组细胞的突起长度明显长于单纯诱导组和阴性对照组。 PTEN RNAi与CD44 RNAi共同干扰后,PTEN单纯干扰组细胞轴突长度明显长于共同干扰组和单纯诱导组细胞的轴突长度,差异显著。结论：mTOR通路激活后通过CD44分子表达上调促进神经细胞轴突生长。
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颈部节细胞神经瘤一例
患者 女，17岁。右上颈肿块4年伴增大。体检：右颌下触及4.5 cm×4.0 cm大小肿块，质实偏中，活动感，表面可触及右颈外动脉搏动。临床诊断：右颈动脉间隙肿瘤，化学感受器瘤？神经纤维瘤？ 颈部CT检查：增强扫描自会厌梨状窝水平向上，以口咽舌骨水平为主，右口鼻咽旁间隙咽后壁见一低密度软组织肿块，约3.0 cm×7.0 cm×15.0 cm大小，密度不均，其内可见边缘有条索样增强的少许片条状及条索状致密影交织，并有分隔， CT值38～100 HU，外周见完整包膜，肿块越过中线。口咽腔右后壁受压变形，肿块外缘达右胸锁乳突肌前内缘及右腮腺深叶内侧，右咽旁间隙呈戴帽征(图1～3)。右颈内外动脉有分离表现：颈内静脉及颈内动脉在肿块后外方，右颈外动脉在肿块前方。两侧颈深淋巴结未见肿大，CT诊断：右颈神经源性肿瘤。 手术所见：术中见肿块有包膜，位于右颈内、外动脉之间。迷走神经及喉上神经位于肿块深面，舌下神经及舌下神经降支位于肿块表面。肿块大径约为7.5 cm。 病理诊断：右颈节神经细胞瘤（ganglioneuroma）(图4)。 讨论 节细胞神经瘤为发生在周围神经组织的含有成熟神经元的良性肿瘤，主要发生在植物神经系统，约占周围神经肿瘤2％～3％。可发生在任何年龄，以青年人与成年人多见，无性别差异。好发于纵隔和后腹膜，亦可发生于肾上腺、骨盆等处，而发生于颈部者极为罕见，笔者检索至1999年文献，仅见报道3例。
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神经生长因子(NGF)治疗脑萎缩33例临床疗效分析
神经生长因子是氨基酸复合酶类物质,是细胞调节因子,它能促进交感、感觉等效应神经元的发育和分化,并营养成熟神经元,维持其存活与功能.本文33例因脑血管障碍引起的脑萎缩病人,应用神经生长因子治疗后发现患者智力、肢体功能、语言表达能力均有明显改善,总有效率为75.76%,现将其有关临床疗效分析报告如下.
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应用神经生长因子治疗脑萎缩36例临床分析
神经生长因子是氨基酸复合酶类物质,是细胞调节因子,它能促进交感,感觉等效应神经元的发育和分化,并营养成熟神经元,维持其正常功能.本文对于我们两个院36例因脑血管障碍引起的脑萎缩病人,应用神经生长因子治疗后进行临床观察与分析,发现患者智力、肢体功能、语言表达能力均有明显改善,总有效率为75.2%,现将临床疗效作如下分析:
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神经干细胞来源的神经元的诱导分裂
为探讨神经干细胞分化成熟的神经元是否能够分裂.实验取材于成年哺乳动物,将神经干细胞体外培养8 d后,诱导分化为神经元,然后进一步诱导其分裂.采用连续摄影与NF-160免疫细胞化学方法检测神经元的分裂过程,同时运用PCNA+NF-160(或Chat、GABA、GAD)的免疫双标记证明分裂神经元是否为成熟神经元.将神经干细胞体外诱导分化培养8 d,直至分化神经元外形成熟,进而加入EGF与bFGF诱导分裂.诱导分裂2 d后,观察到有神经元样细胞分裂;同一区域内神经元样细胞的数量不断增加,表现为NF-160阳性.连续拍摄了神经元样细胞的分裂过程,分裂完成后的细胞同样表现为NF-160抗体反应阳性.PCNA+NF-160(或Chat、GABA、GAD)的免疫双标记结果显示,一些细胞的胞浆显示为棕色的同时细胞核显示为黑色.结果提示,在一定的条件下,先前所认为的终末分化神经元可以重新进入细胞周期,成熟神经元仍然可以进行分裂增殖和自我更新.
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全身麻醉药对发育大脑神经细胞的影响
目前全球每年有数百万的儿童接受全身麻醉.近些年,麻醉学的研究重点正在向全麻药是否对发育大脑产生神经毒性这一方向转移.麻醉药对发育早期神经功能造成损伤的机制包括神经细胞凋亡和神经发育(包括神经元产生、突触形成、胶质细胞发育)受损等.目前,国内外的研究绝大多数都局限于全麻药对未成熟神经元或突触结构的作用,对其他发病机制缺乏深入地了解.本文将探讨临床常用的全麻药对发育大脑的影响机制,为术后神经学的研究提供新的方向.
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脑源性神经营养因子与应激
脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor, BDNF)是1982年由德国神经生物学家Barde及其同事首次从猪脑中分离纯化并发现具有防止神经元死亡功能的一种碱性蛋白.BDNF在中枢神经系统发育过程中起重要作用,同时也能维持成熟神经元的正常功能.应激是机体对内外环境刺激的反应,机体神经、内分泌和免疫系统可以产生一系列的变化去应对应激.近有证据表明BDNF与应激密切相关.本文对这方面的研究进展加以综述.
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异丙酚对发育期小鼠大脑皮质锥体细胞成熟和树突发育的影响
目的 探讨异丙酚对小鼠大脑皮质发育阶段神经元成熟和树突发育的影响.方法 选用同窝的发育期小鼠按随机数字表法分为3组:1％脂肪乳剂注射对照组,30 mg异丙酚注射组,60 mg异丙酚注射组.于出生后第7天(P7)经腹腔注射.采用免疫荧光方法检测异丙酚注射注射对P7小鼠大脑皮质内胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)免疫反应阳性的星形胶质细胞及NeuN免疫反应阳性的成熟神经元的变化,MAP2B免疫组化检测锥体细胞形态与数量的变化.运用高尔基染色观察异丙酚对P14小鼠大脑皮质内锥体细胞树突棘总数及亚型数量的变化.结果 不同剂量异丙酚对P7小鼠大脑皮质星形胶质细胞和成熟神经元细胞数量均无显著影响,MAP2B免疫组化显示60 mg异丙酚注射显著减低P7小鼠大脑皮质内锥体细胞的数量与树突总数,而30 mg异丙酚注射则无显著改变.高尔基染色结果进一步证实:与对照组比较,60 mg异丙酚注射显著减少P14小鼠大脑皮质锥体细胞树突棘总数(P＜0.05)及蘑菇样树突棘数量(P ＜0.05);30 mg异丙酚注射亦显著减少蘑菇样树突棘数量(P＜0.05),而对树突棘总数的影响未达到统计学差异.结论 异丙酚单次注射对发育期小鼠大脑皮质成熟神经元及星形胶质细胞数量影响不明显,但高剂量注射对皮质锥体细胞树突的发育与树突棘的成熟有显著抑制作用.
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NeuN及其在局灶性脑缺血再灌注研究中的应用
脑血管疾病是一组严重危害人类健康的疾病,目前已成为人类致残和死亡的重要原因之一.脑缺血再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)损伤是脑缺血疾病临床治疗中的关键问题.目前,NeuN作为一种稳定而敏感的成熟神经元的特异抗原,在局灶性脑缺血(focal cerebral ischemia,FCI)的研究中应用较多.本文就NeuN及其在该领域的应用做一简要的综述.
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乙状结肠节细胞神经瘤1例并文献复习
节细胞神经瘤( ganglioneuroma )，又称神经节细胞瘤、神经节瘤，是发生于周围神经组织的含有成熟神经元的良性肿瘤，分化良好，生长缓慢，主要发生于植物神经系统，常见于纵隔、腹膜后及肾上腺等，发生于胃肠道者罕见[1]。本文对我院诊治的1例乙状结肠节细胞神经瘤病例进行回顾性分析，并结合国内外相关文献对该肿瘤的临床病理学特点、诊断、治疗及预后进行分析研究，以期待提高及加深对肠道节细胞神经瘤的认识。
