首页 > 文献资料
-
左归丸和右归丸对实验性变态反应性脑脊髓炎大鼠髓鞘及轴突再生的影响
目的:研究左归丸和右归丸对实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)大鼠神经髓鞘和轴突再生的影响.方法:应用髓鞘碱性蛋白(MBP)与完全福氏佐剂(CFA)按1:1(体积比)制成抗原,给动物两后足皮下注射MBP抗原免疫,建立大鼠EAE模型.以醋酸泼尼松作对照,利用髓鞘染色及免疫组织化学染色观察各组大鼠造模后14,28 d大脑和脊髓髓鞘和轴突损伤及再生的变化.结果:左归丸成右归丸干预后大鼠髓鞘脱失程度均较模型组明显减轻,MBP及神经丝蛋白(NF200)表达显著高于模型组(P＜0.05或0.01).结论:左归丸和右归丸能够修复EAE大鼠神经髓鞘和轴突的损伤,可能是其促进神经康复的分子机制之一.
关键词： 左归丸和右归丸 实验性变态反应性脑脊髓炎 髓鞘再生 轴突再生 -
扎里奴思方干预骨髓间充质干细胞移植对脑缺血再灌注损伤大鼠神经轴突再生的影响
目的:观察扎里奴思方(扎方)干预骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对大脑中动脉阻塞(MCAO)大鼠神经轴突再生的影响,并探讨其机制.方法:SD大鼠随机分为假手术组、模型组、扎方组、移植组和联合组;线栓法制备大鼠MCAO模型,体外全骨髓贴壁筛选法培养及扩增BMSCs;大鼠灌胃给药(14.6 g·kg-1·d-1),BMSCs经颈内动脉移植入脑;移植后1,3,7,14 d取材,蛋白质免疫印迹(Western blot)检测生长相关蛋白(GAP-43),神经微丝蛋白(NF-200),髓磷脂相关糖蛋白(MAG)和勿动蛋白-A (Nogo-A)蛋白表达.结果:模型组GAP-43,MAG及Nogo-A蛋白表达较假手术组明显增高(P＜0.01),NF-200降低(P＜0.01);与模型组比较,扎方3,14 d组、移植3,7,14 d组及联合各组GAP-43表达增高(P ＜0.05,P＜0.01),扎方、移植及联合各组NF-200表达增高(P＜0.01),MAG及Nogo-A降低(P＜0.01);与移植组比较,扎方14 d组GAP-43,7d组NF-200及1,3,14 d组MAG表达降低(P ＜0.05,P＜0.01),3d组Nogo-A降低(P＜0.01),7d组增高(P＜0.05),联合各组GAP-43及1,14 d组NF-200表达增高(P＜0.01),MAG,Nogo-A及7d组NF-200表达降低(P＜0.01);扎方与联合组比较,联合3,7,14 d组GAP-43及14 d组NF-200表达增高(P＜0.01),各组MAG及Nogo-A表达降低(P＜0.01);同组间比较,模型7d组GAP-43及MAG表达增高(P ＜0.05,P＜0.01),3d组NF-200表达较1d组增高(P＜0.01),3d组Nogo-A达高峰(P＜0.01),扎方、移植及联合各14 d组GAP-43表达较7d组增高(P＜0.01),扎方及移植各7d组NF-200表达较3,14 d组增高(P＜0.01,P＜0.05),联合3d组NF-200表达较低(P＜0.01),后逐渐增高(P＜0.05),扎方、移植及联合各组MAG及Nogo-A表达呈先增后减趋势.结论:扎方可显著促进脑缺血再灌注损伤BMSCs移植后神经轴突再生,以二者联合作用显著,其机制可能与干预损伤后GAP-43,NF-200及MAG,Nogo-A的动态表达有关.
-
中枢神经再生研究进展
中枢神经系统的神经元是一群高度分化的细胞,一旦损伤后其修复与再生是非常困难和复杂的.研究发现:中枢神经再生困难主要原因不是神经元本身,而是中枢神经系统微环境不适合神经元轴突再生[1].越来越多的研究表明:如果把受损中枢神经元置于合适的微环境中是可以再生的[2].目前促进神经修复与再生的策略主要是通过促进内在的再生能力和消除外在的抑制因素,改善其微环境.本文就目前对这一领域的研究进展做一简要的综述.
-
基因治疗脊髓损伤研究进展
脊髓损伤在全世界都有较高的发病率,迄今为止,临床上脊髓损伤后功能恢复仍非常困难.现在认为中枢神经系统再生困难主要是因为损伤处微环境不适合轴突再生,其中损伤处缺乏神经营养因子类物质被认为是主要的原因之一.近年来,人们将神经营养因子基因导入损伤处对脊髓损伤进行基因治疗取得了一定的研究进展,本文对基因治疗脊髓损伤的目的基因、病毒载体和靶细胞等进行了综述.
-
纤维蛋白胶包裹嗅神经鞘细胞促进脊髓轴突再生的实验研究
目的观察纤维蛋白胶(FG)包裹嗅神经鞘细胞(OECs)植于成年大鼠脊髓全横断断端间隙内对损伤轴突再生的促进作用.方法成年雄性SD大鼠16只,行脊髓T11节段全横断术.FG-OECs组于间隙内移植FG包裹的OECs,FG对照组移植等量的FG,OECs对照组移植等量DF12-OECs悬液,单纯全切对照组未做任何移植,每组动物4只.术后2周处死动物,脊髓损伤区冰冻水平切片,荧光显微镜下观察OECs的存活及迁移,并行抗神经丝(NF)和生长相关蛋白-43(GAP-43)抗体免疫组织化学染色.结果 OECs及单纯全切对照组脊髓两断端连接较差,而FG对照组及FG-OECs组两断端连接良好.FG、OECs及单纯全切对照组损伤区可见少量NF及GAP-43免疫反应纤维;FG-OECs组间隙内OECs大量存活,并迁移至两侧脊髓实质内,大量NF及GAP-43免疫反应纤维通过间隙.结论 FG包裹的OECs可在成年大鼠脊髓全横断断端间隙内存活并迁移至脊髓实质内,促进损伤轴突的再生.
-
钙离子参与Nogo-A抑制轴突生长的作用
目的探索胞内钙离子在Nogo-A抑制轴突生长中的作用,以进一步了解Nogo-A抑制轴突生长的信号转导机制.方法利用激光共聚焦显微镜技术,检测Nogo-A作用于小脑颗粒细胞后不同时段胞内钙离子的浓度,并观察加入钙通道阻滞剂--尼莫地平对Nogo-A抑制轴突生长的影响.结果小脑颗粒细胞内钙离子浓度升高发生于加入Nogo-A后5 min,30 min时达到高,然后逐渐下降,2 h后恢复至正常水平;加入尼莫地平组的轴突生长与对照组相比有显著差异.结论钙离子可能参与了Nogo-A抑制轴突生长的信号转导.
-
施万细胞和一氧化氮合酶抑制剂对大鼠脊髓损伤后背核神经元存活及其轴突再生的影响
目的探讨施万细胞(SCs)和一氧化氮合酶(NOS)抑制剂L-NNA联合应用能否促进脊髓损伤后背核神经元存活及其轴突再生. 方法20只成年大鼠分为对照组、SCs组、L-NNA组和SCs+L-NNA组.在SCs+L-NNA组动物T11脊髓段半横断后在损伤处植入施万细胞,术后腹腔内注射L-NNA.结果脊髓半横断后30d,对照组L1脊髓段损伤侧背核神经元数量减少,其胞体皱缩,NOS表达阳性.SCs组存活的神经元增加的同时其NOS表达增强,胞体也发生皱缩.L-NNA组和SCs+L-NNA组存活的神经元也增加,但NOS表达降低,其胞体皱缩得到改善.各组中仅在SCs+L-NNA组L1脊髓损伤侧背核观察到有被FG标记的神经元胞体,提示其再生轴突穿越损伤区到达头端脊髓组织.结论SCs和L-NNA都可促进脊髓半横断背核受损伤神经元的存活;两者联合应用能更好地促进受损伤背核神经元存活及其轴突再生.
-
嗅鞘细胞移植和左旋硝基精氨酸对大鼠脊髓损伤后背核神经元存活及其轴突再生的影响
目的 探讨嗅鞘细胞(OECs)移植和一氧化氮合酶(NOS)抑制剂左旋硝基精氨酸(LNNA)对大鼠脊髓损伤后,背核神经元存活及其轴突再生的影响.方法 将20只大鼠行脊髓半横断术后分为对照组、OECs组、L-NNA组和OECs+L-NNA组.OECs+L-NNA组在脊髓损伤处移植嗅鞘细胞,并注射L-NNA.术后30d时,应用NADPH酶组织化学、免疫组织化学、中性红染色、HE染色和荧光金逆行标记等方法,观察4组大鼠L1背核神经元存活及其轴突再生情况.结果 1.0ECs组、L-NNA组L1背核神经元存活数量均高于对照组,且分类计数显示,这两组对脊髓背核大、中、小神经元的存活均有促进作用,而OECs+L-NNA组的促存活作用显著.2.0ECs组和OECs+L-NNA组脊髓损伤处可见再生的轴突,且L1背核可观察到被荧光金逆行标记的神经元胞体.3.与对照组比较,OECs组L1背核NOS阳性神经元增加,L-NNA组NOS阳性神经元减少,OECs+L-NNA组NOS阳性神经元数量差异不明显.结论 嗅鞘细胞移植和L-NNA均可促进脊髓受损伤背核神经元的存活,两者联合应用可更好地促进受损伤的背核神经元存活及其轴突再生.
-
轴突损伤距离对成年金黄地鼠视网膜节细胞轴突在正常或预先溃变周围神经移植物中再生的影响
目的系统研究轴突损伤的距离与轴突再生之间的关系,以及预先溃变周围神经移植物对视网膜节细胞(简称节细胞)轴突在不同距离损伤后再生的影响.方法在距成年金黄地鼠眼球后极0.5、1、1.5、2、3或7mm处切断左侧视神经,视神经眶侧断端同正常(正常组)或预先溃变(溃变组)的周围神经移植物相吻合.结果移植术后28d,两组荧光金逆行标记的发出再生轴突的节细胞数量均随轴突损伤距离的增加而下降,并以0.5～3mm距离点之间下降为明显.比较两组对应距离点,溃变组标记节细胞数量在2、3mm距离点较正常组显著增多.结论成年金黄地鼠节细胞轴突损伤的距离,决定了发出再生轴突的节细胞数量.预先溃变周围神经移植物对节细胞轴突再生具有促进作用,并以轴突损伤距离为条件.
-
中枢神经损伤后影响轴突再生的因素
与周围神经不同,成年哺乳动物中枢神经损伤后轴突不能再生,往往造成不可逆的功能丧失.影响再生的原因相当复杂,胶质瘢痕形成、神经营养因子缺乏及存在诸多的抑制性因子等.本文就一些影响中枢神经再生的因子从其结构、分布、功能及可能的作用机制诸方面作一综述.
-
周围神经或其组织成分移植修复成年哺乳动物视网膜节细胞的损伤
本综述重点阐述了移植周围神经或其组织成分雪旺细胞、成纤维细胞和神经营养因子，改善成年哺乳动物中枢神经系统抑制神经再生的微环境、增强受损神经元的内在再生潜力，以促进节细胞损伤后的存活和轴突再生。
-
视神经损伤后视网膜节细胞的凋亡及视神经的再生与修复
视神经损伤后,大量的视网膜节细胞发生凋亡,视神经再生受阻.造成这些现象的原因复杂,而对抗节细胞凋亡以及促进视神经的再生修复是治疗视神经损伤的重点.
-
周围神经损伤后轴突再生微环境的研究进展
周围神经损伤后，轴突再生的微环境发生复杂变化，有促进机制、抑制机制及促进和抑制双重作用。本文总结轴突再生微环境对轴突再生的不同作用与影响的研究进展。
-
大鼠脊髓损伤后勿动蛋白受体的动态表达
目的：观察大鼠脊髓损伤后勿动蛋白受体(NgR)在脊髓组织中的动态表达变化。方法108只Sprague-Dawley大鼠随机分成正常组、假手术组和模型组，每组36只，其中模型组采用改良Allen法造模。3组分别于干预后24 h、3 d、7 d、14 d处死大鼠，每组9只，以免疫组化及Western blotting检测各组大鼠脊髓组织中NgR表达的变化，以荧光定量PCR检测NgR mRNA表达变化。结果正常组、假手术组各时间点NgR表达无明显变化(P>0.05)。模型组在损伤后24 h NgR及其mRNA表达较低，3 d后下降至低，7 d后迅速上升达到高峰，14 d时有所下降。与正常组比较，模型组在损伤后各时间点，NgR免疫组化及Western blotting蛋白表达差异均有统计学意义(P<0.05)；与假手术组比较，模型组在损伤后各时间点，NgR mRNA表达差异均有统计学意义(P<0.01)。结论大鼠脊髓损伤后，NgR及其mRNA表达均在7 d时上升至峰值，并较长时间保持高水平表达。这可能是造成脊髓损伤后轴突再生困难的重要原因之一。
-
夹脊电针和神经松动术对兔坐骨神经损伤后轴突再生和血清神经营养因子的影响
目的：观察夹脊电针和神经松动术对兔坐骨神经损伤后轴突再生和血清脑源性神经营养因子(BDNF)、睫状神经营养因子(CNTF)含量的影响。方法30只成年雄性兔分为模型组(n=6)、假手术组(n=6)、神经松动术组(n=6)、夹脊电针组(n=6)、夹脊电针结合神经松动术组(n=6)。钳夹法复制坐骨神经损伤模型。模型组、假手术组不做任何干预，神经松动术组行神经松动术治疗，夹脊电针组进行夹脊电针治疗，夹电针结合神经松动术组进行夹脊电针和神经松动术治疗。治疗4周后，HE染色观察轴突生长情况，ELISA法检测血清BDNF、CNTF含量。结果神经松动术组、夹脊电针组、夹脊电针结合神经松动术组轴突生长情况均优于模型组，夹脊电针结合神经松动术组优于神经松动术组和夹脊电针组；神经松动术组、夹脊电针组、夹脊电针结合神经松动术组血清BDNF、CNTF含量均高于模型组(P<0.05)，夹脊电针结合神经松动术组优于神经松动术组和夹脊电针组(P<0.05)。结论神经松动术、夹脊电针均可促进兔损伤坐骨神经的轴突再生，可能与提高血清中CNTF、BDNF水平有关；两者结合效果更佳。
-
两种组织透明技术在免疫荧光染色观察脊髓3D结构中的应用
目的：观察CUBIC和iDISCO两种透明技术在脊髓免疫荧光染色中的效果。方法应用两种组织透明技术处理1 mm厚脊髓冠状切片，然后行神经丝(NF)蛋白免疫荧光染色，激光共聚焦扫描显微镜观察染色效果。结果与CUBIC透明相比，iDIS-CO透明技术所需时间短，透明度高(F=6.64, P<0.01)，免疫荧光染色深(F=5117.55, P<0.01)。结论应用iDISCO透明方法和免疫荧光染色相结合的方法可以完整观察脊髓轴突，更加简单快速，染色效果更好。
-
周围神经电刺激对脊髓损伤大鼠轴突再生的影响
目的：探讨周围神经电刺激对大鼠脊髓损伤后损伤节段轴突再生的影响。方法92只健康成年Sprague-Dawley大鼠随机分为空白对照组(n=12)、对照组(n=40)和实验组(n=40)。采用NYU打击器制作T8脊髓损伤模型。空白对照组不植入电刺激器。对照组只植入刺激器而不干预。实验组植入电刺激器，并施加电刺激干预。三组分别于脊髓损伤后1 d，1、2、4、8周行BBB评分；1、2、4、8周行运动诱发电位检测(MEP)评价大鼠后肢神经功能变化。三组分别于术后1、2、4、8周取材，采用HE染色观察损伤节段脊髓的大体病理变化；采用免疫组化法测定损伤节段脊髓组织内神经丝蛋白200(NF-200)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)水平。结果术后1 d，1、2、4周，三组BBB评分无显著性差异(P>0.05)；8周时实验组评分高于空白对照组和对照组(P<0.05)。术后1周，三组MEP潜伏期和波幅无显著性差异(P>0.05)，术后2、4、8周，实验组较空白对照组和对照组MEP潜伏期缩短，波幅增加(P<0.05)。术后1、2、4、8周，三组脊髓损伤节段HE染色病理表现相似。术后1周，三组间NF-200轴突计数无显著性差异(P>0.05)；术后2、4、8周，实验组NF-200轴突计数多于空白对照组和对照组(P<0.05)。术后1、2、4、8周，三组间GFAP表达无显著性差异(P>0.05)。结论植入式周围神经电刺激能够促进脊髓损伤大鼠传导功能及运动功能的恢复，对损伤节段轴突的再生可能有促进作用。
-
Nogo及其受体在脊髓损伤修复中的作用机制
成体哺乳动物中枢神经系统(CNS)髓磷脂可影响神经的可塑性并抑制神经纤维的再生.Nogo-A被认为是中枢神经系统中抑制轴突生长关键的一种髓磷脂抑制分子.在脊髓损伤(SCI)动物模型中,抑制Nogo-A的活性可明显促进轴突再生及功能改善.Nogo-A及其信号转导机制的研究日益成为SCI修复过程中的研究热点;Nogo-A及其信号转导分子特别是Nogo-66受体(NgR)、p75神经营养素受体(p75NTR)和LINGO-1成为损伤后促进轴突再生、抑制生长锥塌陷的主要治疗靶点.抑制Nogo-A及其受体NgR/p75NTR/LINGO-1可能有助于SCI的修复,促进患者功能的恢复.
-
脊髓康对大鼠脊髓损伤后神经功能恢复及脑源性神经营养因子表达的影响
目的：探讨脊髓康对脊髓损伤(SCI)后神经功能恢复以及脑源性神经营养因子(BDNF)蛋白和mRNA表达的影响。方法144只雌性Sprague-Dawley大鼠，体质量180~220 g，随机抽取24只作为假手术组，仅咬除T9~T11段椎板、棘突。其余采用改良Allen法成功建立SCI动物模型后，随机分为5组，即模型组、醋酸泼尼松组及脊髓康高、中、低剂量组，每组24只。脊髓康高、中、低剂量组分别按生药剂量50 g/(kg?d)、25 g/(kg?d)、12.5 g/(kg?d)灌胃；醋酸泼尼松组以醋酸泼尼松0.06 g/(kg?d)灌胃；假手术组与模型组均以同体积生理盐水灌胃。分别于术后24 h、3 d、7 d、14 d，进行Basso-Beattie-Bresnahan(BBB)评分、斜板试验，干预后3 d、7 d、14 d处死大鼠取脊髓样本，采用免疫组化、Western blotting、荧光定量PCR法检测脊髓损伤区BDNF蛋白和mRNA的表达情况。结果术后24 h假手术组大鼠BBB评分、斜板试验角度明显高于其他各组(P<0.01)。术后3~14 d脊髓康中剂量组和醋酸泼尼松组BBB评分均高于模型组(P<0.05)，且术后14 d脊髓康中剂量组BBB评分明显高于其他各组(P<0.01)。免疫组化和Western blotting显示，不同时间点醋酸泼尼松组和脊髓康中剂量组BDNF蛋白表达水平均明显高于模型组(P<0.01)，二者具有等效性(P>0.05)。荧光定量PCR显示，醋酸泼尼松、脊髓康可促进SCI后脊髓损伤区BDNF mRNA的表达，早期醋酸泼尼松效果较为明显，而干预后14 d脊髓康中剂量效果明显优于醋酸泼尼松。结论脊髓康可促进大鼠SCI后神经功能的恢复，提升SCI后脊髓内BDNF蛋白及mRNA的表达水平。
-
脊髓损伤后轴突再生研究的示踪方法
轴突再生是脊髓损伤研究的重要方面.轴突再生的示踪方法包括体外的细胞培养和组织块培养模型;动物神经传导束的皮质传导束和红核传导束模型等.示踪剂包括顺行示踪剂和逆行示踪剂.
